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尿液紅細(xì)胞及形態(tài)學(xué)檢查血尿的概念
鏡下血尿:以傳統(tǒng)的尿離心沉渣玻片涂片,在高倍鏡下檢查10個(gè)視野后,如每高倍視野中見到紅細(xì)胞超過3~5個(gè),則定為鏡下血尿。肉眼血尿:重癥者尿呈洗肉水樣或血色,稱為肉眼血尿。尿紅細(xì)胞檢測(cè)方法干化學(xué)分析法顯微鏡檢查法(鏡檢)自動(dòng)化尿沉渣分析儀法單克隆抗體免疫法干化學(xué)法原理:利用尿液中紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白或其破壞釋放出的血紅蛋白均具有過氧化物酶活性,可使過氧氫茴香素或過氧化氫烯鈷釋放出新生態(tài)氧,后者可氧化有關(guān)色原(如鄰甲苯胺)顯色。因此,它既可檢測(cè)紅細(xì)胞,也可檢測(cè)游離血紅蛋白,還可作為紅細(xì)胞鏡檢的篩選法。不足:吩噻嗪類或吩嗪類藥物、肌紅蛋白、對(duì)熱不穩(wěn)定酶、氧化劑或細(xì)菌過氧化物酶、尿pH值偏高等均可使隱血出現(xiàn)假陽性。尿液中存在大量維生素C時(shí),可由于競(jìng)爭(zhēng)性抑制反應(yīng)而使干化學(xué)隱血出現(xiàn)假陰性。顯微鏡檢查法(鏡檢)尿沉渣鏡檢的標(biāo)準(zhǔn)是:①醫(yī)生要求鏡檢或病人的主訴、體征可能在尿沉渣中出現(xiàn)除紅、白細(xì)胞以外的有形成分如結(jié)晶、異常細(xì)胞等;②泌尿系統(tǒng)疾病或可引發(fā)腎臟并發(fā)癥的疾?。虎勰蛞侯伾?、濁度、蛋白、亞硝酸鹽、紅細(xì)胞、白細(xì)胞有任何一項(xiàng)異常者。對(duì)于干化學(xué)篩選后的鏡檢問題,國(guó)內(nèi)學(xué)者有爭(zhēng)議,有學(xué)者認(rèn)為鏡檢是尿沉渣分析的參考標(biāo)準(zhǔn),其重要意義是任何方法無可替代的,只要有條件,最好每份標(biāo)本都鏡檢。尿紅細(xì)胞鏡檢是尿液紅細(xì)胞檢測(cè)的參考標(biāo)準(zhǔn)。其不足是:①有些紅細(xì)胞在腎臟長(zhǎng)時(shí)間滯留,受機(jī)械作用破碎或在血管內(nèi)發(fā)生溶血,形成Hb尿,不能檢出;②規(guī)范化尿沉渣鏡檢操作較為繁瑣(標(biāo)準(zhǔn)化操作步驟:新鮮尿液10ml,1500r/min離心5min后留0.2ml尿沉渣,將尿沉渣充盈到標(biāo)準(zhǔn)尿沉渣計(jì)數(shù)板內(nèi),計(jì)算出紅細(xì)胞數(shù)/μl);③獲得準(zhǔn)確的試驗(yàn)結(jié)果,除需訓(xùn)練有素、工作認(rèn)真負(fù)責(zé)的技術(shù)人員外,還需對(duì)所用試驗(yàn)器材(標(biāo)本收集器皿、離心機(jī)及計(jì)數(shù)板)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。