第二章蛋白質(zhì)化學(xué)氨基酸

第二章蛋白質(zhì)化學(xué)氨基酸第1頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一第二章蛋白質(zhì)（Proteins）第2頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一第3頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一Firefliesemitlightcatalyzedbyluciferase（熒光素酶）withATPAfewexamplesonproteindiversity…第4頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一Erythrocytes（紅細(xì)胞）containalargeamountofhemoglobins（血紅蛋白）,theoxygen-transportingprotein.第5頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一Theproteinkeratin（角蛋白）isthechiefstructuralcomponentsofhair,horn,wool,nailsandfeathers.第6頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一第一節(jié)蛋白質(zhì)的分類蛋白質(zhì)是一類重要的生物大分子，英文名稱為protein，源自希臘文protos，是“最原初的”，“第一重要的”意思。漢譯為“蛋白質(zhì)”

。定義：蛋白質(zhì)是由20種α-氨基酸按一定順序通過肽鍵（酰胺鍵）縮合而成的具有一定特定空間構(gòu)象和生物功能的生物大分子。一、蛋白質(zhì)的化學(xué)概念第7頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一1、蛋白質(zhì)是生物體內(nèi)必不可少的重要成分，是構(gòu)成生物體最基本的結(jié)構(gòu)物質(zhì)和功能物質(zhì)

蛋白質(zhì)占干重人體中（中年人）

人體45%水55%

細(xì)菌50%～80%蛋白質(zhì)19%

真菌14%～52%脂肪19%

酵母菌14%～50%糖類＜1%

白地菌50%無機(jī)鹽7%二、蛋白質(zhì)的重要生物學(xué)功能第8頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一2、蛋白質(zhì)是一種生物功能的主要體現(xiàn)者，它參與了幾乎所有的生命活動(dòng)過程

生物催化作用：酶運(yùn)輸作用：如血紅蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白調(diào)節(jié)作用：如胰島素、生長激素運(yùn)動(dòng)作用：如肌動(dòng)蛋白和肌球蛋白防御功能：如免疫球蛋白、凝血因子營養(yǎng)功能：如卵清蛋白、酪蛋白結(jié)構(gòu)蛋白：如膠原蛋白、角蛋白能量轉(zhuǎn)換蛋白：如細(xì)胞色素基因調(diào)節(jié)蛋白：如阻遏蛋白3、外源蛋白質(zhì)有營養(yǎng)功能，可作為生產(chǎn)加工的對象。第9頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一三、蛋白質(zhì)的元素組成

主要有C、H、O、N和S。

有些蛋白質(zhì)含有少量磷或金屬元素鐵、銅、鋅、錳、鈷、鉬，個(gè)別蛋白質(zhì)還含有碘。這些元素在蛋白質(zhì)中的組成百分比如圖所示第10頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一各種蛋白質(zhì)的含氮量很接近，平均為16％。

由于體內(nèi)的含氮物質(zhì)以蛋白質(zhì)為主，因此，只要測定生物樣品中的含氮量，就可以根據(jù)以下公式推算出蛋白質(zhì)的大致含量：蛋白質(zhì)元素組成的特點(diǎn)第11頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一100克樣品中蛋白質(zhì)的含量(g%)=每克樣品含氮克數(shù)×6.25×1001/16%凱氏定氮法：第12頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一蛋白質(zhì)含量的測定：凱氏定氮法(測定氮的經(jīng)典方法)第13頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一第14頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一三聚氰胺（Melamine）分子量126.12。第15頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一

牛奶中總蛋白質(zhì)由大約94%的純蛋白質(zhì)（約3.1g/100g）和約6%非蛋白質(zhì)（約0.2g/100g）組成?？偟鞍踪|(zhì)平均含量為3.3%。第16頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一四、蛋白質(zhì)的分類（一）根據(jù)分子形狀1、球狀蛋白質(zhì)（globularprotein）：大多數(shù)可溶性蛋白質(zhì)，如血紅蛋白、肌紅蛋白等2、纖維狀蛋白質(zhì)（fibrousprotein）：膠原蛋白、彈性蛋白、絲狀蛋白等第17頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一（二）根據(jù)組成不同1、單純蛋白質(zhì)（simpleprotein）:也稱簡單蛋白質(zhì)，完全由氨基酸組成的蛋白質(zhì)。2、結(jié)合蛋白質(zhì)（conjugatedprotein）：也稱復(fù)合蛋白質(zhì)或全蛋白，由蛋白質(zhì)和非蛋白質(zhì)兩部分組成。包括色蛋白、金屬蛋白、磷蛋白、核蛋白、脂蛋白和糖蛋白。第18頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一（三）根據(jù)溶解度的不同1)清蛋白（albumin）：溶于水及稀鹽、稀酸或稀堿溶液。如血清清蛋白2)球蛋白（globulin）：不溶于水而溶于稀鹽溶液，如血清球蛋白。3）谷蛋白（glutelin）：不溶于水、醇及中性鹽溶液，但溶于稀酸、稀堿，如米谷蛋白。

