分離土壤中分解尿酸的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)報(bào)告1300字

分離土壤中分解尿酸的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)報(bào)告1300字

分離土壤中分解尿素的細(xì)菌和計(jì)數(shù)制作：鄒霖1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簭耐寥乐蟹蛛x出能夠分解尿素的細(xì)菌，計(jì)數(shù)2.實(shí)驗(yàn)原理：A.培養(yǎng)基中加入唯一氮源--尿素，能分解尿素的細(xì)菌自身能夠合成脲酶，能夠分解利用尿素中的氮元素，從而能夠生存繁殖；不能分解尿素的細(xì)菌的繁殖受到抑制，從而達(dá)到分離出土壤中能分解尿素的細(xì)菌的作用。B.使用酚紅鑒定尿素是否被分解.CO(NH2)2分解產(chǎn)生NH3使溶液顯堿性.如果尿素被分解，則酚紅會(huì)顯紅色，C.分解原理.CO(NH2)2+H2O==脲酶==CO2+NH3D.稀釋涂布平板法.將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋濃度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。E.計(jì)數(shù)菌落，一個(gè)或幾個(gè)細(xì)菌可以繁殖為一個(gè)肉眼可見的菌落（計(jì)數(shù)結(jié)果低于實(shí)際細(xì)菌數(shù)）3.提出問題：尿素分解后NH3的產(chǎn)生是否會(huì)影響實(shí)驗(yàn)？4.做出假設(shè)：尿素分解后NH3的產(chǎn)生會(huì)影響實(shí)驗(yàn)。5.實(shí)驗(yàn)材料用具：超凈工作臺(tái)、取樣鏟、試管、錐形瓶、恒溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)皿、高壓蒸汽滅菌鍋、酒精燈、酒精、無菌水、地面以下3-8CM處的土壤、培養(yǎng)基A（磷酸二氫化鉀1.4g磷酸氫化二鈉2.1g七水合硫酸鎂0.2g葡萄糖10g尿素1g瓊脂15g）培養(yǎng)基B（牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基）涂布器、干熱滅菌箱、燒杯、膠頭滴管6.實(shí)驗(yàn)步驟：1.對(duì)實(shí)驗(yàn)用具消毒滅菌；按配方稱取上述物質(zhì)，將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000ml。2.配置好培養(yǎng)基后，將培養(yǎng)基A.B倒置都放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1d，取出后觀察是否產(chǎn)生了菌落，若無，則繼續(xù)下一步實(shí)驗(yàn)。若有，重做~~~~(>_<)~~~~3.系列稀釋：將分別盛有9ml水的5只試管和90ml水的1個(gè)錐形瓶滅菌，并按10~10的順序編號(hào)錐形瓶編號(hào)10。將10g符合條件的土壤放入錐形瓶中，震蕩錐形瓶，用移液管吸取1ml菌液，注入標(biāo)有10的試管中，用手輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸三次，使菌液與水充分混勻。以此類推，直到完成最后一只試管的稀釋。（注意：移液管需要經(jīng)過滅菌，操作時(shí)，試管口和移液管應(yīng)在離火焰1~2cm處）4.涂布平板：將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中，分別取10.10.10中的少量菌液，分別各滴加到3個(gè)培養(yǎng)基A（總計(jì)9個(gè)）的表面，注明培養(yǎng)基種類，培養(yǎng)日期以及平板上培養(yǎng)樣品的稀釋程度，取少量無菌水滴加到1個(gè)培養(yǎng)基中作為空白對(duì)照組，取少量菌液滴加到培養(yǎng)基B中（判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用），將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻8-10S。用涂布器將菌液均勻的涂布在每個(gè)培養(yǎng)基表面（每次涂布前都必須用酒精燈灼燒）涂布時(shí)可轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使菌液分布均勻。5.將培養(yǎng)基倒置并放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1-2d6.相同稀釋程度的3個(gè)培養(yǎng)基統(tǒng)計(jì)其菌落數(shù)（30-300）取平均值。7.實(shí)驗(yàn)結(jié)果：1.空白對(duì)照組無菌落。2.培養(yǎng)基B上的菌落數(shù)目多且種類多。3.培養(yǎng)基A8.實(shí)驗(yàn)結(jié)論：

