向文勝超高效液相色譜詳解演示文稿

向文勝超高效液相色譜詳解演示文稿目前一頁\總數(shù)二十三頁\編于十八點(diǎn)優(yōu)選向文勝超高效液相色譜目前二頁\總數(shù)二十三頁\編于十八點(diǎn)今天的HPLC

科學(xué)描述今天HPLC分離的品質(zhì)取決于色譜柱的填料；同時(shí)也被其所限制。改進(jìn)色譜柱填料的性能可以給色譜過程帶來速度、靈敏度及分離度均大幅提高的好處填料的顆粒度對色譜柱性能的貢獻(xiàn)最大目前三頁\總數(shù)二十三頁\編于十八點(diǎn)速率理論

1956年VanDeemter等人在塔板理論的基礎(chǔ)上，提出了關(guān)于色譜過程的動(dòng)力學(xué)理論——速率理論。該理論采用塔板高度的概念，但同時(shí)考慮到H還取決于同一組分的不同分子在柱中差速遷移過程中所引起的色譜蜂擴(kuò)展程度，將色譜過程與組分在兩相間的擴(kuò)散和傳質(zhì)過程等動(dòng)力學(xué)因素聯(lián)系起來，從理論上總結(jié)出影響塔板高度的各種因素。目前四頁\總數(shù)二十三頁\編于十八點(diǎn)vanDeemter方程dp—固定相顆粒平均直徑—填充不規(guī)則因子Dm—組分在流動(dòng)相中的擴(kuò)散系數(shù)（cm2/s）—彎曲因子，亦稱阻礙因子—由柱填充性決定的因子q—與固定相性質(zhì)有關(guān)的因子，均勻液膜q為2/3df—液膜平均厚度Ds—組分分子在固定液中的擴(kuò)散系數(shù)目前五頁\總數(shù)二十三頁\編于十八點(diǎn)10min從80年代到現(xiàn)在3.5~5μm球形微多孔填料1500~4000psi50,000~80,000塔板數(shù)/米3.9×300mm70年代末期10μm不規(guī)則微多孔填料1000~2500psi25,000塔板數(shù)/米3.9×300mm10min填料顆粒尺寸的演變70年代早期40μm薄殼非多孔基質(zhì)上涂布100~500psi1000塔板數(shù)/米1m長色譜柱10min目前六頁\總數(shù)二十三頁\編于十八點(diǎn)vanDeemter曲線帶來的承諾如果填料的顆粒繼續(xù)演變……更小的顆粒度……目前七頁\總數(shù)二十三頁\編于十八點(diǎn)填料顆粒尺寸的演變前景：2.1×100mm色譜柱1.7μm雜化填料顆?？蛇_(dá)到15,000psi通常有每米200,000理論塔板數(shù)的柱效速度、靈敏度及分離度的完美結(jié)合Minutes1.000.000.200.400.600.80AU0.0000.0200.040一分鐘以內(nèi)！目前八頁\總數(shù)二十三頁\編于十八點(diǎn)UPLC?的技術(shù)成就小顆粒色譜填料（化學(xué)品）超高壓輸液單元（能達(dá)到15,000psi）降低系統(tǒng)體積并優(yōu)化流體路徑降低自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣周期的時(shí)間、減少交叉污染超高速檢測器，包括光學(xué)及質(zhì)譜檢測器新的色譜單元之間的通訊協(xié)議功能齊全的診斷功能為系統(tǒng)完整性而專門設(shè)計(jì)的軟件目前九頁\總數(shù)二十三頁\編于十八點(diǎn)系統(tǒng)的技術(shù)

超高效由設(shè)計(jì)而來檢測器：光學(xué)及/或質(zhì)譜檢測器可調(diào)紫外或光電二極管矩陣為UPLC?專門優(yōu)化的流動(dòng)池高速檢測色譜柱管理：創(chuàng)新的樞軸轉(zhuǎn)動(dòng)設(shè)計(jì)置色譜柱出口直接到檢測器樣品管理器：低擴(kuò)散XYZZ’形式快速進(jìn)樣周期低交叉污染樣品盤及/或樣品瓶可選樣品組織器兩元溶劑管理：高壓混合兩元梯度四溶劑選擇在線脫氣低擴(kuò)散設(shè)計(jì)UPLC的耐壓能力目前十頁\總數(shù)二十三頁\編于十八點(diǎn)0.000.040.000.501.001.502.002.503.003.504.004.505.005.506.001.Tpylbenzene-1.7424.butylbenzene-2.4135.hexylbenzene-5.058

