氣相色譜法原理

氣相色譜法原理第一頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日§3-1概述3.1.1.色譜法:一種分離技術(shù)1.由俄國植物學家Tsweett創(chuàng)立2.原理使混合物中各組分在兩相間進行分配,其中一相是不動的(固定相),另一相(流動相)攜帶混合物流過此固定相,與固定相發(fā)生作用,在同一推動力下,不同組分在固定相中滯留的時間不同,依次從固定相中流出,又稱色層法,層析法3.分類(1)氣相色譜和液相色譜(流動相)(2)柱色譜,紙(PC)色譜,薄層色譜(TLC)(固定相)(3)吸附色譜,分配色譜,離子交換色譜,排阻色譜(物理化學原理)(4)洗脫法,頂替法,迎頭法第二頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日第三頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日3.1.2色譜圖及相關(guān)術(shù)語色譜圖:試樣中各組分經(jīng)色譜柱分離后,在柱的末端收集各組分,經(jīng)檢測器轉(zhuǎn)換為電信號,用紀錄儀將各組分濃度記錄下來,得到色譜圖基線(baseline):O-t反映檢測器系統(tǒng)噪聲隨時間變化的線基線漂移(baselinedrift):基線隨時間定向的變化基線噪聲(baselinenoise):由各種因素引起的基線起伏保留值(retentionvalue):試樣中各組分在色譜柱中的滯留時間,由色譜分離過程中的熱力學因素控制,作定性參數(shù)1.死時間(deadtime)tM:不被固定相吸附或溶解的物質(zhì)進入色譜柱時,從進樣到出現(xiàn)極大值所需時間O’Au=L/tM2.保留時間(retentiontime)tR:試樣從進樣到柱后出現(xiàn)峰極大值所經(jīng)歷的時間O’B3.調(diào)整保留時間tR’:tR’=tR-tM第四頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日§第五頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日4.死體積VM:VM=tM.F0(流動相體積流速)5.保留體積VR:VR=tR.F0(流動相體積流速)6.調(diào)整保留體積VR’:VR’=VR-VM7.相對保留值r21:r21=VR’(2)/VR’(1)=tR’(2)/tR’(1)r21只與柱溫,固定相性質(zhì)有關(guān),是色譜定性分析的重要參數(shù),可用來表示固定相的選擇性分配比k(partitionratio):分配過程分配系數(shù)K=CS/CM分配比k:在一定溫度,壓力下,在兩相間達到平衡時,組分在兩相之中的質(zhì)量比

k=nS/nM

k=KVS/VM(why?)r21=k2/k1=K2/K1k=tR’/tM第六頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日色譜峰高

區(qū)域?qū)挾?Peakwidth):色譜峰寬度

1．標準偏差（σ）

即0.607倍峰高處色譜峰寬度的一半。

2．半峰寬（Y1/2）

峰高一半處色譜峰的寬度Y1/2=2.354σ

3．基線寬度（Y）

Y=4σ

從色譜圖得到的信息:

1.樣品中所含組分數(shù)(峰個數(shù))

2.定性分析(色譜峰的保留值)

3.定量分析(色譜峰面積或峰高)

4,評價色譜柱分離性能(區(qū)域?qū)挾?

第七頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日§5-2色譜分離法基本理論

涉及到試樣中各組分在兩相間的分配情況和各組分在色譜柱中的運動情況

5.2.1踏板理論

1.假定:

(1)在每小段,氣相平均組成與液相平均組成可以很快達到平衡,每小段高度稱為理論踏板高度

(2)載氣進入色譜柱是脈動似的,每次進氣為一個板體積

(3)試樣開始均加在第0號板上

(4)分配系數(shù)在各踏板上是常數(shù)(線性色譜)

2內(nèi)容

(1)理論踏板數(shù)n>50(n=L/H)時,可得到基本對稱的峰型曲線

(2)樣品進入色譜柱后,可得到良好分離

(3)n與半峰寬及峰底寬的關(guān)系式

第八頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日第九頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日當tR一定時,如果色譜峰越窄,則n越大,H越小,柱效能越高(4)有效踏板數(shù)踏板理論只能定性給出板高的概念例題:p366例1,例25.2.2速率理論(ratetheory)1956年,VanDeemter等人提出的色譜過程的動力學理論,吸取了踏板理論中板高的概念,考慮影響板高的動力學因素,導出方程第十頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日5.2.2速率理論(ratetheory)

第十一頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日

H=A+B/u+u1.渦流擴散項A(eddydiffusionterm)A=2dp

使用適當細粒度和顆粒均勻的擔體,盡量填充均勻,是減少渦流擴散,提高柱效的有效途徑2.分子擴散項(縱向擴散項)B(moleculardiffusionterm)B=2Dg