自動(dòng)尿沉渣分析儀UF-100尿沉渣分析儀對(duì)尿液中有形成分直接作熒光染色,利用流式細(xì)胞儀原理,通過前向散射光強(qiáng)度(Fsc)、前向散射光脈沖寬度(Fscw)、熒光強(qiáng)度(Fls)、熒光脈沖寬度(Flw)以及細(xì)胞電阻抗等參數(shù)來檢測(cè)尿中有形成分的大小、長(zhǎng)度、染色情況,從而區(qū)分尿中的各種有形成分,具有操作簡(jiǎn)單、結(jié)果重復(fù)性好等特點(diǎn)。在紅細(xì)胞檢測(cè)方面,UF-100的特點(diǎn)之一是同時(shí)提供尿紅細(xì)胞均一型和非均一型指標(biāo),對(duì)鑒別尿中紅細(xì)胞的來源有較大參考價(jià)值。
結(jié)晶、菌尿(草酸鈣結(jié)晶和霉菌)導(dǎo)致假陽性,紅細(xì)胞碎片及影紅細(xì)胞相對(duì)于普通紅細(xì)胞而言其熒光染色敏感度下降,熒光強(qiáng)度弱而造成儀器漏檢。單克隆抗體免疫法可將尿液中的紅細(xì)胞或Hb與試劑中單克隆抗體結(jié)合并顯色。其優(yōu)點(diǎn)是敏感度高、特異性好。按每個(gè)紅細(xì)胞Hb含量為30pg計(jì),尿液中含有2個(gè)紅細(xì)胞/μl(相當(dāng)于0.5/HFP)即可檢出。其特異性體現(xiàn)在僅與人Hb起反應(yīng),假陽性率很低。由于其過于敏感,在正常人尿內(nèi)含紅細(xì)胞(0~3/HFP)時(shí),即可發(fā)生反應(yīng)。因此,不適合常規(guī)尿紅細(xì)胞檢查。但當(dāng)常規(guī)鏡檢與干化學(xué)法結(jié)果不能解釋時(shí),如尿中紅細(xì)胞溶解和受某些物質(zhì)干擾干化學(xué)檢查陽性,而鏡檢未找到紅細(xì)胞,應(yīng)用單克隆抗體免疫法可為尿中紅細(xì)胞的性質(zhì)提供鑒別診斷依據(jù)。
綜合評(píng)價(jià)尿紅細(xì)胞鏡檢是尿液紅細(xì)胞檢測(cè)的參考標(biāo)準(zhǔn),但對(duì)尿中溶解的紅細(xì)胞不能檢出。干化學(xué)法可檢測(cè)Hb,既有助于溶血性疾病的診斷,也可彌補(bǔ)鏡檢不能檢出破壞的紅細(xì)胞之不足,還可作為尿紅細(xì)胞鏡檢的篩選方法。但必須注重尿液分析儀及試劑帶的質(zhì)量及在工作中可能出現(xiàn)的干擾因素。綜合評(píng)價(jià)單克隆抗體免疫法檢查尿液紅細(xì)胞具有很好的敏感性和特異性,但由于其過于敏感,不能用于常規(guī)檢測(cè);在鏡檢和干化學(xué)法檢測(cè)結(jié)果不可解釋時(shí),其有重要的鑒別診斷價(jià)值。尿流式細(xì)胞儀檢查不僅對(duì)尿紅細(xì)胞定量分析有意義,而且還能對(duì)尿紅細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行分析,以確定血尿來源。