第十三章、弧菌與厭氧菌屬

短小，彎曲成弧形，G-菌單鞭毛，氧化酶實驗陽性分布廣泛，水中最多與人類感染有關(guān)的主要為霍亂弧菌、副溶血性弧菌當(dāng)前第1頁\共有72頁\編于星期三\11點當(dāng)前第2頁\共有72頁\編于星期三\11點霍亂弧菌霍亂是由霍亂弧菌所致的烈性腸道傳染病,因其發(fā)病急，傳播快，是亞非大部分地區(qū)腹瀉的重要原因，故列為國際檢疫傳染病。在我國為甲類傳染病。典型病例起病急驟，以劇烈腹瀉、嘔吐、脫水、肌肉痙攣、循環(huán)衰竭伴嚴(yán)重電解質(zhì)紊亂與酸堿失衡，甚或急性腎功能衰竭等為臨床特征。一般以輕癥多見，帶菌者亦較多，重癥及典型患者其病死率極高。當(dāng)前第3頁\共有72頁\編于星期三\11點霍亂流行當(dāng)前第4頁\共有72頁\編于星期三\11點WHO分類：

WHO腹瀉控制中心根據(jù)弧菌的生化性狀、O抗原的特異性和致病性等的不同，將其分為三類：當(dāng)前第5頁\共有72頁\編于星期三\11點O1群霍亂弧菌：包括古典生物型和埃爾托生物型,1817-1923年發(fā)生6次世界性霍亂大流行,自1961年出現(xiàn)第七次世界大流行以后，埃爾托生物型成為霍亂的主要致病菌。不典型O1群霍亂弧菌：無致病性，雖可被多價O1群血清凝集，但不產(chǎn)生腸毒素。非O1群霍亂弧菌：其O抗原與O1群不相同，不能被O1群霍亂弧菌的多價血清所凝集，故統(tǒng)稱為不凝集弧菌。當(dāng)前第6頁\共有72頁\編于星期三\11點

1992年在印度和孟加拉等地區(qū)發(fā)生霍亂大流行，證實為一種新的非O1群霍亂弧菌血清型，后被命名為O139群霍亂弧菌。并可能標(biāo)志著第八次大流行的開始。當(dāng)前第7頁\共有72頁\編于星期三\11點（一）生物學(xué)特性

1、形態(tài)與染色

?

革蘭染色陰性

?

弧形或逗點狀，有一根單鞭毛

?

運動非?；顫?，呈魚群穿梭樣或流星狀

?經(jīng)人工培養(yǎng)后，易失去弧形而呈桿狀當(dāng)前第8頁\共有72頁\編于星期三\11點當(dāng)前第9頁\共有72頁\編于星期三\11點鞭毛染色魚群狀排列當(dāng)前第10頁\共有72頁\編于星期三\11點2、培養(yǎng)特性與生化反應(yīng)

?

兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高?

耐堿不耐酸，pH8.4~9.2

?堿性平板：圓形、扁平、透明的大菌落?

可在無鹽環(huán)境中生長（鑒別）當(dāng)前第11頁\共有72頁\編于星期三\11點當(dāng)前第12頁\共有72頁\編于星期三\11點生化反應(yīng)：分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。遲緩發(fā)酵乳糖，不分解阿拉伯膠糖。觸酶、氧化酶試驗均陽性能產(chǎn)生靛基質(zhì)，亞硝酸鹽試驗陽性當(dāng)前第13頁\共有72頁\編于星期三\11點3、抗原結(jié)構(gòu)與分型

O-Ag:O1~O155血清群

AgO1、O139→霍亂H-Ag:無特異性當(dāng)前第14頁\共有72頁\編于星期三\11點（二）致病性與免疫性1、致病物質(zhì)（1）霍亂腸毒素（CT）

·染色體上的基因編碼·熱不穩(wěn)定性多聚體蛋白 ·最強(qiáng)烈致瀉毒素，腸毒素的典型代表當(dāng)前第15頁\共有72頁\編于星期三\11點A亞單位（毒性亞單位）B亞單位（結(jié)合亞單位）cAMP↑，主動分泌Na+、K+、HCO3-和水，導(dǎo)致嚴(yán)重的腹瀉和嘔吐與小腸黏膜上皮細(xì)胞神經(jīng)節(jié)苷脂受體結(jié)合，介導(dǎo)A亞單位進(jìn)入細(xì)胞當(dāng)前第16頁\共有72頁\編于星期三\11點（2）鞭毛、菌毛

?鞭毛：有助于細(xì)菌穿過腸粘膜表面粘液層而接近腸壁上皮細(xì)胞?

