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-.z.目錄TOC\o"1-2"\h\u19924目錄③滅菌·在菊花組織培養(yǎng)中,可以不添加植物激素原因是菊花莖段組織培養(yǎng)比擬容易?!缇翰扇〉臏缇椒ㄊ歉邏赫羝麥缇?。·MS培養(yǎng)基中各種營養(yǎng)物質(zhì)的作用是什么?與肉湯培養(yǎng)基相比,MS培養(yǎng)基有哪些特點?大量元素和微量元素提供植物細胞所必需的無機鹽;蔗糖提供碳源,維持細胞滲透壓;甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)需求。微生物培養(yǎng)基以有機營養(yǎng)為主,MS培養(yǎng)基則需提供大量無機營養(yǎng)?!?〕外植體的消毒外植體:用于離體培養(yǎng)的植物器官或組織片段。選取菊花莖段時,要取生長旺盛的嫩枝。菊花莖段用流水沖洗后可加少許洗衣粉,用軟刷輕輕刷洗,刷洗后在流水下沖洗20min左右。用無菌吸水紙吸干外植體外表的水分,放入體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精中搖動2~3次,持續(xù)6~7s,立即將外植體取出,在無菌水中清洗。取出后仍用無菌吸水紙吸干外植體外表水分,放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液中1~2min。取出后,在無菌水中至少清洗3次,漂洗消毒液。注意:對外植體進展外表消毒時,就要考慮藥劑的消毒效果,又要考慮植物的耐受能力?!?〕接種:接種過程中插入外植體時形態(tài)學(xué)上端朝上,每個錐形瓶接種7~8個外植體。外植體接種與細菌接種相似,操作步驟一樣,而且都要求無菌操作。〔4〕培養(yǎng):應(yīng)該放在無菌箱中進展,并定期進展消毒,保持適宜的溫度〔18~22℃〕和光照〔12h〕〔5〕移栽:栽前應(yīng)先翻開培養(yǎng)瓶的封口膜,讓其在培養(yǎng)間生長幾日,然后用流水清洗根部培養(yǎng)基。然后將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中生活一段時間,進展壯苗。最后進展露天栽培?!?〕栽培外植體在培養(yǎng)過程中可能會被污染,原因有外植體消毒不徹底;培養(yǎng)基滅菌不徹底;接種中被雜菌污染;錐形瓶密封性差等。課題二月季的花藥培養(yǎng)1、被子植物的花粉發(fā)育被子植物的雄蕊通常包含花絲、花藥兩局部?;ㄋ帪槟覡顦?gòu)造,內(nèi)部含有許多花粉。花粉是由花粉母細胞經(jīng)過減數(shù)分裂而形成的,因此,花粉是單倍體的生殖細胞。被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)歷小孢子四分體時期、單核期和雙核期等階段。在小孢子四分體時期,4個單倍體細胞連在一起,進入單核期時,四分體的4個單倍體細胞彼此別離,形成4個具有單細胞核的花粉粒。這時的細胞含濃厚的原生質(zhì),核位于細胞的中央〔單核居中期〕。隨著細胞不斷長大,細胞核由中央移向細胞一側(cè)〔單核靠邊期〕,并分裂成1個生殖細胞核和1個花粉管細胞核,進而形成兩個細胞,一個是生殖細胞,一個是營養(yǎng)細胞。生殖細胞將在分裂一次,形成兩個精子。注意:①成熟的花粉粒有兩類,一類是二核花粉粒,其花粉粒中只含花粉管細胞核和生殖細胞核,二核花粉粒的精子是在花粉管中形成的;另一類是三核花粉粒,花粉在成熟前,生殖細胞就進展一次有絲分裂,形成兩個精子,此花粉粒中含有兩個精子核和一個花粉管核〔營養(yǎng)核〕②花粉發(fā)育過程中的四分體和動物細胞減數(shù)分裂的四分體不同。花粉發(fā)育過程中的四分體是花粉母細胞經(jīng)減數(shù)分裂形成的4個連在一起的單倍體細胞;而動物細胞減數(shù)分裂過程中的四分體是聯(lián)會配對后的一對同源染色體,由于含有四條染色單體而稱為四分體。③同一生殖細胞形成的兩個精子,其基因組成完全一樣。