采用相對分子質(zhì)量較大的載氣;擔體填充均勻,可減少分子擴散采用較高的載氣流速,控制較低的柱溫3.傳質(zhì)項Cu)(resistancetomasstransfer)

采用粒度小的填充物和分子量小的氣體作載氣可提高柱效固定相的液膜厚度薄,組分在液相的擴散系數(shù)大,則液相傳質(zhì)阻力就小第十二頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日第十三頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日第十四頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日

板高方程對選擇色譜分離條件具有實際指導意義,它指出了色譜柱填充的均勻程度,填料粒度的大小,流動相的種類與流速,固定相的液膜厚度對柱效的影響

4.載氣流速u對理論踏板高度的影響

第十五頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日§5-3色譜分離條件的選擇5.3.1柱效和選擇性衡量柱效的指標:理論踏板數(shù)n有效衡量色譜柱的選擇性:色譜圖上兩峰間的距離,主要取決于組分在固定相上的熱力學性質(zhì)5.3.2分離度(resolution)R<1時,兩峰不能分離R=1時,兩峰能分離R=1.5時,兩峰能完全分離第十六頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日第十七頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日要增大分離度需1.增加踏板數(shù)n2.加大容量因子3.增大選擇性參數(shù)k第十八頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日第十九頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日5.3.3色譜柱的選擇與制備1．固定相的選擇根據(jù)“相似相溶”的原則選擇固定液,對于常見物質(zhì)的分析，也可參閱色譜手冊來確定合適的固定液。固定液種類繁多，色譜手冊中通常給出十幾種優(yōu)選固定液，能滿足大部分色譜分析需要，對新試樣要判別試樣是否完全分離，需在不同分離柱上進行實驗。2．柱長和柱內(nèi)徑的選擇已知分離度R正比于柱長的平方根，增加柱長對分離度有利，但會使組分的保留時間增加，且柱阻力增加，不便操作。柱長的選用原則是在能滿足分離目的的前提下，盡可能選用較短的柱。填充色譜柱的柱長通常為1~3m，內(nèi)徑3~4cm。柱內(nèi)徑增加，柱效下降。第二十頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日第二十一頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日

3．柱的制備柱的制備包括固定液的涂漬和柱的填裝。當選定固定液和擔體后，還需確定固定液用量，原則是固定液應(yīng)能均勻覆蓋擔體表面形成薄的液膜，固定液的用量通常用配比來表示（固定液與擔體的質(zhì)量比），一般在5%~25%之間。低配比，柱效較高。分析速度快，但允許的進樣量低。固定液的涂漬是將選定的固定液用合適的溶劑溶解后（溶劑用量以能完全浸沒單體為宜），加入擔體，緩慢蒸發(fā)溶劑至干燥。螺旋形柱的填充通常采用真空填充法，應(yīng)注意填充均勻，致密，但又不可使柱壓太大。4．色譜柱的老化制備好的色譜柱在使用前要進行老化處理，即將柱子在比其工作過程中的最高使用溫度高25℃的情況下通載氣加熱幾小時。為防止污染檢測器，需將柱出口與檢測器脫離直接引至室外。在老化過程中，填料中殘存的溶劑以及固定相中可能存在的低沸點組分隨載氣流出。此外，還有助于使擔體上的固定液分布的更加均勻。第二十二頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日5.3.4分離條件的選擇1．載氣種類和流速的選擇由速率理論方程式：H=A+B/u+Cu可知，分子擴散項與流速成反比，傳質(zhì)阻力項與流速成正比，故必有一最佳載氣流速能使色譜柱的理論塔板高度最小，柱效最高。當載氣流速較小時，分子擴散項對柱效的影響較大，此時選用摩爾質(zhì)量較大的氣體如（N2，Ar）作為載氣，可抑制試樣的縱向擴散，提高柱效。當載氣流速較大時，傳質(zhì)阻力項起主要作用，采用較小摩爾質(zhì)量的載氣（如H2，He），可減小傳質(zhì)阻力，提高柱效，載氣的選擇還應(yīng)考慮檢測器的種類。２．柱溫的選擇當柱子確定后，組分的分離程度還與柱溫有關(guān)，因此，柱溫的選擇是十分重要的。首先應(yīng)使柱溫在固定液的最高至最低使用范圍內(nèi)。柱溫升高，分離度下降，保留時間縮短，色譜峰變窄變高；柱溫下降，分離度增加，分析時間延長。一般選擇接近或略低于組分平均沸點的溫度為柱溫。對于組分復雜，沸程很寬的試樣應(yīng)采用程序升溫的方法第二十三頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日３．進樣方式和進樣量的選擇液體試樣采用色譜微量進樣進樣，進樣器規(guī)格有1μL，10μL，100μL。填充柱一般使用10μL進樣器，進樣量應(yīng)控制在柱容量允許范圍及檢測器線性檢測范圍之內(nèi)。進樣動作要快，時間要短。氣體試樣應(yīng)采用氣體進樣閥進樣。４．氣化溫度的選擇在色譜儀進樣口下端有一氣化器，液體試樣進樣后，需要在此瞬間氣化，氣化溫度一般較柱溫高30~70℃。應(yīng)防止氣化溫度太高而造成試樣分解。第二十四頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日

