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123室內(nèi)管理大棚管理大棚管理銷售室(大棚)最好有防蟲網(wǎng),加強(qiáng)肥水管理、殺(抑)菌劑處理,及溫濕度光照控制,確保植株健壯,4移栽組培苗移栽溫室(大棚),可調(diào)控溫度范圍20℃~28℃,相對(duì)濕度70%~90%、活動(dòng)遮光網(wǎng)。5培養(yǎng)瓶一般先用洗衣粉洗刷、再用自來(lái)水沖洗干凈。被細(xì)菌污染的培養(yǎng)瓶應(yīng)用含0.2%有效氯消毒液浸泡30min,被霉菌污染的培養(yǎng)瓶,需先整瓶進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,趁熱倒掉培養(yǎng)把各大類成分先配成母液,然后按需要加入各類物質(zhì),混合后倒入煮培養(yǎng)基的鍋中,加入少量的蒸餾水,加熱至固化劑(卡拉膠、瓊脂等)完全溶解后,用蒸餾水定容至所需的體積,用1mol/L的HCl溶液或1mol/L的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值后,趁熱把培養(yǎng)基分裝入培養(yǎng)瓶,擰緊瓶蓋。培養(yǎng)基制備后應(yīng)及時(shí)完成滅菌工序(按6.3.1濕熱滅菌)。母液+水+固化劑+糖→定容→調(diào)節(jié)pH值→加熱溶解%蔗糖+0.5%~0.7%瓊脂(或0.45%~0.6%卡拉膠),pH值為5.8±0.2。6.4.1用于防止微生物進(jìn)入動(dòng)植物組織或其它無(wú)菌范圍的操體消毒、接種,繼代增殖培養(yǎng)、生根壯苗培養(yǎng)的轉(zhuǎn)66.4.2操作間消毒:每次操作前把培養(yǎng)基、工具等在接種室擺放整齊,超凈工作臺(tái)臺(tái)面用75%酒精擦拭,然后打開超凈臺(tái)風(fēng)機(jī),打開紫外燈照射消毒30min。6.4.3準(zhǔn)備:進(jìn)入操作間前,操作人員要洗手、穿白大褂、換鞋、戴帽、戴口罩,接種母瓶用75%酒6.4.4操作:操作人操作前用酒精棉球擦拭雙手,接種工具用酒瓶瓶蓋,用鑷子將需要接轉(zhuǎn)的材料取出后放在已滅菌的墊盤(紙)上,用鑷子和手術(shù)刀(剪刀)將材每次操作完畢后及時(shí)蓋上瓶蓋,接種工具每轉(zhuǎn)接一瓶母瓶均需重新灼燒,同時(shí)更換墊盤(紙)?!僮鲬?yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行,金屬器械燒灼時(shí)間不能太長(zhǎng),以免退火,冷卻后才能夾取接——不得在已滅菌的墊盤(紙)上方(前)打開瓶蓋,帶菌的材料、器皿、手等也不要在已滅菌的墊盤(紙)上方經(jīng)過(guò)?!荒苡檬种苯咏佑|已消毒器皿的工作部分及接種材料,工作臺(tái)面上用品——瓶子開口后要盡量保持約45℃斜位?!僮髌陂g不能說(shuō)話、走動(dòng)和咳嗽等?!臃N完畢,需清理工作臺(tái),打開紫外燈消毒30min。選擇具有品種典型性狀,生長(zhǎng)健壯、形態(tài)正常、花色正常、花序大小正常、無(wú)畸變、健康無(wú)病蟲害的母株,用帶有側(cè)芽的莖段與莖尖為外植體。不建議使用葉片材料取回后,小心剝?nèi)ネ鈱尤~片,盛放于超凈工作臺(tái)上的無(wú)菌容器(燒杯、玻璃瓶等)盛放,先用75%酒精清洗10s~30s,無(wú)菌水沖洗1~2次,再用0.1%HgC12浸泡3min~10min,必要時(shí)加入2~3滴吐溫-20(或吐溫-80),浸泡時(shí)要不斷搖動(dòng)容器,無(wú)菌水沖洗5次~10次,根據(jù)材料老嫩及污染程溫度26℃±2℃,先暗培養(yǎng)5d~15d,然后光照強(qiáng)度為10001x~15001x,光照時(shí)間10h/d。外植體誘導(dǎo)培養(yǎng)30d~60d后,可誘導(dǎo)腋芽或莖尖的萌發(fā)與膨大,并在基部產(chǎn)生愈傷組織,繼代時(shí)須將愈培養(yǎng)條件:溫度26℃±2℃,光照強(qiáng)度,10001x~15001x,光照時(shí)間12h/d。7.1將誘導(dǎo)培養(yǎng)或增殖培養(yǎng)形成的叢生芽,切割為3~5塊不帶愈傷組織的叢芽切塊,轉(zhuǎn)接到繼代增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng),每瓶5~8塊。幾次繼代增殖可用較高的激素濃度,但繼代增殖4次~5次后應(yīng)逐漸降低激素濃度,繼代增殖8次~10次后,如果叢生芽較多、較弱,可轉(zhuǎn)至無(wú)激素的培養(yǎng)基復(fù)壯,再轉(zhuǎn)至含激素培.4繼代增殖培養(yǎng)代數(shù)控制在15代以內(nèi),增殖系數(shù)控制在2.5~5.0。培養(yǎng)條件:溫度26℃±2℃,光照強(qiáng)度,10001x~20001x,光照時(shí)間14h/d。方法將增殖的叢生芽切割為單芽,接種到壯苗、生根培養(yǎng)基中,每瓶10苗,培養(yǎng)30d~60d,待長(zhǎng)出根系后即可出瓶假植,也可將叢芽切為帶4~6個(gè)芽的芽塊,每瓶4~6塊,壯苗后直接6.6組培苗的大棚管理移栽大棚遮光70%~90%,溫度20℃~28℃,相對(duì)濕度大于80%。組培苗長(zhǎng)出新根后,放置在光線充足的環(huán)境下(光強(qiáng)約30001x~50001x)煉苗3d~7d,小心從瓶?jī)?nèi)取出試管苗,用清水清洗干凈附著的培養(yǎng)基,清洗時(shí)盡量減少對(duì)根系和葉片的傷害,之后直接移栽,或用0.1%~0.2%的高錳酸鉀或多菌靈等殺菌劑溶液浸洗,然后用清水清洗后移栽在含泥炭、珍珠巖、砂(10:1:1)等混合基質(zhì)的育苗盤(30cm×50cm)或105孔穴盤中。栽后用噴霧器淋透水。6.6.3篩苗(穴盤苗)栽培管理剛移栽的小苗需遮光90%、保濕,20d后光照可適當(dāng)提高,基質(zhì)水分保持干濕交潛,當(dāng)小苗開始長(zhǎng)出新根、新葉后,可噴施鳳梨專用葉面肥,葉面肥N、P、K比例為2:1:1,濃度0.1%,培育2個(gè)月~又稱二次移苗,當(dāng)鳳梨組培苗移栽成活生長(zhǎng)至3cm~6cm高時(shí),

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