但分析過程易受某些因素的干擾,如酵母菌、精子等,當(dāng)儀器出現(xiàn)報(bào)警時(shí),必須用鏡檢確認(rèn)。尿紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查主要用于鑒別腎性血尿和非腎性血尿。主要方法有:普通光鏡、相差顯微鏡、掃描電鏡、血液分析儀、尿液有形成分分析儀等。普通光鏡檢查通常,在高倍鏡下(400倍)識(shí)別非染色細(xì)胞形態(tài),此法由于缺乏色澤對(duì)比和立體感,常要求觀察者有豐富熟練的尿形態(tài)學(xué)經(jīng)驗(yàn)。改用染色法(甲基綠染色,結(jié)晶紫-沙黃染色,或瑞氏染色)可增加形態(tài)鑒別特征。相差顯微鏡檢查1968年,Kark研究小組開始應(yīng)用相差顯微鏡觀察尿細(xì)胞等形態(tài),1979年澳大利亞的腎病學(xué)家Birch和Fairly應(yīng)用于臨床。相差顯微鏡反映紅細(xì)胞立體感強(qiáng),是目前檢查尿紅細(xì)胞形態(tài)最常用的方法。掃描電鏡1983年,F(xiàn)asseff用掃描電鏡觀察尿紅細(xì)胞。由于立體感強(qiáng),可敏感地觀察到紅細(xì)胞表面的細(xì)微變化。但因價(jià)格昂貴而難以普及于臨床。尿液有形成分分析儀1995年,日本推出流式細(xì)胞技術(shù)為原理的尿液分析儀SysmexUF-100,可將尿中成分作熒光染色后識(shí)別,如為腎性紅細(xì)胞,散射光分布在圖像左側(cè),非腎性紅細(xì)胞在圖像右側(cè),能有效地區(qū)別血尿來源。血液錢分析篩儀測(cè)定緞尿紅推細(xì)胞沸平均設(shè)體積(M導(dǎo)CV洋):腎速性紅品細(xì)胞駝以小初型為湯主,MC更V小于召血MC馳V;MC丈V<72斤f吸l;非漫腎性朗紅細(xì)豪胞以婦正常術(shù)為主施,MC歌V大于爺血MC摧V。但喪用MC赴V時(shí),澆要注從意排停除其擊他微齡粒的眼干擾牙。觀察疼紅細(xì)哈胞體淋積分靈布圖(R奇DW干):具鹿有客凡觀、悉快速先、準(zhǔn)抄確、往重復(fù)砍性好沒的特月點(diǎn)?;涡录t細(xì)罷胞分貍類大紅把細(xì)胞鎖:細(xì)岸胞體巨增大你,中誕心淡刻,無糖雙盤耗凹陷選感。小紅脖細(xì)胞丘:胞要體小內(nèi),外爐膜增份厚,瞞折光厘增強(qiáng)濫。棘形江紅細(xì)委胞:逃胞質(zhì)獎(jiǎng)常向桂一側(cè)萬或多吊側(cè)伸灣出、炎突起濃,如蛛生芽侮樣。環(huán)形果紅細(xì)提胞(斥面包夜圈紅頸細(xì)胞緩):選因細(xì)蝦胞內(nèi)材血紅醉蛋白便丟失全或胞竭漿聚紀(jì)集,論形似桿面包比圈樣占空心法環(huán)狀卷。新月腐形紅奔細(xì)胞洋:紅賀細(xì)胞價(jià)如半渴月形新。顆粒毒形紅仰細(xì)胞街:胞陪質(zhì)內(nèi)棗有顆秤粒狀增的間絨斷沉就積,塞血紅征蛋白公丟失絲式。皺縮店紅細(xì)臥胞:份高滲姻尿中豆多見猛。影紅爹細(xì)胞高:低辱滲尿警中多面見。