4）谷醇溶蛋白（prolamine）：不溶于水，但溶于70%～80%乙醇，如玉米醇溶蛋白。

第19頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一（三）根據(jù)溶解度的不同6)魚精蛋白（protamine）：溶于水及稀酸溶液，分子中含堿性氨基酸特別多，呈（強(qiáng)）堿性，如鮭精蛋白。7)硬蛋白（scleroprotein）：不溶于水、鹽、稀酸、稀堿溶液。如膠原蛋白、角蛋白、絲心蛋白、彈性蛋白等。5)組蛋白（histone）：溶于水及稀酸溶液，分子中含Arg、Lys

較多，呈（弱）堿性，如小牛胸腺組蛋白。

第20頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一1）酶的生物催化作用(四)蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能第21頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一膜蛋白蛋白質(zhì)化學(xué)2）生物體的結(jié)構(gòu)成分第22頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一3）運(yùn)動(dòng)與支持機(jī)體的結(jié)構(gòu)蛋白：頭發(fā)、骨骼、牙齒、肌肉等第23頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一4）參與運(yùn)輸貯存的作用血紅蛋白——運(yùn)輸氧第24頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一5）免疫保護(hù)作用抗原抗體反應(yīng)凝血機(jī)制第25頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一6）參與細(xì)胞間信息傳遞信號傳導(dǎo)中的受體、信息分子等7）氧化供能第26頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一（五）根據(jù)營養(yǎng)價(jià)值不同1、完全蛋白：含有人體所必需的各種氨基酸2、不完全蛋白：缺乏人體所必需的某種氨基酸如大豆缺甲硫氨酸小麥缺賴氨酸玉米缺色氨酸第27頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一第二節(jié)蛋白質(zhì)的組成單位——氨基酸（AminoAcid)發(fā)現(xiàn)：1819年，法國化學(xué)家布拉孔諾從蛋白質(zhì)中水解得到一種含N化合物，其結(jié)構(gòu)中含有氨基和羧基，故取名為氨基酸?，F(xiàn)已證實(shí)氨基酸是蛋白質(zhì)的基本組成單位。什么是氨基酸？第28頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一氨基酸（aminoacid,aa)：蛋白質(zhì)的基本組成單位，是含氨基的羧酸。是羧酸分子中Cα上的一個(gè)H被氨基取代而成的化合物。什么是氨基酸？第29頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一R-COOHR-Cα

H

-COOHHR-C

α

H

-COOH

NH2----C-C-C-C-COOHγβα第30頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一蛋白質(zhì)氨基酸自然界中存在的氨基酸有300余種，但組成蛋白質(zhì)的有22種，稱為蛋白質(zhì)氨基酸，又名標(biāo)準(zhǔn)氨基酸，其中最早發(fā)現(xiàn)的20種較為常見，20種氨基酸中，第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的是Asn，是1806年在植物蘆筍中發(fā)現(xiàn)的；最后一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的是Thr，是1938年在小麥麩質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的。2種不常見的蛋白質(zhì)氨基酸：含硒半胱氨酸（第21種）和吡咯賴氨酸（第22種）第31頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一一、氨基酸的結(jié)構(gòu)氨基酸的結(jié)構(gòu)通式或氨基酸是含有氨基的羧酸，不同氨基酸的R基不同，（除脯氨酸外）都為L-α-氨基酸。第32頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一第33頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一構(gòu)型具有相同的分子式和結(jié)構(gòu)式，但原子在空間的排布不同，稱之構(gòu)型。2.α-氨基酸的構(gòu)型(configuration)第34頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一2.α-氨基酸的構(gòu)型一個(gè)有機(jī)化合物的構(gòu)型是由兩種結(jié)構(gòu)元素賦予的：一是分子中的雙鍵(doublebond)；二是分子中存在著手性中心（chiralcenter）第35頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一連接了四個(gè)不相同的原子或基團(tuán)，這種碳原子被稱為手性碳原子，又稱為不對稱碳原子，常用C*表示。會(huì)產(chǎn)生兩種構(gòu)型。它們彼此非常相象，但不能相互重迭，如同左手與右手或?qū)嵨锱c鏡象的關(guān)系。手性碳原子第36頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一第37頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一D-型L-型

