細胞生物學(xué)技術(shù)

細胞生物學(xué)技術(shù)

第一部分電子顯微鏡技術(shù)

第二部分細胞化學(xué)技術(shù)

第三部分分析細胞學(xué)技術(shù)

第四部分培養(yǎng)細胞技術(shù)

第一頁，共十九頁。

第一部分

電子顯微鏡技術(shù)

第一章緒論

第二章電子顯微鏡的基本理論第三章透射電子顯微鏡第四章掃描電子顯微鏡第二頁，共十九頁。

一電子顯微鏡的誕生和發(fā)展二電鏡樣品制備技術(shù)三電鏡技術(shù)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用第一章緒論第三頁，共十九頁。

一電子顯微鏡的誕生和發(fā)展

（一）電子顯微鏡誕生的理論基礎(chǔ)：1任何快速運動的粒子都伴有電磁輻射電子輻射波波長約為0.05?(比可見光的波長短十萬倍)2高速運動的電子在電場或磁場的作用下會發(fā)生折射并聚焦第四頁，共十九頁。

（二）電子顯微鏡的發(fā)展

30年代第一臺電子顯微鏡誕生（1931年）

60年代電鏡種類增多

80年代電子顯微學(xué)

90年代電鏡計算機一體化第五頁，共十九頁。

二、電鏡樣品制作技術(shù)

電鏡樣品制作技術(shù)是制作電鏡標本的綜合技術(shù)

1、基本樣品制備技術(shù)

超薄切片技術(shù)負染色技術(shù)常規(guī)掃描樣品制備技術(shù)

2、特殊樣品制備技術(shù)

電鏡酶細胞化學(xué)技術(shù)電鏡放射自顯影技術(shù)免疫電鏡技術(shù)電鏡原位雜交技術(shù)第六頁，共十九頁。

三、電子顯微鏡技術(shù)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用

電鏡技術(shù)廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)各個學(xué)科

細胞生物學(xué)微生物學(xué)組織學(xué)病理學(xué)等學(xué)科

第七頁，共十九頁。

從顯微水平提高到亞顯微水平，為闡明組織細胞的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)揮了巨大的作用了解生物大分子合成和代謝情況

研究抗原抗體反應(yīng)以及定位基因表達

（一）在細胞生物學(xué)和分子生物學(xué)中的應(yīng)用第八頁，共十九頁。

▲觀察感染細胞內(nèi)病毒形態(tài)結(jié)構(gòu)

▲協(xié)助病毒性疾病的診斷

▲研究原蟲、細菌、真菌、螺旋體等的超微結(jié)構(gòu)

（二）電鏡是直接觀察病毒結(jié)構(gòu)的唯一工具第九頁，共十九頁。

不僅能看到骨表面的微細形貌，而且可以看到骨細胞的超微結(jié)構(gòu)和骨基質(zhì)中鈣鹽在膠原纖維間的沉積過程

揭示了肌細胞內(nèi)肌微絲的排列和結(jié)構(gòu)

骨組織肌系統(tǒng)（三）電鏡技術(shù)在組織學(xué)中的應(yīng)用第十頁，共十九頁。電鏡是病理學(xué)研究和疾病診斷的重要手段在基礎(chǔ)實驗病理的研究中得以廣泛應(yīng)用在臨床疾病的診斷中發(fā)揮重要作用

特別在腎臟疾病、腫瘤的診斷及鑒別診斷中電鏡已成為不可缺少的工具之一

（四）電鏡技術(shù)在病理學(xué)中的應(yīng)用第十一頁，共十九頁。

區(qū)別低分化鱗癌和腺癌

◆低分化鱗癌特征—張力微絲和橋粒◆低分化腺癌特征—細胞間的緊密連接連接復(fù)合體，微絨毛粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等電鏡在確定腫瘤的組織發(fā)生類型和分化程度上起重要作用1．電鏡技術(shù)在腫瘤診斷中的應(yīng)用第十二頁，共十九頁。

對神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的診斷

各種神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤中,無論其分化程度如何,是原發(fā)的還是轉(zhuǎn)移的，在電鏡下均可發(fā)現(xiàn)神經(jīng)分泌顆粒。

對黑色素瘤的診斷在無色素性黑色素瘤細胞中可找到未成熟的前黑色素小體（這種前黑色素小體只有電鏡下觀察到）

第十三頁，共十九頁。

由于各種腎臟疾病的超微結(jié)構(gòu)病變各具特點，所以腎臟活檢的電鏡觀察對疾病的早期診斷有十分重要的意義，是目前腎臟疾病診斷不可缺少的手段，特別是在遺傳性腎炎性疾病的診斷中電鏡起著決定性的作用2.電鏡技術(shù)在腎臟病中的應(yīng)用第十四頁，共十九頁。

基底膜增厚、撕裂，顆粒狀物質(zhì)沉積和節(jié)段性的基底膜變薄

基底膜彌漫變薄為其特征，厚度相當(dāng)于正常厚度的2/3—1/3，腎小球臟層細胞質(zhì)中有大量髓鞘樣小體Alport綜合癥

薄基底膜腎?。夹约易逍匝颍〧abry病第十五頁，共十九頁。

◆

凋亡細胞形態(tài)學(xué)變化及其發(fā)展過程主要是通過透射電鏡和掃描電鏡觀察到的，電鏡可以較準確地判定單個的凋亡細胞

◆凋亡細胞在電鏡下具有一定的超微結(jié)構(gòu)特征，細胞凋亡過程中出現(xiàn)一系列特征性的形態(tài)學(xué)變化大致可分為三個階段

3.電鏡技術(shù)在細胞凋亡研究中的應(yīng)用第十六頁，共十九頁。第十七頁，共十九頁。一、電鏡技術(shù)包括：電子顯微鏡和樣品制備技術(shù)二、電子顯微鏡是以電子束做光源，電磁場做透鏡，具有高分辨率，高放大倍率的顯微鏡三、樣品制備技術(shù)是制作電鏡標本的綜合技術(shù)包括普通樣品制備技術(shù)和特殊樣品制備技術(shù)四、電子顯微鏡技術(shù)是研究細胞超微結(jié)構(gòu)最重要的手段,廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)各學(xué)科.第一章小結(jié)第十八頁，共十九頁。內(nèi)容總結(jié)細胞生物學(xué)技術(shù)。第二章電子顯微鏡的基本理論。電子輻射波波長約為0.05?。細胞的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)揮了巨大的作用?！芯吭x、細菌、真菌、螺旋體等的超微結(jié)構(gòu)。特別在腎臟疾病、腫瘤的診斷及鑒別診斷中。各種神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤中,無論其分化程度如何,是