第二篇：生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告5200字清華大學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告系別：機(jī)械工程系班號(hào)：機(jī)11姓名：潘霖（同組姓名：肖鶴翀胡志鵬）實(shí)驗(yàn)日期：20xx年9月25日微生物實(shí)驗(yàn)第一部分環(huán)境中微生物的檢測(cè)和分離純化一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?．學(xué)習(xí)并掌握無菌操作技術(shù)原理和方法。2．學(xué)習(xí)用稀釋涂布法分離微生物。3．認(rèn)識(shí)微生物存在的普遍性。二、實(shí)驗(yàn)原理（一）微生物的分離與純化：土壤是微生物生活的大本營，微生物數(shù)量和種類都極其豐富，因此可以從土壤中分離、純化得到許多有價(jià)值的菌株。微生物常用的分離純化方法是平板分離法。為了獲得某種微生物的純培養(yǎng)，一般根據(jù)不同微生物對(duì)營養(yǎng)、酸堿度、溫度好、氧等的條件要求的不同，供給它適宜的培養(yǎng)條件，或者加入某種抑制劑造成抑制其他菌生長而利于此菌生長的環(huán)境，從而淘汰雜菌，再用稀釋涂布平板法或稀釋后平板劃線分離，純化該微生物，得到純菌株。（二）平板菌落計(jì)數(shù)法：將待測(cè)樣品經(jīng)過適當(dāng)稀釋之后，使其中微生物盡量分散成單個(gè)細(xì)胞，接種到平板上，使之形成單菌落。通過統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)，根據(jù)稀釋倍數(shù)和取樣接種量即可換算出樣品中含菌個(gè)數(shù)。三、實(shí)驗(yàn)材料和儀器用具實(shí)驗(yàn)材料：（1）菌源：10g土壤（2）事先配置好的土壤稀釋液（稀釋倍數(shù)10^5）1ml（3）液態(tài)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（足夠倒?jié)M12個(gè)）實(shí)驗(yàn)儀器：取液器（100μl，若干），100μl無菌吸頭若干，培養(yǎng)皿（12個(gè)），無菌涂棒，培養(yǎng)箱，酒精燈，打火機(jī)，記號(hào)筆四、實(shí)驗(yàn)步驟（一）制作無菌平板將已經(jīng)準(zhǔn)備好的熱的液態(tài)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基用疊皿法均勻倒入滅菌處理過的12個(gè)培養(yǎng)皿中，使每個(gè)培養(yǎng)皿都有足夠的培養(yǎng)基且內(nèi)部培養(yǎng)基均勻分布，并且盡量不要讓培養(yǎng)基有剩余。操作需在酒精燈火焰邊的無菌環(huán)境下進(jìn)行，動(dòng)作要快，以免雜菌進(jìn)入。倒完后待培養(yǎng)皿冷卻凝固，然后倒置待用。（二）從土壤中分離微生物1.涂布：在酒精燈火焰邊的無菌環(huán)境中，用100μl的取液器吸取100μl的土壤稀釋液在平板上進(jìn)行涂布分離。注意每涂一次要轉(zhuǎn)動(dòng)一下培養(yǎng)皿換一個(gè)角度繼續(xù)涂，并使用滅過菌的無菌涂棒將加入的土壤稀釋液涂抹均勻，盡量使之分布均勻。2.培養(yǎng)：將涂布后的培養(yǎng)皿放入35℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，然后取出并觀察統(tǒng)計(jì)菌落個(gè)數(shù)。3.計(jì)數(shù)：同組同學(xué)分別觀察并統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)，相互對(duì)照后舍去離群值，計(jì)算出平均值。舍去有較大片菌苔生長的培養(yǎng)皿。若成片的菌苔大小不到培養(yǎng)皿的一半，其余一半分布均勻，則將分布均勻的一半計(jì)數(shù)后乘以2作為菌落數(shù)。（計(jì)數(shù)公式：土壤中的細(xì)菌含量（個(gè)/g）=菌落平均數(shù)*10*10^5）（三）周圍環(huán)境中微生物的檢測(cè)在牛肉膏蛋白胨平板上作如下實(shí)驗(yàn)：1·取一個(gè)平板，分成6個(gè)區(qū)域，做好標(biāo)記。同一個(gè)同學(xué)（潘霖）用同一指頭按如下要求用力一致均勻進(jìn)行實(shí)驗(yàn)：分別用未洗過的手指頭；用自來水打濕的手指頭；自來水認(rèn)真洗過的手指頭；用肥皂或洗手液洗過并沖洗干凈1遍的手指頭；用肥皂或洗手液洗過并沖洗干凈2遍的手指頭；肥皂洗后沖洗干凈并用75%酒精棉球擦過消毒后的手指頭。分別將以上手指在分好的六個(gè)區(qū)上涂抹（所有實(shí)驗(yàn)都不用毛巾擦）。2·取一個(gè)平板，分成4個(gè)區(qū)域，做好標(biāo)記。