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文檔簡介
生物技術總論生技術:是指人們以現(xiàn)代生命科學為基礎結合先進的工程技術手段和其他基礎學科的科學原理按照預先的設計改造物體或加工生物原料人們生產出所需產品或達到某種目的的一門新興的、綜合性的學科。傳生物技術要是通過微生物的初級發(fā)來生產產品括造醬面包酪酸奶及其他食品的傳統(tǒng)工藝?,F(xiàn)生物技術:指在20世中葉后隨著一些生物學領域的重要發(fā)現(xiàn),以及隨后產生的新手段和新技術而形成以現(xiàn)代生物科學研究成果為基礎基因工程為核心的新興學科?,F(xiàn)生物技術的標志:是以1953年雙旋結構模型建立為基礎。以年代重組技術的建立為標志生技術的重要性:)物技術是解決全球性經濟問題的關鍵技術,可以解決人類所面臨的諸如食品短缺問題、健康問題、環(huán)境問題、及資源問題2)生物技術廣泛應用于醫(yī)藥衛(wèi)生、農林牧漁、化工和能源等領域,促進傳統(tǒng)產業(yè)的技術改造和新興產業(yè)的形成)生物技術還與與倫理德律等社會問題都有著密切的關系計生產生重大的影響。生技術的特征:高效益,高智力,高投入高競爭,高風險,高勢能。生技術的種類上分統(tǒng)物技術生物技術操作對象和操作對象的不同:基因工程,細胞工程,酶工程,發(fā)酵工程,蛋白質工程,生化工程等現(xiàn)生物技術對經濟社會發(fā)展的影響:改善農業(yè)生產、解決食品短缺,包括提高農作物的產量及品質,培育抗逆的作物優(yōu)良品系,培養(yǎng)動物的優(yōu)良品系提高生命質量,延長人類壽命3)決能源危機、治理環(huán)境污染4)造工業(yè)原料、生產貴重金屬。第二章基因工程基工程:按照人為的愿望,進行嚴密的設,通過體外DNA重和轉移等技術,有目的地改造生物種性使有物種較短的時間內趨于完善而創(chuàng)造出新的生物類型這就是基因工程。10.因工程克隆載體:外源基因必須先同某種傳者結合后才能進入細菌和動植物受體細胞,把這種能承載外源DNA斷(基因)帶入受體細胞的傳遞者稱之為基因克隆載體。11.的基因:基因工程的目的是通過優(yōu)良性狀基的重組,獲得有價值的新物質,為此須從現(xiàn)有生物群體中分出可用克隆的相關基因樣的基因通常稱之為目的基因的基因主要是結構基因。12.結構基因:是決定合成某種蛋白質分子結構相應的一段DNA。結構基因的功能是把攜帶的遺傳信息轉錄給(使核糖酸再以為板合成具有特定氨基酸序列的蛋白質。13.轉化:攜帶基因的外源分子通過與膜結合進入受體細胞,并在其中穩(wěn)定維持和表達的過程;14.轉導:通過噬菌體顆粒感,把導受體細胞的過程。15.感受態(tài)細胞:16.體細胞:從技術上講是能攝取外源基因并能其穩(wěn)定維持的細胞;從目的上講是有應用和研究價值的細胞;17.物轉基因技術:是將功能基因導入植物的基組中,從而引起植物體性狀的可遺傳改變的技術。13.基因工程的主要操作內容1目的基因的獲?。簭纳锘蚪M中,分離出帶有目的基因的片斷)重組體的制備:將目的基因的片斷插入到載體分子上。3)重組體的
轉化:將重組體轉入到受體細胞中)隆鑒定:挑選轉化成功的細胞克隆)的基因表達:使導入寄主細胞的目的基因表達出需要的基因產物。14.基因工程的特征:跨物種,無性擴增??缥锓N:外基因到另一種不同的生物細胞內進行繁殖。無擴:外源DNA在寄主細胞內可大量擴增和高水平表達15.基因工程誕生的理論基礎是傳物質雙旋結構,中心法則和遺傳密碼。1、是傳物質:核酸的組成和分類?(和RNA)2DNA雙旋結構年D.和FrancisH.C.Crick揭了DNA分子的雙螺旋結構和半保留復制機制3中心法則和遺傳密碼1957年又出了遺傳信息傳遞的“中心法則年MarshallNirenberg和GobindKhorana等終于破譯了64個傳密碼16.