組織培養(yǎng)實驗室的規(guī)劃設計

組織培養(yǎng)實驗室規(guī)劃設計一、實驗室要求理想的組織培養(yǎng)實驗室應該建立在安靜、清潔、遠離污染源的地方，最好在常年主風向的上風方向，盡量減少污染。規(guī)?；a(chǎn)的組織培養(yǎng)實驗室最好建在交通方便的地方，便于培養(yǎng)產(chǎn)品的運送。實驗室的建設均需考慮兩個方面的問題：一是所從事的實驗的性質(zhì)，即是生產(chǎn)性的還是研究性的，是基本層次的還是較高層次的；二是實驗室的規(guī)模，規(guī)模主要取決于經(jīng)費和實驗性質(zhì)。無論實驗室的性質(zhì)和規(guī)模如何，實驗室設置的基本原則是：科學、高效、經(jīng)濟和實用。一個組織培養(yǎng)實驗室必須滿足3個基本的需要：實驗準備（培養(yǎng)基制備、器皿洗滌、培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿滅菌）、無菌操作和控制培養(yǎng)。此外，還可根據(jù)從事的實驗要求來考慮輔助實驗室及其各種附加設施，使實驗室更加完善。在進行植物組織培養(yǎng)工作之前，首先應對工作中需要哪些最基本的設備條件有個全面的了解，以便因地制宜地利用現(xiàn)有房屋，或新建、改建實驗室。實驗室的大小取決于工作的目的和規(guī)模。以工廠化生產(chǎn)為目的，實驗室規(guī)模太小，則會限制生產(chǎn)，影響效率。在設計組織培養(yǎng)實驗室時，應按組織培養(yǎng)程序來沒計，避免某些環(huán)節(jié)倒排，引起日后工作混亂。植物組織培養(yǎng)是在嚴格無菌的條件下進行的。要做到無菌的條件，需要一定的設備、器材和用具，同時還需要人工控制溫度、光照、濕度等培養(yǎng)條件。二、實驗室組成（一）基本實驗室基本實驗室包括準備室、洗滌滅菌室、無菌操作室、培養(yǎng)室、緩沖間，是組織培養(yǎng)實驗所必須具備的基本條件。如進行工廠化生產(chǎn)，年產(chǎn)4~20萬，需3~4間實驗用房。實驗室設計布局如下：1、準備室（化學實驗室）功能：又叫化學實驗室，進行一切與實驗有關(guān)的準備工作：完成所使用的各種藥品的貯備、稱量、溶解、器皿洗滌、培養(yǎng)基配制與分裝、培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿的滅菌、培養(yǎng)材料的預處理等。腐要求：最好手有20共m但2稻左右。要求頸寬敞明亮、構(gòu)以便于放置嘉多個實驗臺庸和相關(guān)設備板，方便多人或同時工作；涌同時要求通軋風條件好，采便于氣體交鄉(xiāng)換；實驗室且地面應便于陣清潔，并應員進行防滑處涼理。趙分體式-研成究抹性質(zhì)實驗室痰，堅分開的若干損房間將準備羅室分解為藥級品貯藏室、寶培養(yǎng)基配制濁與洗滌室和蹄滅菌室等，郵功能明確，傘便于管理，飽但不適于大睡規(guī)模生產(chǎn)。意通間式-規(guī)擱?；瘜嶒炇乙r，準備室一挺般設計成大冬的通間，使史試驗操作的圈各個環(huán)節(jié)在亦同一房間內(nèi)罷按程序完成神。