河北農(nóng)業(yè)大學(xué)免疫學(xué)課件第二十二章免疫學(xué)檢測原理及臨床應(yīng)用詳解

河北農(nóng)業(yè)大學(xué)免疫學(xué)課件第二十二章免疫學(xué)檢測原理及臨床應(yīng)用詳解演示文稿目前一頁\總數(shù)四十四頁\編于一點優(yōu)選河北農(nóng)業(yè)大學(xué)免疫學(xué)課件第二十二章免疫學(xué)檢測原理及臨床應(yīng)用目前二頁\總數(shù)四十四頁\編于一點目錄基于抗原-抗體反應(yīng)的檢測方法免疫細胞檢測免疫分子檢測免疫學(xué)診斷與監(jiān)測目前三頁\總數(shù)四十四頁\編于一點第一節(jié)基于抗原-抗體反應(yīng)的檢測方法抗原與抗體在體內(nèi)體外均能發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)，因抗體主要來自血清，因此在體外進行的抗原抗體反應(yīng)又稱為血清學(xué)反應(yīng)或免疫血清學(xué)技術(shù)。目前四頁\總數(shù)四十四頁\編于一點一、抗原-抗體反應(yīng)的特點1.特異性與交叉性交叉反應(yīng)是區(qū)分血清型和亞型的重要依據(jù)??！目前五頁\總數(shù)四十四頁\編于一點2.抗原-抗體結(jié)合的帶現(xiàn)象與可見性目前六頁\總數(shù)四十四頁\編于一點3.可逆性目前七頁\總數(shù)四十四頁\編于一點4.反應(yīng)階段性第一階段：特異性結(jié)合階段

特點：反應(yīng)快（數(shù)秒至數(shù)分鐘）、無可見反應(yīng)第二階段：反應(yīng)的可見階段

特點：反應(yīng)慢（數(shù)分鐘至數(shù)小時）、表現(xiàn)為凝集、沉淀、補體結(jié)合等反應(yīng)，所受影響因素較多。目前八頁\總數(shù)四十四頁\編于一點二、影響抗原抗體結(jié)合的因素電解質(zhì)：生理鹽水、緩沖液溫度：37或4攝氏度酸堿度：pH值在6~8抗原和抗體的性質(zhì)（抗體特異性和親和力）振蕩：適當(dāng)雜物和異物目前九頁\總數(shù)四十四頁\編于一點三、抗原-抗體反應(yīng)檢測方法反應(yīng)類型及試驗名稱反應(yīng)類型及試驗名稱凝集試驗直接凝集試驗標(biāo)記抗體技術(shù)免疫熒光抗體技術(shù)間接凝集試驗免疫酶標(biāo)記技術(shù)乳膠凝集試驗放射免疫測定技術(shù)沉淀試驗絮狀沉淀試驗化學(xué)發(fā)光標(biāo)記技術(shù)瓊脂免疫擴散試驗免疫復(fù)合物散射反應(yīng)免疫電泳血清學(xué)新技術(shù)免疫傳感技術(shù)火箭免疫電泳免疫印記技術(shù)補體參與的試驗補體結(jié)合試驗、補體依賴性細胞毒試驗、免疫黏附血凝試驗免疫膠體金技術(shù)免疫沉淀技術(shù)免疫核酸探針技術(shù)中和試驗病毒中和試驗免疫電鏡技術(shù)毒素中和試驗免疫蛋白芯片技術(shù)目前十頁\總數(shù)四十四頁\編于一點1.凝集反應(yīng)

直接凝集

目前十一頁\總數(shù)四十四頁\編于一點間接凝集目前十二頁\總數(shù)四十四頁\編于一點間接凝集抑制試驗?zāi)壳笆揬總數(shù)四十四頁\編于一點

協(xié)同凝集試驗

人血清IgG可與葡萄球菌A蛋白（SPA）結(jié)合，將已知特異性抗體IgG結(jié)合至SPA,IgGFab暴露在金黃色葡萄球菌菌體表面，其與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合，導(dǎo)致金黃色葡萄球菌凝集。

