富血小板血漿的臨床應(yīng)用

富血小板血漿的臨床應(yīng)用2023/5/281第一頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六目錄

富血小板血漿概念Part1

富血小板血漿發(fā)展歷史Part2

富血小板血漿制備方法Part3

富血小板血漿成分特點(diǎn)Part4

富血小板血漿臨床應(yīng)用及研究Part52023/5/282第二頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六概念富血小板血漿富血小板血漿凝膠·Platelet-richplasma,PRP·Platelet-richplasmagel,PRG全血通過梯度離心分層后得到的富含血小板的血漿部分，它含有多種較豐富的生物活性因子。PRP被凝血酶等激活物激活后形成的膠凍狀物，它具有完整的三維結(jié)構(gòu)和良好的組織相容性的纖維蛋白支架。2023/5/283第三頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六PRP發(fā)展歷史1977198419931997Harkedeng首次分離制備出PRP，將其用于心外科手術(shù)后患者，取得良好的療效。Okuda等發(fā)現(xiàn)血漿中提取的富血小板血漿含多種生長(zhǎng)因子。Hood等在PRP中加入凝血酶和鈣離子，提出了PG概念，將其所形成的凝膠狀物質(zhì)用于組織修復(fù)。Whitman率先將自體PRP用于口腔頜面外科手術(shù)修補(bǔ)骨組織。2023/5/284第四頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六PRP制備方法原理

根據(jù)血液成分在離心過程中的沉降速率不同來提取。制備方法無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，都需兩次離心。全自動(dòng)制備法、手工制備法。影響PRP血小板抗凝劑離心力離心時(shí)間離心次數(shù)凝膠激活劑濃度活性回收率2023/5/285第五頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六PRP制備方法全自動(dòng)法（血漿分離置換法）利用血成分分離耗材分離制備得到血小板血漿。特點(diǎn)自動(dòng)化程度高、血小板純度濃度高2023/5/286第六頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六PRP制備方法手工制備法都為兩步法，但離心力、離心時(shí)間略有不同。一般認(rèn)為初次200g離心10min,二次1200g離心10min,制備PRP中血小板計(jì)數(shù)約為全血6.17倍，效果較好。（血液離心后分3層：由下至上---紅細(xì)胞層、血小板濃縮物層、貧血小板血漿層）用中間層再次分離。2023/5/287第七頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六PRP成分特點(diǎn)PRP纖維蛋白白細(xì)胞高濃度血小板其它2023/5/288第八頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六PRP成分特點(diǎn)血小板成人：平均195*109/L，PRP約為全血3-17倍。血小板結(jié)構(gòu)圖作用