因工程的安全性:對境的影響:新的生物性狀可能給生態(tài)環(huán)境帶來不良影響。2)新型病毒的出現(xiàn):制造帶有抗性基因的新型病毒微生物癌擴散:將腫瘤病毒引入細菌有可能擴大癌癥的發(fā)生范圍造物擴散新生物體的意外擴散可能會出現(xiàn)危險。17.基因工程操作的主要技術理:電泳技術,分子雜交技術技,測序技術,技術。18.泳技術:在直流電場中,帶電粒子向帶符號反的電極移動的現(xiàn)象稱為電泳。用途:用于分離、鑒定和純化DNA多肽片斷。原理:凝膠結構孔徑分子篩作用是分離DNA片。19.PCR技基本原理類于DNA的內復制首先擴增?模板加熱變性解鏈隨之將反應混合物冷卻至某一溫度后物與它的靶序列發(fā)生退火將溫度升高使退火引物在聚合酶作用下得以延伸。這種熱變復-延的過程就是一個PCR循。20.工具酶的種類:限制性內酶連接酶、聚酶、核酸酶、核酸修酶。21.限制性內切酶:有限制和飾作用。限制是指細胞能識別外來的并把它切成片斷;修飾是指細胞通過堿基的甲基化對內源DNA起護作用。22.DNA連接酶:催化上口兩側3‘羥基和’磷酸之間形成的磷酸二酯鍵,使斷開的?口連接起來。所以其具有修復單鏈或雙鏈的能力。23.DNA聚酶為三類賴的DNA聚合酶聚合酶Ⅰ全賴于RNA的聚合:反錄酶。不依賴于的聚酶末轉移酶24.因克隆載體的定義:外源基因必須先同傳遞結合后才能進入受體細胞,把這種能承載外源基因的傳遞者稱之為基因克隆載體。25.因克隆載體的功能:運送外源基因高效轉入體細胞;為外源基因提供復制能力或整合能力;為外源基因的擴增或表達提供條件。26.因克隆載體的種類:質粒克隆載體;噬菌體病毒克隆載體;復合型克隆載體;酵母人工染色體;細菌人工染色體載體;哺乳類人工染色體。27.因克隆載體具備的條件:必須含有復制單元以使片斷能在細胞內復制;必須含有標記基因于轉化細胞和非轉化細胞鑒別開來基的內部必須有合適的切割位點,使得外源基因插入到標記基因內使標記基因失活;載體DNA應包括合適的控制單元如啟動子、終止子等。28.結構基因的組成:轉錄啟子、基因編碼區(qū)和轉錄終止子。33.目的基因的分離方法技法選基因文庫法位克隆法差別顯示技術;酵母雙雜交系統(tǒng)法;標法;生物信息技術。34.物基因轉化受體系統(tǒng):是指用于轉化的外植通過一定培養(yǎng)途徑,能高效、穩(wěn)定再生無性系,并能接受外源DNA合,能轉化選擇抗生素敏感的再生系統(tǒng)。
35.植物基因轉化受體系統(tǒng)的件高效穩(wěn)定的再生能力植必須有很高的再生頻率,并且具有良好的穩(wěn)定性和重復性B較的遺傳穩(wěn)定性,要求植物受體系統(tǒng)接受外源DNA后不影響其分裂和分化并能將它們穩(wěn)定地遺傳給后代具有穩(wěn)定的外植體來源外體容易得到并且可以大量提供。因為實驗需要大量的外植體材料。36.物基因工程應用:抗植物病蟲害;抗非生物迫;提高作物產量;改良作物品質。1、抗植物蟲害基因及其應用植物病害和蟲害往往使農業(yè)生產蒙受嚴重損失物產量損失的三分之一可歸因于病害植物蟲害也使全世界每年大約損失數千億美元學藥的使用存在食物殘食鏈中的積累造成嚴重的環(huán)境污染的非特異性殺益的昆蟲破生態(tài)平衡期用使病原體逐步生抗性等問題由于不僅新品種選育歷程較長于某些病蟲害尚無基因資源作為雜交育種的親本常規(guī)的育種手段來獲得抗病蟲害的作物品神是很困難的2、抗植物真病害基因及其應用增強細胞壁結構誘導產生或激活抗菌物質3、抗非生物脅迫基因及應用脅系對植物生存和生長不利的種環(huán)境因素的總和4高作物產量改良作物品質的基因及其應用第三章細胞工程植物培養(yǎng)基在無菌和人為控制外因(營養(yǎng)成分,光照,溫度,濕度等)的件下,培養(yǎng),研究植物組織器官,甚至進而從中分化,發(fā)育出整體蜘蛛的技術。