驚恐障礙相關(guān)CCK系統(tǒng)基因多態(tài)性研究進(jìn)展

驚恐障礙相關(guān)CCK系統(tǒng)基因多態(tài)性研究進(jìn)展

【關(guān)鍵詞】驚恐障礙；CCK受體；基因多態(tài)

遺傳學(xué)研究發(fā)現(xiàn)驚恐障礙具有家族聚集性，神經(jīng)生化研究證實(shí)中腦皮層的DA能系統(tǒng)與膽囊收縮素受體共存于CNS內(nèi)，經(jīng)安定藥長(zhǎng)期治療后，中腦DA神經(jīng)元CCKmRNA的表達(dá)量明顯升高。本文綜述了驚恐障礙相關(guān)CCK亞型，CCK及其受體基因多態(tài)性近年來進(jìn)展。

驚恐障礙是以反復(fù)出現(xiàn)顯著的心悸，出汗，震顫等植物神經(jīng)癥狀，伴以強(qiáng)烈的瀕死感或失控感，害怕產(chǎn)生不幸后果的驚恐發(fā)作為特征的一種急性焦慮障礙［1］。意外發(fā)現(xiàn)低劑量CCK4能誘發(fā)PD患者發(fā)作，而正常人需要較高劑量，提示大腦中廣泛分布的CCK神經(jīng)元及其分布一致CCKB受體可能包含在人類PD的病理生理機(jī)制中；由此CKKB受體基因自然成為PD的候選基因；其中驚恐障礙，精神分裂癥及焦慮障礙研究較多。

1CCK前體、CCK與PD

有證據(jù)表明PD患病者中CCK神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)發(fā)揮著重要作用。人類大腦中CCK分布廣泛，在皮質(zhì)，基底節(jié)，杏仁核，下丘腦中含量最高，海馬及腦干含量次之，小腦和脊髓含量最低。CCK首先在細(xì)胞體合成前體，其活性片段包括CCK58，CCK39，CCK33，CCK12，CCK8，CCK4等，合成后儲(chǔ)存于突觸前囊泡，以胞裂外排放方式釋放；CNS中CCK8最多，占60～70%，且80%CCK為CCK58的降解產(chǎn)物，大多數(shù)CCK產(chǎn)物羧基末端結(jié)構(gòu)相似，第7位上酪氨酸以硫化形式存在以保持與相應(yīng)受體的親和力和生物活性。盡管CCK4可誘發(fā)PD，而且腦脊液和淋巴細(xì)胞CCK濃度較正常對(duì)照水平低，沒有治療的PD患者較已經(jīng)治療的PD患者，包括抑郁癥和精神分裂癥有明顯增高的淋巴細(xì)胞內(nèi)CCK4介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)Ca2+動(dòng)員；但有學(xué)者在研究其前體基因多態(tài)性是沒有發(fā)現(xiàn)與PD相關(guān)聯(lián)。

2CCK能神經(jīng)系統(tǒng)與PD

CCK受體腦內(nèi)分布，亞型和功能研究大鼠發(fā)現(xiàn)CCK受體與CCK神經(jīng)元分布基本一致，大腦皮質(zhì)，紋狀體最多，下丘腦，海馬次之，而小腦內(nèi)幾乎沒有。根據(jù)功能及受體分子克隆將CCKB受體分為CCKA受體及CCKB受體兩種亞型，因?yàn)榍罢咧饕植加谕庵芙M織，在消化系統(tǒng)主要是通過CCKA而發(fā)揮作用；后者則廣泛分布于中樞神經(jīng)組織，后者是精神疾病研究重點(diǎn)，CCKDA共存的神經(jīng)末梢分布到伏隔核后內(nèi)側(cè)區(qū)，且富含CCKB；推測(cè)該區(qū)CCK通過激活CCKB受體加強(qiáng)DA的功能，而前區(qū)則通過CCK與CCKB受體結(jié)合抑制DA的功能，從而調(diào)節(jié)情緒反應(yīng)及情感表達(dá)。有人研究發(fā)現(xiàn)CCK預(yù)防谷氨酸所致的神經(jīng)毒性作用是通過CCKB抑制NMDA引起的NO形成而產(chǎn)生，另外還與嗎啡的鎮(zhèn)痛作用相關(guān)；近年還發(fā)現(xiàn)同時(shí)CCKB參與腫瘤生長(zhǎng)，心血管，呼吸，學(xué)習(xí)，記憶，睡眠等活動(dòng)［2］。

