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第三章基因工程第1節(jié)重組DNA技術(shù)的基本工具01基因工程基因工程:指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)并通過(guò)體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性,創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類(lèi)型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的,因此又叫作DNA重組技術(shù)?;蚬こ痰膭e名DNA重組技術(shù)實(shí)質(zhì)基因重組操作環(huán)境生物體外操作對(duì)象基因操作水平DNA分子水平基本過(guò)程剪切→拼接→導(dǎo)入→表達(dá)結(jié)果定向改造生物的遺傳性狀轉(zhuǎn)移A生物B生物螢火蟲(chóng)普通動(dòng)植物發(fā)光基因基因工程的基礎(chǔ)理論a、DNA是遺傳物質(zhì)的證明b、DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)和中心法則的建立c、遺傳密碼的破譯相關(guān)技術(shù)的發(fā)展a、基因表達(dá)載體和工具酶相繼發(fā)現(xiàn)b、DNA合成和測(cè)序技術(shù)的發(fā)明c、DNA體外重組得以實(shí)現(xiàn),重組DNA表達(dá)實(shí)驗(yàn)獲得成功基因能夠拼接的基礎(chǔ)a、基本組成單位相同b、空間結(jié)構(gòu)相同c、堿基互補(bǔ)配對(duì)方式相同外源基因能夠在受體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的基礎(chǔ)a、生物界共用同一套遺傳密碼b、相同的遺傳信息在不同的生物體內(nèi)可表達(dá)出相同的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)基因
非轉(zhuǎn)基因“分子手術(shù)刀”—限制酶“分子縫合針”—DNA連接酶“分子運(yùn)輸車(chē)”—載體重組DNA技術(shù)所需工具02“分子手術(shù)刀”-限制酶“分子手術(shù)刀”----限制性?xún)?nèi)切核酸酶(1)簡(jiǎn)稱(chēng)(2)來(lái)源
(3)種類(lèi)(4)特點(diǎn)(5)作用部位
(6)結(jié)果限制酶數(shù)千種能識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列,使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開(kāi)主要來(lái)源于原核生物產(chǎn)生黏性末端或平末端磷酸二酯鍵EcoRI限制酶①識(shí)別的序列是─GAATTC──CTTAAG─②切割位點(diǎn)為GA之間EcoRⅠSmaI限制酶
①
識(shí)別的序列是─CCCGGG──GGGCCC─②切割位點(diǎn)是CG之間幾種常見(jiàn)的限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)不同酶的識(shí)別序列一般不同酶的專(zhuān)一性推斷限制酶切割一次可斷開(kāi)幾個(gè)磷酸二酯鍵?產(chǎn)生多少游離的磷酸基團(tuán)?產(chǎn)生幾個(gè)黏性末端?消耗幾分子水?斷開(kāi)2個(gè)磷酸二酯鍵產(chǎn)生2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)產(chǎn)生2個(gè)或0個(gè)黏性末端消耗2分子水寫(xiě)出下列限制酶切割形成的黏性末端,不同限制酶切割產(chǎn)生的黏性末端是否一定不同?把兩種來(lái)源不同的DNA用同一種限制酶來(lái)切割,會(huì)怎樣呢?會(huì)形成相同的黏性末端以下黏性末端是由
種限制酶作用產(chǎn)生的三為什么限制酶不切割原核生物本身的DNA分子?含某種限制酶的細(xì)菌的DNA分子不具備這種限制酶的識(shí)別序列,或者甲基化酶將甲基轉(zhuǎn)移到了限制酶所識(shí)別序列的堿基上,使限制酶不能將其切開(kāi)推測(cè)限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么?限制酶是原核生物的一種防御工具,用來(lái)切割侵入細(xì)胞的外源DNA,以保證自身安全。...ATGAGAATTCATG目的ATGGAATTCCG......TACTCTTAAGTAC基因TACCTTAAGGC...AATTCATG目的ATGGGTAC基因TACCTTAA...ATGAG...TACTCTTAAAATTCCG...GGC...獲取目的基因
獲取目的基因
下圖中,選擇哪種限制酶來(lái)獲得抗病
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