蝴蝶蘭組培過程的技術(shù)關(guān)鍵課件

蝴蝶蘭組培過程的技術(shù)關(guān)鍵

高級農(nóng)藝師張秀珊個(gè)人簡介本人于1995年6月畢業(yè)于華南農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝系果樹專業(yè)，同年7月份分配至廣東梅雁集團(tuán)股份有限公司工作，主要從事螺旋藻的養(yǎng)殖和產(chǎn)品開發(fā)，1998年認(rèn)定為助理農(nóng)藝師資格；1999年7月，由梅雁公司調(diào)入汕頭市農(nóng)科所工作。十年來，本人一直在農(nóng)科所生物中心，主要從事園藝植物組織培養(yǎng)和花卉選育種的研究和開發(fā)工作。2003年12月評定為農(nóng)藝師資格，2008年12月評定為高級農(nóng)藝師資格。前言

我所從事蝴蝶蘭組織培養(yǎng)的研究工作始于1996年。經(jīng)過十多年的努力，現(xiàn)已發(fā)展成為一個(gè)年產(chǎn)100多萬苗的蝴蝶蘭組培生產(chǎn)線，目前生產(chǎn)的蝴蝶蘭品種有幾十種，主要有:“滿天紅”、“汕農(nóng)紅皇后”、“汕農(nóng)姑娘”、“紅天鵝”、“內(nèi)山姑娘”、“新莎拉黃金”等優(yōu)良品種；同時(shí)，蝴蝶蘭組培技術(shù)在蝴蝶蘭的選育種、種質(zhì)保存等方面也發(fā)揮了重要作用。近幾年來，每年出圃的選育種中間材料有3萬多苗，保存的品種資源有幾百個(gè)。今天，本人主要結(jié)合自己十年來在蝴蝶蘭組培工作方面的一些實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，與大家共同探討蝴蝶蘭組培過程的主要技術(shù)措施或一些需要注意的問題，以求推動我所蝴蝶蘭的組培工作更好、更快地發(fā)展。一、培養(yǎng)基的研究和配制1．在蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)中，培養(yǎng)基的種類與成分是決定組培成功與否的關(guān)鍵因素之一。蝴蝶蘭不同品種、不同培養(yǎng)材料或不同的生長階段對培養(yǎng)基的要求都不同，因此，培養(yǎng)基的研究和選擇是一個(gè)非常關(guān)鍵的基礎(chǔ)性工作，也是蝴蝶蘭組培生產(chǎn)中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。2．在培養(yǎng)基的配制過程中，要保證所使用的各種試劑或原材料的穩(wěn)定性（如不使用過期的試劑，不使用變質(zhì)的椰子汁、香蕉等原材料）。3．在培養(yǎng)基的配制過程中，要保證各種稱量的準(zhǔn)確性。二、外植體的選擇和消毒1．外植體的選擇除培養(yǎng)基成分外，決定蝴蝶蘭組培成敗的另一個(gè)重要因素就是外植體的來源。雖然從理論上講，植物細(xì)胞都具有全能性，能夠再生新植株，因此任何器官、任何組織，都可以作為外植體。但實(shí)際上，蝴蝶蘭的不同器官之間的分化能力有巨大差別，因此選擇合適的外植體就顯得尤為重要。①蝴蝶蘭的組培外植體主要有葉片、花梗腋芽、花梗節(jié)間、莖尖、根尖等，其中花梗腋芽是蝴蝶蘭組培的最佳外植體，也是目前利用最廣泛的。②在選擇外植體時(shí)，應(yīng)先選擇生長健壯、無病蟲害、不變異的母株。③在采取外植體前，對母株進(jìn)行采前預(yù)處理（在采前5-7天，用殺菌劑噴灑母株），可有效預(yù)防和降低內(nèi)源性污染，提高誘導(dǎo)的成功率。④外植體的最佳成熟度：葉片：葉齡3-5天花梗腋芽：第一朵花現(xiàn)蕾時(shí)莖尖或根尖：無菌苗或株齡40天內(nèi)的植株2．外植體的消毒

無菌的外植體材料是蝴蝶蘭組培成功的重要前提和根本保證，而消毒是獲得無菌外植體的有效方法，它通過一些表面消毒劑來殺死外植體表面的微生物，又盡可能保持外植體的生命力。因此，消毒處理是蝴蝶蘭組培工作中的重要一環(huán)。常用的消毒劑：0.1%的升汞溶液（HgCl2），成本很低，但不環(huán)保，使用安全性較差，同時(shí)易殘留，容易對外植體產(chǎn)生毒害作用）、10%次氯酸鈉溶液（NaClO，環(huán)保，使用安全，不殘留，但成本較高）。消毒方法（以花梗腋芽為例）：將取回的花梗用75%的酒精棉花擦干凈表面的灰塵、殘留的農(nóng)藥、肥料、部分細(xì)菌、真菌等→將花梗剪成長4CM左右的花梗段（腋芽上下各2CM左右）→剝?nèi)ヒ秆客獾陌诔瑑艄ぷ髋_上用0.1%升汞溶液（或10%次氯酸鈉溶液）消毒13-20分鐘→用無菌水清洗5-6次。注意事項(xiàng)：消毒時(shí)間因外植體的種類或成熟度不同而不同。四、外植體的培養(yǎng)1．培養(yǎng)環(huán)境的控制2．增殖率的控制：主要靠激素調(diào)節(jié)3．繼代培養(yǎng)次數(shù)的控制：蝴蝶蘭大多數(shù)品種培養(yǎng)材料在組培過程中會隨著繼代培養(yǎng)次數(shù)的增加而逐漸衰退，主要表