§5-4氣相色譜5.4.1氣相色譜固定相1.氣固色譜固定相氣固色譜固定相通常是具有一定活性的固體吸附劑細小顆粒，常見的有：活性炭，三氧化二鋁，硅膠，分子篩，高分子多孔微球（GDX系列）等。二、氣液色譜固定相氣液色譜固定相是以一種惰性固體微粒作支持劑（稱其為擔體或載體），在其表面涂敷上一高沸點的物質(zhì)（其在色譜分離操作溫度下呈液態(tài)，稱其為固定液）而構(gòu)成。第二十五頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日（一）擔體化學惰性的多孔固體微粒，具有較大的比表面積，固定液能均勻地分布在其表面。擔體應(yīng)能滿足一定的要求。常見擔體有硅藻土型和非硅藻土型兩類。硅藻土型擔體應(yīng)用較廣泛，它又分為紅色擔體和白色擔體兩種，它們都是由天然硅藻土煅燒而成。白色擔體在煅燒前加入了少量助溶劑，如碳酸鈉等。紅色擔體：孔徑較小，比表面積較大，具有較好的機械強度，適宜分離非極性或弱極性組分的試樣。白色擔體：孔徑較大，比表面積較小，機械強度較差，吸附性小適宜分離極性組分的試樣。擔體使用前需要經(jīng)過預處理（經(jīng)酸洗、堿洗、硅烷化及釉化等處理，使擔體表面鈍化）。第二十六頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日（二）固定液1．固定液通常是高沸點的有機化合物，使用時注意其使用溫度。固定液應(yīng)能滿足一定的要求。2．固定液的極性相對極性。麥氏常數(shù)。3．固定液的選擇在掌握了固定液的相對極性和麥氏常數(shù)的基礎(chǔ)上，根據(jù)試樣的性質(zhì)，參照“相似相溶”的原則，初步選擇適當?shù)墓潭ㄒ骸９潭ㄒ旱倪x擇大致可分為以下五種情況：（1）分離非極性組分一般選用非極性固定液。（2）分離極性組分一般選用極性固定液。（3）分離非極性和極性（或易被極化的）組分的混合物一般選用極性固定液。第二十七頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日第二十八頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日（4）分離能形成氫鍵的組分（如：醇，胺，水等）一般選用極性的或氫鍵型的固定液。（5）對于復雜的難分離組分的分離通常采用特殊的固定液或混合固定液。5.4.2氣相色譜儀第二十九頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日第三十頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日1.氣路系統(tǒng)(carriergas)(1)載氣(2)氣路結(jié)構(gòu)(3)凈化器(4)穩(wěn)壓恒流裝置第三十一頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日2.進樣系統(tǒng)(sampleinjection)(1)進樣器(2)氣化室

第三十二頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日3.分離系統(tǒng)色譜柱(capillarycolumn)第三十三頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日4.溫控系統(tǒng)5.檢測器(detector)濃度型微分檢測器:熱導池檢測器(thermal-conductivitydetectorTCD),

電子捕獲檢測器(electron-capturedetectorECD)質(zhì)量型微分檢測器:氫氧焰離子化檢測器(hydrogen-flameionizationdetectorFID)1.熱導池檢測器檢測原理:不同的物質(zhì)具有不同的熱導系數(shù)第三十四頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日第三十五頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日第三十六頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日第三十七頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日ECD第三十八頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日FID第三十九頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日(2)FID

第四十頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日思考題:1.進行色譜分析時,載氣流速時高一些好,還是低一些好?2.選擇固定相時,應(yīng)遵循什么原則?3.熱導池檢測器的工作原理如何?第四十一頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日§5-5氣相色譜分析方法及應(yīng)用5.5.1試樣的預處理1.化學衍生化2.裂解技術(shù)3.分離與富集蒸餾,萃取,吸收,冷凍5.5.1定性方法1.利用保留值與已知物對照(1)保留時間(2)峰高增量(3)雙色譜系統(tǒng)2.利用保留值經(jīng)驗規(guī)律定性碳數(shù)規(guī)律,沸點規(guī)律第四十二頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期日2.利用保留值經(jīng)驗規(guī)律定性碳數(shù)規(guī)律:一定溫度下,同系物保留值的對數(shù)值與其分子中碳原子數(shù)成正比

lgtR’=A1n+C1沸點規(guī)律:在一定色譜條件下,同族具有相同碳數(shù)的碳鏈異構(gòu)體,其保留值的對數(shù)與其沸點成正比

lgtR’=A2Tb+C2