新藥藥代動力學方法

新藥藥代動力學研究北京大學醫(yī)學部基礎醫(yī)學院藥理系樓雅卿新藥藥代動力學研究

藥理學(Pharmacology)

藥效學(Pharmacodynamics)(藥理作用、作用機制和毒、副作用)藥代動力學(Pharmacokinetics)(藥物吸收、分布、代謝和排泄,ADME).新藥藥代動力學研究

非血管途徑給藥---吸收過程

|

血管給藥----進入血液循環(huán)--分布和消除

|(代謝,排泄)

進入藥物作用部位及其他組織|

臨床藥理效應或毒性反應

新藥研究、開發(fā)及上市的藥代動力學研究1.非臨床(動物)的藥代研究:*先導化合物藥代研究.(篩選)*入選化合物的藥代研究.2.臨床藥代動力學研究*I期臨床藥代動力學研究.(以正常受試者為試驗對象)*II、III及IV臨床藥代動力學研究(包括特殊人群、病人為試驗對象)新藥藥代動力學研究1.化學藥物臨床前藥代動力學研究技術指導原則(試行).2.速釋、緩釋、控釋制劑臨床前藥代動力學研究指導原則(試行).3.新生物制品臨床前藥代動力學技術指導原則(試行).4.化學藥物臨床藥代動力學研究技術指導原則(試行).5.化學藥物制劑人體生物利用度和生物等效性研究技術指導原則(試行).6.新生物制品臨床藥代動力學研究指導原則(試行).新藥早期(先導化物)研究:

1.有效性：選擇作用。2.安全性:*肝毒性。*三致試驗。*Q-Tc不利影響-心臟毒性。3.藥代研究:*吸收試驗-Coca-2細胞通透性試驗或整體動物試驗。*P-糖蛋白轉運-藥物吸收、分布和排泄相關。*藥物代謝:新藥早期藥代研究1.采用肝微粒體、肝細胞或肝灌流法研究藥物代謝途徑和藥酶.2.P450酶系統(tǒng)及及亞型分析.3.整體動物試驗.4.計算機模擬代謝物分析.

臨床前（動物）藥代動力學研究

目的：

探討新藥在動物體內(nèi)的規(guī)律和特點。2為新藥研制和開發(fā)前景提供信息。3為臨床試驗設計提供依據(jù)。進行臨床前藥代動力學的基本要求1.試驗目的明確.2.分析方法可靠.3.試驗設計合理.4.試驗數(shù)據(jù)科學、全面、能滿足新藥評價要求.5.實事求是總結分析試驗結果,作出客觀的評價.建立分析方法。血藥濃度經(jīng)時變化:*單劑量給藥試驗。*多劑量給藥試驗等。藥物吸收。蛋白結合率:求結合型/非結合型藥物比值。組織分布。排泄試驗:藥物從尿、糞便和膽汁排泄。

研究內(nèi)容:7.藥物生物轉化（代謝）:*代謝部位。

*代謝方式(途徑)。

*藥物代謝酶。*代謝產(chǎn)物。8.細胞色素P450酶(CYP)抑制和誘導作用。9.可能發(fā)生的藥物相互作用。

研究內(nèi)容:藥品注冊中臨床前藥代研究的技術要求:

常用的藥物含量分析方法1.色譜法:1)高壓液相色譜法(HPLC)HPLC-UVHPLC-FHPLC-ECDHPLC-MSn(LC-MSn)2)氣相色譜法(GC)GC-FIDGC-NPDGC-ECDGC-MS

2.免疫法:放射免疫法(RIA)

酶免疫法(EMIT,ELISA等)螢光免疫法(FIA)

螢光偏振免疫法(FPIA)3.生物測定法:*微生物測定法*靶酶或靶細胞測定法4.放射性同位素示蹤法:3H-,14C-,125I-,131I-5.穩(wěn)定同位素示蹤法:2H-,13C-,15N-,18O-等。

常用的藥物含量分析方法

分析方法學研究的考察1.特異性:證明測定的物質為原形藥物或其活性代謝,能排除內(nèi)源性及其他外源性物質的干擾。

2.靈敏度:用最低檢測濃度(LLOQ)表示。通常為標準曲線的最小濃度,要求能測出3-5個消除t1/2或Cmax的1/10或1/20的血藥濃度。

3.標準曲線制備:至少包括5個藥物濃度點,應能覆蓋生物樣品的濃度范圍,不得外推。提供標準曲線性方程式和相關系數(shù)(r>0.99)。測定不同生物樣品時應提供不同生物樣品的藥物標淮曲線。4.精確度:方法回收率表示。選擇高、中、低三個濃度。回收率在80-120%范圍內(nèi)。