樣品的組份數(shù)：55μm顆粒度完全分離時(shí)間：6.00分鐘0.200.241.Tpylbenzene-0.1374.butylbenzene-0.1825.hexylbenzene-0.360UPLC?AU0.000.100.20Minutes0.000.250.300.350.400.450.500.550.60UPLC?HPLC樣品的組份數(shù)：51.7μm顆粒度完全分離的時(shí)間：0.60分鐘UPLC?的速度提高了！增加了樣品的通量0.00AU目前十一頁\總數(shù)二十三頁\編于十八點(diǎn)使用1.7μm顆粒度的填料增加靈敏度可看到更多的樣品信息AU0.0000.0040.0080.0120.0160.020Minutes1.701.801.902.0002.402.502.601.7μmAU0.0000.0100.0200.0300.0400.050Minutes0.001.002.003.004.005.006.007.008.00AU0.0000.0100.0200.0300.0400.0505.0μm0.024恒定柱長時(shí)；UPLC?的靈敏度提高1.7倍（170%）！恒定L/dp時(shí)；UPLC?的靈敏度提高三倍（300%）！目前十二頁\總數(shù)二十三頁\編于十八點(diǎn)UltraPerformanceLC?

速度、靈敏度與分離度的結(jié)合AU0.0000.0100.0200.0300.0400.050Minutes0.001.002.003.004.005.006.007.00AU0.0000.0100.0200.0300.0400.050Minutes0.002.004.006.008.0010.0012.0015.005.0μm1.7μm60%更快30%更靈敏70%更高分離度在改進(jìn)獲得信息質(zhì)量的前提下提高分析速度目前十三頁\總數(shù)二十三頁\編于十八點(diǎn)UltraPerformanceLC?

速度、靈敏度與分離度的結(jié)合HPLC3.5μmUPLC?1.7μm對流出時(shí)間接近的色譜峰有更好的分離度及更高的靈敏度生產(chǎn)力：每次實(shí)驗(yàn)得到更多信息AUAU目前十四頁\總數(shù)二十三頁\編于十八點(diǎn)UltraPerformanceLC?

與HPLC一樣的重現(xiàn)性AU0.0000.400.500.600.700.80Minutes0.600.700.800.901.0001.40Acetanilide-0.677Acetophenone-0.837Propiophenone-0.951Butyrophenone-1.035Benzophenone-1.064Valerophenone-1.111Hexanophenone-1.182Heptanophenone-1.247Octanophenone-1.307梯度重現(xiàn)性N=34目前十五頁\總數(shù)二十三頁\編于十八點(diǎn)UltraPerformanceLC?

與HPLC一樣的耐受性穩(wěn)定性試驗(yàn)的條件： 從10到90%甲醇的1分鐘梯度1000次進(jìn)樣 溫度：55oC 最大壓力：8500psi 流速：1.3ml/min.AU0.000.000.250.300.35Minutes0.000.250.500.751.001.251.501.75ACQUITYUPLC?C18色譜柱2.1×30mm1.7μm黑色：第一次進(jìn)樣紅色：第1000次進(jìn)樣目前十六頁\總數(shù)二十三頁\編于十八點(diǎn)UltraPerformanceLC?

先進(jìn)的MS入口技術(shù)－代謝物IDHPLCUPLC?目前十七頁\總數(shù)二十三頁\編于十八點(diǎn)液相色譜/質(zhì)譜接口技術(shù)及特點(diǎn)目前十八頁\總數(shù)二十三頁\編于十八點(diǎn)ESI特點(diǎn)目前十九頁\總數(shù)二十三頁\編于十八點(diǎn)ESI電噴霧狀態(tài)目前二十頁\總數(shù)二十三頁\編于十八點(diǎn)APCI特點(diǎn)目前二十一