血細(xì)胞分析原理及白細(xì)胞散點(diǎn)圖臨床意義

血細(xì)胞分析儀原理及散點(diǎn)圖臨床應(yīng)用目前一頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)一、血細(xì)胞各通道分析原理及散點(diǎn)圖分析二、散點(diǎn)圖案例分析目前二頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)一、血細(xì)胞各通道分析原理及散點(diǎn)圖分析血細(xì)胞分析儀提供了大量的警示信息和可供參考的研究參數(shù)，如直方圖，DIFF散點(diǎn)圖，NRBC散點(diǎn)圖等。實(shí)驗(yàn)人員可根據(jù)這些信息從大量的標(biāo)本中挑出需要重點(diǎn)關(guān)注的,進(jìn)行涂片復(fù)檢確認(rèn)，提高工作效率，減少漏診率。目前三頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)DIFFWBC/BASONRBC半導(dǎo)體激光熒光染色（聚次甲基+噁嗪）主要原理FSC前向散射光：細(xì)胞大小SSC側(cè)向散射光：復(fù)雜程度（細(xì)胞的顆粒和細(xì)胞核等內(nèi)含物的信息）SFL側(cè)向熒光：核酸含量（DNA、RNA)目前四頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)DIFF通道分析原理4DL(陰離子表面活性劑）完全溶解RBC PLT在WBC膜上打孔溶血素中加入有機(jī)酸，與嗜酸粒細(xì)胞內(nèi)的堿性蛋白粘附，使Eo顆粒的復(fù)雜程度增加，在SSC顯示復(fù)雜程度是最大的。4DS對(duì)核酸染色縱坐標(biāo)：側(cè)向熒光（SFL）反映核酸含量橫坐標(biāo)：側(cè)向散射光（SSC）反映細(xì)胞內(nèi)部復(fù)雜程度化學(xué)粘附大分子有機(jī)酸與嗜酸粒細(xì)胞中的堿性顆粒發(fā)生化學(xué)粘附嗜酸粒細(xì)胞大分子有機(jī)酸目前五頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)RNA/DNA熒光染色原理成熟白細(xì)胞：高熒光特性網(wǎng)織紅細(xì)胞：弱熒光特性血小板：成熟RBC：原始細(xì)胞：幼稚細(xì)胞：微弱熒光特性無熒光特性極高熒光特性極高熒光特性目前六頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)熒光染色WBC分類的優(yōu)勢(shì)檢測(cè)異常細(xì)胞提供幼稚粒細(xì)胞信息（IG）提供原始細(xì)胞信息（Other）目前七頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)10S–FB溶血?jiǎng)ㄋ嵝?，低滲）溶解RBC PLT除嗜堿性粒細(xì)胞以外的白細(xì)胞處理成裸核形態(tài)Baso保持原狀縱坐標(biāo)：前向散射光（FSC）反映細(xì)胞大小橫坐標(biāo)：側(cè)向散射光（SSC）反映細(xì)胞內(nèi)部復(fù)雜程度嗜堿其它有核細(xì)胞嗜堿粒細(xì)胞溶血素為酸性低滲溶液，Baso內(nèi)的蛋白為酸性蛋白，因此在該溶液中受到保護(hù)，而其他有核細(xì)胞則被溶解成裸核WBC/BASO通道分析原理目前八頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)NRBC通道分析原理NR溶血?jiǎng)┩耆芙釸BC，PLTWBC保持原狀NRBC溶解為裸核NR染液對(duì)核酸染色縱坐標(biāo)：前向散射光（FSC）反映細(xì)胞大小橫坐標(biāo)：側(cè)向熒光（SFL）反映核酸含量NRBC%=NRBC#/

NRBC_WBC#目前九頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)出現(xiàn)有核紅時(shí)WBC的修正紅系增生活躍時(shí)，外周血易見較多的NRBC，在WBC計(jì)數(shù)時(shí)不被溶解，常被計(jì)入淋巴細(xì)胞中。目前十頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)WBC增多對(duì)RBC計(jì)數(shù)的干擾RBC：阻抗法RBC值含WBCWBC>100*109/L時(shí)，需校正紅系統(tǒng)參數(shù)貧血越嚴(yán)重，對(duì)RBC影響越大目前十一頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)血紅蛋白通道光電比色法SLS（十二烷基磺酸鈉）：無氰無毒目前十二頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)二、散點(diǎn)圖案例分析目前十三頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)嗜堿性粒細(xì)胞增多癥在BASO散點(diǎn)圖上，嗜堿區(qū)域出現(xiàn)大量散點(diǎn)，另外DIFF散點(diǎn)圖上，中性區(qū)域的左下方也為嗜堿區(qū)域，也出現(xiàn)了大量的散點(diǎn)。