普通菌毛：是細(xì)菌定居于小腸所必須的黏附因子。當(dāng)前第17頁\共有72頁\編于星期三\11點2、所致疾病霍亂:烈性腸道傳染病，為我國的

甲類法定傳染病傳染源:病人、無癥狀感染者易感性：人是唯一易感者當(dāng)前第18頁\共有72頁\編于星期三\11點水源傳播途徑：主要是通過污染的水源或食物經(jīng)口攝入上吐下瀉當(dāng)前第19頁\共有72頁\編于星期三\11點霍亂弧菌（污染的水或食物）↓粘附小腸上皮細(xì)胞、繁殖↓腸毒素↓與細(xì)胞受體（GM1神經(jīng)節(jié)苷脂）結(jié)合↓腺苷環(huán)化酶活化↓主動分泌Na+,K+,HCO3-和水入腸腔↓嚴(yán)重吐瀉→霍亂致霍亂機(jī)制當(dāng)前第20頁\共有72頁\編于星期三\11點臨床表現(xiàn):上吐下瀉

劇烈腹瀉和嘔吐（米泔水樣腹瀉物），大量水分和電解質(zhì)喪失，低容量性休克及心力不齊和腎衰竭（死亡率高達(dá)60%）

當(dāng)前第21頁\共有72頁\編于星期三\11點當(dāng)前第22頁\共有72頁\編于星期三\11點3、免疫性

O1群霍亂弧菌——

感染后機(jī)體可獲得牢固免力，再感染少見；保護(hù)性抗腸毒素抗體及抗菌抗體；腸道局部粘膜免疫是保護(hù)性免疫的基礎(chǔ)。當(dāng)前第23頁\共有72頁\編于星期三\11點（三）微生物學(xué)檢查

原則：霍亂是烈性傳染病，對首例病人的病原學(xué)診斷應(yīng)快速、準(zhǔn)確，并及時作出疫情報告。

當(dāng)前第24頁\共有72頁\編于星期三\11點病人糞便、肛拭，水樣（流行病學(xué)調(diào)查）標(biāo)本快速檢驗堿性蛋白胨水增菌TCBS，玻片凝集分離培養(yǎng)G-弧菌，魚群狀排列懸滴法呈穿梭樣運動制動實驗當(dāng)前第25頁\共有72頁\編于星期三\11點（四）防治原則控制傳染源：隔離病人，治療無癥狀攜帶者。切斷傳播途徑：改善社區(qū)環(huán)境，加強(qiáng)水源管理。提高易感者免疫力：疫苗預(yù)防接種。當(dāng)前第26頁\共有72頁\編于星期三\11點預(yù)防：疫苗

O1群死疫苗（im）：保護(hù)率低，血清抗體持續(xù)時間短Ｂ亞單位—O1群全菌滅活疫苗（口）基因工程-O1群減毒活疫苗（口）O1與O139群二價疫苗（在研）效果評估當(dāng)前第27頁\共有72頁\編于星期三\11點治療：（一）隔離（二）補(bǔ)液（三）抗菌治療（四）對癥治療

1.糾正酸中毒2.糾正低血鉀3.糾正休克和心力衰竭4.抗腸毒素治療當(dāng)前第28頁\共有72頁\編于星期三\11點

☆復(fù)習(xí)思考題：1、試述霍亂腸毒素的致病機(jī)制。2、試述霍亂的特點和防治原則。當(dāng)前第29頁\共有72頁\編于星期三\11點第四節(jié)厭氧性細(xì)菌

當(dāng)前第30頁\共有72頁\編于星期三\11點【概述】

嚴(yán)格厭氧菌，G+菌芽胞比菌體粗，菌體膨大呈梭狀抵抗力強(qiáng)周鞭毛，無莢膜（除產(chǎn)氣莢膜梭菌外）致病菌產(chǎn)生外毒素致病，病情嚴(yán)重防治：類毒素與抗毒素（預(yù)防＞治療）當(dāng)前第31頁\共有72頁\編于星期三\11點常見的厭氧芽胞梭菌：破傷風(fēng)梭菌產(chǎn)氣莢膜梭菌(無鞭毛、有莢膜)肉毒梭菌艱難梭菌