5.精密度:用相對標準誤差(RSD)表示。選擇高、中、低三個濃度,求日內(nèi)和日間精密度,應<10-20%。

6.樣品穩(wěn)定性。7.質控。

對分析方法學研究考察試驗藥品1.藥品的正式名稱.2.藥品的純度、批號和來源.3.保存條件.4.試驗用藥品的配制方法,應和藥效學及毒理學試驗一致.試驗動物選擇*兩種動物:小鼠、大鼠或兔,beagle犬或猴等。*口服藥物試驗不選用家兔。*選用動物應與藥效及毒理試驗一致。*最好選用一種能多次采取血樣,制成藥-時曲線的動物.*試驗動物數(shù),每個時間點不少于5個數(shù)據(jù),雌雄各半.*生物制品試驗應選能產(chǎn)生相應活性動物或與人源蛋白同源性高的動物,如猴,相應轉基因動物等。

血藥濃度經(jīng)時變化試驗目的和內(nèi)容

目的:探討藥物吸收,分布和消除的動力學規(guī)律和特點。

試驗內(nèi)容:*單劑量給藥。*多劑量給藥。*口服藥物的絕對生物利用度。*進食對口服藥物吸收的影響。*性別因素的影響。

劑量的確定和給藥途徑1.高、中、低三種劑量:*主要參考動物藥效學和毒理試驗劑量(ED50,TD50,LD50,慢毒劑量

),*選擇其有效劑量范圍內(nèi),高、中、低三個劑量,高劑量不能>最大耐受量(MTD)。

2.給藥途徑應與藥效學、毒理學及以后臨床給藥途徑一致。

1.采樣點冠應能反危映藥物愛吸收、饑平衡/分布和宗消除三究個時相睬的動力唱學規(guī)律疤。2.吸收相聲至少2個采血評點.3.平衡相至頁少3個點.4.消除相艙為4-6個點.應能反映圈3～5個皂消除半衰評期或1導/10或政1/20奴的Cmax。5.求得一甜條完整壩的藥嶼–時焰曲線。圖1.大耳白家符兔單次靜戲脈注射三收種劑量（10m嚷g·k堪g-1，20mg借·kg-挖1，30m闖g·k塞g-1）A199養(yǎng)8脂肪乳罰后平均蔑藥-時曲線坡比較。藥代參蹤蝶數(shù)的估萍算*國內(nèi)多根選用3P97軟件或算其他公逐認的藥玩代動力針學程序舟軟件來扎估算藥怨代動力牲學參數(shù)拜。*可采用房凱室模型或帽非房室模森型程序。*主要藥疾代動力倡學參數(shù)用有：血管給課藥:提供t1/2,Vd愿,CL和AUC等參數(shù)。血管外毒給藥:除上述膠參數(shù)外,尚應提供MRT,Cmax,Tmax蛾,和F值。家兔靜羅注三種架劑量A199伴8后的藥代眾動力學參徐數(shù)(n=5)參數(shù)10舟20易3丸0(mg)T1/2(h)矩0.池36±0削.06元2.6柴7±0.囑58旋2.落36±2得.87V(c)便(L/k吊g)期4.4弦0±0.洲57領6豈.11±熱1.36恐5.39驕±2.4襯0AUC(隊ug·m摸l/h)市1.13焰±0.2隸44碑.46±造0.96脖6.14瘦±1.1欠9CL(m戴g·ml膝.h-1)11乒.0±2扒.56靠5業(yè).17±微0.82槳5.58暫±2.7釀9提供資料1.各組(各個)的藥-時數(shù)據(jù)和預曲線圖及仗其平均值.2.各組(各個)的藥代參驗數(shù)及其平獨均值.3.試驗結果鏟分析和討帆論:*吸收的規(guī)晚律和特點.*血藥濃氏度和劑冤量相關顯性.*藥物消鐮除動力己學的特狗點.*藥物體內(nèi)組分布特點.多次給藥辰試驗藥品在臨漏床需長期看給藥及呈亦蓄積傾向拳時,應進行多浙次給藥試琴驗.1.選用一堅種有效覆劑量.2.確定給糊藥間隔肚時間和蹲給藥次趁數(shù).3.測定3次Cmin豈,求穩(wěn)態(tài)藥-時數(shù)據(jù)和用曲線.4.求算t1/2奔,AUC算ss,C既min,房誠Cav和DF值等.5.比較單黎、多次摸給藥試買驗結果:藥代規(guī)律普的差別和害蓄積性.單劑量丈和多劑獨量口服散加替沙映星的藥啊代參數(shù)藥代參患數(shù)塵單耽劑量淋多劑霧量(10于d)____江____頑____胳____供____拍____錘____紀____龜____棄____Cmax勞(mg.璃L-1)拍3.3挎9±0.56毛3襖.51±0.9鎖3Cmin孩(mg.桐L-1)肥0.廈23±0.1贊0岸0蘋.29±0.1猛6Tmax告(h)浸0.9±0.29笑1.共15±0.41AUC(胸mg.h進.L-1)連2端0.26±4.2吳4*架2會6.1螞6±4.5槍3t1/2塌(h)學7.菠25±1.50堆7提.69±0.8紫1Vd(攝L)限1清02.辨27±32.1串2貓97.蠅24±19.壯23CL(椒L.h-1)內(nèi)19蔑.14±4.2擦4*孕1竹6.7榮2±2.93____魯____性____兄____圓____虜____撤____包____希____都____遍_血管外砍給藥的蝴藥物吸椅收試驗1.體外Coca既-2細胞模型槳試驗.2.在體腸道哪試驗.3.整體生物殘利用度試軍驗:*絕對生剪物利用萍度試驗.*相對生物像利用度試疫驗.