準備試驗護的過程在同工一空間進行削，便于程序輪化操作與管禾理，試驗中瘦減少各環(huán)節(jié)吼間的銜接時習間，遇從而提高工芳作效率。此耗外還便于培駝養(yǎng)基配制、睡分裝和滅菌童的自動化操猴作程序設計沿，從娛而減少規(guī)模牙化生產(chǎn)的人踐工勞動，更海便于無菌條盤件的控制和蠟標準化操作督體系的建立技。頁設備：準備唐室應具備實澡驗臺、藥品寬柜、水池、團儀器、藥品錄、防塵櫥（騎放置培悠養(yǎng)容器）、竄冰箱、天平匠、蒸餾水器念、酸度計及炊常用的培養(yǎng)板基配制用玻仗璃儀器墾等。坊2、惹洗滌滅菌室碌功能：完成粘各種器具的乎洗滌、干燥欠、保存、培受養(yǎng)基的滅菌站等。柜要求：洗滌芽滅菌室根據(jù)席工作量的大坑小決定其大銳小，一般面喂積控制在船30日~喝50跟m妨2壺。在實濃驗室的一側(cè)射設置專用的毀洗滌水槽，東用來清洗玻荷璃器皿。中唱央實驗臺還胳應配置2郵個水跌槽，用于清碰洗小型玻璃筆器皿。如果樹工作量大，軌可以購置一己臺洗瓶機。恢準備冬1泳~斧2個洗液缸納，專門用于夏洗滌對潔凈擔度要求很高候的玻璃器皿月，地面應耐沖濕并排水雪良好。艙設備：水池括、落水架、給中央實驗臺盜、高壓滅菌長鍋、超聲波荒清洗器、干亞燥滅菌器施（如烘箱）餅等。賊3、無菌操規(guī)作室（接種爆室）竟功能：也叫僑接種室，主貨要用于植物晉材料的消毒細、接種、培灶養(yǎng)物的轉(zhuǎn)移斷、試管苗的田繼代、原生陜質(zhì)體的制備快以及一切需艦要進行無菌溝操作的技術(shù)巨程序，是植砌物離體培養(yǎng)喉研究或生產(chǎn)橋中最關(guān)鍵的揉一步。駕要求：接種盲室宜故小不宜大，算一般姻10件~補20伐m傘2噸即可，其規(guī)膝模根據(jù)實驗燦需要和環(huán)境深控制的難易摟程度稿而定。要求占封閉性好，遲干爽安靜，吳清潔明亮，折能較秒長時間保持歸無菌，因此襯不易設在容啦易受潮的地汗方；地面、呼天花板及四柏壁盡可能密豐閉光滑，易裕于清潔和消葵毒；配置拉駛動門，以減璃少開關(guān)門時歉的空氣擾動及；為便于消腐毒處理，地葬面及內(nèi)墻壁構(gòu)都應采用防裳水和耐腐蝕革材料；為了支保持清潔，免無菌室應防贏止空氣對流惡。接種室要誓求在適當位交置吊裝1垃~或2盞紫外線宣滅菌燈，用私以照射滅菌侵。最好安裝悉一小型空調(diào)悶，使室溫可灑控，這樣可脅使門窗緊閉腔，減少與外榨界空氣對流弄。污一般新建實大驗室的無菌的室在使用之謠前應進行嗎滅菌處理，椅處理方法是為甲醛和高錳倆酸鉀熏蒸，俊并需定期滅科菌處理，還眨可用紫外線邪照射凝1田~麗2h寬/騾周，或每次魂使用前照射健10荒~等30min繳。斑設備：紫外捧燈、空調(diào)、令解剖鏡、消繁毒器、酒精勁燈、接種器湊械（接種鑷紹子、剪刀、灘解剖刀、接蓬種針），實誤驗臺、和擱倦架，還有超低凈工作臺和案整套滅菌接燕種儀器、藥領品等。4、培養(yǎng)室討功能跌：對浸接種到培養(yǎng)能瓶等器皿中攪的植物離體饞材料進行控妙制條件下的朗培養(yǎng)，無論洲是研究性實局驗室還是生有產(chǎn)性實驗材革料進行培養(yǎng)倍的場所。烈要求：約需診10統(tǒng)~弟20托m漲2西左右，培養(yǎng)密室的大小可情根據(jù)需要培艘養(yǎng)架的大小核、數(shù)目、及愈其他附屬設吐備而定，其詳設計以充分帝利用鴉空間和節(jié)省東能源為原則崖?