不同細(xì)菌的芽胞形態(tài)及其在菌體中位置互不相同，對菌種的鑒別有意義。當(dāng)前第32頁\共有72頁\編于星期三\11點一、破傷風(fēng)梭菌（一）生物學(xué)性狀1、形態(tài)與染色G+菌，菌體細(xì)長呈桿狀（芽胞菌→G-）周鞭毛，無莢膜芽胞正圓，位于菌體頂端，較菌體粗，使細(xì)菌呈鼓槌狀當(dāng)前第33頁\共有72頁\編于星期三\11點破傷風(fēng)梭菌芽胞當(dāng)前第34頁\共有72頁\編于星期三\11點2、培養(yǎng)特性與生化反應(yīng)

普通瓊脂平板：中心緊密、周邊稀疏、不整齊、鋸齒狀菌落血瓊脂平板/GAM——爬行生長，呈薄膜狀菌落皰肉培養(yǎng)基（厭氧培養(yǎng)基）——液體混濁，腐敗臭味當(dāng)前第35頁\共有72頁\編于星期三\11點

厭氧袋厭氧罐當(dāng)前第36頁\共有72頁\編于星期三\11點厭氧箱當(dāng)前第37頁\共有72頁\編于星期三\11點（二）致病性與免疫性1、致病條件：

傷口厭氧微環(huán)境深而狹窄的傷口組織缺血壞死、需氧菌混合感染當(dāng)前第38頁\共有72頁\編于星期三\11點2、致病物質(zhì)

破傷風(fēng)痙攣毒素神經(jīng)毒素（外毒素）毒性強(qiáng)：致死量＜1ug化學(xué)成分為蛋白質(zhì)：不耐熱(65℃30min)當(dāng)前第39頁\共有72頁\編于星期三\11點3、致病機(jī)制痙攣毒素→

中樞神經(jīng)系統(tǒng)→阻止抑制性神經(jīng)介質(zhì)的釋放→使肌肉活動的興奮和抑制失調(diào)→骨骼肌出現(xiàn)持續(xù)性緊張強(qiáng)直（屈肌、伸肌同時收縮）→強(qiáng)直性痙攣當(dāng)前第40頁\共有72頁\編于星期三\11點4、臨床表現(xiàn)1）潛伏期：平均7~14d

距離CNS越近，潛伏期越短，死亡率高2）發(fā)病早期：

前驅(qū)癥狀—發(fā)熱、頭疼、肌肉酸痛、流涎、出汗、激動當(dāng)前第41頁\共有72頁\編于星期三\11點3）典型癥狀：

張口困難、牙關(guān)緊閉、苦笑面容全身肌肉強(qiáng)直性痙攣、角弓反張CNS功能紊亂—心率不齊、血壓波動呼吸困難、窒息死亡當(dāng)前第42頁\共有72頁\編于星期三\11點新生兒角弓反張苦笑面容當(dāng)前第43頁\共有72頁\編于星期三\11點5、免疫性

?

體液免疫——抗毒素發(fā)揮中和作用?

病后免疫力不牢固?

病愈患者仍需注射類毒素當(dāng)前第44頁\共有72頁\編于星期三\11點（三）微生物學(xué)檢查

直接鏡檢、分離培養(yǎng)→陽性率低

臨床診斷：典型癥狀+病史當(dāng)前第45頁\共有72頁\編于星期三\11點（四）防治原則1、正確及時處理傷口，清創(chuàng)擴(kuò)創(chuàng)2、特異性預(yù)防以注射類毒素主動免疫為主6個月~6歲兒童：百白破三聯(lián)疫苗3、緊急預(yù)防：注射破傷風(fēng)抗毒素（TAT）4、治療：抗毒素+抗生素TAT應(yīng)用要早期、足量且需皮試

人抗破傷風(fēng)免疫球蛋白——效優(yōu)不引起超敏反應(yīng)當(dāng)前第46頁\共有72頁\編于星期三\11點二、產(chǎn)氣莢膜梭菌

廣泛分布于自然界，人與動物消化道可形成芽胞，存在于土壤中

A型產(chǎn)氣莢膜梭菌——氣性壞疽壞死性腸炎食物中毒當(dāng)前第47頁\共有72頁\編于星期三\11點（一）生物學(xué)特性1、形態(tài)與染色

?

革蘭染色陽性，G+桿菌

?

菌體粗大，兩端鈍圓，常呈鏈狀排列

?

芽胞呈橢圓形，位于菌體中央或次極端直徑＜菌體橫徑

?