生理性止血---通過黏附反應(yīng)作用起到初期止血功能。

組織修復(fù)---通過黏附于血管壁和插入內(nèi)皮細(xì)胞之間來修復(fù)血管內(nèi)皮，保持其完整性。調(diào)控炎癥和免疫反應(yīng)---通過調(diào)節(jié)其表面粘附及表面受體的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)，如介導(dǎo)白細(xì)胞作用。2023/5/289第九頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六PRP成分特點(diǎn)---血小板凝血酶血小板源性生長(zhǎng)因子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子胰島素樣生長(zhǎng)因子表皮生長(zhǎng)因子血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子血小板在凝血酶激活后聚集，由顆粒釋放生長(zhǎng)因子（GF），可與目標(biāo)受體上的結(jié)合激活誘導(dǎo)蛋白再生過程，如細(xì)胞增殖、基質(zhì)形成、骨形成、膠原蛋白合成等。血小板2023/5/2810第十頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六PRP成分特點(diǎn)---血小板血小板源性生長(zhǎng)因子（PDGF）一種促細(xì)胞分裂蛋白，第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)存在于血小板中，是趨化作用最強(qiáng)的骨生長(zhǎng)因子之一。作用可促進(jìn)血管生成、活化巨噬細(xì)胞，刺激成纖維細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞等中胚層細(xì)胞的增殖和活性，2023/5/2811第十一頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六PRP成分特點(diǎn)---血小板轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）以旁分泌或自分泌方式作用于成纖維細(xì)胞、骨髓干細(xì)胞、成骨前體細(xì)胞和破骨細(xì)胞。TGF免疫染色圖作用：參與體內(nèi)多種炎癥反應(yīng)和組織修復(fù)，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)分泌，提高成纖維細(xì)胞增殖能力，刺激膠原蛋白1和纖維連接蛋白的生物合成以及骨基質(zhì)的沉積，抑制破骨細(xì)胞形成和骨吸收發(fā)生。2023/5/2812第十二頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六PRP成分特點(diǎn)---血小板胰島素樣生長(zhǎng)因子（IGF）作用：趨化成纖維細(xì)胞，刺激蛋白質(zhì)合成。刺激骨細(xì)胞增殖、分化，促進(jìn)軟骨和骨基質(zhì)生成。2023/5/2813第十三頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六PRP成分特點(diǎn)---血小板表皮生長(zhǎng)因子（EGF）作用：新生血管重要的誘導(dǎo)因子?？纱龠M(jìn)創(chuàng)口愈合、參與血管生成。刺激內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂和細(xì)胞遷移。還可增加血管通透性。2023/5/2814第十四頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六PRP成分特點(diǎn)---血小板血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（VEGF）是高度保守的同源二聚體糖蛋白。二條分子量各為24kDa的單鏈以二硫鍵組成二聚體。作用：能直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，增加血管通透性。誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞的增生和遷移，啟動(dòng)血管生成反應(yīng)。2023/5/2815第十五頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六PRP成分特點(diǎn)---血小板成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（FGFs）作用：參與血管形成、損傷愈合和胚胎發(fā)育等過程，是關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞最具顯著效應(yīng)的有絲分裂刺激原和形態(tài)原之一。2023/5/2816第十六頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六PRP成分特點(diǎn)---白細(xì)胞白細(xì)胞：參與機(jī)體免疫和防御功能幫助機(jī)體清除局部病原體、增強(qiáng)抗感染能力；幫助機(jī)體清除局部壞死組織，加快組織修復(fù)。受血小板分泌生長(zhǎng)因子趨化，本身可分泌生長(zhǎng)因子直接參與組織修復(fù)。2023/5/2817第十七頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六PRP成分特點(diǎn)---其它其它成分如：纖維連接蛋白（FN）血小板反應(yīng)蛋白（TSP）骨連接蛋白（ON）玻璃體連接蛋白（VN）作用：對(duì)傷口感染、促進(jìn)組織修復(fù)及增加新生血管內(nèi)膜的形成發(fā)揮重要作用。2023/5/2818第十八頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六PRP優(yōu)點(diǎn)一優(yōu)點(diǎn)二來源豐富、取材方便、操作簡(jiǎn)單、價(jià)格低廉具有自源性，不會(huì)出現(xiàn)免疫排斥反應(yīng)，沒有異體移植傳播疾病風(fēng)險(xiǎn)2023/5/2819第十九頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六PRP優(yōu)點(diǎn)三優(yōu)點(diǎn)四含高濃度多種生長(zhǎng)因子，且比例接近正常人，具備最佳協(xié)同效應(yīng)，（避免單一因子不能良好誘導(dǎo)創(chuàng)面愈合）PRP凝膠具有極好粘附性，使用時(shí)可較好的黏附在創(chuàng)面上而不流失，避免損失，保證局部較高的生長(zhǎng)因子濃度。2023/5/2820第二十頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六PRP優(yōu)點(diǎn)五優(yōu)點(diǎn)六因含有較多的白細(xì)胞和單核細(xì)胞，可起到防止感染作用。避免了異體和人工合成組織的致畸危險(xiǎn)，同時(shí)各種因子表達(dá)良好，避免了誘導(dǎo)腫瘤形成的可能。2023/5/2821第二十一頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六PRP臨床應(yīng)用及研究骨缺損修復(fù)軟骨損傷修復(fù)預(yù)防骨感染急性創(chuàng)面慢性難愈合傷口皮膚脂肪組織液化急性運(yùn)動(dòng)損傷慢性運(yùn)動(dòng)損傷頜骨相關(guān)疾病牙周病上頜竇手術(shù)燒傷整形科燒傷創(chuàng)面脂肪移植皮膚組織再生骨科運(yùn)動(dòng)損傷普外科口腔頜面外科2023/5/2822第二十二頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六口腔頜面外科2023/5/2823第二十三頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六實(shí)驗(yàn)方法：將患者因正畸拔出的患牙傳代培養(yǎng)，取第5代細(xì)胞作為試驗(yàn)用牙周膜成纖維細(xì)胞來源；人病牙制成1mm厚根片；2次離心法制備PRP；觀察不同濃度PRP（A組10%、B組15%、C組20%、D組30%、對(duì)照組無PRP）對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞在脫礦的病變牙根表面附著情況及膠原形成情況。研究一2023/5/2824第二十四頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六研究一結(jié)論：PRP可促進(jìn)牙周細(xì)胞在病變牙根表面的附著，其中20%濃度最佳。