PD相關(guān)CCK能系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)根據(jù)首先CCK大量存在于同人類情感表達(dá)，情緒體驗(yàn)和焦慮有關(guān)的腦區(qū)邊緣系統(tǒng)。其次，CCK常與經(jīng)典的神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)或多態(tài)共存，如：與DA能及YGABA能等神經(jīng)元共存，前者參與人的行為反應(yīng)，后者參與苯二氮卓類抗焦慮劑的病理生理作用機(jī)制。

多數(shù)依據(jù)多來自于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，當(dāng)然在人CCK誘發(fā)PD早已眾所周知；先應(yīng)用CCK受體的選擇性或非選擇性激動(dòng)劑制作出現(xiàn)焦慮反應(yīng)的老鼠模型，最后在應(yīng)用拮抗劑抗焦慮。首先不同的CCK片段對(duì)CCKA受體和CCKB受體結(jié)合具有選擇性，CCKA受體對(duì)羧基端第7位上硫化型CCK親和力高，如：CCK58，CCK33，CCK39，CCK8；而CCKB受體無(wú)論對(duì)羧基端6位或7位硫化型CCK類多態(tài)都有較高親和力。

常見用于動(dòng)物試驗(yàn)的CCKA受體選擇性激動(dòng)劑有caerulein,A71378等。選擇性拮抗劑：MK329；PD140，548；SR27897；CR1409等；非選擇性拮抗劑：proglumide,benzetrip等；CCKB受體非選擇性激動(dòng)劑有五肽胃泌素pentagastrin，選擇性拮抗劑：CI998和L365，260；非選擇性拮抗劑同CCKA受體相同。

SinghL等研究老鼠X迷宮試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)靜脈注射CCKA受體選擇性激動(dòng)劑caerulein或CCKB受體非選擇性激動(dòng)劑pentagastrin后，可以增加劑量-依賴性大鼠的焦慮水平，而CCKB受體選擇性拮抗劑CI998和L365，260對(duì)焦慮大鼠有抗焦慮作用，且CI998僅對(duì)CCKB受體所致焦慮有拮抗作用［3］。

PD相關(guān)CCKB受體基因多態(tài)性候選基因研究策略仍是近年較為流行的手段，以下作一簡(jiǎn)述，當(dāng)然不一致的意見較多。越來越多的動(dòng)物試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)焦慮障礙病理生理機(jī)制中包含著CCK的調(diào)節(jié)作用，在臨床研究中也進(jìn)一步證實(shí)CCK有誘導(dǎo)驚恐發(fā)作的作用，抗焦慮劑能緩解發(fā)作；因此推測(cè)可能與表達(dá)CCK基因變化有關(guān)。這驅(qū)使了越來越多學(xué)者從分子生物學(xué)角度研究PD的遺傳多態(tài)性發(fā)病機(jī)理。

根據(jù)早期發(fā)現(xiàn)大腦皮層CCK多肽和CCKmRNA水平降低，Zachrisson等［4］運(yùn)用原位雜交檢測(cè)了大腦皮層Brodmann10區(qū)編碼兩種CCKB受體同源體mRNA變異，結(jié)果發(fā)現(xiàn)大腦皮質(zhì)外層編碼CCKB受體mRNA堿基序列長(zhǎng)度減少51%，而大腦皮質(zhì)中相應(yīng)的同源體在外層減少65%，內(nèi)層減少62%；由此進(jìn)一步證明精神分裂癥病理生理機(jī)制中CCK能神經(jīng)傳遞假說。KennedyJL等［5］研究未發(fā)現(xiàn)CCK和CCKA受體基因與PD相關(guān)，而對(duì)CCKB受體進(jìn)行單核苷酸多態(tài)性分析發(fā)現(xiàn)位于5′調(diào)節(jié)區(qū)n微衛(wèi)星在PD患者中有高度多態(tài)性，因此他認(rèn)為CCKB受體基因變異在PD的神經(jīng)生物學(xué)發(fā)生上有重要作用。