2、產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株〔即單倍體植株〕一般有兩種途徑,一種是花粉通過胚狀體階段發(fā)育為植物,另一種是花粉在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先形成愈傷組織,再將其誘導(dǎo)分化成植株。這兩種途徑之間并沒有絕對的界限,主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比。注意:①無論哪種產(chǎn)生方式,都要先誘導(dǎo)生芽,再誘導(dǎo)生根②胚狀體:植物體細胞組織培養(yǎng)過程中,誘導(dǎo)產(chǎn)生的形態(tài)與受精卵發(fā)育成的胚非常類似的構(gòu)造,其發(fā)育也與受精卵發(fā)育成的胚類似,有胚芽、胚根、胚軸等完整構(gòu)造,就像一粒種子,又稱為細胞胚。3、影響花藥培養(yǎng)的因素誘導(dǎo)花粉能否成功及誘導(dǎo)成功率的上下,受多種因素影響,其中材料的選擇與培養(yǎng)基的組成是主要的影響因素〔1〕親本的生理狀況:親本植株的生理狀況對誘導(dǎo)成功率也有直接影響,花粉早期是的花藥比后期的更容易產(chǎn)生花粉植株,選擇月季的初花期?!?〕適宜的花粉發(fā)育時期:適宜的花粉發(fā)育時期也是誘導(dǎo)成功率的重要因素,一般來說,在單核期,細胞核由中央移向細胞一側(cè)的時期,花藥培養(yǎng)成功率最高〔3〕花蕾:為了挑選到單核期的花藥,通常選擇完全未開放的花蕾〔4〕親本植株的生長條件、材料的低溫預(yù)處理以及接種密度等對誘導(dǎo)成功率都有一定影響4、實驗操作〔1〕材料的選取:選擇花藥時,一般要通過鏡檢來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。確定花粉發(fā)育時期的最常用的方法是醋酸洋紅法。但是,*些植物的花粉細胞核不易著色,需采用焙花青-鉻礬法,這種方法能將花粉細胞核染成藍黑色〔2〕材料的消毒〔3〕種和培養(yǎng):滅菌后的花蕾,要在無菌條件下除去萼片和花瓣,并立即將花藥接種到培養(yǎng)基上。在剝離花藥時,要盡量不損傷花藥〔否則接種后容易從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織〕,同時還要徹底去除花絲,因為與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成,通常每瓶接種花藥7~10個,培養(yǎng)溫度控制在25℃左右,不需要光照.幼小植株形成后才需要光照.一般經(jīng)過20~30天培養(yǎng)后,會發(fā)現(xiàn)花藥開裂,長出愈傷組織或形成胚狀體。將愈傷組織及時轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上,以便進一步分化出再生植株。如果花藥開裂釋放出胚狀體,則一個花藥內(nèi)就會產(chǎn)生大量幼小植株,必須在花藥開裂后盡快將幼小植株分開,分別移植到新的培養(yǎng)基上,否則這些植株將很難分開。還需要對培養(yǎng)出來的植株做進一步的鑒定和篩選。植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的一樣之處是:培養(yǎng)基配制方法、無菌技術(shù)及接種操作等根本一樣。兩者的不同之處在于:花藥培養(yǎng)的選材非常重要,需事先摸索時期適宜的花蕾;花藥裂開后釋放出的愈傷組織或胚狀體也要及時更換培養(yǎng)基;花藥培養(yǎng)對培養(yǎng)基配方的要求更為嚴(yán)格。這些都使花藥培養(yǎng)的難度大為增加。專題4酶的研究與應(yīng)用知識點課題1果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用由水果制作果汁要解決兩個主要問題:一是果肉的出汁率低,耗時長;二是榨取的果汁渾濁、黏度高,容易發(fā)生沉淀。1、植物細胞壁以及胞間層的主要組成成分有纖維素和_果膠_。并且兩者不溶于水,在果汁加工中,既影響出汁率,又使果汁渾濁。2、果膠是植物細胞壁以及胞間層的主要組成成分之一,它是由半乳糖醛酸聚合而成的一種高分子化合物,不溶于水。