PRP可促進(jìn)牙周細(xì)胞外基質(zhì)膠原的形成。2023/5/2825第二十五頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六口腔頜面外科相關(guān)研究Whitman用PRP聯(lián)合骨移植治療骨缺損獲得成功。Suba等應(yīng)用β磷酸三鈣復(fù)合PRP治療犬牙槽骨缺損，發(fā)現(xiàn)PRP可明顯促進(jìn)骨再生。Lekovic研究發(fā)現(xiàn)PRP能促進(jìn)牙槽骨再生。張麗等的研究證實(shí)PRP聯(lián)合植骨術(shù)治療牙周鄰面骨缺損效果優(yōu)于單純植骨術(shù)。Philippart等將PRP混合物充填于上頜竇中，6個(gè)月組織學(xué)觀察顯示有活躍的骨新生活動(dòng)。Rodrignez等在上頜竇區(qū)植入PRP及種植體，移植成功率達(dá)92.9%，表明PRP可加快骨再生速度，提高骨再生質(zhì)量。頜骨相關(guān)研究牙周病上頜竇

手術(shù)2023/5/2826第二十六頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六骨科2023/5/2827第二十七頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六研究二方法：選擇股骨干骨不連、骨缺損≤2ｃｍ需行骨移植治療的40例患者，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(脫蛋白牛松質(zhì)骨+PRP)及對(duì)照組(脫蛋白牛松質(zhì)骨)，每組20例。術(shù)后7ｄ和1、2、3、6、12個(gè)月定期攝Ｘ線片檢查，參照Lane-Sandhu的Ｘ線評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分,并比較兩組骨痂灰度、愈合情況及愈合速度。2023/5/2828第二十八頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六研究二結(jié)果：如表1（Ｘ線評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)）評(píng)分，在傷口愈合天數(shù)及傷口引流量上，實(shí)驗(yàn)組明顯少于對(duì)照組。如表2、3在術(shù)后實(shí)驗(yàn)組的成骨率、成骨速率明顯高于對(duì)照組，說明PRP有較好的促進(jìn)骨缺損修復(fù)的作用。2023/5/2829第二十九頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六骨科相關(guān)研究Marx等發(fā)現(xiàn)復(fù)合PRP的移植骨修復(fù)速度比單純用移植骨修復(fù)快1.62-2.16倍。Bielecki等用PRP經(jīng)皮注射治療骨不連取得良好療效。Drengk等研究顯示PRG作為細(xì)胞支架能明顯促進(jìn)軟骨細(xì)胞遇見充質(zhì)干細(xì)胞的增生和向軟骨細(xì)胞分化。Wu等認(rèn)為PRP可以作為軟骨細(xì)胞的載體，治療關(guān)節(jié)軟骨缺損。Bielecki的研究顯示血小板-白細(xì)胞凝膠在體外可抑制金葡、大腸桿菌生長(zhǎng)，提示PRP可作為“生物抗菌制劑”。骨缺損修復(fù)軟骨損傷修復(fù)預(yù)防骨

