消毒與滅菌-物理滅菌法（動物微生物）

一輻射殺菌二目錄頁過濾除菌三消毒與滅菌—物理滅菌法熱力滅菌超聲波四干燥五低溫六微生物廣泛存在于自然界中，微生物的活動與外界環(huán)境條件關(guān)系密切；當(dāng)環(huán)境惡劣時，微生物的代謝發(fā)生障礙，生長繁殖受到抑制，甚至死亡。在畜牧生產(chǎn)實踐中，利用對微生物不利的環(huán)境因素(物理因素、化學(xué)因素)，來抑制或殺滅微生物，以消除物體或環(huán)境中的微生物，達(dá)到消毒或滅菌的目的。消毒：是指殺死病原微生物，但不一定能殺死細(xì)菌芽孢的方法。通常用化學(xué)方法消毒。eg.用碘棉球、酒精棉球?qū)ζつw進(jìn)行消毒滅菌：是指把物體上的所有的微生物（包括細(xì)菌芽孢在內(nèi)）全部殺死的方法。通常用物理方法滅菌。幾個基本概念高壓蒸汽滅菌鍋eg.高壓蒸汽滅菌鍋滅菌培養(yǎng)基、手術(shù)器械防腐：是指防止或抑制微生物生長繁殖的方法。用于防腐的化學(xué)藥品稱為防腐劑。eg.用福爾馬林浸泡保存組織無菌：不存在任何活菌，是滅菌的結(jié)果。是防止微生物進(jìn)入機(jī)體或物體的操作技術(shù)。

注意：在進(jìn)行微生物培養(yǎng)或外科手術(shù)操作過程中，操作者必須嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，以防止微生物污染或感染。微生物培養(yǎng)無菌操作物理滅菌法熱力滅菌輻射殺菌過濾除菌超聲波干燥低溫一、熱力滅菌概念：利用高溫使微生物的蛋白質(zhì)及核酸變性、破壞，殺滅細(xì)菌。分類：由空氣和水蒸氣導(dǎo)熱，傳熱快，穿透力強(qiáng)。濕熱滅菌：相對濕度在20%以下的高熱，由空氣導(dǎo)熱，傳熱較慢。干熱滅菌：濕熱滅菌效果比干熱滅菌好，原因：濕熱的蒸汽穿透力比干熱強(qiáng)，可較快提高物體內(nèi)部溫度；濕熱中病原體易吸收水分，促進(jìn)蛋白質(zhì)的凝固變性；熱蒸汽接觸物品變?yōu)橐簯B(tài)可放出大量的潛熱。焚燒：最徹底的滅菌方法適用范圍：接種針、接種環(huán)、試管口等適用范圍：被污染的廢棄物或動物尸體等適用范圍：金屬制品、玻璃器皿、瓷器等燒灼：直接用火焰滅菌干烤：干烤箱,加熱160-180℃，1-2h（一）干熱滅菌

干烤法注意事項：洗凈后再干烤，防止污物碳化；玻璃器皿洗凈、干燥后再滅菌，T<40℃時開烤箱，防止炸裂；物品包裝不宜太大，所放物品不宜太多（<2/3），以利于空氣對流；中途不能打開添加物品；時間計算從溫度達(dá)到時開始。接種環(huán)燒灼滅菌電熱烘箱干熱滅菌法濕熱滅菌對一般營養(yǎng)體和孢子的殺滅條件：多數(shù)細(xì)菌和真菌的營養(yǎng)細(xì)胞：在60℃左右處理5-10min；酵母菌和真菌的孢子：用80℃以上溫度處理；細(xì)菌的芽孢：121℃處理15min以上。（二）濕熱滅菌高壓蒸汽滅菌法最有效的滅菌方法121℃15~30min適用對象：耐高溫的物品

