新藥藥代動(dòng)力學(xué)方法

新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院藥理系樓雅卿新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究

藥理學(xué)(Pharmacology)

藥效學(xué)(Pharmacodynamics)(藥理作用、作用機(jī)制和毒、副作用)藥代動(dòng)力學(xué)(Pharmacokinetics)(藥物吸收、分布、代謝和排泄,ADME).新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究

非血管途徑給藥---吸收過(guò)程

|

血管給藥----進(jìn)入血液循環(huán)--分布和消除

|(代謝,排泄)

進(jìn)入藥物作用部位及其他組織|

臨床藥理效應(yīng)或毒性反應(yīng)

新藥研究、開發(fā)及上市的藥代動(dòng)力學(xué)研究1.非臨床(動(dòng)物)的藥代研究:*先導(dǎo)化合物藥代研究.(篩選)*入選化合物的藥代研究.2.臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究*I期臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究.(以正常受試者為試驗(yàn)對(duì)象)*II、III及IV臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究(包括特殊人群、病人為試驗(yàn)對(duì)象)新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究1.化學(xué)藥物臨床前藥代動(dòng)力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則(試行).2.速釋、緩釋、控釋制劑臨床前藥代動(dòng)力學(xué)研究指導(dǎo)原則(試行).3.新生物制品臨床前藥代動(dòng)力學(xué)技術(shù)指導(dǎo)原則(試行).4.化學(xué)藥物臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則(試行).5.化學(xué)藥物制劑人體生物利用度和生物等效性研究技術(shù)指導(dǎo)原則(試行).6.新生物制品臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究指導(dǎo)原則(試行).新藥早期(先導(dǎo)化物)研究:

1.有效性：選擇作用。2.安全性:*肝毒性。*三致試驗(yàn)。*Q-Tc不利影響-心臟毒性。3.藥代研究:*吸收試驗(yàn)-Coca-2細(xì)胞通透性試驗(yàn)或整體動(dòng)物試驗(yàn)。*P-糖蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)-藥物吸收、分布和排泄相關(guān)。*藥物代謝:新藥早期藥代研究1.采用肝微粒體、肝細(xì)胞或肝灌流法研究藥物代謝途徑和藥酶.2.P450酶系統(tǒng)及及亞型分析.3.整體動(dòng)物試驗(yàn).4.計(jì)算機(jī)模擬代謝物分析.

臨床前（動(dòng)物）藥代動(dòng)力學(xué)研究

目的：

探討新藥在動(dòng)物體內(nèi)的規(guī)律和特點(diǎn)。2為新藥研制和開發(fā)前景提供信息。3為臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì)提供依據(jù)。進(jìn)行臨床前藥代動(dòng)力學(xué)的基本要求1.試驗(yàn)?zāi)康拿鞔_.2.分析方法可靠.3.試驗(yàn)設(shè)計(jì)合理.4.試驗(yàn)數(shù)據(jù)科學(xué)、全面、能滿足新藥評(píng)價(jià)要求.5.實(shí)事求是總結(jié)分析試驗(yàn)結(jié)果,作出客觀的評(píng)價(jià).建立分析方法。血藥濃度經(jīng)時(shí)變化:*單劑量給藥試驗(yàn)。*多劑量給藥試驗(yàn)等。藥物吸收。蛋白結(jié)合率:求結(jié)合型/非結(jié)合型藥物比值。組織分布。排泄試驗(yàn):藥物從尿、糞便和膽汁排泄。

研究?jī)?nèi)容:7.藥物生物轉(zhuǎn)化（代謝）:*代謝部位。

*代謝方式(途徑)。

*藥物代謝酶。*代謝產(chǎn)物。8.細(xì)胞色素P450酶(CYP)抑制和誘導(dǎo)作用。9.可能發(fā)生的藥物相互作用。

研究?jī)?nèi)容:藥品注冊(cè)中臨床前藥代研究的技術(shù)要求:

常用的藥物含量分析方法1.色譜法:1)高壓液相色譜法(HPLC)HPLC-UVHPLC-FHPLC-ECDHPLC-MSn(LC-MSn)2)氣相色譜法(GC)GC-FIDGC-NPDGC-ECDGC-MS

2.免疫法:放射免疫法(RIA)

酶免疫法(EMIT,ELISA等)螢光免疫法(FIA)

螢光偏振免疫法(FPIA)3.生物測(cè)定法:*微生物測(cè)定法*靶酶或靶細(xì)胞測(cè)定法4.放射性同位素示蹤法:3H-,14C-,125I-,131I-5.穩(wěn)定同位素示蹤法:2H-,13C-,15N-,18O-等。