感染2023/5/2830第三十頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)2023/5/2831第三十一頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六研究三方法：患者11例跟腱有炎癥19處，每次制備患者自體PRP2ml行跟鍵周圍注射。每周1次，5次為1個(gè)療程，治療期間患者停用一切藥物及其他的藥物輔助治療?；颊唠S訪3一8個(gè)月，平均6個(gè)月，觀察療效。結(jié)果：跟腱有炎癥的地方19處，治療后痊愈5處，顯效13處，治療有效率94.74%。結(jié)論：PRP對(duì)跟腱炎療效肯定，是一種安全有效的方法。2023/5/2832第三十二頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六運(yùn)動(dòng)損傷相關(guān)研究急性運(yùn)動(dòng)損傷Sanchez的研究發(fā)現(xiàn)應(yīng)用PRP患者在關(guān)節(jié)活動(dòng)度、功能恢復(fù)及術(shù)后并發(fā)癥方面均優(yōu)于單純修復(fù)患者。耿震的研究表明PRP在改善肌腱愈合質(zhì)量的同時(shí)也加速了愈合進(jìn)程。Radice的研究顯示，應(yīng)用髕韌帶進(jìn)行前交叉韌帶重建時(shí)應(yīng)用PRP，可將韌帶成熟時(shí)間從12個(gè)月縮短到3.6個(gè)月。Sanchez等報(bào)道肌肉拉傷運(yùn)動(dòng)員在超聲波引導(dǎo)下局部注射PRGF后，功能恢復(fù)時(shí)間明顯縮短，且運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練后未出現(xiàn)肌肉纖維化現(xiàn)象。2023/5/2833第三十三頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六運(yùn)動(dòng)損傷相關(guān)研究慢性運(yùn)動(dòng)損傷Mishra通過對(duì)難治性肱骨外上髁炎患者注射PRP發(fā)現(xiàn)，只有非激活狀態(tài)并同時(shí)含有濃縮血小板和白細(xì)胞的PRP有效。Barrett發(fā)現(xiàn)慢性跖腱膜炎患者在B超引導(dǎo)下局部注射PRP治療效果好。王虎等的研究表明，和類固醇比PRP治療跟痛癥取得了良好療效。KonE等用PRP和透明質(zhì)酸鹽對(duì)照注射入膝關(guān)節(jié)治療骨性關(guān)節(jié)炎，發(fā)現(xiàn)其療效優(yōu)于傳統(tǒng)的透明質(zhì)酸鹽。2023/5/2834第三十四頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六普外科2023/5/2835第三十五頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六研究四方法：抽取難愈合傷口患者靜脈血，與氯化鈣、凝血酶混合后制成PRP凝膠敷于患者創(chuàng)面，凡士林紗布填塞。每7天換1次，3次一療程。評(píng)估治療后傷口變化情況。2023/5/2836第三十六頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六研究四結(jié)果：29例患者在三次使用PRP后傷口明顯縮小，大部分壞死組織清除，組織色澤紅潤(rùn)血供良好，無明顯滲液和膿液。3例效果不明顯。治療3個(gè)月：10例傷口完全愈合，形成瘢痕組織；11例創(chuàng)面覆蓋率75%，9例50%-75%，2例<50%；治愈率31.2%，顯效率93.8%。結(jié)論：