煮沸消毒法水煮100℃，5min(繁殖體)~2h(芽胞)用于清洗玻璃器皿流通蒸汽消毒法巴氏消毒法間歇蒸汽滅菌法水蒸汽100℃，15~30min(繁殖體)食品、食具、不耐高溫的物品反復(fù)多次流動蒸汽間歇加熱滅菌用于不耐熱的含糖、血清、牛奶等的培養(yǎng)基較低的溫度（63℃30min或72℃15～30s）殺滅致病菌---------------------------濕熱滅菌法1.高壓蒸汽滅菌法：最常用，最有效用高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行。滅菌條件：壓力103.4kPa，溫度121.3℃，15-20min，可殺滅全部微生物適用范圍：適用于耐高溫、耐潮濕的物品。如手術(shù)器械、敷料、生理鹽水、一般培養(yǎng)基等。高壓蒸汽滅菌鍋高壓蒸汽滅菌鍋結(jié)構(gòu)高壓蒸汽滅菌鍋的使用流程放入待滅菌物品設(shè)置溫度、滅菌時間加水蓋好鍋蓋12345121℃15~30min,，滅菌結(jié)束后，等壓力降回零時才可打開蓋6開蓋取出滅菌物品備用（注意：取物時要帶耐熱手套）7高壓蒸汽滅菌鍋的使用流程2.煮沸法：滅菌條件：100℃，5min，可殺死細(xì)菌的繁殖體100℃，1-2h，可殺死芽孢加入2%碳酸氫鈉可提高沸點至105℃，還可防止金屬器械生銹。適用范圍：用于食具、注射器和一般外科器械的消毒。注意事項：煮沸消毒前，物品必須刷洗干凈。物品各面要全部浸人水中，有軸節(jié)的器械要打開。玻璃器具應(yīng)從冷水或溫水放人，并用紗布包好，橡膠類物品應(yīng)用紗布包裹，待水沸后放入，消毒后及時取出以免橡膠變軟。海拔每增高300m，需延長消毒時間2min。3.流通蒸汽滅菌法：利用蒸籠進(jìn)行條件：100℃水蒸氣，15-30min,可殺死細(xì)菌繁殖體4.間歇滅菌法：方法：把經(jīng)過流通蒸汽滅菌的物品置于37℃溫箱過夜，使細(xì)菌芽孢發(fā)育成繁殖體后，次日再經(jīng)流通蒸汽加熱滅菌，反復(fù)三次

特點：利用間歇滅菌法可使芽孢發(fā)育為繁殖體后被殺滅適用范圍：多用于不耐高溫的、營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基（如血清培養(yǎng)基）蒸籠加血清的培養(yǎng)基5.巴氏消毒法：由法國科學(xué)家巴斯德創(chuàng)立。滅菌條件：低溫維持法：63℃，30min

高溫瞬時法：72℃，15-30S

超高溫法：132℃，2秒，迅速冷卻至10℃以下特點：用較低溫度殺滅液體中的病原菌(如牛奶中的結(jié)核桿菌或沙門氏菌)，而不破壞被消毒物品的營養(yǎng)成分和風(fēng)味。適用范圍：常用于牛奶、酒類等的消毒。1.紫外線（UV）:是一種低能量電磁輻射；波長240～280nm

的紫外線具有殺菌作用，最適波長為260nm殺菌機(jī)理：紫外線易被核酸（約260nm）吸收，作用于DNA，干擾DNA的復(fù)制，導(dǎo)致細(xì)菌死亡或變異紫外線穿透力較弱，不能穿過玻璃、紙張?zhí)攸c：應(yīng)用范圍：1.空氣消毒：手術(shù)室、細(xì)菌實驗室2.不耐熱物品的表面消毒紫外線用于室內(nèi)空氣消毒時，每10m2

安裝30w紫外線燈管一支，有效距離不超過2米，照射時間不少于30分min；保持紫外線燈管清潔，每2周用75％乙醇棉球擦拭燈管表面一次。凡使用時間超過1000h需更換燈管。注意事項：二、輻射殺菌2.電離輻射X射線、γ射線等具有較高的能量和穿透力，在足夠劑量時，對細(xì)菌有致死作用。殺菌機(jī)制：產(chǎn)生游離基，破壞細(xì)菌的DNA