常用的藥物含量分析方法

分析方法學(xué)研究的考察1.特異性:證明測(cè)定的物質(zhì)為原形藥物或其活性代謝,能排除內(nèi)源性及其他外源性物質(zhì)的干擾。

2.靈敏度:用最低檢測(cè)濃度(LLOQ)表示。通常為標(biāo)準(zhǔn)曲線的最小濃度,要求能測(cè)出3-5個(gè)消除t1/2或Cmax的1/10或1/20的血藥濃度。

3.標(biāo)準(zhǔn)曲線制備:至少包括5個(gè)藥物濃度點(diǎn),應(yīng)能覆蓋生物樣品的濃度范圍,不得外推。提供標(biāo)準(zhǔn)曲線性方程式和相關(guān)系數(shù)(r>0.99)。測(cè)定不同生物樣品時(shí)應(yīng)提供不同生物樣品的藥物標(biāo)淮曲線。4.精確度:方法回收率表示。選擇高、中、低三個(gè)濃度?；厥章试?0-120%范圍內(nèi)。

5.精密度:用相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)誤差(RSD)表示。選擇高、中、低三個(gè)濃度,求日內(nèi)和日間精密度,應(yīng)<10-20%。

6.樣品穩(wěn)定性。7.質(zhì)控。

對(duì)分析方法學(xué)研究考察試驗(yàn)藥品1.藥品的正式名稱.2.藥品的純度、批號(hào)和來(lái)源.3.保存條件.4.試驗(yàn)用藥品的配制方法,應(yīng)和藥效學(xué)及毒理學(xué)試驗(yàn)一致.試驗(yàn)動(dòng)物選擇*兩種動(dòng)物:小鼠、大鼠或兔,beagle犬或猴等。*口服藥物試驗(yàn)不選用家兔。*選用動(dòng)物應(yīng)與藥效及毒理試驗(yàn)一致。*最好選用一種能多次采取血樣,制成藥-時(shí)曲線的動(dòng)物.*試驗(yàn)動(dòng)物數(shù),每個(gè)時(shí)間點(diǎn)不少于5個(gè)數(shù)據(jù),雌雄各半.*生物制品試驗(yàn)應(yīng)選能產(chǎn)生相應(yīng)活性動(dòng)物或與人源蛋白同源性高的動(dòng)物,如猴,相應(yīng)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等。

血藥濃度經(jīng)時(shí)變化試驗(yàn)?zāi)康暮蛢?nèi)容

目的:探討藥物吸收,分布和消除的動(dòng)力學(xué)規(guī)律和特點(diǎn)。

試驗(yàn)內(nèi)容:*單劑量給藥。*多劑量給藥。*口服藥物的絕對(duì)生物利用度。*進(jìn)食對(duì)口服藥物吸收的影響。*性別因素的影響。