在果汁加工中,果膠不僅會影響出汁率,還會使果汁渾濁。果膠酶的作用是能夠?qū)⒐z_分解成可溶性的_半乳醛酸,瓦解植物的細胞壁及胞間層,并且使果汁變得澄清。3、果膠酶是一類酶總稱,包括_果膠分解酶、多聚半乳糖醛酸酶、果膠酯酶_等。4、酶的活性是指酶催化一定化學(xué)反響的的能力。酶活性的上下可以用在一定條件下,酶所催化的*一化學(xué)反響的反響速度來表示。在科學(xué)研究與工業(yè)生產(chǎn)中,酶反響速度用單位時間內(nèi)、單位體積中反響物的減少量或產(chǎn)物的增加量來表示。5、影響酶活性的因素包括:溫度、PH、酶的抑制劑等。〔二〕.實驗設(shè)計〔設(shè)計一〕探究溫度對酶活性的影響當(dāng)酶處于最適溫度或最適pH時,酶的活性最高;假設(shè)溫度過高、過酸或過堿,則導(dǎo)致酶變性失活。在一定*圍內(nèi),果肉的出汁率和果汁的澄清度與果膠酶的活性成正比。此實驗的自變量是溫度_;根據(jù)單一變量原則,你應(yīng)確保各實驗組一樣的變量有_PH底物濃度底物量實驗器材酶的用量等等_?!苍O(shè)計二〕探究PH對酶活性的影響探究pH對果膠酶活性的影響,只須將溫度梯度改成pH梯度,并選定一個適宜的溫度進展水浴加熱。反響液中的pH可以通過體積分?jǐn)?shù)為0.1%的氫氧化鈉或鹽酸溶液進展調(diào)節(jié)。〔設(shè)計三〕探究果膠酶的用量探究果膠酶的用量是建立在探究最適溫度和pH對果膠酶活性影響的根底之上的。此時,研究的變量是果膠酶的用量,其他因素都應(yīng)保持不變。實驗時可以配制不同濃度的果膠酶溶液,也可以只配制一種濃度的果膠酶溶液,然后使用不同的體積即可。需要注意的是,反響液的pH必須一樣,否則將影響實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。實驗變量與反響變量〔如表〕實驗變量〔自變量〕反響變量〔因變量〕含義實驗中實驗者所操縱的因素或條件由于實驗變量改變而引起的變化和結(jié)果實例溫度或pH果汁量聯(lián)系實驗變量為原因,反響變量是結(jié)果,二者是因果關(guān)系課題2探討加酶洗衣粉的洗滌效果1、酶絕大多數(shù)是蛋白質(zhì),少數(shù)為RNA;酶具有生物催化作用;酶具有高效性、專一性特點,但易受溫度、PH、外表活性劑等因素的影響?!?〕加酶洗衣粉是指含酶制劑的洗衣粉,目前常用的酶制劑有蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶四類。普通洗衣粉中含磷,含磷的污水排放可能導(dǎo)致微生物和藻類大量繁殖,造成水體污染,加酶洗衣粉可以降低外表活性劑和三聚磷酸鈉,使洗滌劑朝無磷的方向開展,減少對環(huán)境的污染。〔2〕脂肪酶可以將脂肪分解成甘油和脂肪酸,蛋白酶可以將蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸,小分子肽可在肽酶作用下分解成氨基酸;淀粉酶可以將淀粉分解成可溶性麥芽糖,纖維素酶可以將纖維素分解成葡萄糖,以到達去污的目的,因此,蛋白類纖維織物〔羊毛、蠶絲等〕不能用加〔蛋白〕酶洗衣粉來洗滌?!?〕應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。堿性蛋白酶能將血漬、奶漬等含有大分子蛋白質(zhì)水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污跡容易從衣物上脫落?!?〕衣物的洗滌,不僅要考慮到洗滌效果,還要考慮衣物的承受能力、洗滌本錢等因素?!?〕加酶洗衣粉可以降低外表活性劑和三聚磷酸鈉的用量,使洗衣粉朝低磷無磷的方向開展,減少對環(huán)境的污染。2、實驗設(shè)計遵循原則:是單一變量原則、對照原則和等量原則,比方探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉對衣物污漬的洗滌效果有何不同時,用控制使用不同種類洗衣粉為變量,其他條件完全一致;同時普通洗衣粉處理污漬物與加酶洗衣粉處理污漬物形成對照實驗。3.