紅細(xì)殊胞碎昆片尿異稱形紅漁細(xì)胞塔形態(tài)晨形成鹽機(jī)制①紅祝細(xì)胞狀通過屯有病魔理改數(shù)變的戰(zhàn)腎小霉球?yàn)V層膜,扭受到綢擠壓咽損傷丘;②紅育細(xì)胞獎(jiǎng)受到絞不同pH和滲胖透壓臥持續(xù)衫變化軋的腎虛小管攻濾液盟的影諸響:克腎性狐血尿豪中由覆于紅擱細(xì)胞征本身餡受損劑,其蹄形態(tài)望已經(jīng)收發(fā)生梁變化原,因捷此極宰易受螺腎小踐管濾劫液pH和滲秩透壓旋變化擋的影師響而譜發(fā)生騰形態(tài)艘畸變晉。非挖腎性穿血尿斥則不亡存在訓(xùn)紅細(xì)菠胞通其過腎忍小球?yàn)鯙V膜嬌擠壓采損傷描的前勁提,籌而且舌紅細(xì)友胞在集腎小委管濾名液中樣流經(jīng)映的時(shí)姿間短乒暫,爺因而洗受濾躲液pH和滲媽透壓塘變化踐的影任響較仗小,頭故紅師細(xì)胞珍形態(tài)軋保持耕正常掙或均勇一性牙輕度侵變化冒。判斷暮界限非腎槽小球識(shí)性血依尿:掙均一架性紅陳細(xì)胞>8屑0%,畸晉形紅驚細(xì)胞<2米0%。腎小援球性捉血尿煉:畸醒形紅箏細(xì)胞>8聰0%。紅艦細(xì)胞冤呈多身形性男,如來粗棘胃狀、俱菜花萬狀、蜂偽足意狀、芽面包拜圈狀趕;或牧極度膏萎縮夕或極秘度膨篩脹;葡或呈桑碎片冷狀等耍?;旌仙倚约t疼細(xì)胞傷血尿豎:畸界形紅炕細(xì)胞>2局0%、<8嘗0%,為逼混合昏型血楊尿。影響以因素①堿勵(lì)性(pH>9.來0)尿憶中,猛紅細(xì)喚胞膜解脂質(zhì)烏外層必表面拒增加頑,出雙現(xiàn)鋸焰齒形兵紅細(xì)饞胞和士棘形貧紅細(xì)曠胞;稀②酸姨性(pH<4.滔0)尿矛中,蛾紅細(xì)脾胞膜使脂質(zhì)蓋內(nèi)層條表面稱增加劈燕,出忘現(xiàn)可打逆口梢型紅植細(xì)胞潤(rùn)或細(xì)全胞溶有解、做破壞封;③失滲透森壓較適低(泛<40蠻0m堤mo斷l(xiāng)/況L)時(shí)擇,出絞現(xiàn)面事包圈挖樣、妖戒形滑紅細(xì)棗胞且蛾易溶約血;蘋④滲啦透壓鳴較高阿(>90蝕0m溪mo咬l/睡L)且pH增加死時(shí),技則形棄成鋸荒齒形鼠、棘腥形紅殘細(xì)胞米。標(biāo)本資要求由于斤pH為及尿吩滲透梁壓會(huì)混對(duì)R冰BC爹形態(tài)弓產(chǎn)生漁影響窩,在樹采集志標(biāo)本陣時(shí),閘我們沉要求旬受檢近者檢嗎前限既水,釣讓尿符液在持膀胱緊中停困留6h,芳嚴(yán)格淹取清臨潔中梁段晨蛙尿,訴以期縮慧減小坊pH婆值及嶼尿滲仿透壓淚對(duì)結(jié)飼果的錘影響脾,使破結(jié)果殼更具還可比雨性。取刻冊(cè)度離垃心管旦,倒蛋入混啄合后皂的新碌鮮尿10糕ml笑,4脫00足g離心生力,仰離心5m慨in,待碰離心納停止吃后,平取出肢離心拒管,走棄去刮上層歸清夜贈(zèng),留饅下0.斯2線ml沉渣脾,輕舉搖離茂心管盟,使播尿有小形成轟分充彎分混喉勻。郵取尿拳沉渣0.閘02聞ml,滴紫在載勝玻片爽上,掙用18鍛mm昂×1點(diǎn)8m什m的蓋鐮玻片搜覆蓋廈觀察鋼。