；疽笏悄軌蚩刂迫A光照和溫度憂，并保持相傅對的無菌環(huán)沿境，劍因此，培養(yǎng)向室應保持清淚潔和適度干襖燥；為滿足交植物培養(yǎng)材的料生長對氣奴體的需要，拆還應配安裝排風窗蝴和換氣扇等嘩培養(yǎng)室的換叨氣裝置；為喊節(jié)省能源和孟空間，應配夫置適宜的培氧養(yǎng)架，并安葬裝日光燈照煮明。寸研究用實驗甘室，通?？伤筛鶕?jù)光照時襪間設置成長飯日照、中日蝶照、短日照趟培養(yǎng)室，也滿可以根據(jù)溫帥度設置成缺高溫和低溫傲培養(yǎng)室，每澡一個培養(yǎng)室困的空間不宜眾過大，便于鈴對條件的均視勻控制。進頸行精細培養(yǎng)炭類型如細胞延培養(yǎng)和原生興質(zhì)體培養(yǎng)，剩可采用光照蓬培養(yǎng)箱或人容工氣候箱代閑替培養(yǎng)室。述為了控制培志養(yǎng)室的溫度恥和光照時帝間及其強度漆，培養(yǎng)室的塔房間不要窗第戶，但應當定留一個通氣序窗，并安上領排氣扇。室宵內(nèi)溫牛度由空調(diào)控勁制，光照由鼠日光燈控制滔。天花板和愉內(nèi)墻最好用儉塑料鋼板裝巾修，地面用志水磨出石或瓷磚鋪翠設，一般要罪分兩間，一弟為光照培養(yǎng)像室，一為暗倉培養(yǎng)室。培躬養(yǎng)室外應有凱一預備間或易走廊。套培養(yǎng)材料殖放在培養(yǎng)架晃上培養(yǎng)。培插養(yǎng)架大多由幻金屬制成，按一般設5層懶，最低一層殿離地高約予l初0仗cm，其他槍每層間隔3宣0cm左右雙，培養(yǎng)架即駁高1送.掏7m左右。慮培養(yǎng)架長度唐都是根據(jù)日索光燈的長度硬而設計，如造采用40W丈日光燈勵則長遞1.隊3m，籍采用殲30W記日光燈則智長lm，寬隱度一般為6達0cm。日花光燈一般用夠40W，固百定在培養(yǎng)架鑒的側(cè)面或擱珍板的下面，渾每層有兩支腔日光燈，距茫離在20c搞m，光照強烈度為撒2000鼻~開3000l峰x。可培養(yǎng)室最重給要的因子是撇溫度，一般魂保持在芽20稅~鄰27鏈℃枝左右，具備蠟產(chǎn)熱裝置，棵并安裝窗式暴或立式空調(diào)療機。由于熱報帶植物和寒喪帶植物等不治同種類要求朽不同溫度，山最好不荷同種類有不守同的培養(yǎng)室除。戒室內(nèi)濕度也徑要求恒定，冠相對濕度以測保持在70層%凱~音80%為好蒼，可安裝加黃濕器。控制釀光照時間可滋安裝定時開衰關(guān)鐘，一般甜需要每天光饑照彩10使~妙16h，也爸有的需要傭連續(xù)照明。滋短日照植物劈需要短日照召條件，長日勇照植物需要辱長日照條件以?，F(xiàn)代組培凈實驗室大多豆設計為采用飛天然太陽光壩照座作為主要能罪源，這樣不耀但可以節(jié)省晝能源，而且秀組培苗接受紅太陽光生長滲良好，馴化厚易成活。在分陰雨天可用愈燈光作補充忙。盆設備：培養(yǎng)算架（控溫控更光控濕）、唇搖床、轉(zhuǎn)床遇、自動控時證器、紫外燈準、光照培養(yǎng)慣箱或人工氣督候箱、生化載培養(yǎng)箱、邊抹臺實驗臺用距于拍攝培養(yǎng)同物生長狀況軋，除濕機、閑顯微鏡、溫娘濕度計、空田調(diào)等。5、緩沖間雕功能：是進價入無菌室前催的一個緩沖謹場地，減少莊人體從外界從帶入的塵埃迷等污染物。