實(shí)驗(yàn)六、藥物的利尿作用

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【目的】學(xué)習(xí)利尿藥的試驗(yàn)辦法，觀看利尿藥對(duì)水、電解質(zhì)排泄的影響，把握其作用機(jī)制。

【原理】呋塞米作用于髓袢升支粗段，與腔膜側(cè)K-Na-2Cl同向轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的Cl結(jié)合部位結(jié)合，阻礙同向轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)，干擾NaCl的重汲取，使官腔液中的NaCl濃度增強(qiáng)，凈水生成削減，尿的稀釋功能受到抑制。同時(shí)因NaCl向間質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)削減，使腎髓質(zhì)間液滲透壓梯度降低，導(dǎo)致尿液流經(jīng)結(jié)合管時(shí)，水的重汲取削減，影響尿的濃縮過程，排出大量近等滲尿液。

【試驗(yàn)流程】

1、麻醉家兔，保留靜脈通道，并插入導(dǎo)尿管。

2、注射生理鹽水，并收集尿液，作為用藥前尿液。

3、賦予呋塞米，收集尿液，作為給藥后尿液。

4、比色法測(cè)定Na+濃度，并計(jì)算Na+總量。

【試驗(yàn)材料】雄性家兔，3%戊巴比妥鈉，1%呋塞米，0.9%氯化鈉，2ml、20ml注射器，50ml燒杯，導(dǎo)尿管，10ml量筒。

【試驗(yàn)辦法】取家兔1只，稱重，用3%戊巴比妥鈉1ml/kg經(jīng)耳緣靜脈注射麻醉，保留靜脈通道。背位固定家兔，插入導(dǎo)尿管并固定。按壓膀胱，棄去

5分鐘尿液。緩慢靜脈注射生理鹽水10ml/kg，呋塞米0.5ml/kg，觀看并記錄各藥給藥前、后30min尿量。同時(shí)可根據(jù)下述辦法測(cè)定尿液中Na+含量。

【試驗(yàn)結(jié)果】將試驗(yàn)結(jié)果填入下表：

表1呋塞米對(duì)家兔尿量和尿鈉的影響

藥物尿液量(ml)鈉濃度（mg/ml）鈉總量(mg)

生理鹽水

1%呋塞米

附：尿Na+含量測(cè)定辦法

【原理】用無水乙醇沉淀尿中蛋白得無蛋白尿?yàn)V液，其中鈉與焦性銻酸鉀作用生成焦性銻酸鈉沉淀，與標(biāo)準(zhǔn)管比較求其Na+濃度。

化學(xué)反應(yīng)式如下：NaCl+K[Sb(OH)6]→Na[Sb(OH)6]+KCl

【藥品】

1.鈉標(biāo)準(zhǔn)液(1ml=0.15mg)：取0.3815g氯化鈉加水50ml溶解，再以無水

乙醇加至100ml，充分混勻后備用。

2.無水乙醇。

3.2%焦性銻酸鉀：取焦性銻酸鉀10g,溶于500mL蒸餾水中，煮沸3～5min，用冷水冷卻，加10%氫氧化鉀15ml，過濾后保存于棕色玻璃瓶中備用。

【辦法】取尿0.1ml加無水乙醇1.9ml，置于離心管中，用力振搖后放置10min,2500rpm離心5min，取上清液按下表程序操作。

表2尿鈉測(cè)定

試劑標(biāo)準(zhǔn)管測(cè)定管空白管

尿上清液0.5

蒸餾水0.5

鈉標(biāo)準(zhǔn)液0.5

2%焦性銻酸鉀5.05.05.0(單位：ml)

操作完畢后，混勻，用分光光度計(jì)在波長(zhǎng)520nm比色，以空白調(diào)零點(diǎn)，讀光密度值(OD520)。

【計(jì)算】鈉濃度(mg/ml)=(測(cè)定管OD520×0.075)/(標(biāo)準(zhǔn)管OD520×0.025)總鈉量=鈉(mg/ml)×30min內(nèi)尿量

【注重事項(xiàng)】

1.加無水乙醇后應(yīng)用力振搖，使快速沉淀，蛋白顆粒勻稱。

2.標(biāo)準(zhǔn)液