不同種類的酶洗衣粉對同一污漬的洗滌效果〔1〕實驗原理:不同種類的加酶洗衣粉所加的酶不同,而酶具有專一性,所以對不同污漬的洗滌效果不同。4、比擬普通洗衣粉和加酶洗衣粉去污原理的異同普通洗衣粉加酶洗衣粉一樣點外表活性劑可以產(chǎn)生泡沫,將油脂分子分散開,水軟化劑可以分散污垢,等不同點酶可以將大分子有機物分解為小分子有機物,小分子有機物易溶于水,從而與纖維分開專題五DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)課題一DNA的粗提取與鑒定1、相關(guān)問題〔1〕提取DNA的溶解性原理包括哪些方面?DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精?!?〕DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度有何特點?要使DNA溶解,需要使用什么濃度?要使DNA析出,又需要使用什么濃度?在0.14mol/L時溶解度最?。惠^高濃度可使DNA溶解通常用2mol/LNaCl溶液溶解DNA;0.14mol/L可使DNA析出?!?〕在溶解細胞中的DNA時,人們通常選用2mol/LNaCl溶液;將DNA分子析出的方法是向溶有DNA的NaCl溶液中緩慢注入蒸餾水,以稀釋NaCl溶液。酒精是一種常用有機溶劑,但DNA卻不能溶于酒精〔特別是95%冷卻酒精〕,但細胞中蛋白質(zhì)可溶于酒精。從理論上分析,預(yù)冷的乙醇溶液具有以下優(yōu)點。一是抑制核酸水解酶活性,防止DNA降解;二是降低分子運動,易于形成沉淀析出;三是低溫有利于增加DNA分子柔韌性,減少斷裂?!?〕采用DNA不溶于酒精的原理,可以到達什么目的?將DNA和蛋白質(zhì)進一步別離?!?〕提取DNA還可以利用DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性原理。利用該原理時,應(yīng)選用怎樣的酶和怎樣的溫度值?蛋白酶,因為酶具有專一性,蛋白酶只水解蛋白質(zhì)而不會對DNA產(chǎn)生影響。溫度值為60~75℃,因為該溫度值蛋白質(zhì)變性沉淀,而DNA不會變性。補充:DNA的變性是指DNA分子在高溫下解螺旋,其溫度在80℃以上,如在PCR技術(shù)中DNA變性溫度在95℃?!?〕洗滌劑在提取DNA中有何作用?洗滌劑瓦解細胞膜?!?〕當(dāng)鑒定提取出的物質(zhì)是否是DNA時,需要使用什么指示劑進展鑒定?在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺呈現(xiàn)藍色。原理總結(jié):通過利用不同濃度NaCl溶液溶解或析出DNA,可以從細胞中提取和提純DNA;再利用酒精進一步將DNA與蛋白質(zhì)別離開來,到達提純的目的;最后利用二苯胺試劑鑒定提取的物質(zhì)是否是DNA。2、實驗材料的選取不同生物的組織中DNA含量不同。在選取材料時,應(yīng)本著DNA含量高、材料易得、便于提取的原則。本實驗用雞血細胞做實驗材料有兩個原因。一是因為雞血細胞核的DNA含量豐富,材料易得;二是雞血細胞極易吸水脹破,而用動物肝臟細胞作實驗材料常常需要勻漿和離心,對設(shè)備要求較高,操作繁瑣,歷時較長。雞血細胞破碎以后釋放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,所以在提取過程中為了減少DNA的損失,最好使用塑料的燒杯和試管盛放雞血細胞液。〔8〕假設(shè)選用雞血和洋蔥作實驗材料,則怎樣獲取含DNA的濾液?在雞血細胞液中參加一定量蒸餾水并用玻棒攪拌,過濾后收集濾液;切碎洋蔥,參加一定量洗滌劑和食鹽,攪拌研磨,過濾后收集濾液。〔9〕為什么參加蒸餾水能使雞血細胞破裂?答:蒸餾水對于雞血細胞來說是一種低滲液體,水分可以大量進入血細胞內(nèi),使血細胞脹裂,再加上攪拌的機械作用,就加速了雞血細胞的破裂〔細胞膜和核膜的破裂〕,從而釋放出DNA?!?0〕在以上實驗中,參加蒸餾水、洗滌劑和食鹽的作用分別是什么?過濾時應(yīng)中選用〔濾紙、尼龍布〕。