冬工作人員在鑒此換上工作便服、拖鞋，螺戴上口罩，撐才能進入無黎菌室和培養(yǎng)件室。進入無慕菌操作室前穿在此更衣?lián)Q汁鞋，以減少夫進出時帶入們接種室雜菌剪。捉要求：緩沖秧間需3陜~檔5婦m撞2石，可建在堂準備室外或觸無菌操作室矛外，應保持夏清潔無菌；報備有鞋架和煮衣帽掛鉤，戚并有清潔的御實驗用拖鞋您、已滅菌過婦的工作服；邊墻頂用執(zhí)1頸~恨2盞紫外燈穴定時照射，易對衣物進行榮滅菌。緩沖悲間最好也安輝一盞紫外線掛滅菌燈，用汽以照射滅菌脊。緩沖間的解門應該與接艙種室的門錯如開，兩個門矮也不要同時褲開啟剃，以保證無沿菌室不因開讀門和人的進伍出帶進雜菌勁。庸設備：努1終~運2盞紫外燈非、水槽、實火驗臺、鞋帽柜架、柜子、稻滅菌后的工屯作服、拖鞋盛、口罩。街（二）輔助原實驗室速根據(jù)研究或慧生產(chǎn)的需要蝴而配套設置諷的專門實驗搬室，主要用券于細胞學觀轉(zhuǎn)察和生理生跑化分析等。術(shù)1、細胞學曾實驗室果功能：用于瓜對培養(yǎng)物的診觀察分蠢析與培養(yǎng)物拜的計數(shù)，對耍培養(yǎng)材料進徹行細胞學鑒犧定和研究，和由制片室和團顯微觀察室葡組成。制片華是獲取顯微象觀察數(shù)據(jù)的割基礎，配備洞有切片機、渠磨刀機、溫太箱及樣品處進理和切片染套色的設備。矩應有通風櫥找和廢液處理辣設施。顯微于觀察室主要勝是顯微鏡和鉛圖像拍攝、悟處理設備。木要求：明亮罵、艙清潔、干燥巾、防止潮濕仔和灰塵污染劇。就設備：雙筒些實體顯微鏡版、顯微鏡、脂倒置顯微鏡粒等。宗2、生化分六析實驗室邀功能：培養(yǎng)哲細胞產(chǎn)物為稅主要目的的怕實驗室，應菠建立相應的陵分析化驗實勝驗室，隨時返對培養(yǎng)物成東分進行取樣艷檢查。大型前次生代謝物甜生產(chǎn)，還需嫩有效分離實躁驗室。殺三、儀器設圓備和器皿用素具壇（一氧）常規(guī)設備1、天平烈組織培養(yǎng)實凈驗室需要魔2疏~裝3臺不同精坑度的天平。紹感量0.0篇01g的天慘平（分析天抵平）和感量秩0.000瞞1g的天平瓜（電子天平櫻）用于稱量剩微量元素和果一些較高精扶確度的實驗悲用品。感量悠0.01g神和0.1g桂的天平，用格于大量元素凈母液配制和室一些用量較恭大的藥品的嫁稱量。2、冰箱藥各種維生素滋和激素類藥蟲品以及培養(yǎng)筍基母液均需剪低溫報存，約某些試驗還專需植物材料多進行低溫處公理，一般普辟通冰箱即可筑。3、酸度計悠用于測定培研養(yǎng)基及其它鋸溶液的pH拔，一般要求詞可測定pH映范圍暢1飛~騾14之間，樸精度0.0客1即可。4、離心機射用于細胞、敬原生質(zhì)體等伍活細母胞分離，亦撞用于培養(yǎng)細枝胞的細胞器去、核酸以及歲蛋白質(zhì)的分江離提取。根債據(jù)分離物質(zhì)剝不同配置不離同類型的離揭心機。細胞鞭、原生質(zhì)體露等活細胞的穿分離用低速減離心機；核甲酸、蛋白質(zhì)糟分離用高速色冷凍離心機紀；規(guī)?；a(chǎn)次生產(chǎn)物吳，還需選擇嶺大型離心分俯離系統(tǒng)。5、加熱器敲用于培養(yǎng)基掀的汪配制。研究令性實驗室一西般選用帶磁彎力攪拌功能堵的加熱器，墾規(guī)模化大型虎實驗室用大概功率加熱和定電動攪拌系習統(tǒng)。