特點：不使物品升溫，又稱冷滅菌；且穿透力強(qiáng)應(yīng)用范圍：用于不耐熱物品的消毒，如藥品、塑料（一次性注射器、輸液器等）電離輻射對生物體傷害示意圖可直接破壞細(xì)胞大分子結(jié)構(gòu)（蛋白質(zhì)、DNA）；還可通過電離機(jī)體內(nèi)廣泛存在的水分子，形成自由基，間接損傷細(xì)胞三、濾過除菌濾菌器的濾板或濾膜上含有微細(xì)小孔，只允許液體或空氣中小于濾孔孔徑的物質(zhì)通過，而大于孔徑的細(xì)菌等顆粒則不能通過。原理：濾菌器大于孔徑的細(xì)菌等顆粒不能通過濾膜濾膜孔徑0.22um的硝酸纖維素濾膜,裝于過濾器上適用對象：主要用于不耐熱的血清、抗毒素、抗生素以及空氣等的除菌。缺點：不能除去病毒、支原體和細(xì)菌毒素等。超凈工作臺空氣除菌注射式微孔濾器

過濾除菌法臨床應(yīng)用—液體過濾除菌器注射式微孔濾器和小型過濾裝置均是利用濾過除菌原理除去液體中的細(xì)菌

小型過濾裝置注射式微孔濾器結(jié)構(gòu)

過濾除菌法臨床應(yīng)用--超凈工作臺超凈工作臺超凈工作臺工作原理：濾過除菌法除去進(jìn)入工作臺空氣中的細(xì)菌凡在送風(fēng)口裝有高效過濾器的房間，通常稱為生物潔凈室。經(jīng)過高效過濾器的超凈空氣，其潔凈度可達(dá)99.8%。生物潔凈室主要用于手術(shù)室、無菌制藥室等。過濾除菌法臨床應(yīng)用--生物潔凈室手術(shù)室無菌制藥室概念：每秒鐘超過20000次振動的聲波不能被人耳感受，稱為超聲波。

殺菌機(jī)理：超聲波可破壞細(xì)胞細(xì)胞壁，使其裂解死亡，但往往有殘存的活細(xì)胞；對G-菌效果最好，對葡萄球菌效果最差。

臨床應(yīng)用：主要用于裂解細(xì)胞分離提取細(xì)胞組分或病毒。四、超聲波超聲波破碎儀五、干燥作用機(jī)制：干燥可使細(xì)菌繁殖體脫水、鹽類濃縮，阻礙細(xì)菌代謝，最后導(dǎo)致細(xì)菌死亡高濃度糖或鹽處理食物，可使細(xì)菌脫水，抑制其生長繁殖（生理干燥）不同微生物對干燥的敏感性不同：多數(shù)細(xì)菌對干燥敏感eg.腦膜炎雙球菌、霍亂弧菌，

在空氣中干燥時幾小時便死亡有些細(xì)菌抗干燥力較強(qiáng)eg.結(jié)核分支桿菌，在干痰中數(shù)月不死；溶血性鏈球菌在塵埃中可存活25天芽孢抵抗力最強(qiáng)eg.炭疽桿菌的芽孢可耐干燥20多年應(yīng)用：常用于食品、藥品保存。腦膜炎雙球菌霍亂弧菌溶血性鏈球菌結(jié)核分枝桿菌炭疽芽胞桿菌作用機(jī)制：多數(shù)細(xì)菌耐低溫，在低溫狀態(tài)下細(xì)菌代謝減慢，抑制其生長繁殖，一旦溫度等條件適宜，即可恢復(fù)生長繁殖。應(yīng)用：常用于菌種保藏(-20℃、-70℃)六、低溫超低溫冰箱冰箱干熱滅菌：干烤、灼燒、焚燒濕熱滅菌輻射殺菌過濾除菌超聲波物理滅菌熱力滅菌干燥低溫高壓蒸汽滅菌法：最有效的滅菌方法121℃15~30min適用對象：