血細胞在蒸餾水中大量吸水而*裂;洗滌劑瓦解細胞膜;食鹽溶解DNA物質(zhì);選用尼龍布進展過濾?!?1〕在處理植物組織時需要進展研磨,其目的是什么?研磨不充分產(chǎn)生什么結(jié)果?破碎細胞壁,使核物質(zhì)容易溶解在NaCl溶液中;研磨不充分會使DNA的提取量減少,影響實驗結(jié)果,導(dǎo)致看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍色等。具體做法。10mL雞血+20mL蒸餾水→同方向攪拌→3層尼龍布過濾→濾液3、去除濾液中的雜質(zhì)〔12〕為什么反復(fù)地溶解與析出DNA,能夠去除雜質(zhì)?用高鹽濃度的溶液溶解DNA,能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì);用低鹽濃度使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此,通過反復(fù)溶解與析出DNA,就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質(zhì)。最初獲得的DNA濾液含有蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等雜質(zhì),需要進一步提純DNA。方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì),不分解DNA;方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同。方案二與方案三的原理有什么不同?答:方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白,從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開;方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性的不同,從而使蛋白質(zhì)變性,與DNA別離。4、析出與鑒定〔13〕在濾液中仍然含有一些雜質(zhì),怎樣除去這些雜質(zhì)呢?得到的DNA呈何顏色?濾液與等體積的冷卻酒精混合均勻,靜置2~3分鐘,析出的白色絲狀物就是DNA。DNA呈白色?!?4〕怎樣鑒定析出的白色絲狀物就是DNA呢?具體做法。試管2支,編號甲乙→各加等量5mLNaCl溶液→甲中放入少量白色絲狀物,使之溶解→各加4mL二苯胺,混合均勻→沸水浴5min→觀察顏色變化5、實驗操作制備雞血細胞液…………加檸檬酸鈉,靜置或離心↓破碎細胞,釋放DNA…加蒸餾水,同一方向快速通方向攪拌↓→過濾,除去細胞膜等。溶解核內(nèi)DNA…………參加NaCl至2mol/L,同一方向緩慢攪拌↓DNA析出………………加蒸餾水至0.14mol/L,過濾,在溶解到2mol/L溶液中↓→除去細胞質(zhì)中的大局部物質(zhì)。DNA初步純化…………與等體積95%冷卻酒精混合,析出白色絲狀物↓→除去核蛋白、RNA、多糖等。DNA鑒定………………二苯胺,沸水浴,呈現(xiàn)藍色考前須知:在雞血中參加檸檬酸鈉防止凝固;雞血靜置或離心以提高細胞懸液濃度;使用塑料燒杯;使用尼龍布過濾;玻棒沿同一方向攪拌;玻棒攪拌要緩慢〔細胞破裂快速攪拌〕;玻棒不要碰到燒杯壁;二苯胺試劑要現(xiàn)用現(xiàn)配等。專題六植物有效成分的提取課題一植物芳香油的提取天然香料主要來源是植物、動物不同植物的根、莖、葉、花、果實、種子都可以提取芳香油。芳香油的提取方法:蒸餾、壓榨、萃取等。具體采用哪種方法要根據(jù)植物原料的特點來決定。芳香油的性質(zhì):揮發(fā)性強,成分復(fù)雜,以萜類化合物及其衍生物為主。1、水蒸氣蒸餾法:是植物芳香油提取的常用方法。原理:水蒸汽可將揮發(fā)性較強的芳香油攜帶出來形成油水混合物,冷卻后水油分層。方法:水中蒸餾:原料放在沸水中加熱蒸餾。水上蒸餾:原料隔放在沸水上加熱蒸餾。水汽蒸餾:利用外來高溫水蒸氣加熱蒸餾。缺乏:有些原料不適宜于水中蒸餾,如柑橘、檸檬等易焦糊,有效成分容易水解。通常用壓榨法〔通過機械壓縮力將液相物從液固兩相混合物中別離出來的一種簡單操作〕2、萃取法:原理:芳香油易溶于有機溶劑,溶劑揮發(fā)后得到芳香油。