6、其它露純水器、分爺裝設備拿（二）滅菌素設備列維持相對得冠無菌環(huán)境是誓組織培養(yǎng)實匯驗室的基本未要求。欣1、高壓滅名菌鍋砌用于培養(yǎng)基馳、玻璃器皿俊以及其它可揪高溫滅菌用芒品的滅菌，筒根據(jù)規(guī)模大殺小有民手提式、立勤式、臥式等培不同規(guī)格。污2、干熱消桿毒柜教用于金屬工瞧具如鑷子、旺剪刀、解剖娘刀，以及玻蓬璃器皿的滅炭菌。一般選楚用200并℃夠左右的普通揚或遠紅外消婚毒柜。歲3、過濾滅衛(wèi)菌器亦用于一些酶手制劑、激素謙以及某些維賤生素等不能更高壓滅菌試圍劑的滅菌，門主要有真空鋸抽濾式和注略射侵器式。4、紫外燈拘方便經(jīng)濟的大控制無菌環(huán)輔境的裝置，貿(mào)緩沖間、接型種室和培養(yǎng)科室必備。蝦（三）無菌植操作設備1、接種箱侮是使用較早凍的最簡單的隊無菌裝置，風主體為玻璃愿箱罩、入口柜有袖罩，內(nèi)皇裝紫外燈和鋤日光燈，使策用時對無菌滴室要求較高背。聾2、凈化工專作臺舊其操作臺面攻是半開放區(qū)勝，具方便、捏操作舒些適優(yōu)點，通搖過過濾的空椒氣連續(xù)不斷非吹出，大于淘0.03楊μ撐m直徑的微停生物很難在棗工作臺的操漁作空間停留嚴，保持了較靠好的無菌環(huán)缸境。由于過傻濾器吸附微視生物，使用紡一段時間后飛過濾網(wǎng)易堵令塞，因此應旨定期更換。梅（四）培養(yǎng)板設備拍培養(yǎng)設備是蝦指根據(jù)需要之所選用的不奮同規(guī)格和控戒制精爭度的用于植盡物細胞、組瓜織和器官培誤養(yǎng)的設施和弄設備。1、培養(yǎng)架方目前所有植斑物組織培養(yǎng)廟實驗室植株事繁殖培養(yǎng)的技通用設施。借成本低、設域計靈活、可子充分利用培踏養(yǎng)空間，以許操作方便、茶最大限度利吃用培養(yǎng)空間建為原則。一系般有盛4各~市5層，層間姨間隔叫40嘗~訪50cm，來光照強度可跡根據(jù)培養(yǎng)植災物特性來確春定，一般每校架上配備2服~重4盞日光燈礦。2、培養(yǎng)箱庫細胞培養(yǎng)、模原生質(zhì)體培肝養(yǎng)等要求精享確培養(yǎng)的實攜驗，可用光單照培養(yǎng)箱、摘CO背2晚培養(yǎng)箱、濕躁度控制培養(yǎng)洲箱等培養(yǎng)。3、搖床消進行液體培氧養(yǎng)時，為改賴善通氣狀況稠，可用振蕩籃培養(yǎng)箱或搖糟床。釀4、生物反墊應器沃進行植物細駱胞生產(chǎn)次生陽產(chǎn)物的廈實驗室，還源需生物反應復器。幸（五）其他凱設備戲可安裝時間旨程序控制器杜、溫度控制豈系統(tǒng)或空調(diào)鑼；實體顯微屬鏡、倒置式搜生物顯微鏡興及配套的攝另影、錄像和往圖像處理設映備；電泳儀漲、萃取和層污析設備、紫密外分光光度塑計、高效液令相色譜儀、側(cè)氣相色譜儀煮、酶聯(lián)免疫筑測定系統(tǒng)。厭四、培養(yǎng)容辨器與用具墾培養(yǎng)容器指決盛早有培養(yǎng)基并遺提供培養(yǎng)物惜生長空間的丟無菌置，培岔養(yǎng)用具指培胃養(yǎng)物接種封意口所用的各壘種金屬或塑山料制品，實傅驗室必備。仇（一）培養(yǎng)卡容器念包括各種規(guī)叫格的培養(yǎng)皿脅、三角瓶、膝試管、培養(yǎng)準瓶。玻璃容女器，一般用煙無色并不