分別用未使用過的餐巾紙，舊紙幣，硬幣，學(xué)生卡在培養(yǎng)基上拖動(dòng)2~3次，確保物品均與培養(yǎng)基充分接觸。3·取一個(gè)平板，分區(qū)，用100μl取液器分別取100μl的自來水和河水分別涂布在平板上，并分別用滅菌過的涂棒涂抹均勻。4·取兩個(gè)平板，一個(gè)打開皿蓋，置實(shí)驗(yàn)臺(tái)上（空氣中）10min，另一個(gè)按無菌操作要求在酒精燈火焰邊打開皿蓋1min。5·取一個(gè)平板，打開皿蓋，對(duì)著培養(yǎng)基咳嗽（必須使口腔中噴出的氣流和飛沫落到培養(yǎng)基上）。6·取一個(gè)平板，將稍稍打開的嘴唇在培養(yǎng)基上壓一下，檢查嘴唇上的細(xì)菌。上述實(shí)驗(yàn)操作完成后，將培養(yǎng)皿放在35℃培養(yǎng)箱里培養(yǎng)24小時(shí)后觀察結(jié)果。五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果（一）從土壤中分離微生物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示，為培養(yǎng)24h后的結(jié)果。1培養(yǎng)基邊緣有白色菌落生長，有白色斑點(diǎn)狀菌落分布于培養(yǎng)基中2培養(yǎng)基邊緣有幾塊白色菌落，中央菌落呈白色，較集中分布。3培養(yǎng)基邊緣有大片白色菌落生長，有少數(shù)斑點(diǎn)狀白色菌落分布于培養(yǎng)基中，還有一塊較大白色的菌落群。事實(shí)上，三個(gè)平板的計(jì)數(shù)都有困難，最后計(jì)數(shù)結(jié)果是大概有40個(gè)左右菌落，換算后得土壤中微生物含量約為4*10^7個(gè)/g。（二）周圍環(huán)境中微生物檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)1沒洗過的手指頭涂抹過的區(qū)域有較多淡黃色菌落帶狀集中分布，自來水打濕過的手指頭涂抹過的區(qū)域有淡黃色斑點(diǎn)狀菌落分布，用自來水認(rèn)真洗過的手指頭涂抹過的區(qū)域有較多白色和淡黃色的菌落均勻分布，肥皂沖洗過一次的手指頭涂抹過的區(qū)域有白色菌落均勻分布，肥皂沖洗過兩次的手指頭涂抹過的區(qū)域有少量白色菌落均勻分布，用酒精棉擦拭過的手指頭涂抹過的區(qū)域有淡白色菌落帶狀分布。六、實(shí)驗(yàn)討論?你所取的土壤中細(xì)菌數(shù)量級(jí)為多少？約為4*10^7個(gè)/g。（不知道準(zhǔn)不準(zhǔn)）?從你周圍環(huán)境中微生物的觀察,你認(rèn)為無菌操作應(yīng)注意什么?從結(jié)果來看?說明飯前洗手,飯后刷牙的重要性;從實(shí)驗(yàn)的結(jié)果來看，無論是洗過還是沒洗過手接種后都會(huì)有菌落存在，但是很明顯，洗過手和用肥皂洗過手后細(xì)菌會(huì)少很多。因此從這個(gè)角度而言飯前洗手可以大大減少細(xì)菌的潛在的危害，是十分重要的。而飯后刷牙這一點(diǎn)，雖然我沒做過關(guān)于牙垢的實(shí)驗(yàn)，但可想而知，既然是牙垢，牙垢是殘留的食物，必然已經(jīng)有很多細(xì)菌在上面繁殖。如果飯后刷牙的話可以減少大多數(shù)牙垢，從這個(gè)角度將自然也大大減少了細(xì)菌的潛在危害。?在日常生活中如何講究飲食衛(wèi)生?首先自然要吃東西前洗手，吃東西后漱口或者刷牙，然后還要注意不要去不衛(wèi)生的地方吃東西，還有不要隨便把東西往嘴里面塞，因?yàn)榧?xì)菌無處不在。第二部分固定化酵母細(xì)胞發(fā)酵啤酒實(shí)驗(yàn)與酸奶制作一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.了解固定化細(xì)胞技術(shù)的方法和意義。2.了解酵母發(fā)酵產(chǎn)生啤酒的過程。3.學(xué)習(xí)酸奶制作方法。4.了解純種發(fā)酵和傳統(tǒng)發(fā)酵在無菌操作方面的差別。二、實(shí)驗(yàn)原理（一）啤酒發(fā)酵實(shí)驗(yàn)1.固定化技術(shù)固定化技術(shù)將生物酶或細(xì)胞固定在一定的基質(zhì)上，可以重復(fù)利用，從而提供酶或細(xì)胞的利用效率。本實(shí)驗(yàn)中采用包埋法把酵母細(xì)胞固定起來。酵母細(xì)胞在載體中能迅速增殖，單位體檢中的酵母數(shù)目比通常的液體高，并且增殖酵母都凝集在凝膠表面形成濃厚的菌體層，能迅速與基質(zhì)接觸，從而縮短周期提高啤酒產(chǎn)量。2．固定化技術(shù)生產(chǎn)啤酒固定化細(xì)胞能重復(fù)使用；發(fā)酵后菌體與發(fā)酵液易于分離；后處理工藝簡單，成本低；連續(xù)發(fā)酵,過程自動(dòng)化。（二）酸奶的制作實(shí)驗(yàn)1.常見酸乳產(chǎn)品：?凝固型酸奶發(fā)酵過程在包裝容器中進(jìn)行，從而使成品因發(fā)酵而保留了凝乳狀態(tài)。我國傳統(tǒng)的玻璃瓶和瓷瓶裝的酸奶即屬于此類型。?