胚狀體:指的是在組織培養(yǎng)培養(yǎng)中分化產生的具有芽端和跟端類似合子胚的構造。脫分化度化的植物器官或細胞產生愈傷組織的過程植物細胞的脫分化。再分化分產生的愈傷組織續(xù)進行培養(yǎng)又可以重新分化成根或芽等器官一程稱為植物細胞的再分化。1細工程的基礎知識:生物界有兩大類細胞:原核細胞和真核細胞2細全能性:生物體的細胞具有使后代細胞形成完整個體的潛能的特性3基技術:無菌操作技術,細胞培養(yǎng)技術,細胞融合技術4細工程重要應用1快2優(yōu)植物快培育與繁殖3動胚胎工程快速繁殖優(yōu)良、瀕危品種;利動植物細胞培養(yǎng)生產活性產物、藥品5新動植物品種的培育6供醫(yī)學器官修復或者移植的組織工程7轉基因動植物的生物工程反應器8在遺傳學、發(fā)育學等領域的理論研究;在源、環(huán)保等領域的應用。5植物細胞工程:所采用技術的理論基礎是植物細胞的全能性,通常采用的術手段是植物組織培養(yǎng)和植物體細胞雜交。特點1:物細胞程方面植物細胞培養(yǎng)可以進行深層培養(yǎng),在較短周期內獲得大量難得的、有用的物質。特點2:細胞和組織培養(yǎng)法使傳統(tǒng)作物育種實現(xiàn)工廠化不效率高本低還以改良作物品將某些人類需要的特性進一步發(fā)展。6外植體:即能誘發(fā)產生無性增殖系的器官或組織切斷。7愈組織:由植物各種器官的外植體增殖而形成的一種無特定結構和功能細胞團。8植組織培養(yǎng)的個過程備階段分為選擇合適的外植體除病原菌及雜,置合適的培養(yǎng)基。到誘導去分化階段(脫分化)再到繼代增殖階段(再分化生根成芽階段再到移栽成活階段(包括煉苗等)最后到大田推廣及家系內選擇。9培基成分基成分碳(蔗糖葡糖等及磷鉀鎂微無機物鐵錳、硼酸等;微量有機物:如激動素、吲哚乙酸、肌醇等值:-10植物組織培養(yǎng)的類型:依據培養(yǎng)基分類:細胞的懸培養(yǎng),細胞的固體培養(yǎng)。據外植體材料分類器官培養(yǎng)細培依據培養(yǎng)途徑分類愈組織發(fā)生體細胞胚胎發(fā)生。11單倍體:是指細胞中僅含有一組染色體的個。12單體培養(yǎng):誘發(fā)途徑:天然誘發(fā)途徑(孤雌繁殖、孤雄繁殖、無融合生殖等導(花藥培養(yǎng)、花粉培養(yǎng)、未授粉子房或胚珠培養(yǎng)、雜交法獲得單倍體植株:單倍
體植株僅含有一組染色體不存在基因之間的顯隱性關系過染色體加倍可以創(chuàng)造純合的二倍體植株,作為雜交的親本材料,獲得較高的雜種優(yōu)勢等13植組織培養(yǎng)的應用:初級及次級代謝物的生產,生物轉化(利用植物培養(yǎng)細胞為酶源使某種前體化合物生成相應產物的技術稱之為生物轉化植物食用色素的生產,快速繁殖,人工種子,無病毒植物的培育,轉基因植物的培育。14人種子:定義:即人為制造的種子,它是一種含有植物胚狀體或芽、營養(yǎng)成分、激素以及其他成分的人工膠囊。構成:由人工種皮、胚狀體和人工胚乳三部分構成。15人種子的特點:不受環(huán)境因素的制約,一年四季可以進行工廠化生產;由于胚狀體是經人工無性繁育產生,有利于保持該種系的優(yōu)良性狀;與試管苗相比更更合機械化田間播種;可根據需要在人工胚乳中添加適量的營養(yǎng)物、激素、農藥、抗生素、除草劑等,以利于胚狀體的健康生長。16人種子的制備流程:胚狀體的制備及其同步化生長:可采用低溫法、抑制劑法DNA合抑制劑離和通氣法等進行誘導和篩選人胚的制備:人工胚乳的營養(yǎng)需求因種而異與胞組培養(yǎng)的培養(yǎng)基大體相仿同可據需要在培養(yǎng)基中添加適量的激素抗素、農藥草劑等人種皮的制備主采包埋劑-褐藻酸鈉進行包埋,經氯化鈣滴定、絡合作用后形成具有一定剛性的人工種皮。