如石油醚、酒精、乙醚等。方法:原料浸泡在溶劑中→得到浸泡液→有機溶劑揮發(fā)→芳香油。缺乏:有機溶劑中的雜質(zhì)影響芳香油的品質(zhì)玫瑰精油的提取玫瑰精油是制作高級香水的主要成分,能使人產(chǎn)生愉悅感。0.1g/mL氯化鈉溶液:促使油水混合物〔乳濁液〕中油和水的別離。無水硫酸鈉:吸收油層中的水分。實驗步驟:①采集玫瑰花:采集盛花期〔5月中上旬〕的玫瑰花,清水清洗瀝干。②裝入蒸餾原料:稱取50g玫瑰花放入蒸餾瓶,添加200mL蒸餾水。③安裝蒸餾裝置:按照從左向右、自下到上次序安裝水蒸氣蒸餾裝置。④加熱蒸餾:控制蒸餾時間和速度〔1~2滴/秒〕,獲得乳白色乳濁液;拆卸裝置。⑤別離油層:向乳濁液參加NaCl溶液后,利用分液漏斗別離出上面的油層。⑥除去水分:向油層中參加無水硫酸鈉,24h后過濾,得到玫瑰油。*考前須知:蒸餾時間不能過短,溫度不能過高。4、橘皮精油的提取橘皮精油的主要成分:檸檬烯,主要分布在橘皮中。石灰水:防止壓榨時滑脫,提高出油率,降低壓榨液黏稠度,過濾不堵塞篩眼。小蘇打、硫酸鈉:促進油和水的別離〔用量分別為橘皮質(zhì)量的0.25%和5%〕。實驗步驟:①橘皮的處理:將新鮮橘皮用清水清洗瀝干。②石灰水浸泡:用7~8%石灰水浸泡橘皮24h。③清水漂洗:浸泡好的橘皮用流水徹底漂洗干凈,瀝干。④粉碎和壓榨:將橘皮粉碎,參加小蘇打和硫酸鈉后,用壓榨機壓榨得到壓榨液。⑤過濾壓榨液:用布袋過濾,濾液再高速離心處理,別離出上層橘皮油。⑥靜置處理:將橘皮油在5~10℃冰箱中靜置5~7d,別離出上層澄清橘皮油。⑦再次過濾:將下層橘皮油用濾紙過濾,濾液與上層橘皮油合并,得到橘皮精油。靜置處理目的:除去果蠟和水分。課題二胡蘿卜素的提取1、胡蘿卜素性質(zhì):橘黃色結(jié)晶,化學(xué)性質(zhì)比擬穩(wěn)定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有機溶劑。依據(jù)碳碳雙鍵的數(shù)目劃分為α、β、γ三類。其中最主要的組成成分為β-胡蘿卜素。2、作用:①治療夜盲癥、幼兒生長發(fā)育不良、干皮癥等疾病;②常用于食品色素;③使癌變細胞恢復(fù)成正常細胞。3、提取β-胡蘿卜素的方法主要有三種:①從植物中提?、趶拇竺娣e養(yǎng)殖的巖藻中獲得③利用微生物的發(fā)酵生產(chǎn)4、實驗步驟①粉碎:使原料與有機溶劑充分接觸,增大溶解度。②枯燥:脫水溫度太高,枯燥時間太長會導(dǎo)致胡蘿卜素分解。③萃?、苓^濾:除去萃取液中的不溶物⑤濃縮:蒸發(fā)出有機溶劑提取方法實驗原理方法步驟適用*圍水蒸氣蒸餾
利用水蒸氣將揮發(fā)性較強的芳香油攜帶出來1.水蒸氣蒸餾2.別離油層3.除水過濾
適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強的芳香油壓榨法
通過機械加壓,壓榨出果皮中的芳香油1.石灰水浸泡、漂洗2.壓榨、過濾、靜置3.再次過濾
適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取有機溶劑萃取
使芳香油溶解在有機溶劑中,蒸發(fā)溶劑后就可獲得芳香油1.粉碎、枯燥2.萃取、過濾3.濃縮
適用*圍廣,要求原料的顆粒要盡可能細小,能充分浸泡在有機溶液中專題二十五實驗與探究實驗一觀察DNA、RNA在細胞中的分布1、實驗考前須知(1)選材:口腔上皮細胞、無色的洋蔥表皮細胞,不能用紫色洋蔥表皮細胞或葉肉細胞,防止顏色的干擾。(2)緩水流沖洗目的:防止玻片上的細胞被沖走。(3)幾種試劑在實驗中的作用①0.9%NaCl溶液(生理鹽水):保持口腔上皮細胞正常形態(tài)。②8%鹽酸:a.改變細胞膜等的通透性;b.使染色體中DNA與蛋白質(zhì)分開。③蒸餾水:a.配制染色劑;b.沖洗載玻片。④甲基綠吡羅紅染液:混合使用且現(xiàn)配現(xiàn)用。(4)DNA和RNA在細胞核和細胞質(zhì)中都有分布,只是量的多少不同。故結(jié)論中強調(diào)"主要〞而不能說"只〞存在于細胞核或細胞質(zhì)中。實驗二檢測生物組織中復(fù)原糖、脂肪和蛋白質(zhì)實驗考前須知(1)復(fù)原糖鑒定實驗材料要求①淺色:不能用綠色葉片、西瓜、血液等材料,防止顏色的干擾。