標(biāo)準(zhǔn)曲線制作與應(yīng)用

淺談分光光度法--一.相關(guān)名稱簡介二.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作三.相關(guān)曲線及應(yīng)用邊清鵬16.05.012021/5/91一.相關(guān)名稱簡介1

分光光度法分光光度法是通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸光度或發(fā)光強(qiáng)度，對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法。光區(qū)包括：紫外光區(qū)（200～400nm）、可見光區(qū)（400～760nm）、紅外光區(qū)（0.8-100um）。2021/5/92一.相關(guān)名稱簡介2

標(biāo)準(zhǔn)曲線定義標(biāo)準(zhǔn)曲線是標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的物理/化學(xué)屬性跟儀器響應(yīng)之間的函數(shù)關(guān)系。建立標(biāo)準(zhǔn)曲線的目的是推導(dǎo)待測物質(zhì)的理化屬性。在分析化學(xué)實(shí)驗(yàn)中，常用標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量分析，通常情況下的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線是一條直線。2021/5/93一.相關(guān)名稱簡介3

坐標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線的橫坐標(biāo)(X)表示可以精確測量的變量(如標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度)，稱為普通變量，縱坐標(biāo)(Y)表示儀器的響應(yīng)值(也稱測量值，如吸光度、電極電位等)，稱為隨機(jī)變量。當(dāng)X取值為X1,X2,…Xn時(shí)，儀器測得的Y值分別為Y1,Y2,…Yn。2021/5/94一.相關(guān)名稱簡介

將這些測量點(diǎn)Xi,Yi描繪在坐標(biāo)系中，用直尺繪出一條表示X與Y之間的直線線性關(guān)系，這就是常用的標(biāo)準(zhǔn)曲線制作方法。用作繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，它的含量范圍應(yīng)包括試樣中被測物質(zhì)的含量，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線實(shí)驗(yàn)點(diǎn)7個(gè)較好，不能任意延長。2021/5/95一.相關(guān)名稱簡介4

點(diǎn)分布從不確定度理論推算樣本的不確定度時(shí)，有二個(gè)重要的結(jié)論：一、標(biāo)準(zhǔn)曲線的重心點(diǎn)處，所查出來的樣品不確定度最小。二、標(biāo)準(zhǔn)的點(diǎn)數(shù)越多，樣品的不確定度越小?；谶@兩個(gè)結(jié)論的標(biāo)準(zhǔn)曲線的做法應(yīng)該是：在樣品濃度的附近盡量的多布標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)。2021/5/96二.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作1標(biāo)準(zhǔn)曲線的表達(dá)式標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)是一條通過原點(diǎn)的直線,如果坐標(biāo)上各濃度點(diǎn)基本在一條直線上可不進(jìn)行回歸處理,但在實(shí)驗(yàn)中不可避免地存在測定誤差,往往會有一、二點(diǎn)偏離直線,此時(shí)可用最小二乘法進(jìn)行回歸分析,

然后繪制曲線,通常稱為回歸直線,而代表回2021/5/97二.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作歸直線方程叫回歸方程,表達(dá)式為:y=kx+b(式中:k為直線斜率,b為y軸上的截距,x為被測溶液的濃度,y為吸光度,是多次測定結(jié)果的平均值)。2

標(biāo)準(zhǔn)曲線的參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)曲線有3個(gè)參數(shù),即相關(guān)系數(shù)r,斜率k和截距b。2021/5/98二.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作2.1

相關(guān)系數(shù)(r):相關(guān)系數(shù)是表示變量x與y之間的線性關(guān)系的密切程度。如果r=1則所有點(diǎn)都落在一條直線上,y與x完全呈現(xiàn)線性關(guān)系,在分析中總存在隨機(jī)誤差,一般,r≥0.999。2.2斜率(k):某種分析方法的斜率在實(shí)驗(yàn)條件基本一致的情況下是相對穩(wěn)定的,斜率是檢驗(yàn)分析方法靈敏度的,因此當(dāng)斜2021/5/99二.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作率出現(xiàn)異常數(shù)據(jù)(超過相當(dāng)偏差的2.5%)時(shí),就要尋找原因。2.3截距(b):截距是評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)曲線準(zhǔn)確度的,是實(shí)驗(yàn)誤差在y軸上(或x軸上)的反映,當(dāng)用扣除空白值吸光度的數(shù)值為y值進(jìn)行回歸時(shí),理論上b值應(yīng)為零,但實(shí)際上截距等于零的情況是很罕見的,當(dāng)系統(tǒng)誤差減至允許程度后,隨機(jī)誤差總是存2021/5/910二.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作在的,因此截距一般不為零。3影響標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系的因素（1）分析法自身的精密度（2）測定用儀器的精密度（3）易揮發(fā)的溶劑所引起的測定溶液濃度的改變（4）污染（5）分析人員操作的影響2021/5/911二.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

玉米漿中溶磷標(biāo)準(zhǔn)曲線2021/5/912二.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作玉米漿中溶磷標(biāo)準(zhǔn)曲線2021/5/913三.相關(guān)曲線及應(yīng)用

總砷標(biāo)準(zhǔn)曲線制作2021/5/914三.相關(guān)曲線及應(yīng)用

總砷標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)用表格2021/5/915三.相關(guān)曲線及應(yīng)用1實(shí)用性這是做標(biāo)準(zhǔn)曲線的重要前提，這個(gè)問題實(shí)際很簡單，就是這樣一個(gè)問題：我的樣品的儀器響應(yīng)能否用我們所建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線來推導(dǎo)其理化屬性？答案建立在儀器響應(yīng)的特異性和標(biāo)準(zhǔn)系列和樣品的匹配性上面。一方面我們總是力求儀器2021/5/916三.相關(guān)曲線及應(yīng)用1實(shí)用性的響應(yīng)對于標(biāo)準(zhǔn)和樣品是一視同仁；同時(shí)我們也要求我的樣本跟標(biāo)準(zhǔn)基體匹配。所以最好的標(biāo)準(zhǔn)是基體匹配標(biāo)準(zhǔn)，最好的標(biāo)準(zhǔn)曲線是工作曲線。2021/5/917三.相關(guān)曲線及應(yīng)用2現(xiàn)實(shí)現(xiàn)有方法趨向于標(biāo)準(zhǔn)曲線適用于較寬的樣品濃度范圍。在較寬的濃度跨度和有限的標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)的情況下，均勻的分布濃度點(diǎn)是最佳選擇，這樣對該標(biāo)準(zhǔn)曲線覆蓋的濃度范圍內(nèi)，對于所有的濃度所提供的信息量都是相同的。奇數(shù)點(diǎn)的設(shè)置來2021/5/918三.相關(guān)曲線及應(yīng)用源于相關(guān)信息，在已知該濃度范圍先確定中間點(diǎn)，然后在中間點(diǎn)左右分布對稱的標(biāo)準(zhǔn)曲線點(diǎn)，所以出來的總