17人種子的貯存與萌發(fā):貯存:一般要將人工種子保存在低溫4-<67%對濕度)條件下(相對成本較高萌發(fā):在自然條件下,人工種子貯存時間較短,萌發(fā)率較低;在人為控制的條件下,萌發(fā)率相對較高。18體胞雜交:定義:兩個遺傳性狀不同的體細胞融合的過程。優(yōu)勢:獲得了有價值的新品系或育種上有用的新材料。19體細胞雜交流程:、生質體制備a取材與除菌b酶解:纖維素合成酶消化,反應液轉綠是酶解成功的標志c分:獲得原生質體d洗滌e鑒:測定其活力2、生質體的融合:采用化學法誘導融合3、原生質體細胞融合后產生的細胞融合類型:雜合株、核質異源的植株、嵌合植株4、雜合體的鑒別與篩選:顯微鏡鑒別、互補法選等。第四章發(fā)酵工程1發(fā)工程:是生物技術的重要組成部分,是生物技術產業(yè)化的重要環(huán)節(jié)。將微生物學、生物化學和化學工程學的基本原理有機結合起來利用微生物的生長和代謝活動來生產各種有用物質的工程技術,由于它以培養(yǎng)微生物為主,所以又稱微生物工程。2發(fā)工程主要內容:包括生產菌種的選育、發(fā)酵條件的優(yōu)化和控制、反應的設計及產物的分離、提取與精制等。3發(fā)工程主要的發(fā)酵類型:微生物菌體發(fā)酵,微生物酶發(fā)酵,微生物代謝物發(fā)酵,微生物轉化發(fā)酵,生物工程細胞的發(fā)酵4發(fā)技術的特點:)微生物的特點:所利用的微生物主要是細菌、放線菌,酵母菌和霉菌極適應能力化力繁殖能力類多酶品種多產容易本)植物特點過以生物體的動調節(jié)方式進行個應過程在發(fā)酵設備中一次完成;反應在常溫常壓下進行減成原通常以蜜糖、淀粉等碳水化合物為主;容易生產復雜的高分子化合物能度選擇在復雜化合物的特定部位進行氧化還原等反應發(fā)過程中需要防止雜菌污染。5發(fā)工程的應用:醫(yī)藥工業(yè);食品工業(yè)(食品添加劑,人造肉工;化學工業(yè);冶金工業(yè);農牧業(yè);環(huán)境保護。
6發(fā)方法的類別:根據微生物的種類分類:厭氧性發(fā)酵,好氧性發(fā)酵,兼發(fā)酵。根據發(fā)酵設備分類:敞口發(fā)酵,密閉發(fā)酵,淺盤發(fā)酵。根據培養(yǎng)基的物理性狀分類:深層發(fā)酵,固體發(fā)酵,液體發(fā)酵。8常微生物:細菌,放線菌,病毒,真菌,酵母菌和霉菌。9培基的種類:孢子培養(yǎng)基:是供制備孢子用的,其基質濃度要低些;無機鹽的濃度要適量;生產中常用的孢子培養(yǎng)基有麩皮培養(yǎng)基、大(?。┟着囵B(yǎng)基,瓊脂斜面培養(yǎng)基等;種子培養(yǎng)基:供孢子發(fā)芽和菌體生長繁殖用的。原料有葡萄糖、糊精、蛋白胨、等;發(fā)酵培養(yǎng)基:發(fā)酵培養(yǎng)基是供菌體生長繁殖和合成大量代謝產物用的。發(fā)酵培養(yǎng)基的組成:碳源、氮源、無機鹽和微量元素、生長因子(維生素、氨基酸、嘌呤和嘧啶的衍生物及脂肪酸等產物形成的誘導物、前體和促進劑10發(fā)的一般過程:上游工程:菌體的分離、純化和選育,種子的擴大培養(yǎng),發(fā)酵罐的清洗、滅菌,培養(yǎng)基的配置和滅菌等中游工程:微生物酵及控制:是微生物合成大量產物的過程,是整個發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)半續(xù)發(fā)酵連續(xù)發(fā)酵發(fā)和液體發(fā)酵等發(fā)的因素很多,如溫度、pH通風、攪拌、罐壓力等等,必須適當地控制影響發(fā)酵的各種條件,掌握發(fā)酵的動態(tài),并進行雜菌的檢查和產物測定,使整個發(fā)酵過程順利進行。