攪拌型酸奶將發(fā)酵后的凝乳在灌裝前或灌裝過程中攪碎，添加或不添加果料、果醬等制成具有一定黏度的奶油樣制品。?酸性乳飲料?發(fā)酵型酸乳飲料以鮮乳或乳制品為原料經(jīng)發(fā)酵，添加水和增稠劑等輔料，經(jīng)加工制成的產(chǎn)品。其中由于殺菌方式不同，可分為活性乳酸菌飲料和非活性乳酸菌飲料。?調(diào)配型酸乳飲料以鮮乳或乳制品為原料加入水、糖液、酸味劑等調(diào)制而成的制品，經(jīng)過滅菌處理，保質(zhì)期比乳酸菌飲料長。2.本實(shí)驗(yàn)中制作酸奶的原理：本實(shí)驗(yàn)制作的酸奶為凝固型酸奶。由于市售酸奶（攪拌型酸奶）是已經(jīng)發(fā)酵完成的酸奶，富含活性的乳酸菌，故可以直接取用作為發(fā)酵的菌種來源。實(shí)驗(yàn)中選取市售鮮牛奶作為材料，加入市售酸奶，經(jīng)過一段時(shí)間的發(fā)酵即可制作出凝固型酸奶。三、實(shí)驗(yàn)材料和儀器用具（一）啤酒發(fā)酵實(shí)驗(yàn)的材料用具1.啤酒酵母；2.發(fā)酵培養(yǎng)基：含100ml麥芽汁（8%~10%）的250ml三角瓶；3.滅菌后的2.5%海藻酸鈉溶液5ml；4.1.5%CaCl250ml,滅菌；5.0.9%無菌生理鹽水,50ml;6.無菌滴管;7.無菌封口膜封好的100ml三角瓶;（二）酸奶的制作實(shí)驗(yàn)的材料用具8.袋裝三元鮮牛奶9.酸奶菌種：市售光明酸奶10.煮沸和攪拌酸奶的鍋等設(shè)備11.一次性杯子（用于盛裝酸奶）若干，和封口用的白紙四、實(shí)驗(yàn)步驟（一）固定化酵母細(xì)胞發(fā)酵啤酒1.制備固定化酵母細(xì)胞凝膠：在5mL海藻酸鈉溶液中,加入2ml預(yù)熱至35oC的酵母培養(yǎng)液,混合均勻,以無菌滴管吸取混合液,滴管口離液面5cm以上,緩慢而穩(wěn)定滴加到CaCl2溶液中,即可得到直徑約3mm左右的凝膠珠;全部滴入.鈣化30min;2.利用固定化酵母進(jìn)行啤酒的發(fā)酵：（由于實(shí)驗(yàn)中沒有提供玻璃棒，我們采取的辦法是利用涂棒的另一頭在酒精燈火焰下消毒后充當(dāng)玻璃棒。）在“玻璃棒”的幫助下倒掉CaCl2溶液,倒生理鹽水于制得的固定化好的酵母細(xì)胞的瓶子中,把生理鹽水分成兩份，分兩次洗凝膠珠（個(gè)人覺得分兩次洗更干凈，且已經(jīng)征得助教和同組同學(xué)的同意），將100mL發(fā)酵培養(yǎng)基（麥芽汁）倒入制得的固定化小球的瓶子中,25℃靜止培養(yǎng)24小時(shí);4℃下放置于冰箱。3.品嘗啤酒。（若發(fā)酸或其他異味，證明實(shí)驗(yàn)失敗，請(qǐng)勿品嘗）（二）酸奶的制作1.取足量的鮮奶，在教授和助教的安排下，分成兩部分做兩組實(shí)驗(yàn)：第一組是對(duì)鮮奶攪拌煮沸消毒，第二組只進(jìn)行攪拌，并不煮沸消毒。兩組都加入等量白糖攪拌溶解。然后待煮沸的鮮奶冷卻后，兩組實(shí)驗(yàn)組都加入等量的光明酸奶按5%（體積分?jǐn)?shù)）的比例加入鮮牛奶中，攪拌均勻。2.每位同學(xué)取一個(gè)一次性杯子，按照各自喜好取用煮沸或未煮沸過的鮮牛奶一杯（當(dāng)然不同組的牛奶混在一起也可以），用白紙封口。3.把紙杯放在42℃條件下，靜置發(fā)酵培養(yǎng)10~12h，至變?yōu)椴涣鲃?dòng)的酸奶。然后置于4℃冰箱中保存。4.品嘗酸奶。五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果（以圖片展示為主）六、實(shí)驗(yàn)討論1.你釀制的啤酒和酸奶風(fēng)味如何？啤酒有甜味，入口有很輕微的點(diǎn)點(diǎn)澀，喝起來更像是米酒的味道酸奶口感很好，味道和市面上出售的差不多2.談?wù)劰潭ɑ?xì)胞技術(shù)的意義？固定化技術(shù)有以下優(yōu)點(diǎn)：固定化細(xì)胞能重復(fù)使用;發(fā)酵后菌體與發(fā)酵液易于分離;后處理工藝簡單,成本低;可連續(xù)發(fā)酵,過程自動(dòng)化。固定化技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)對(duì)菌體的多次利用，這樣可以極大地降低生產(chǎn)成本。例如使用包埋法固定酵母菌，由于細(xì)胞與載體不發(fā)生反應(yīng)，細(xì)胞可以處于最佳的生理狀態(tài)，這樣可以提高生產(chǎn)效率，在單位時(shí)間內(nèi)生產(chǎn)出更多的產(chǎn)品，同時(shí)有載體為屏障，可以避免外界的比例濃度，提高菌種的濃度，縮短生產(chǎn)周期，降低生產(chǎn)成本，提到產(chǎn)品產(chǎn)量。該技術(shù)既不需要把酶從細(xì)胞中提取出來,又不需要加以純化,因而酶活性損失小。有利于原料的可持續(xù)利用。研究和應(yīng)用表明,固定化微生物技術(shù)有微生物密度高、反應(yīng)速度快、耐毒害能力強(qiáng)、微生物流失少、產(chǎn)物分離容易、處理設(shè)備小型化等優(yōu)點(diǎn)。