藥物的叫組織分灣布目的：叮探討藥升物在組陰織分布覽規(guī)律,親和力及禽與藥效和歇毒性的相鬼關性。通常選葡用大鼠們或小鼠孔。一種有參效劑量少。>13種折組織,恩根據(jù)藥品行特點相應頑增加。(些肺,脾塑,肝,烈心,遮腎,腦送,肌,漠平滑肌營,脂肪鍬,生殖介器,骨棍髓等)至少三個售采樣時間炮點,反褲映其動力布學規(guī)律。組織分布5.除提供券試驗數(shù)截據(jù)外,懸應分械析組織脫/血中魚藥物濃食度的比等值。6.特別注歷意藥物鮮濃度高扣、蓄積怒時間長予及在靶共器官的刪組織分較布.7.采用同位倆素示蹤法鉗時,盡可能框提供給精藥后不秒同時相蟻的整體判放射自腥顯影圖繞像.藥物的血班漿蛋白結磚合率試驗采用透析持法,超扮濾法等。高,中心,低三統(tǒng)種藥物濃胸度,應截接近體內(nèi)鍬濃度。兩種動物坐和人血漿謙。A199熔8的蛋白結阻合率濃度(ug/m售l)大鼠人6炭66.梢04±笛9.8源97.針54±彎1.7綠88燃75.影83±叼2.8板93.樸15±塑8.3置210醋77.9肝4±3.柿73偉97筍.93±赴1.94藥物排暴泄試驗目的：崇探討插藥物排顫泄途徑,排泄總量,排泄高瘡峰,排泄終餅點的規(guī)雄律和特券點。大鼠,烘一種遍有效劑喘量內(nèi)容:鬧糞便,游尿和膽汁宿排泄試驗主要排返泄途徑熊、排泄浩速率和競排泄量(至藥物排哥泄結束為蠻止)。注意原形挑藥排泄累李積總量占叉劑量的百揀分比,毅物料平衡悉問題。是否存港在肝腸古循環(huán),搖胃腸舍循環(huán)等盛現(xiàn)象。藥物生燒物轉化馳(代謝作)如原形藥冬在體內(nèi)生近成大量具僻有藥理活示性代謝物,并其排狹泄總量<50鳳%時,則應進行初初步藥物碑代謝試驗代謝部位陸。代謝途徑縮慧和藥物代旋謝酶。主要代莊謝物M1,啟M2,陸M3….嬸.等。如為前煎藥,租要確定尼主要代患謝物的癢化學結索構,柜代謝物做合成,璃藥理舍活性和PK試驗。藥酶誘辮導和抑肌制作用測定藥焰物對肝款微粒中P45翼0總量的徐影響.肝微粒率體酶促帽動力學振試驗(墻應用巳露知被CYP季1A2矮,2霞C9,櫻2匹C19添,爆2D6和3A4等藥酶催帶化的藥物驗進行試驗告)或藥容酶抗體反趟應試驗,研究:*藥物收代謝酶鳥。*藥酶誘鑼導作用。*藥物抑炕制作用。CYP典型底援物Km艦IC50Ki1A2非那西丁54芹1000薄51釘9.22A6雙香豆蒙素0.3駝4濱100孤0裙25貫3.72C9甲苯磺甲丁脲120產(chǎn)53前2葵2宜90.22C19煮S-美芬妥喬英36.飄1臘1薄000促419餓.32D6異喹胍57.5優(yōu)*褲5著3.3膏*喪39蓬.9*2E1氯唑沙鑄宗30.4堆146請55.23A4紅霉素55.李8*吹5漲6.5料*摟39引.1*藥酶誘導鳴作用和抑翼制作用討論和結套論除試驗結判果小結外,應結合哪藥效學攻和毒理憐進行分藍析討論.如:吸收規(guī)律,BA。消除動螞力學規(guī)湯律。性別,進食及寒用藥持縫續(xù)時間饒對藥代靠的影響款。藥物蛋左白結合慎率、組若織分布怠親和力攔和藥效,毒性的相愈關性。排泄和吸呆收的平衡,蓄積性炒。代謝特點,和藥效,毒性相關爬性,相互作牌用等。新藥、艙新制劑屈的生物婦利用度/生物等效皮性試驗研禁究*生物利用母度(Bioa忽vail滾abil救ity,嚴BA)是以藥旋物濃度日-時間駁曲線下構面積(AUC激)為基礎得,反逼映藥物啊在體內(nèi)敘的吸收勒程度和劈燕速度.絕對生物鋸利用度:F=A惜UCp歷o/A獵UCi桃v×1退00%相對生物星利用度:F=AU軌C(試驗制劑污)/AUC(參比制區(qū)劑)×擊100暮%*生物等效牌性(Bioe腿quiv嬸alan糧cy,B炎E)是指一種咐藥物的不濫同制劑在臘相同的實腫驗條件下先,其體吧內(nèi)吸收程伴度和速度版無顯著性潑差異.BA和BE的意義甘和應用確定新愚藥的給帥藥途徑.確定新歲藥的劑集型(包括處方躬的篩選).新劑型,特殊劑伐型的研憤究(緩、控釋惰制劑,脂質體巧制劑等).仿制制劑搭的研制(制劑工規(guī)藝,藥物粒徑筋等).不同條愉件下,同一藥躁物在體在內(nèi)吸收耳程度和盛速度的晴比較,說明各旋種因素吐對藥物森吸收和幻玉血藥濃俘度的影販響,以指導臨忽床用藥.如進食,食物,疾病,藥物相互繩作用等.生物利用城度試驗--臨床前(動物)生物利用識度試(生物藥康劑學)血藥濃度穩(wěn)檢測方法坑同前。受試對象伶:動物悔-Beag玻le犬(>露6只)奇,大宗鼠等。3.藥物制劑正:受試伍制劑-研囑究的制劑琴。4.參比制劑猾-巳批準撥上市的主悔導藥物劑在型。5.試驗設庫計:體通常采病用兩制鋼劑雙周燦期交叉梨試驗(斯二種制遍劑)或賊3×3丹拉丁方鐘試驗設侮計(三撈種制劑素)。劑量:一般應用輩有效劑量.不同劑型(制劑)和研皂究目的,試驗內(nèi)元容要求笛不同:*普通倆制劑:單劑量懸給藥交漂叉試驗好。*特殊劑久型,緩,控釋制劑:單劑量或就多劑量給北藥交叉試恢驗。第1周期第2周期A組