臨床損意義腎性粗血尿探疾病肅主要安有:欣膜性罵腎小涂球腎嫩炎、Ig主A腎病冬、狼景瘡性刮腎炎往、局格灶性科腎硬鹽化、乏系統(tǒng)透性血莖管炎虛、腎湯淀粉強(qiáng)樣變遵等。非腎擁性血技尿疾舟病主途要有蟲:腎啦結(jié)石秧癥、估尿道睜腫瘤張、前攏列腺襲肥大唯等。尿紅朗細(xì)胞冬形態(tài)甘檢查伯時(shí)應(yīng)瓶注意細(xì)的問溪題1、尿中丘畸形尾紅細(xì)葵胞增良多、餡但形市態(tài)單垃一不驅(qū)能診套斷腎沿小球浪性血糠尿危單挎純尿柴pH圣、滲桶透壓抱的變?cè)苹餐タ梢龘炱鹉驇X紅細(xì)跑胞畸絮形,但此愿時(shí)尿楚畸形藥紅細(xì)養(yǎng)胞為盡單一顫形態(tài)羊。尿配紅細(xì)企胞在言酸性作尿液狡中腫竊脹呈鍛現(xiàn)球確狀、木口形;在堿恢性尿翠液中局血紅閣蛋白壓溶解拖丟失曉呈現(xiàn)團(tuán)鋸齒循性、預(yù)影形;尿紅鈔細(xì)胞似在高古滲環(huán)崗境下樸細(xì)胞眼漿粘棉滯性里增加納、順瓦應(yīng)性勵(lì)下降,呈皺讀縮形;在低記滲環(huán)漏境中誘細(xì)胞受表面驅(qū)積與順體積察比上嘩升,濾過臥阻力洋下降,稀釋燦的血繩紅蛋懲白漏岸出細(xì)舌胞外意而呈索現(xiàn)環(huán)撞形、鈔戒形礎(chǔ)。因秀此,尿中立畸形冠紅細(xì)遇胞增廳多、腐但形悉態(tài)單螺一不開能診臺(tái)斷腎狗小球欠性血暗尿;腎小設(shè)球性幸血尿盞的特量征是誕尿中過出現(xiàn)誕多種挑形態(tài)缸的畸款形紅典細(xì)胞,且畸散形紅倡細(xì)胞訓(xùn)數(shù)目滲明顯等增多豬。2、尿瘋畸形殊紅細(xì)方胞并弦非腎博小球半性疾才病所蒼特有岸尿畸凈形紅妙細(xì)胞枕不只國(guó)出現(xiàn)哨于腎鑄小球窄性疾高病,健康敲人尿頑中的番紅細(xì)晴胞均潛為畸弄形紅鐵細(xì)胞,但其忽數(shù)量些小于5×毛10塞6/L。衣因此,腎小誕球性予血尿別診斷槳的前爐提條傾件是蛾尿紅越細(xì)胞允數(shù)量番大于8×切10屠6/L。俱此外,尿路蠅感染揭患者剩尿紅浙細(xì)胞亭體積稼分布?xì)⑶€肅也可親呈現(xiàn)充腎小乖球性浩分布知。3、腎界小球傾性疾劇病也誕可是室非畸敘形紅超細(xì)胞番性血史尿掏在嚴(yán)居重的罰腎功頑能衰轟竭患加者,由于蹄腎小型管內(nèi)我滲透財(cái)壓梯巧度的射喪失建和腎勿小球秘基底珍膜的宿嚴(yán)重碼破壞,尿紅喉細(xì)胞炭可為散正常厚形態(tài)筑。4、尿躬中紅旁細(xì)胞匯數(shù)量?jī)A要充萌足刷尿侄中紅脆細(xì)胞傍每高觀倍(4答00倍)視野醬少于30~40個(gè),將影喜響尿份紅細(xì)無胞形蝴態(tài)檢照測(cè)對(duì)奇血尿寨定位監(jiān)診斷屢的可類靠性額。近期雄本科濃新開的展項(xiàng)罪目24抖h尿蛋護(hù)白定模量OG捉TT試驗(yàn)?zāi)蚣t母細(xì)胞棚形態(tài)燈檢查血、洪尿、坡痰培央養(yǎng)24小時(shí)冤尿蛋顫白定異量標(biāo)組本留誓取方糕法準(zhǔn)確拒收集24小時(shí)賊尿液瀉:例洲如:厭早晨7點(diǎn)起國(guó)床解膀小便脆,棄畏去不柏要。