②復(fù)原糖含量高:不能用馬鈴薯(含淀粉)、甘蔗、甜菜(含蔗糖)。(2)唯一需要加熱—復(fù)原糖鑒定,且必需水浴加熱,不能用酒精燈直接加熱。假設(shè)不加熱則無磚紅色沉淀出現(xiàn)。(3)非復(fù)原糖(如蔗糖)+斐林試劑〔水浴加熱〕,現(xiàn)象不是無色而是淺藍色[Cu(OH)2]的顏色。(4)唯一需要顯微鏡——脂肪鑒定,實驗用50%酒精的作用——洗掉浮色。(5)斐林試劑,混合后參加,且現(xiàn)配現(xiàn)用;雙縮脲試劑分別參加(先加A液,后加B液)。(6)假設(shè)用大豆做材料,必須提前浸泡;假設(shè)用蛋清作材料,必須稀釋,防止其粘在試管壁上不易涮洗;且該實驗應(yīng)預(yù)留局部組織樣液做比照。實驗三用顯微鏡觀察多種多樣的細胞1、顯微鏡使用的一般程序:①、取鏡和安放②、對光③、放置標(biāo)本④、調(diào)焦觀察2、顯微鏡使用的考前須知:先低后:先低倍鏡后高倍鏡;先放低鏡筒,再向上調(diào)節(jié)〔換高倍鏡后只能用細準(zhǔn)焦螺旋!〕成像規(guī)律:上下、左右顛倒〔如何移動玻片〕變化規(guī)律:圖像變大、數(shù)量減少、視野變暗放大倍數(shù):物*目指的是長度上的放大倍數(shù)高放大倍數(shù)的表現(xiàn):目鏡越短,物鏡越長,物鏡距離玻片越近〔目短物長距離近〕實驗四觀察線粒體和葉綠體1、實驗原理①葉綠體呈綠色的橢球形或球形,不需染色,制片后直接觀察。②線粒體呈無色棒狀、圓球狀等,用健那綠染成藍綠色后制片觀察。2、實驗步驟①觀察葉綠體:制作蘚類葉片的臨時裝片→先低倍鏡后高倍鏡觀察葉綠體②觀察線粒體:制作人的口腔上皮細胞臨時裝片〔健那綠染液染色〕→先低倍鏡后高倍鏡觀察觀察線粒體3、注意問題①實驗過程中的臨時裝片要始終保持有水狀態(tài)。②要漱凈口腔,防止雜質(zhì)對觀察物像的干擾。③用菠菜葉帶葉肉的下表皮的原因:靠近下表皮的葉為海綿組織,葉綠體大而排列疏松,便于觀察;帶葉肉是因為表皮細胞不含葉綠體。④葉綠體在弱光下以橢球形的正面朝向光源,便于承受較多的光照;在強光下則以側(cè)面朝向光源以防止被灼傷。實驗五通過模擬實驗探究膜的透性(圖見教材)1.滲透系統(tǒng)的組成及條件(1)半透膜可以是生物性的選擇透過性膜,如細胞膜,也可以是物理性的過濾膜,如玻璃紙。(2)半透膜兩側(cè)的溶液具有濃度差。濃度差的實質(zhì)是單位體積溶液中溶質(zhì)分子數(shù)的差,即物質(zhì)的量濃度之差,即摩爾濃度而不是質(zhì)量濃度。2、考前須知①假設(shè)溶質(zhì)分子能通過半透膜,則先是濃度高的一側(cè)液面升高,隨后另一側(cè)液面上升,最后到達滲透平衡。②圖中,在到達滲透平衡后,只要存在液面差Δh,則S1溶液的濃度仍大于S2溶液的濃度。③假設(shè)S1為10%蔗糖溶液,S2為10%葡萄糖溶液(葡萄糖不能透過半透膜),則水分子由漏斗進燒杯使漏斗液面下降。④水分子的移動方向:雙向移動,但最終結(jié)果是單位體積內(nèi)水分子數(shù)多(低濃度)溶液流向單位體積內(nèi)水分子數(shù)少(高濃度)溶液。實驗六觀察植物細胞的質(zhì)壁別離和復(fù)原1、原理:成熟的植物細胞構(gòu)成滲透系統(tǒng),可發(fā)生滲透作用。2、特別提醒〔1〕實驗成功的關(guān)鍵是實驗材料的選擇,必須選擇有大液泡并有顏色的植物細胞,便于在顯微鏡下觀察?!?〕質(zhì)壁別離和質(zhì)壁別離復(fù)原中水分子移動是雙向的,結(jié)果是雙向水分子運動的差異所導(dǎo)致的現(xiàn)象?!?〕質(zhì)壁別離后在細胞壁和細胞膜之間充滿的是濃度降低的外界溶液,因細胞壁是全透性且有水分子通過原生質(zhì)層滲出來?!?〕假設(shè)用50%蔗糖溶液做實驗,能發(fā)生質(zhì)壁別離但不能復(fù)原,因為細胞過度失水而死亡?!?〕假設(shè)用尿素、乙二醇、KNO3、NaCl做實驗會出現(xiàn)自動復(fù)原現(xiàn)象,因外界物質(zhì)會轉(zhuǎn)移到細胞內(nèi)而引起細胞液濃度升高。