Kato等［6］曾檢測(cè)了CCKB受體基因的兩個(gè)突變結(jié)果沒有發(fā)現(xiàn)此突變?cè)赑D患者有病理生理意義。YamadaCK［7］運(yùn)用單鏈構(gòu)象多態(tài)性對(duì)PD的4個(gè)已證實(shí)CCKBR基因的多態(tài)位點(diǎn)研究，其中包括兩個(gè)新的堿基置換突變位點(diǎn)沒有發(fā)現(xiàn)與PD有相關(guān)性。HamiltonSP［8］研究編碼CCK和CCKB受體基因多態(tài)性，運(yùn)用PCR和熒光偏振探測(cè)儀分別檢測(cè)CCKB受體的多態(tài)微衛(wèi)星遺傳標(biāo)記以及CCK啟動(dòng)區(qū)的SNP，連鎖分析兩者均沒有顯著性，運(yùn)用傳遞不平衡TDT(transmissiondisequilibriumtest)和單體相對(duì)風(fēng)險(xiǎn)HRR進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析同樣沒有相關(guān)性。

因?yàn)镃CK4可以誘發(fā)人類驚恐發(fā)作，而CCK8則對(duì)精神分裂癥有治療作用；日本學(xué)者HattoriE［9］研究了編碼CCK基因上游區(qū)域一個(gè)新的微衛(wèi)星多態(tài)性發(fā)現(xiàn)與PD顯著相關(guān)，同時(shí)檢測(cè)主要位于CNS中的CCKB受體基因5′調(diào)節(jié)區(qū)二核苷酸重復(fù)序列n，沒有發(fā)現(xiàn)在日本人群中與PD及精神分裂癥相關(guān)。

也有學(xué)者［10］研究了特發(fā)性環(huán)境耐受差與PD關(guān)系發(fā)現(xiàn)，人格特質(zhì)或兩者有共同的神經(jīng)遺傳學(xué)基礎(chǔ)，并能夠預(yù)測(cè)焦慮癥狀；他們選取11例年齡性別種族背景相匹配IEI癥狀者為研究對(duì)象，檢測(cè)PD相關(guān)CCKB受體基因多態(tài)性及人格特質(zhì)相關(guān)的多巴胺D4受體基因多態(tài)性；結(jié)果顯示受體相關(guān)的CCKBR等位基因7有較高的患病率，編碼DRD4與人格特質(zhì)相關(guān)基因多態(tài)性沒有顯著性差異。因此他們認(rèn)為在預(yù)測(cè)IEI相關(guān)癥狀方面，只能說明該結(jié)果為兩者有共同的神經(jīng)遺傳學(xué)基礎(chǔ)提供的證據(jù)不足，但此結(jié)果至少為提示PD者癥狀與部分IEI者相重疊，并為合理化治療提供了必要手段。該研究樣本量較少，如果擴(kuò)大樣本仍能夠重復(fù)這一結(jié)果則表明伴有IEI者較高的PD患病率，且可能反映是焦慮相關(guān)的一種特質(zhì)；這種特質(zhì)有利于精神衛(wèi)生工作者及其心理咨詢師有針對(duì)性制定治療方案及其心理干預(yù)措施。

3結(jié)語(yǔ)

總之，近二十年研究已經(jīng)能夠合成外源性CCK4，并發(fā)現(xiàn)其誘發(fā)健康人和焦慮障礙屬劑量依賴性，且PD患者更加敏感，甚至低劑量就能夠誘發(fā)驚恐發(fā)作。但內(nèi)源性CCK是如何誘發(fā)PD仍然不得而知，到底是否存在內(nèi)源性CCK，PD僅僅通過CCKBR作用嗎？PD的病因?qū)W發(fā)生或臨床診斷是否可以應(yīng)用測(cè)量腦脊液CCK含量實(shí)現(xiàn)，以便可以對(duì)此類患者提供更好的診斷和治療，其實(shí)PD的病因?qū)W非常復(fù)雜，以上問題還遠(yuǎn)遠(yuǎn)沒有得到解決。

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