嶺收集7點(diǎn)鐘水以后內(nèi)的所謀有尿道液置虹干凈走容器果內(nèi),竹至第洋二天曠早晨7點(diǎn)鐘腹止,膜并在總第一掙次小新便解殊入容偷器后般加入籌防腐紙劑(丘甲苯林)。槍門診慣病人牧將全沉部尿醉液送機(jī)化驗(yàn)修室體芹液檢刪驗(yàn)窗徹口。滅住院準(zhǔn)患者淚將全躺部尿晉液送端護(hù)理上站,者混勻華并量盾取總堅(jiān)尿量湯后,賢留取10撒-2衡0m葬l尿液歲于一除次性尼尿杯鴿中送扮化驗(yàn)屬室檢繪測(cè),帶請(qǐng)務(wù)驗(yàn)必在途化驗(yàn)懸單上記錄蜓總尿雀量。注意秀:甲貍苯系默有機(jī)份溶劑競(jìng),應(yīng)壺避免擇與塑罵料制鄰品直以接接暈觸。OG炒TT試驗(yàn)WH框O建議犯:成蔬人75捷g葡萄錫糖,甩孕婦10井0g,兒炸童1.陵75浩g/想kg體重黑,總舅量不弓超過75碼g葡萄船糖,貪用25出0痰ml水溶岡解,5分鐘粉內(nèi)口喚服。標(biāo)本程采集批:于序口服禾糖前舍、0.仙5、1、2、3h抽取掠靜脈馬血測(cè)課定GL辯U,同勻時(shí)收談集尿項(xiàng)液標(biāo)他本查紋尿糖港。整個(gè)魔試驗(yàn)解期間享不可歲吸煙欣、喝永茶或酸進(jìn)食尿液卸培養(yǎng)恒標(biāo)本霧留取雅方法標(biāo)本旁收集:需項(xiàng)在應(yīng)脂用抗抵菌藥浩物之池前或驚停用著抗菌鵲藥5d之后出留取至尿液挑標(biāo)本撕;尿呢液在都膀胱黃內(nèi)應(yīng)繞停留6~沾8小時(shí)莊以上更。清潔撐排尿德法:女取患者篩以手遺指將拆陰唇斬分開晨,用景肥皂賭水或辨碘伏搬清洗聯(lián)外陰走,然乳后以扛清水揀沖洗碗尿道聯(lián)口周疾圍,邁擦干毅并排登出前瓶段尿零液后鎖,用瀉無菌螞容器擋接取犬中段齒尿;渣男患傷者應(yīng)威翻轉(zhuǎn)陵包皮純沖洗塞,用搖碘伏檔或1:10志00新潔休爾滅寧消毒您尿道來口,會(huì)排出缸前段狼尿液洲后,達(dá)用無體菌容在器接顫取中冤段尿蔥。標(biāo)本義的運(yùn)染送:標(biāo)企本采脈集后腐應(yīng)立詢即送隙檢,柔爭(zhēng)取縣在1h之內(nèi)嬸送檢脖驗(yàn)科娘微生逆物室輛。痰培巷養(yǎng)的摸標(biāo)本釘采集自然悔咳痰托法:要育求患僚者清孤晨留桐取,搖留取原標(biāo)本乓前用倒清水撒漱口3次,建之后壩用力幅將氣墾管深幕部的萍痰液艱咳出當(dāng)??葘犹递^粘困難浙者可緒用霧成化蒸鞋氣吸鼓入以增利痰絡(luò)液咳最出。年幼兒志可用庫(kù)手指璃輕叩管胸骨妖柄上閣方以窩誘發(fā)扶咳痰宗。注意余事項(xiàng):留饒?zhí)登罢聿灰苓^早傲打開河無菌宋容器均,留殿痰時(shí)蠻不要銹接觸汽容器歸內(nèi)層鳳,留劣痰后正應(yīng)立呢即送潤(rùn)檢,職爭(zhēng)取掙在1小時(shí)
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