下游工程發(fā)產物的分離、純和精制:發(fā)酵液的預處理和固液分離:目的是改善發(fā)酵液性質,以利于固液分離,常用酸化、加熱和加絮凝劑等方法;提取:目的主要是濃縮,也起到對產物一定的純化作用采吸附法子交換法淀法萃取法濾法等制:進一步純化發(fā)酵產物,可采用沉淀、超濾、層析等方法。成品加工:對獲得產物進行最后的濃縮、無菌過濾和去熱原、干燥、加穩(wěn)定劑等。37.發(fā)酵的操作方式:1)分批發(fā)酵:先將空罐殺菌,培養(yǎng)基裝入發(fā)酵罐,接種之后進行培養(yǎng),在培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)基成分減少,微生物增殖,環(huán)境隨時間而變化,是一種非穩(wěn)態(tài)操作法。優(yōu)缺點此法不易染菌但很難采用控制基質濃度的方法來增大發(fā)酵生產能力發(fā)過程中,微生物具有典型的生長周期(延滯期、指數生長期、減速期、穩(wěn)定期、衰亡期在酒精、氨基酸、抗生素生產中。2)連續(xù)發(fā)酵:連續(xù)供給新鮮培養(yǎng)基的同時,將含有微生物和產物的培養(yǎng)液從發(fā)酵罐中連續(xù)放出,叫做連續(xù)培養(yǎng)法。優(yōu)點可維持穩(wěn)定的操作條件有利于微生物的生長代謝率和產品質量穩(wěn)定;實現(xiàn)機械化和自動化;減少設備清洗等非生產時間;滅菌次數減少,使儀器探頭壽命延長;缺點由是開放系統(tǒng)容造雜菌污染發(fā)酵過程中微生物容易發(fā)生變異;對設備的技術要求較高;粘性絲狀菌容易附著在器壁上生長和在發(fā)酵液內結團。3)補料分批發(fā)酵:又稱半連續(xù)發(fā)酵,是介于分批發(fā)酵和連續(xù)發(fā)酵之間的一種發(fā)酵技術,是指在微生物分批發(fā)酵中,以某種方式向培養(yǎng)系統(tǒng)補加一定物料的培養(yǎng)技術;分為兩種類型:單一補料分批發(fā)酵和反復補料分批發(fā)酵。優(yōu)點:補料分批發(fā)酵既可以保證微生物生長的需要,又不造成不利的影響,提高產率。12.發(fā)酵工藝控制溫度通在生物學范圍內每升高10℃長速度就加快一倍所以溫度直接影響其生長和合成酶。微生物可生長的溫度范圍較廣,總體說—℃溫度:如果所培養(yǎng)的微生物能承受稍高一些的溫度進行生長和繁殖減少污染雜菌的機會和夏季培養(yǎng)所需降溫的輔助設備,因此培養(yǎng)耐高溫的菌種有一定的生產現(xiàn)實意義。pH值:影響酶的活性進而影響微生物的新陳謝響微生物細胞膜所帶電荷的狀態(tài)改變細胞膜的通透性影響微生物對營養(yǎng)物質的收及代謝產物的排泄響?zhàn)B基中某些組分和種間代謝
產物的離解,從而影響微生物對這些物質的利用值同,往往引起菌體代謝過程的不同使代謝產物的質量和比例發(fā)生改變pH值還會影響霉菌的形態(tài)。溶解氧的濃度:好氣性菌主要是有氧呼吸或氧化代謝氣菌為厭氣發(fā)酵兼性厭氣菌則兩者兼而有之通氣可以供給大量的氧攪則能使新鮮氣更好地與培養(yǎng)液混合證氧的最大限度溶解并攪拌有利于熱交換養(yǎng)液的溫度一致利營養(yǎng)物質和代謝物的分散與種量:種子培養(yǎng)期應取菌種的對數生長期為宜種過嫩或過老不但延長發(fā)酵周期而且會降低產量接量的大小直接影響發(fā)周期量地接入培養(yǎng)成熟的菌種的優(yōu)點以短生長過程的延緩期因縮短了發(fā)酵期,提高了設備利用率,節(jié)約了發(fā)酵培養(yǎng)的動力消耗,并有利于減少染菌機會。13.酵設備分類:微生物種類劃分:好氧發(fā)酵設和厭氧發(fā)酵設備;根據攪拌方式劃分:好氧發(fā)酵設備又可以分為機械攪拌式發(fā)酵罐和通風攪拌式發(fā)酵罐義行生物深層培養(yǎng)的設備。