劑量的確定和給藥途徑1.高、中、低三種劑量:*主要參考動(dòng)物藥效學(xué)和毒理試驗(yàn)劑量(ED50,TD50,LD50,慢毒劑量

),*選擇其有效劑量范圍內(nèi),高、中、低三個(gè)劑量,高劑量不能>最大耐受量(MTD)。

2.給藥途徑應(yīng)與藥效學(xué)、毒理學(xué)及以后臨床給藥途徑一致。

1.采樣點(diǎn)冠應(yīng)能反危映藥物愛(ài)吸收、饑平衡/分布和宗消除三究個(gè)時(shí)相睬的動(dòng)力唱學(xué)規(guī)律疤。2.吸收相聲至少2個(gè)采血評(píng)點(diǎn).3.平衡相至頁(yè)少3個(gè)點(diǎn).4.消除相艙為4-6個(gè)點(diǎn).應(yīng)能反映圈3～5個(gè)皂消除半衰評(píng)期或1導(dǎo)/10或政1/20奴的Cmax。5.求得一甜條完整壩的藥嶼–時(shí)焰曲線。圖1.大耳白家符兔單次靜戲脈注射三收種劑量（10m嚷g·k堪g-1，20mg借·kg-挖1，30m闖g·k塞g-1）A199養(yǎng)8脂肪乳罰后平均蔑藥-時(shí)曲線坡比較。藥代參蹤蝶數(shù)的估萍算*國(guó)內(nèi)多根選用3P97軟件或算其他公逐認(rèn)的藥玩代動(dòng)力針學(xué)程序舟軟件來(lái)扎估算藥怨代動(dòng)力牲學(xué)參數(shù)拜。*可采用房凱室模型或帽非房室模森型程序。*主要藥疾代動(dòng)力倡學(xué)參數(shù)用有：血管給課藥:提供t1/2,Vd愿,CL和AUC等參數(shù)。血管外毒給藥:除上述膠參數(shù)外,尚應(yīng)提供MRT,Cmax,Tmax蛾,和F值。家兔靜羅注三種架劑量A199伴8后的藥代眾動(dòng)力學(xué)參徐數(shù)(n=5)參數(shù)10舟20易3丸0(mg)T1/2(h)矩0.池36±0削.06元2.6柴7±0.囑58旋2.落36±2得.87V(c)便(L/k吊g)期4.4弦0±0.洲57領(lǐng)6豈.11±熱1.36恐5.39驕±2.4襯0AUC(隊(duì)ug·m摸l/h)市1.13焰±0.2隸44碑.46±造0.96脖6.14瘦±1.1欠9CL(m戴g·ml膝.h-1)11乒.0±2扒.56靠5業(yè).17±微0.82槳5.58暫±2.7釀9提供資料1.各組(各個(gè))的藥-時(shí)數(shù)據(jù)和預(yù)曲線圖及仗其平均值.2.各組(各個(gè))的藥代參驗(yàn)數(shù)及其平獨(dú)均值.3.試驗(yàn)結(jié)果鏟分析和討帆論:*吸收的規(guī)晚律和特點(diǎn).*血藥濃氏度和劑冤量相關(guān)顯性.*藥物消鐮除動(dòng)力己學(xué)的特狗點(diǎn).*藥物體內(nèi)組分布特點(diǎn).多次給藥辰試驗(yàn)藥品在臨漏床需長(zhǎng)期看給藥及呈亦蓄積傾向拳時(shí),應(yīng)進(jìn)行多浙次給藥試琴驗(yàn).1.選用一堅(jiān)種有效覆劑量.2.確定給糊藥間隔肚時(shí)間和蹲給藥次趁數(shù).3.測(cè)定3次Cmin豈,求穩(wěn)態(tài)藥-時(shí)數(shù)據(jù)和用曲線.4.求算t1/2奔,AUC算ss,C既min,房誠(chéng)Cav和DF值等.5.比較單黎、多次摸給藥試買驗(yàn)結(jié)果:藥代規(guī)律普的差別和害蓄積性.單劑量丈和多劑獨(dú)量口服散加替沙映星的藥啊代參數(shù)藥代參患數(shù)塵單耽劑量淋多劑霧量(10于d)____江____頑____胳____供____拍____錘____紀(jì)____龜____棄____Cmax勞(mg.璃L-1)拍3.3挎9±0.56毛3襖.51±0.9鎖3Cmin孩(mg.桐L-1)肥0.廈23±0.1贊0岸0蘋.29±0.1猛6Tmax告(h)浸0.9±0.29笑1.共15±0.41AUC(胸mg.h進(jìn).L-1)連2端0.26±4.2吳4*架2會(huì)6.1螞6±4.5槍3t1/2塌(h)學(xué)7.菠25±1.50堆7提.69±0.8紫1Vd(攝L)限1清02.辨27±32.1串2貓97.蠅24±19.壯23CL(椒L.h-1)內(nèi)19蔑.14±4.2擦4*孕1竹6.7榮2±2.93____魯____性____兄____圓____虜____撤____包____希____都____遍_血管外砍給藥的蝴藥物吸椅收試驗(yàn)1.體外Coca既-2細(xì)胞模型槳試驗(yàn).2.在體腸道哪試驗(yàn).3.整體生物殘利用度試軍驗(yàn):*絕對(duì)生剪物利用萍度試驗(yàn).*相對(duì)生物像利用度試疫驗(yàn).藥物的叫組織分灣布目的：叮探討藥升物在組陰織分布覽規(guī)律,親和力及禽與藥效和歇毒性的相鬼關(guān)性。通常選葡用大鼠們或小鼠孔。一種有參效劑量少。>13種折組織,恩根據(jù)藥品行特點(diǎn)相應(yīng)頑增加。(些肺,脾塑,肝,烈心,遮腎,腦送,肌,漠平滑肌營(yíng),脂肪鍬,生殖介器,骨棍髓等)至少三個(gè)售采樣時(shí)間炮點(diǎn),反褲映其動(dòng)力布學(xué)規(guī)律。組織分布5.除提供券試驗(yàn)數(shù)截?fù)?jù)外,懸應(yīng)分械析組織脫/血中魚藥物濃食度的比等值。6.特別注歷意藥物鮮濃度高扣、蓄積怒時(shí)間長(zhǎng)予及在靶共器官的刪組織分較布.7.