有莢膜，無鞭毛當(dāng)前第48頁\共有72頁\編于星期三\11點當(dāng)前第49頁\共有72頁\編于星期三\11點2、培養(yǎng)特性與生化反應(yīng)?

專性厭氧?

血瓊脂平板：中等大小、光滑菌落

內(nèi)環(huán)—θ毒素→完全溶血雙層溶血

外環(huán)—α毒素→不完全溶血當(dāng)前第50頁\共有72頁\編于星期三\11點雙層溶血環(huán)當(dāng)前第51頁\共有72頁\編于星期三\11點

?

皰肉培養(yǎng)基：生長迅速肉渣粉紅色、肉湯混濁、大量氣體?

卵黃瓊脂平板：乳白色混濁圈

Naglar反應(yīng)—加入抗α毒素抗血清，則無混濁當(dāng)前第52頁\共有72頁\編于星期三\11點卵黃瓊脂平板上，菌落周圍出現(xiàn)乳白色渾濁圈當(dāng)前第53頁\共有72頁\編于星期三\11點生化反應(yīng)：代謝活躍，分解多種糖類，產(chǎn)酸產(chǎn)氣。牛乳培養(yǎng)基——“洶涌發(fā)酵”

分解乳糖→酪蛋白凝固，大量氣體液化明膠，硫化氫（+），卵磷脂酶（+）當(dāng)前第54頁\共有72頁\編于星期三\11點當(dāng)前第55頁\共有72頁\編于星期三\11點（二）致病性與免疫性1、致病物質(zhì)——外毒素

卵磷脂酶、膠原酶、透明質(zhì)酸酶、DNA酶

β毒素、腸毒素

當(dāng)前第56頁\共有72頁\編于星期三\11點2、所致疾病

1）氣性壞疽（多見于戰(zhàn)傷）

致病條件：傷口厭氧微環(huán)境伴有混合感染致病物質(zhì)：毒性酶、毒素當(dāng)前第57頁\共有72頁\編于星期三\11點氣性壞疽當(dāng)前第58頁\共有72頁\編于星期三\11點

臨床特征：

遠(yuǎn)端肢體壞死，有惡臭神經(jīng)末梢因刺激而劇烈疼痛嚴(yán)重病例——組織腫脹、水氣夾雜觸摸有捻發(fā)感毒素入血致毒血癥潛伏期短——8~48h當(dāng)前第59頁\共有72頁\編于星期三\11點2）食物中毒致病物質(zhì)：A型菌——腸毒素臨床癥狀：細(xì)菌性食物中毒癥腹痛、惡心、吐瀉病程：1~2d自愈當(dāng)前第60頁\共有72頁\編于星期三\11點3）壞死性腸炎：致病物質(zhì)：C型菌——β腸毒素臨床癥狀：腹痛、腹瀉、血便并發(fā)腹膜炎，循環(huán)衰竭▲注意與菌痢、出血性腸炎鑒別！當(dāng)前第61頁\共有72頁\編于星期三\11點（三）微生物學(xué)檢查1、直接涂片鏡檢：

極有價值的快速診斷法——G+菌，粗大桿菌，WBC少當(dāng)前第62頁\共有72頁\編于星期三\11點2、分離培養(yǎng)壞死組織↓

懸液↓血瓊脂/皰肉培養(yǎng)基↓鏡檢+生化鑒定當(dāng)前第63頁\共有72頁\編于星期三\11點（四）防治原則

預(yù)防：

及時清創(chuàng)擴(kuò)創(chuàng)，H2O2沖洗、濕敷嚴(yán)格隔離病人，防止芽胞形成器械、敷料、物品徹底滅菌

治療：

手術(shù)切除壞死組織+大量青霉素早期可用多價抗毒素血清高壓氧艙法

當(dāng)前第64頁\共有72頁\編于星期三\11點三、肉毒梭菌

厭氧性腐物寄生菌廣泛分布于土壤、海洋、動物糞便產(chǎn)生肉毒毒素——神經(jīng)中毒

死亡率極高當(dāng)前第65頁\共有72頁\編于星期三\11點（一）生物學(xué)特性1、形態(tài)與染色

?

革蘭染色陽性，G+桿菌

?

菌體粗大，兩端鈍圓，單個或成雙排列

?

芽胞呈橢圓形，位于菌體次極端直徑＞菌體橫徑（網(wǎng)球拍狀）

?無莢膜，周身鞭毛當(dāng)前第66頁\共有72頁\編于星期三\11點肉