固定化微生物技術(shù)可應(yīng)用于環(huán)境污染治理方面的研究，如難處理的有機(jī)廢水及重金屬污染的廢水。3、純種發(fā)酵和傳統(tǒng)發(fā)酵在無菌操作方面的差別?純種發(fā)酵是在成分單一的發(fā)酵基質(zhì)中，僅接入一種微生物，通過對(duì)該微生物的培養(yǎng)，得到純度較高的單一性產(chǎn)物，因此對(duì)無菌要求比較高，對(duì)發(fā)酵設(shè)備和環(huán)境要求較高，要有嚴(yán)格的滅菌措施和空氣凈化系統(tǒng)。而傳統(tǒng)發(fā)酵是以成分復(fù)雜的谷物為原料，有多種微生物分泌的酶系參與，水解與發(fā)酵混合進(jìn)行，將原料成分轉(zhuǎn)化成多種風(fēng)味和營養(yǎng)物質(zhì)的過程，多采用開放式，對(duì)無菌操作的要求比較低，因?yàn)樵诓僮鬟^程中必然會(huì)有雜菌混入。4、為何有的同學(xué)無法制得凝膠珠而得到無規(guī)則的固體？從我們這組操作中出現(xiàn)的情況來看，如果滴海藻酸鈉溶液太快的話會(huì)導(dǎo)致凝固不完全，好幾滴凝聚在一起，就會(huì)得到無規(guī)則的固體。其他原因不清楚。5、在制作酸奶時(shí)，為什么要求使用“無抗奶”作為原料？因?yàn)闊o抗奶中不含抗菌素，對(duì)原味酸牛奶中的乳酸菌不會(huì)起到抑制殺滅作用，否則原味酸牛奶中的乳酸菌便不能繁殖進(jìn)行發(fā)酵，酸奶的制作便會(huì)失敗。6、談?wù)勀銓?duì)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的理解和感想.微生物實(shí)驗(yàn)以微生物為研究主體，作為微觀世界的重要研究手段，它為人類揭示了一個(gè)與宏觀世界同樣精彩的領(lǐng)域，電鏡下各種菌類豐富多彩的形態(tài)、肉眼不可見區(qū)域下蘊(yùn)藏的多彩世界等等無不吸引著人類對(duì)于微生物的興趣。通過微生物實(shí)驗(yàn)，我了解到身邊微生物無處不在，有好的有壞的，檢測(cè)周邊環(huán)境中的微生物實(shí)驗(yàn)提高了我的衛(wèi)生意識(shí)，要勤做清潔工作，而固體化酵母細(xì)胞發(fā)酵啤酒與酸奶制作則展現(xiàn)了微生物奇妙的作用，看到了它們給我們生活帶來便利的一面。＋分離土壤中分解尿酸的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)報(bào)告發(fā)表于：2023.1.1來自：字?jǐn)?shù)：1335手機(jī)看范文分離土壤中分解尿素的細(xì)菌和計(jì)數(shù)制作：鄒霖1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簭耐寥乐蟹蛛x出能夠分解尿素的細(xì)菌，計(jì)數(shù)2.實(shí)驗(yàn)原理：A.培養(yǎng)基中加入唯一氮源--尿素，能分解尿素的細(xì)菌自身能夠合成脲酶，能夠分解利用尿素中的氮元素，從而能夠生存繁殖；不能分解尿素的細(xì)菌的繁殖受到抑制，從而達(dá)到分離出土壤中能分解尿素的細(xì)菌的作用。B.使用酚紅鑒定尿素是否被分解.CO(NH2)2分解產(chǎn)生NH3使溶液顯堿性.如果尿素被分解，則酚紅會(huì)顯紅色，C.分解原理.CO(NH2)2+H2O==脲酶==CO2+NH3D.稀釋涂布平板法.將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋濃度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。E.計(jì)數(shù)菌落，一個(gè)或幾個(gè)細(xì)菌可以繁殖為一個(gè)肉眼可見的菌落（計(jì)數(shù)結(jié)果低于實(shí)際細(xì)菌數(shù)）3.提出問題：尿素分解后NH3的產(chǎn)生是否會(huì)影響實(shí)驗(yàn)？4.做出假設(shè)：尿素分解后NH3的產(chǎn)生會(huì)影響實(shí)驗(yàn)。5.實(shí)驗(yàn)材料用具：超凈工作臺(tái)、取樣鏟、試管、錐形瓶、恒溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)皿、高壓蒸汽滅菌鍋、酒精燈、酒精、無菌水、地面以下3-8CM處的土壤、培養(yǎng)基A（磷酸二氫化鉀1.4g磷酸氫化二鈉2.1g七水合硫酸鎂0.2g葡萄糖10g尿素1g瓊脂15g）培養(yǎng)基B（牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基）涂布器、干熱滅菌箱、燒杯、膠頭滴管6.實(shí)驗(yàn)步驟：1.對(duì)實(shí)驗(yàn)用具消毒滅菌；按配方稱取上述物質(zhì)，將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000ml。2.配置好培養(yǎng)基后，將培養(yǎng)基A.B倒置都放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1d，取出后觀察是否產(chǎn)生了菌落，若無，則繼續(xù)下一步實(shí)驗(yàn)。