采用同位倆素示蹤法鉗時(shí),盡可能框提供給精藥后不秒同時(shí)相蟻的整體判放射自腥顯影圖繞像.藥物的血班漿蛋白結(jié)磚合率試驗(yàn)采用透析持法,超扮濾法等。高,中心,低三統(tǒng)種藥物濃胸度,應(yīng)截接近體內(nèi)鍬濃度。兩種動(dòng)物坐和人血漿謙。A199熔8的蛋白結(jié)阻合率濃度(ug/m售l)大鼠人6炭66.梢04±笛9.8源97.針54±彎1.7綠88燃75.影83±叼2.8板93.樸15±塑8.3置210醋77.9肝4±3.柿73偉97筍.93±赴1.94藥物排暴泄試驗(yàn)?zāi)康模撼缣接懖逅幬锱蓬澬雇緩?排泄總量,排泄高瘡峰,排泄終餅點(diǎn)的規(guī)雄律和特券點(diǎn)。大鼠,烘一種遍有效劑喘量?jī)?nèi)容:鬧糞便,游尿和膽汁宿排泄試驗(yàn)主要排返泄途徑熊、排泄浩速率和競(jìng)排泄量(至藥物排哥泄結(jié)束為蠻止)。注意原形挑藥排泄累李積總量占叉劑量的百揀分比,毅物料平衡悉問(wèn)題。是否存港在肝腸古循環(huán),搖胃腸舍循環(huán)等盛現(xiàn)象。藥物生燒物轉(zhuǎn)化馳(代謝作)如原形藥冬在體內(nèi)生近成大量具僻有藥理活示性代謝物,并其排狹泄總量<50鳳%時(shí),則應(yīng)進(jìn)行初初步藥物碑代謝試驗(yàn)代謝部位陸。代謝途徑縮慧和藥物代旋謝酶。主要代莊謝物M1,啟M2,陸M3….嬸.等。如為前煎藥,租要確定尼主要代患謝物的癢化學(xué)結(jié)索構(gòu),柜代謝物做合成,璃藥理舍活性和PK試驗(yàn)。藥酶誘辮導(dǎo)和抑肌制作用測(cè)定藥焰物對(duì)肝款微粒中P45翼0總量的徐影響.肝微粒率體酶促帽動(dòng)力學(xué)振試驗(yàn)(墻應(yīng)用巳露知被CYP季1A2矮,2霞C9,櫻2匹C19添,爆2D6和3A4等藥酶催帶化的藥物驗(yàn)進(jìn)行試驗(yàn)告)或藥容酶抗體反趟應(yīng)試驗(yàn),研究:*藥物收代謝酶鳥。*藥酶誘鑼導(dǎo)作用。*藥物抑炕制作用。CYP典型底援物Km艦IC50Ki1A2非那西丁54芹1000薄51釘9.22A6雙香豆蒙素0.3駝4濱100孤0裙25貫3.72C9甲苯磺甲丁脲120產(chǎn)53前2葵2宜90.22C19煮S-美芬妥喬英36.飄1臘1薄000促419餓.32D6異喹胍57.5優(yōu)*褲5著3.3膏*喪39蓬.9*2E1氯唑沙鑄宗30.4堆146請(qǐng)55.23A4紅霉素55.李8*吹5漲6.5料*摟39引.1*藥酶誘導(dǎo)鳴作用和抑翼制作用討論和結(jié)套論除試驗(yàn)結(jié)判果小結(jié)外,應(yīng)結(jié)合哪藥效學(xué)攻和毒理憐進(jìn)行分藍(lán)析討論.如:吸收規(guī)律,BA。消除動(dòng)螞力學(xué)規(guī)湯律。性別,進(jìn)食及寒用藥持縫續(xù)時(shí)間饒對(duì)藥代靠的影響款。藥物蛋左白結(jié)合慎率、組若織分布怠親和力攔和藥效,毒性的相愈關(guān)性。排泄和吸呆收的平衡,蓄積性炒。代謝特點(diǎn),和藥效,毒性相關(guān)爬性,相互作牌用等。新藥、艙新制劑屈的生物婦利用度/生物等效皮性試驗(yàn)研禁究*生物利用母度(Bioa忽vail滾abil救ity,嚴(yán)BA)是以藥旋物濃度日-時(shí)間駁曲線下構(gòu)面積(AUC激)為基礎(chǔ)得,反逼映藥物啊在體內(nèi)敘的吸收勒程度和劈燕速度.絕對(duì)生物鋸利用度:F=A惜UCp歷o/A獵UCi桃v×1退00%相對(duì)生物星利用度:F=AU軌C(試驗(yàn)制劑污)/AUC(參比制區(qū)劑)×擊100暮%*生物等效牌性(Bioe腿quiv嬸alan糧cy,B炎E)是指一種咐藥物的不濫同制劑在臘相同的實(shí)腫驗(yàn)條件下先,其體吧內(nèi)吸收程伴度和速度版無(wú)顯著性潑差異.BA和BE的意義甘和應(yīng)用確定新愚藥的給帥藥途徑.確定新歲藥的劑集型(包括處方躬的篩選).新劑型,特殊劑伐型的研憤究(緩、控釋惰制劑,脂質(zhì)體巧制劑等).仿制制劑搭的研制(制劑工規(guī)藝,藥物粒徑筋等).不同條愉件下,同一藥躁物在體在內(nèi)吸收耳程度和盛速度的晴比較,說(shuō)明各旋種因素吐對(duì)藥物森吸收和幻玉血藥濃俘度的影販響,以指導(dǎo)臨忽床用藥.如進(jìn)食,食物,疾病,藥物相互繩作用等.生物利用城度試驗(yàn)--臨床前(動(dòng)物)生物利用識(shí)度試(生物藥康劑學(xué))血藥濃度穩(wěn)檢測(cè)方法坑同前。受試對(duì)象伶:動(dòng)物悔-Beag玻le犬(>露6只)奇,大宗鼠等。3.藥物制劑正:受試伍制劑-研囑究的制劑琴。4.參比制劑猾-巳批準(zhǔn)撥上市的主悔導(dǎo)藥物劑在型。5.試驗(yàn)設(shè)庫(kù)計(jì):體通常采病用兩制鋼劑雙周燦期交叉梨試驗(yàn)(斯二種制遍劑)或賊3×3丹拉丁方鐘試驗(yàn)設(shè)侮計(jì)(三撈種制劑素)。劑量:一般應(yīng)用輩有效劑量.不同劑型(制劑)和研皂究目的,試驗(yàn)內(nèi)元容要求笛不同:*普通倆制劑:單劑量懸給藥交漂叉試驗(yàn)好。*特殊劑久型,緩,控釋制劑:單劑量或就多劑量給北藥交叉試恢驗(yàn)。第1周期第2周期A組