應具備的條件:嚴密的結構、良好的液體混合能力,較高的傳質、傳熱速率,同時還應具有配套而又可靠的檢測及控制儀表。第五章酶工程酶的分類:氧化還原酶、轉移酶、水解酶、裂合酶、異構酶、連接酶(合成化核酸酶的組成和結構特點:單體酶、寡聚酶、多酶復合體多酶復合體的組成部分輔子蛋白中非蛋白質部分它以是無機離子也可以是有機化合物。輔酶機輔因子與酶蛋白結合松散即為輔酶輔基:有機輔因子與酶蛋白結合緊密即為輔基。酶工程:是研究酶的生產和應用的一門技術性學科,包括酶劑的制備固化、酶的修飾與改造及酶反應器等方面的內容學工程學相互滲透結合形成的一門新的技術科學,是酶學、微生物學的基本原理與化學工程學有機結合而產生的邊緣科學。酶的活性部位結底物和底物轉化為產物的區(qū)域是整個酶分子相當小的部分,它是由可能相隔很遠的氨基酸殘基形成的三維實體。酶底物的結合模型:鎖和鑰匙模型,誘導合模型。酶的催化作用廣義的酸堿催化共價催化、鄰近效應及定向效應:所謂鄰近效應就是底物的反應基團與酶的催化基團越靠近反應速度越快變形或張力酶的活性中心為疏水區(qū)域酶作為催化劑的顯著特點:催化能力;專一性:絕對專一、相對專一;調節(jié)性:酶濃度的調節(jié)2激調節(jié)共價修飾調節(jié)4.限性蛋白水解作用與酶活力調控抑劑的調節(jié)6.反調節(jié)7.金離子和其他小分子化合物的調節(jié)酶制作用:概念:能降低酶催化反應速度因素。分類:失活作用,抑制作用,去激活作用和阻遏作用。鄰效應:底物的反應基團與酶的催化基團靠近,其反應速度越快。失作用:是指由于一些物理因素和化學試部分或全部破壞了酶的三維結構,導致酶喪失活性。抑作用:是指在酶不變性的情況下,由于需基團或活性中心化學性質的改變而引起的酶活性的降低或喪失。去活作用:是指反應中去除金屬離子也會起某些酶活性的降低或喪失。阻作用指些因素使酶蛋白的合成減少應速度的降低是由于酶分子數量的減少。12.生物酶的發(fā)酵生產:是指在人工控制的條件,有目的地利用微生物培養(yǎng)來生產所需的酶,其技術包括培養(yǎng)基和發(fā)酵方式的選擇及發(fā)酵條件的控制管理等。13.培養(yǎng)基的組成:碳源、氮、無機鹽類。
15.酶的分離與純化的影響因1)度:提純操作應在低溫下進行,以防止蛋白水解酶對酶的降解;)值:在提純過程中一般采用緩沖液作為溶劑,防止過酸或堿3)鹽濃度純程中應選用合適濃度的鹽溶液以促進蛋白質的溶解度過高易性;4)攪拌:劇烈攪拌容易引起蛋白質的變性,提純中應避免劇烈攪拌和產生泡沫;5)酶液是微生物生長的良好培養(yǎng)基,在提純過程中應盡可能防止微生物對酶的破壞。16.制劑的制備:1)碎細胞:主要針對胞內產酶。植物細胞常用高速組織搗碎機等,而微生物組織的破碎則有機械破碎法等)溶劑抽提:大多數酶蛋白都可用稀酸、稀堿或稀鹽溶液浸泡抽提;3)心分離:主要用于除去發(fā)酵液中的菌體殘渣或抽提過程中生成的沉淀物。)縮:由于抽提液中酶的濃度一般都比較低,必須經過進一步純化)燥:酶溶液或含水量高的酶制劑即使在低溫下也極其不穩(wěn)定。方法有真空干燥等。酶的純化與精制:醫(yī)藥析測等用酶必須使用精制品因此必要進一步進行酶的純化與精制酶的純化與精制方法1根分子大小和形狀的分離方法:包括離心分離、差速離心和等密度梯度離心分離、凝膠過濾、透析與超濾等根據酶子電荷性質的分離方法:離子交換層析析焦泳等電聚電泳等根酶分子專一性結合的分離方法和層析、免疫吸附層析、染料配體親和層析和共價層析根分配系數的分離方法:雙水相萃取分離(由于生物活性物質在兩相中具有不同的分配比,經過反復處理則可達到分離的目
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