若有，重做~~~~(>_<)~~~~3.系列稀釋：將分別盛有9ml水的5只試管和90ml水的1個(gè)錐形瓶滅菌，并按10~10的順序編號(hào)錐形瓶編號(hào)10。將10g符合條件的土壤放入錐形瓶中，震蕩錐形瓶，用移液管吸取1ml菌液，注入標(biāo)有10的試管中，用手輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸三次，使菌液與水充分混勻。以此類推，直到完成最后一只試管的稀釋。（注意：移液管需要經(jīng)過滅菌，操作時(shí)，試管口和移液管應(yīng)在離火焰1~2cm處）4.涂布平板：將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中，分別取10.10.10中的少量菌液，分別各滴加到3個(gè)培養(yǎng)基A（總計(jì)9個(gè)）的表面，注明培養(yǎng)基種類，培養(yǎng)日期以及平板上培養(yǎng)樣品的稀釋程度，取少量無菌水滴加到1個(gè)培養(yǎng)基中作為空白對(duì)照組，取少量菌液滴加到培養(yǎng)基B中（判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用），將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻8-10S。用涂布器將菌液均勻的涂布在每個(gè)培養(yǎng)基表面（每次涂布前都必須用酒精燈灼燒）涂布時(shí)可轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使菌液分布均勻。5.將培養(yǎng)基倒置并放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1-2d6.相同稀釋程度的3個(gè)培養(yǎng)基統(tǒng)計(jì)其菌落數(shù)（30-300）取平均值。7.實(shí)驗(yàn)結(jié)果：1.空白對(duì)照組無菌落。2.培養(yǎng)基B上的菌落數(shù)目多且種類多。3.培養(yǎng)基A8.實(shí)驗(yàn)結(jié)論：

第二篇：生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告5200字清華大學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告系別：機(jī)械工程系班號(hào)：機(jī)11姓名：潘霖（同組姓名：肖鶴翀胡志鵬）實(shí)驗(yàn)日期：20xx年9月25日微生物實(shí)驗(yàn)第一部分環(huán)境中微生物的檢測(cè)和分離純化一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?．學(xué)習(xí)并掌握無菌操作技術(shù)原理和方法。2．學(xué)習(xí)用稀釋涂布法分離微生物。3．認(rèn)識(shí)微生物存在的普遍性。二、實(shí)驗(yàn)原理（一）微生物的分離與純化：土壤是微生物生活的大本營，微生物數(shù)量和種類都極其豐富，因此可以從土壤中分離、純化得到許多有價(jià)值的菌株。微生物常用的分離純化方法是平板分離法。為了獲得某種微生物的純培養(yǎng)，一般根據(jù)不同微生物對(duì)營養(yǎng)、酸堿度、溫度好、氧等的條件要求的不同，供給它適宜的培養(yǎng)條件，或者加入某種抑制劑造成抑制其他菌生長而利于此菌生長的環(huán)境，從而淘汰雜菌，再用稀釋涂布平板法或稀釋后平板劃線分離，純化該微生物，得到純菌株。（二）平板菌落計(jì)數(shù)法：將待測(cè)樣品經(jīng)過適當(dāng)稀釋之后，使其中微生物盡量分散成單個(gè)細(xì)胞，接種到平板上，使之形成單菌落。通過統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)，根據(jù)稀釋倍數(shù)和取樣接種量即可換算出樣品中含菌個(gè)數(shù)。三、實(shí)驗(yàn)材料和儀器用具實(shí)驗(yàn)材料：（1）菌源：10g土壤（2）事先配置好的土壤稀釋液（稀釋倍數(shù)10^5）1ml（3）液態(tài)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（足夠倒?jié)M12個(gè)）實(shí)驗(yàn)儀器：取液器（100μl，若干），100μl無菌吸頭若干，培養(yǎng)皿（12個(gè)），無菌涂棒，培養(yǎng)箱，酒精燈，打火機(jī)，記號(hào)筆四、實(shí)驗(yàn)步驟（一）制作無菌平板將已經(jīng)準(zhǔn)備好的熱的液態(tài)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基用疊皿法均勻倒入滅菌處理過的12個(gè)培養(yǎng)皿中，使每個(gè)培養(yǎng)皿都有足夠的培養(yǎng)基且內(nèi)部培養(yǎng)基均勻分布，并且盡量不要讓培養(yǎng)基有剩余。