PRP修復(fù)慢性難愈合傷口是一種有效、實(shí)用的治療方法。2023/5/2837第三十七頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六普外科相關(guān)研究BhanotS的研究指出，PRP可加速表皮化生長(zhǎng)，減輕創(chuàng)傷后局部腫脹和疼痛，減少術(shù)后傷口滲出。ManD將PRP凝膠用于皮瓣移植術(shù)，發(fā)現(xiàn)血管創(chuàng)出血被凝膠封閉，提高了手術(shù)成功率。CarterCA等用PRP修復(fù)馬小腿傷口發(fā)現(xiàn)，PRP加快上皮細(xì)胞增殖，促進(jìn)傷口膠原合成以及血管再生。郭彥杰等應(yīng)用PRP創(chuàng)面內(nèi)注射治療下肢慢性難愈合傷口，療效顯著。夏江霓等對(duì)慢性潰瘍患者應(yīng)用PRP凝膠治療，發(fā)現(xiàn)PRP能更好的促進(jìn)傷口處肉芽組織形成。Giorgio研究認(rèn)為PRP可激發(fā)細(xì)胞增殖分化和微血管的形成，增強(qiáng)局部組織自我修復(fù)能力，從而有利于切口愈合。劉曉韜的研究顯示，應(yīng)用PRP注入脂肪液化切口深部的患者愈合時(shí)間明顯減少，提示PRP可以減輕疼痛、術(shù)后出血，減少術(shù)后并發(fā)癥。急性創(chuàng)面慢性難愈合傷口手術(shù)切口脂肪液化2023/5/2838第三十八頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六燒傷整形科2023/5/2839第三十九頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六研究五方法：10只裸鼠隨機(jī)選擇一側(cè)背部皮下組織作為PRP組(0.5mL人顆粒脂肪+0.1mLPRP)受區(qū)，一側(cè)作為對(duì)照組(0.5mL人顆粒脂肪+0.1mL磷酸鹽緩沖液)受區(qū)。于植入后10、90d處死后取出移植物進(jìn)行大體形態(tài)觀察、體積測(cè)定及組織學(xué)檢測(cè)。2023/5/2840第四十頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六研究五結(jié)果：術(shù)后90dPRP組移植物存留量明顯多于對(duì)照組，且周圍血供更豐富，觸之質(zhì)地較柔軟，更接近正常脂肪組織。在術(shù)后10、90d，PRP組存留體積均大于對(duì)照組。2023/5/2841第四十一頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六研究五脂肪移植物組織結(jié)構(gòu)觀察（蘇木精-伊紅染色，X100）

對(duì)照組PRP組10d90d結(jié)果：術(shù)后10、90dPRP組脂肪細(xì)胞均維持較好形態(tài)，細(xì)胞間隙保持較好，僅有少量脂肪空泡形成。對(duì)照組移植90d后組織結(jié)構(gòu)較混亂，大量結(jié)締組織及脂肪空泡形成，部分出現(xiàn)壞死，僅少量細(xì)胞能夠維持正常的形態(tài)。2023/5/2842第四十二頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六研究五結(jié)果：定量比較發(fā)現(xiàn)，在各時(shí)間點(diǎn)，PRP組均比對(duì)照組具有更多正常脂肪細(xì)胞面積及微血管數(shù)量，比對(duì)照組具有更少脂肪空泡面積，說明PRP明顯改善了移植脂肪組織的組織學(xué)質(zhì)量。2023/5/2843第四十三頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六燒傷整形科相關(guān)研究Nalbonesi等應(yīng)用PRP成功治療了14例因接受面部整形手術(shù)導(dǎo)致皮膚和軟組織損傷的患者。Hum等研究發(fā)現(xiàn)，局部注射PRP療效明顯優(yōu)于抗生素軟膏好濕性敷料，可使傷口愈合率超過80%。黃云嚴(yán)的將PRP凝膠用于治療60例面部二度燒傷創(chuàng)面，發(fā)現(xiàn)在傷后早期使用PRP凝膠可使創(chuàng)面愈合速度加快、愈合率提高，減少瘢痕形成。2023/5/2844第四十四頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六其它2023/5/2845第四十五頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六研究六方法：健康大耳白兔10只雙側(cè)面神經(jīng)上頰支橫斷后置入硅膠神經(jīng)再生導(dǎo)管(自制)，采用雙側(cè)自身對(duì)照，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)側(cè)和對(duì)照側(cè)。實(shí)驗(yàn)側(cè)注入PRP，對(duì)照側(cè)注入生理鹽水；8周后進(jìn)行相關(guān)檢測(cè)分析評(píng)價(jià)面神經(jīng)恢復(fù)再生情況。

2023/5/2846第四十六頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六研究六2023/5/2847第四十七頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六結(jié)果：面神經(jīng)損傷后8周兔實(shí)驗(yàn)側(cè)及對(duì)照側(cè)均能引出清晰穩(wěn)定的面神經(jīng)復(fù)合動(dòng)作電位，面神經(jīng)損傷兔實(shí)驗(yàn)側(cè)動(dòng)作電位潛伏期明顯短于對(duì)照側(cè)，而波幅則高于對(duì)對(duì)照側(cè)，說明PRP能促進(jìn)面神經(jīng)功能的恢復(fù)。研究六2023/5/2848第四十八頁，共五十三頁，編輯于2023年，星期六研究六結(jié)果：顯微圖像分析也表明，面神