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文檔簡介

《生物產品的分析與檢驗》有機酸的分析與檢驗-----葡萄糖酸的分析與測定葡萄糖酸含量的測定方法二—————異羥肟酸比色法葡萄糖酸在酸性條件下發(fā)生內酯化，形成的內酯與羥胺堿反應，生成異羥肟酸。異羥肟酸與FeCl3能生成有色絡合物，從而可通過分光光度比色法定量分析葡萄糖酸的含量（二）試驗儀器可見分光光度計（一）測定原理1.標準溶液的配制：用葡萄糖酸鈉配制0.100mol/L的標準溶液儲備液。使用時根據需要稀釋至不同濃度的標準葡萄糖酸溶液。2.鹽酸羥胺與NaOH混合試劑：配制4mol/L鹽酸羥胺溶液和4mol/L的NaOH溶液，低溫保存。使用時，將等體積的鹽酸羥胺和NaOH混合，混合后pH值為8.0。配制的溶液應在4h內使用。3.FeCl3試劑：FeCl3和HCl的混合溶液，其中FeCl3和HCl的濃度分別為0.37mol/L和0.1mol/L。（三）所用試劑及其配制將樣品溶液稀釋一定倍數后，在10mL帶有磨口塞的試管中各加入0.5mL標準溶液或者樣品，再加入0.5mL去離子水，混合均勻后，沸水浴中加熱20min，冷卻至室溫。然后順序加入2mL鹽酸羥胺和NaOH混合試劑、1mL4mol/LHCl和1mLFeCl3試劑，混合均勻，這時反應混合物的pH為1.2±0.2。放置10min后比色(波長505nm)，以空白管(用0.5mL去離子水替代樣品溶液，其余試劑用量與前相同)校零，讀取各管的吸光度OD505值。測定工作在10min內完成。（四）樣品測定分別配制0、1、2、4、8mmol/L的葡萄糖酸鈉溶液，按照前述的方法測定其吸光度(OD505)值，作出葡萄糖酸與OD505的標準曲線。（五）標準曲線繪制樣品中葡萄糖酸的含量按下式計算：式中：C---樣品溶液中葡萄糖酸的含量，mmol/L；C1---從標準

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