操作需在酒精燈火焰邊的無菌環(huán)境下進(jìn)行，動(dòng)作要快，以免雜菌進(jìn)入。倒完后待培養(yǎng)皿冷卻凝固，然后倒置待用。（二）從土壤中分離微生物1.涂布：在酒精燈火焰邊的無菌環(huán)境中，用100μl的取液器吸取100μl的土壤稀釋液在平板上進(jìn)行涂布分離。注意每涂一次要轉(zhuǎn)動(dòng)一下培養(yǎng)皿換一個(gè)角度繼續(xù)涂，并使用滅過菌的無菌涂棒將加入的土壤稀釋液涂抹均勻，盡量使之分布均勻。2.培養(yǎng)：將涂布后的培養(yǎng)皿放入35℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，然后取出并觀察統(tǒng)計(jì)菌落個(gè)數(shù)。3.計(jì)數(shù)：同組同學(xué)分別觀察并統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)，相互對(duì)照后舍去離群值，計(jì)算出平均值。舍去有較大片菌苔生長的培養(yǎng)皿。若成片的菌苔大小不到培養(yǎng)皿的一半，其余一半分布均勻，則將分布均勻的一半計(jì)數(shù)后乘以2作為菌落數(shù)。（計(jì)數(shù)公式：土壤中的細(xì)菌含量（個(gè)/g）=菌落平均數(shù)*10*10^5）（三）周圍環(huán)境中微生物的檢測(cè)在牛肉膏蛋白胨平板上作如下實(shí)驗(yàn)：1·取一個(gè)平板，分成6個(gè)區(qū)域，做好標(biāo)記。同一個(gè)同學(xué)（潘霖）用同一指頭按如下要求用力一致均勻進(jìn)行實(shí)驗(yàn)：分別用未洗過的手指頭；用自來水打濕的手指頭；自來水認(rèn)真洗過的手指頭；用肥皂或洗手液洗過并沖洗干凈1遍的手指頭；用肥皂或洗手液洗過并沖洗干凈2遍的手指頭；肥皂洗后沖洗干凈并用75%酒精棉球擦過消毒后的手指頭。分別將以上手指在分好的六個(gè)區(qū)上涂抹（所有實(shí)驗(yàn)都不用毛巾擦）。2·取一個(gè)平板，分成4個(gè)區(qū)域，做好標(biāo)記。分別用未使用過的餐巾紙，舊紙幣，硬幣，學(xué)生卡在培養(yǎng)基上拖動(dòng)2~3次，確保物品均與培養(yǎng)基充分接觸。3·取一個(gè)平板，分區(qū)，用100μl取液器分別取100μl的自來水和河水分別涂布在平板上，并分別用滅菌過的涂棒涂抹均勻。4·取兩個(gè)平板，一個(gè)打開皿蓋，置實(shí)驗(yàn)臺(tái)上（空氣中）10min，另一個(gè)按無菌操作要求在酒精燈火焰邊打開皿蓋1min。5·取一個(gè)平板，打開皿蓋，對(duì)著培養(yǎng)基咳嗽（必須使口腔中噴出的氣流和飛沫落到培養(yǎng)基上）。6·取一個(gè)平板，將稍稍打開的嘴唇在培養(yǎng)基上壓一下，檢查嘴唇上的細(xì)菌。上述實(shí)驗(yàn)操作完成后，將培養(yǎng)皿放在35℃培養(yǎng)箱里培養(yǎng)24小時(shí)后觀察結(jié)果。五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果（一）從土壤中分離微生物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示，為培養(yǎng)24h后的結(jié)果。1培養(yǎng)基邊緣有白色菌落生長，有白色斑點(diǎn)狀菌落分布于培養(yǎng)基中2培養(yǎng)基邊緣有幾塊白色菌落，中央菌落呈白色，較集中分布。3培養(yǎng)基邊緣有大片白色菌落生長，有少數(shù)斑點(diǎn)狀白色菌落分布于培養(yǎng)基中，還有一塊較大白色的菌落群。事實(shí)上，三個(gè)平板的計(jì)數(shù)都有困難，最后計(jì)數(shù)結(jié)果是大概有40個(gè)左右菌落，換算后得土壤中微生物含量約為4*10^7個(gè)/g。（二）周圍環(huán)境中微生物檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)1沒洗過的手指頭涂抹過的區(qū)域有較多淡黃色菌落帶狀集中分布，自來水打濕過的手指頭涂抹過的區(qū)域有淡黃色斑點(diǎn)狀菌落分布，用自來水認(rèn)真洗過的手指頭涂抹過的區(qū)域有較多白色和淡黃色的菌落均勻分布，肥皂沖洗過一次的手指頭涂抹過的區(qū)域有白色菌落均勻分布，肥皂沖洗過兩次的手指頭涂抹過的區(qū)域有少量白色菌落均勻分布，用酒精棉擦拭過的手指頭涂抹過的區(qū)域有淡白色菌落帶狀分布。六、實(shí)驗(yàn)討論?你所取的土壤中細(xì)菌數(shù)量級(jí)為多少？約為4*10^7個(gè)/g。（不知道準(zhǔn)不準(zhǔn)）?從你周圍環(huán)境中微生物的觀察,你認(rèn)為無菌操作應(yīng)注意什么?從結(jié)果來看?說明飯前洗手,飯后刷牙的重要性;從實(shí)驗(yàn)的結(jié)果來看，無論是洗過還是沒洗過手接種后都會(huì)有菌落存在，但是很明顯，洗過手和用肥皂洗過手后細(xì)菌會(huì)少很多。