實驗七探究影響酶活性的因素酶的高效性——比擬過氧化氫在不同條件下的分解實驗考前須知實驗時必須用新鮮的、剛從活的動物體中取出的肝臟作實驗材料。肝臟如果不新鮮,肝細胞內(nèi)的過氧化氫酶等有機物就會在腐生細菌的作用下分解,使組織中酶分子的數(shù)量減少且活性降低。2、探究溫度對酶活性的影響實驗考前須知①因為過氧化氫酶的反響底物過氧化氫受熱會分解,所以用其做溫度探究的實驗,會對實驗結(jié)果帶來干擾。②因為斐林試劑在使用時需要加熱,這對溫度探究帶來干擾,而使用碘液無需加熱,對實驗無干擾。4、探究pH對酶活性的影響思考:為什么不能用淀粉酶做探究pH的實驗?答:因為淀粉在酸性條件下會分解,這對于判斷淀粉酶能否使得淀粉水解出現(xiàn)干擾。故不能使用。實驗八葉綠體色素的提取和別離1、提取色素原理:色素能溶解在酒精或丙酮等有機溶劑中,所以可用無水酒精等提取色素。2、別離色素原理:各色素隨層析液在濾紙上擴散速度不同,從而別離色素。溶解度大,擴散速度快;溶解度小,擴散速度慢。3、各物質(zhì)作用:無水乙醇或丙酮:提取色素;層析液:別離色素;二氧化硅:使研磨得充分;碳酸鈣:防止研磨中色素被破壞。4、結(jié)果:濾紙條從上到下依次是:胡(最窄)、黃、a(最寬)、b,色素帶的寬窄與色素含量相關(guān)。5、考前須知:〔1〕畫濾液細線:均勻,直,細,重復(fù)假設(shè)干次〔2〕別離色素:不能讓濾液細線觸及層析液實驗九探究酵母菌的呼吸方式1、原理:酵母菌在有氧條件下進展有氧呼吸,產(chǎn)生二氧化碳和水2、檢測:〔1〕檢測CO2的產(chǎn)生:使澄清石灰水變渾濁,或使溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃?!?〕檢測酒精的產(chǎn)生:橙色的重鉻酸鉀溶液,在酸性條件下與酒精發(fā)生反響,變成灰綠色。實驗十觀察細胞的有絲分裂1、材料:洋蔥根尖〔蔥,蒜〕2、步驟:〔1〕洋蔥根尖的培養(yǎng)〔2〕裝片的制作流程:解離→漂洗→染色→制片3、觀察〔1〕先在低倍鏡下找到根尖分生區(qū)細胞:細胞呈正方形,排列嚴(yán)密,有的細胞正在分裂?!?〕換高倍鏡下觀察:處于分裂間期的細胞數(shù)目最多??键c提示:〔1)培養(yǎng)根尖時,為何要經(jīng)常換水?答:增加水中的氧氣,防止根進展無氧呼吸造成根的腐爛。〔2〕培養(yǎng)根尖時,應(yīng)選用老洋蔥還是新洋蔥?為什么?答:應(yīng)選用舊洋蔥,因為新洋蔥尚在休眠,不易生根?!?〕為何每條根只能用根尖?取根尖的最正確時間是何時?為何?答:因為根尖分生區(qū)的細胞才能進展有絲分裂;上午10時到下午2時;因為此時細胞分裂活潑。〔4〕解離和壓片的目的分別是什么?壓片時為何要再加一塊載玻片?答:解離是為了使細胞相互別離開來,壓片是為了使細胞相互分散開來;再加一塊載玻片是為了受力均勻,防止蓋玻片被壓破?!?)解離過程中鹽酸的作用是什么?丙酮可代替嗎?答:分解和溶解細胞間質(zhì);不能,而硝酸可代替?!?)為何要漂洗?答:洗去鹽酸便于染色?!?)細胞中染色最深的構(gòu)造是什么?答:染色最深的構(gòu)造是染色質(zhì)或染色體?!?〕假設(shè)所觀察的細胞各局部全是紫色,其原因是什么?答:染液濃度過大或染色時間過長?!?〕為何要找分生區(qū)?分生區(qū)的特點是什么?能用高倍物鏡找分生區(qū)嗎?為什么?答:因為在根尖只有分生區(qū)的細胞能夠進展細胞分裂;分生區(qū)的特點是:細胞呈正方形,排列嚴(yán)密,有的細胞處于分裂狀態(tài);不能用高倍鏡找分生區(qū),因為高倍鏡所觀察的實際*圍很小,難以發(fā)現(xiàn)分生區(qū)?!?0〕分生區(qū)細胞中,什么時期的細胞最多?答:間期;因為在細胞周期中,間期時間最長?!?1〕所觀察的細胞能從中期變化到后期嗎?答:不能,因為所觀察的細胞都是停留在*一時期的死細胞?!?2〕觀察洋蔥表皮細胞能否看到染色體?答:不能,因為洋蔥表皮細胞一般不分裂?!?3〕假設(shè)觀察時不能看到染色體,其原因是什么?答:沒有找到分生區(qū)細胞
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