BASO%：儀器13.4%鏡檢13.5%目前十四頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)AML-M1(例1)不可信DIFF散點(diǎn)圖顯示淋巴與單核之間融合，有分類結(jié)果，但不可信。IMI散點(diǎn)圖也提示大量原始細(xì)胞。鏡檢發(fā)現(xiàn)有77.5%的原始細(xì)胞。細(xì)胞表面標(biāo)志CD13和CD33陽性，CD36陰性；為急性髓細(xì)胞性白血病。目前十五頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)AML-M2DIFF散點(diǎn)圖顯示白細(xì)胞完全融合且不分類。IMI散點(diǎn)圖顯示大量原始細(xì)胞和幼稚粒細(xì)胞。NRBC散點(diǎn)圖：紅色散點(diǎn)鏡檢發(fā)現(xiàn)有90%的原始細(xì)胞、3%的早幼粒細(xì)胞哦、1%中幼粒細(xì)胞。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示細(xì)胞表面標(biāo)志CD13和CD33陽性，為髓細(xì)胞性白血病。目前十六頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)AML-M3DIFF散點(diǎn)圖顯示白細(xì)胞完全融合且不分類。IMI散點(diǎn)圖也顯示大量原始細(xì)胞和幼稚粒細(xì)胞。NRBC散點(diǎn)圖：紅色散點(diǎn)鏡檢發(fā)現(xiàn)3%的原始細(xì)胞，91%的早幼粒細(xì)胞、3.5%的中幼粒細(xì)胞，0.5%晚幼粒細(xì)胞。目前十七頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)AML-M4DIFF散點(diǎn)圖，白細(xì)胞區(qū)域出現(xiàn)大量灰白色散點(diǎn)，完全融合，不分類。大致分成兩群，一群為原始細(xì)胞，一群為幼稚粒細(xì)胞。IMI散點(diǎn)圖也顯示大量原始細(xì)胞和幼稚粒細(xì)胞。目前十八頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)AML-M5bDIFF散點(diǎn)圖淋巴與單核融為一體，不分類，IMI散點(diǎn)圖顯示大量原始細(xì)胞和幼稚粒細(xì)胞。鏡檢發(fā)現(xiàn)59%的原始細(xì)胞，0.5%的早幼粒細(xì)胞，單核細(xì)胞24.5%。目前十九頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)慢粒危象DIFF散點(diǎn)圖OTHER區(qū)域出現(xiàn)大量散點(diǎn)，中性粒細(xì)胞上方也有少量散點(diǎn)，IMI散點(diǎn)圖也出現(xiàn)大量紅色散點(diǎn)，儀器報(bào)警提示有大量原始細(xì)胞和幼稚粒細(xì)胞。NRBC散點(diǎn)圖：紅色散點(diǎn)鏡檢發(fā)現(xiàn)38.5%的原始細(xì)胞，幼稚粒細(xì)胞和幼稚的單核細(xì)胞。酯酶染色陰性或弱陽性，可被氟化鈉抑制。這是一例慢粒急單變。目前二十頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)MDSDIFF：淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞之間界限不清，提示出現(xiàn)原始細(xì)胞。中性粒細(xì)胞散點(diǎn)向左下方延伸到嗜堿區(qū)域。IMI：少量紅點(diǎn)NRBC：幼紅鏡檢：原始：1%，BASO：5%，NRBC：2.5/100WBC目前二十一頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)

范**，女，67y。2016.11，診斷為MDS伴原始細(xì)胞增多（10%）DIFF散點(diǎn)圖淋巴與單核區(qū)域融合，提示出現(xiàn)原始細(xì)胞報(bào)警提示異常淋巴細(xì)胞/原始細(xì)胞，異淋？鏡檢：47%原始淋巴細(xì)胞，未見異淋。血片POX（-）。

急淋變MDS急淋變目前二十二頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)急性T淋巴細(xì)胞白血病DIFF散點(diǎn)圖淋巴與單核完全融合，IMI散點(diǎn)圖幾乎沒有紅色散點(diǎn)，儀器提示異常淋巴/原始淋巴細(xì)胞。鏡檢發(fā)現(xiàn)有59.5%的異常淋巴細(xì)胞。本例被診為ATL。目前二十三頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)CLL淋巴與單核區(qū)域分界不清，儀器提示淋巴細(xì)胞增多/原始淋巴。

鏡檢：L：86.5%，幼淋2.0%目前二十四頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)異型淋巴細(xì)胞異型淋巴細(xì)胞增高與多種病毒感染及變態(tài)反應(yīng)有關(guān)。常見有：傳染性單核細(xì)胞增多癥、病毒性肺炎、病毒性肝炎、腎綜合征出血熱等病毒性感染。特點(diǎn)：胞體增大，胞質(zhì)增多、嗜堿性增強(qiáng)，細(xì)胞核母細(xì)胞化，熒光強(qiáng)度最強(qiáng)。目前二十五頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)散點(diǎn)圖特點(diǎn)：嗜酸性粒細(xì)胞群向中性粒細(xì)胞靠攏，間距小。原因：瘧原蟲裂殖體破裂，瘧色素從感染的血細(xì)胞中釋放出來，繼而被白細(xì)胞吞噬，吞噬了瘧色素的白細(xì)胞側(cè)向散射光強(qiáng)度改變，顯示在散點(diǎn)圖靠近中性粒細(xì)胞一側(cè)，但也被儀器以Eo特有的紅色標(biāo)示出來。張時(shí)民等.血細(xì)胞分析儀測(cè)定瘧原蟲感染患者特征二例.中華臨床醫(yī)師雜志，2011,5（2）:633-635瘧原蟲感染的散點(diǎn)圖（一）目前二十六頁\總數(shù)二十八頁\編于五點(diǎn)從儀器報(bào)警EO增高或無EO分類結(jié)果的1501份標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)有9份瘧原蟲標(biāo)本，6份散點(diǎn)圖表現(xiàn)為EO與NEG之間間距縮小(圖1)，3份報(bào)警白細(xì)胞散點(diǎn)圖異常,且散點(diǎn)圖顯示EO與NEG之間無間距(圖2)。其他1492份散點(diǎn)圖基本正常