因此從這個(gè)角度而言飯前洗手可以大大減少細(xì)菌的潛在的危害，是十分重要的。而飯后刷牙這一點(diǎn)，雖然我沒做過關(guān)于牙垢的實(shí)驗(yàn)，但可想而知，既然是牙垢，牙垢是殘留的食物，必然已經(jīng)有很多細(xì)菌在上面繁殖。如果飯后刷牙的話可以減少大多數(shù)牙垢，從這個(gè)角度將自然也大大減少了細(xì)菌的潛在危害。?在日常生活中如何講究飲食衛(wèi)生?首先自然要吃東西前洗手，吃東西后漱口或者刷牙，然后還要注意不要去不衛(wèi)生的地方吃東西，還有不要隨便把東西往嘴里面塞，因?yàn)榧?xì)菌無處不在。第二部分固定化酵母細(xì)胞發(fā)酵啤酒實(shí)驗(yàn)與酸奶制作一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.了解固定化細(xì)胞技術(shù)的方法和意義。2.了解酵母發(fā)酵產(chǎn)生啤酒的過程。3.學(xué)習(xí)酸奶制作方法。4.了解純種發(fā)酵和傳統(tǒng)發(fā)酵在無菌操作方面的差別。二、實(shí)驗(yàn)原理（一）啤酒發(fā)酵實(shí)驗(yàn)1.固定化技術(shù)固定化技術(shù)將生物酶或細(xì)胞固定在一定的基質(zhì)上，可以重復(fù)利用，從而提供酶或細(xì)胞的利用效率。本實(shí)驗(yàn)中采用包埋法把酵母細(xì)胞固定起來。酵母細(xì)胞在載體中能迅速增殖，單位體檢中的酵母數(shù)目比通常的液體高，并且增殖酵母都凝集在凝膠表面形成濃厚的菌體層，能迅速與基質(zhì)接觸，從而縮短周期提高啤酒產(chǎn)量。2．固定化技術(shù)生產(chǎn)啤酒固定化細(xì)胞能重復(fù)使用；發(fā)酵后菌體與發(fā)酵液易于分離；后處理工藝簡單，成本低；連續(xù)發(fā)酵,過程自動(dòng)化。（二）酸奶的制作實(shí)驗(yàn)1.常見酸乳產(chǎn)品：?凝固型酸奶發(fā)酵過程在包裝容器中進(jìn)行，從而使成品因發(fā)酵而保留了凝乳狀態(tài)。我國傳統(tǒng)的玻璃瓶和瓷瓶裝的酸奶即屬于此類型。?攪拌型酸奶將發(fā)酵后的凝乳在灌裝前或灌裝過程中攪碎，添加或不添加果料、果醬等制成具有一定黏度的奶油樣制品。?酸性乳飲料?發(fā)酵型酸乳飲料以鮮乳或乳制品為原料經(jīng)發(fā)酵，添加水和增稠劑等輔料，經(jīng)加工制成的產(chǎn)品。其中由于殺菌方式不同，可分為活性乳酸菌飲料和非活性乳酸菌飲料。?調(diào)配型酸乳飲料以鮮乳或乳制品為原料加入水、糖液、酸味劑等調(diào)制而成的制品，經(jīng)過滅菌處理，保質(zhì)期比乳酸菌飲料長。2.本實(shí)驗(yàn)中制作酸奶的原理：本實(shí)驗(yàn)制作的酸奶為凝固型酸奶。由于市售酸奶（攪拌型酸奶）是已經(jīng)發(fā)酵完成的酸奶，富含活性的乳酸菌，故可以直接取用作為發(fā)酵的菌種來源。實(shí)驗(yàn)中選取市售鮮牛奶作為材料，加入市售酸奶，經(jīng)過一段時(shí)間的發(fā)酵即可制作出凝固型酸奶。三、實(shí)驗(yàn)材料和儀器用具（一）啤酒發(fā)酵實(shí)驗(yàn)的材料用具1.啤酒酵母；2.發(fā)酵培養(yǎng)基：含100ml麥芽汁（8%~10%）的250ml三角瓶；3.滅菌后的2.5%海藻酸鈉溶液5ml；4.1.5%CaCl250ml,滅菌；5.0.9%無菌生理鹽水,50ml;6.無菌滴管;7.無菌封口膜封好的100ml三角瓶;（二）酸奶的制作實(shí)驗(yàn)的材料用具8.袋裝三元鮮牛奶9.酸奶菌種：市售光明酸奶10.煮沸和攪拌酸奶的鍋等設(shè)備11.一次性杯子（用于盛裝酸奶）若干，和封口用的白紙四、實(shí)驗(yàn)步驟（一）固定化酵母細(xì)胞發(fā)酵啤酒1.制備固定化酵母細(xì)胞凝膠：在5mL海藻酸鈉溶液中,加入2ml預(yù)熱至35oC的酵母培養(yǎng)液,混合均勻,以無菌滴管吸取混合液,滴管口離液面5cm以上,緩慢而穩(wěn)定滴加到CaCl2溶液中,即可得到直徑約3mm左右的凝膠珠;全部滴入.鈣化30min;2.利用固定化酵母進(jìn)行啤酒的發(fā)酵：（由于實(shí)驗(yàn)中沒有提供玻璃棒，我們采取的辦法是利用涂棒的另一頭在酒精燈火焰下消毒后充當(dāng)玻璃棒。）在“玻璃棒”的幫助下倒掉CaCl2溶液,倒生理鹽水于制得的固定化好的酵母細(xì)胞的瓶子中,把生理鹽水分成兩份，分兩次洗凝膠珠（個(gè)人覺得分兩次洗更干凈，且已經(jīng)征得助教和同組同學(xué)的同意），將100mL發(fā)酵培養(yǎng)基（麥芽汁）倒入制得的固定化小球的瓶子中,25℃靜止培養(yǎng)24小時(shí);4℃下放置于冰箱。3.品嘗啤酒。（若發(fā)酸或其他異味，證明實(shí)驗(yàn)失敗，請(qǐng)勿品嘗）（二）酸奶的制作1.取足量的鮮奶，在教授和助教的安排下，分成兩部分做兩組實(shí)驗(yàn)：第一組是對(duì)鮮奶攪拌煮沸消毒，第二組只進(jìn)行攪拌，并不煮沸消毒。兩組都加入等量白糖攪拌溶解。然后待