testreferenceB組

referencetest其間清洗期約1-2周藥代參瞞數(shù)估算單劑量試語驗主要藥想代參數(shù):磁用房室廟模型或非亞房室模型領求藥代參憂數(shù),但侄其中a)A君UCo-t以梯形法激計算。b)閉AUCo-∞按下式計簡算:AUCo-∞=AU夸Co-t+Ct/λz2.t為最后亭一次采蜂血時間怖;Ct為末次夢的藥物璃濃度,λz為藥-蒜時曲線劑末端部寒份求得仙的消除憲速率常孩數(shù).3.Cmax和Tmax以實測值萌表示。4.生物利用骨度:F%=罪AUCT/AUCR×10窮0%多劑量生早物利用度佛試驗主要慮藥代參數(shù)*三次谷濃品度(Cmin)、Tmax、t1/2、A戴UCs柜s和F值.*C腿av=命AU費Css甜/τ女(用藥間刻隔時間鏈)*D災F=Cmax-Cmin/Cav街×100繡%生物等誕效性評刪價1.主要對Cmax,Tmax及AUC三個參數(shù)哲進行統(tǒng)計葡學處理,紙評價生決物等效性梳.2.Cmax和AUC對數(shù)轉換,以校正求其對稱紙性.3.用多因笨素方差碑分析(AN轉OVA魯)進行顯著雄性檢驗.4.用雙單側t檢驗和害計算90%可信區(qū)對間.5.試驗制劑Cmax的90累%可信篇限在7扯0-1兵43%維范圍內(nèi).AUC的90%趣可信限在勉80-1鈔25%范紋圍內(nèi).Tmax經(jīng)非參數(shù)甘法檢驗.生物等效狹性分析和狂評價1.與研究的躍目的相關:*仿制演藥:則糊兩制劑告應生