testreferenceB組

referencetest其間清洗期約1-2周藥代參瞞數(shù)估算單劑量試語(yǔ)驗(yàn)主要藥想代參數(shù):磁用房室廟模型或非亞房室模型領(lǐng)求藥代參憂數(shù),但侄其中a)A君UCo-t以梯形法激計(jì)算。b)閉AUCo-∞按下式計(jì)簡(jiǎn)算:AUCo-∞=AU夸Co-t+Ct/λz2.t為最后亭一次采蜂血時(shí)間怖;Ct為末次夢(mèng)的藥物璃濃度,λz為藥-蒜時(shí)曲線劑末端部寒份求得仙的消除憲速率常孩數(shù).3.Cmax和Tmax以實(shí)測(cè)值萌表示。4.生物利用骨度:F%=罪AUCT/AUCR×10窮0%多劑量生早物利用度佛試驗(yàn)主要慮藥代參數(shù)*三次谷濃品度(Cmin)、Tmax、t1/2、A戴UCs柜s和F值.*C腿av=命AU費(fèi)Css甜/τ女(用藥間刻隔時(shí)間鏈)*D災(zāi)F=Cmax-Cmin/Cav街×100繡%生物等誕效性評(píng)刪價(jià)1.主要對(duì)Cmax,Tmax及AUC三個(gè)參數(shù)哲進(jìn)行統(tǒng)計(jì)葡學(xué)處理,紙?jiān)u價(jià)生決物等效性梳.2.Cmax和AUC對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換,以校正求其對(duì)稱紙性.3.用多因笨素方差碑分析(AN轉(zhuǎn)OVA魯)進(jìn)行顯著雄性檢驗(yàn).4.用雙單側(cè)t檢驗(yàn)和害計(jì)算90%可信區(qū)對(duì)間.5.試驗(yàn)制劑Cmax的90累%可信篇限在7扯0-1兵43%維范圍內(nèi).AUC的90%趣可信限在勉80-1鈔25%范紋圍內(nèi).Tmax經(jīng)非參數(shù)甘法檢驗(yàn).生物等效狹性分析和狂評(píng)價(jià)1.與研究的躍目的相關(guān):*仿制演藥:則糊兩制劑告應(yīng)生