目前十四頁\總數(shù)四十四頁\編于一點2.沉淀反應(yīng)單向免疫擴散雙向免疫擴散目前十五頁\總數(shù)四十四頁\編于一點

雙向雙擴散沉淀線與抗原成分的關(guān)系目前十六頁\總數(shù)四十四頁\編于一點免疫電泳目前十七頁\總數(shù)四十四頁\編于一點3.補體參與的反應(yīng)溶血空斑試驗?zāi)壳笆隧揬總數(shù)四十四頁\編于一點4.免疫標(biāo)記技術(shù)（1）免疫熒光法目前十九頁\總數(shù)四十四頁\編于一點唾液腺中的狂犬病毒單純皰疹病毒

目前二十頁\總數(shù)四十四頁\編于一點（2）酶免疫測定用酶標(biāo)記的抗體進行抗原抗體反應(yīng)。一般用酶標(biāo)儀測定光密度值（OD值）以反應(yīng)抗原或抗體含量。靈敏度可達ng~pg/ml水平。常用標(biāo)記的酶為辣根過氧化物酶（HRP）、堿性磷酸酶（AP）等。目前二十一頁\總數(shù)四十四頁\編于一點酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzymelinked-immunosorbentassay,ELISA）:將已知抗原或抗體吸附在固相載體表面，在固相表面經(jīng)行抗原抗體反應(yīng)，通過洗滌固相表面抗原抗體復(fù)合物與液相中游離成分分離。目前二十二頁\總數(shù)四十四頁\編于一點酶標(biāo)儀目前二十三頁\總數(shù)四十四頁\編于一點目前二十四頁\總數(shù)四十四頁\編于一點目前二十五頁\總數(shù)四十四頁\編于一點酶聯(lián)免疫斑點試驗（enzymelinkedimmunospotassay,ELISPOT）目前二十六頁\總數(shù)四十四頁\編于一點BAS-ELISA（生物素-親和素系統(tǒng)ELISA）目前二十七頁\總數(shù)四十四頁\編于一點免疫組化技術(shù)目前二十八頁\總數(shù)四十四頁\編于一點免疫膠體金技術(shù)目前二十九頁\總數(shù)四十四頁\編于一點目前三十頁\總數(shù)四十四頁\編于一點免疫膠體金檢測技術(shù)用于懷孕診斷（懷孕）（未懷孕）目前三十一頁\總數(shù)四十四頁\編于一點目前三十二頁\總數(shù)四十四頁\編于一點免疫印跡目前三十三頁\總數(shù)四十四頁\編于一點目前三十四頁\總數(shù)四十四頁\編于一點5.血凝抑制試驗血凝試驗：檢測抗原（新城疫、流感病毒等）血凝抑制試驗：檢測抗體目前三十五頁\總數(shù)四十四頁\編于一點第二節(jié)免疫細胞檢測外周血單個核細胞的分離：

用淋巴細胞分離液（葡聚糖-泛影葡酸）密度梯度離心法。淋巴細胞亞群分離或計數(shù)：

流式細胞術(shù)、磁分離技術(shù)、花環(huán)試驗等。樹突狀細胞誘生和分離：

誘生：IL-4、GM-CSF鑒定：CD1a和CD83一、免疫細胞及其亞類計數(shù)目前三十六頁\總數(shù)四十四頁\編于一點流式細胞技術(shù)的一般過程目前三十七頁\總數(shù)四十四頁\編于一點E玫瑰花環(huán)試驗?zāi)壳叭隧揬總數(shù)四十四頁\編于一點二、淋巴細胞功能測定1.T細胞轉(zhuǎn)化試驗（T細胞增殖試驗）

目前三十九頁\總數(shù)四十四頁\編于一點2.溶血空斑形成試驗?zāi)壳八氖揬總數(shù)四十四頁\編于一點3.巨噬細胞吞噬功能的檢測1234目前四十一頁\總數(shù)四十四頁\編于一點5目前四十二頁\總數(shù)四十四頁\編于一點4.測定淋巴細胞功能的體內(nèi)試驗機體對特定抗原產(chǎn)生初次細胞免疫應(yīng)答，再用相同抗原做皮膚試驗，出現(xiàn)以局部紅腫為特征的遲發(fā)型超敏反應(yīng)。結(jié)核桿菌、免疫缺陷病等目前四十三頁\總數(shù)四十四頁\編于一點第三