H2N—Cα—HCOOHR氨基酸？甘油醛:2種構(gòu)型（D-，L-)第38頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一L-氨基酸D-氨基酸第39頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一氨基酸的構(gòu)型是以距羧基最近的手性C原子為標(biāo)準(zhǔn)（除Gly外），而糖的構(gòu)型是以距羧基最遠(yuǎn)的手性C原子為標(biāo)準(zhǔn)。注意：第40頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一H甘氨酸CH3丙氨酸L-氨基酸的通式R第41頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一二、氨基酸的分類1、根據(jù)側(cè)鏈R基團(tuán)的化學(xué)結(jié)構(gòu)（1）脂肪族氨基酸：Gly，Ala，Val，Leu，Ile，Met，Cys，Ser，Thr，Asp，Glu，Asn，Gln，Lys，Arg（2）芳香族氨基酸：Phe，Tyr，Trp（3）雜環(huán)氨基酸：His（4）雜環(huán)亞氨基酸：Pro第42頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一2、根據(jù)側(cè)鏈R基團(tuán)極性的不同（1）非極性疏水氨基酸：Gly，Ala，Val，Leu，Ile，Met，Phe，Pro，Trp（2）極性親水氨基酸：包括以下三種類型

中性（不帶電荷）：Ser，Thr，Asn，Gln，Tyr，Cys

酸性（帶負(fù)電荷）：Asp，Glu

堿性（帶正電荷）：His，Lys，Arg二、氨基酸的分類第43頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一詞記親水氨基酸與疏水氨基酸西湖景，紫竹為骨水潺潺橫笛相伴，閑聽天簌靜思禪

流蘇落，心比雙絲郁中纏

親水氨基酸：西-硒代半胱氨酸；景-精氨酸；竹-組氨酸；骨-谷氨酸谷氨酰胺；伴-半胱氨酸；天-天冬氨酸

天冬酰胺；籟-賴氨酸；蘇-蘇氨酸；落-酪氨酸；比-吡咯賴氨酸；絲-絲氨酸

孤雁本色，一行斜去浮生轉(zhuǎn)

兩鬢白，異家龍井難為甘

疏水氨基酸：本-苯丙氨酸；色-色氨酸；斜-纈氨酸；浮-脯氨酸；兩-亮氨酸；鬢-丙氨酸；異-異亮氨酸；家-甲硫氨酸；甘-甘氨酸詞作者：南大楊榮武教授第44頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一二、氨基酸的分類3、根據(jù)營養(yǎng)分類：（1）必需AA：依賴植物供給的AA，主要有Lys,Trp,Phe,Met,Thr,Ile,Leu,Val,另外，His和Arg，人雖然能合成，但效率低，所以有時(shí)也列在必需氨基酸中。，嬰兒時(shí)期所需:Arg，His

早產(chǎn)兒所需：Trp，Cys（2）非必需AA：人體可以自身合成或可以由其它氨基酸轉(zhuǎn)化的。*20種AA的英文名稱、縮寫符號及分類如下:第45頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一甘氨酸（Gly,

G）丙氨酸（Ala,

A）纈氨酸（Val,

V）亮氨酸（Lue,

L）異亮氨酸（Ile,

I）1.側(cè)鏈只是烴鏈（5種）

脂肪族氨基酸第46頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一2.側(cè)鏈含有羥基

（2種）絲氨酸（Ser,

S）蘇氨酸（Thr,

T）第47頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一3.側(cè)鏈含硫原子（2種）

半胱氨酸（Cys,

C）甲硫氨酸（Met,

M）巰基第48頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一4.側(cè)鏈含有羧基或酰胺基（4種）天冬氨酸（Asp,

D）谷氨酸（Glu,

E）天冬酰胺（Asn,

N）谷氨酰胺（Gln,

Q）第49頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一5.側(cè)鏈含有堿性基團(tuán)（3種）賴氨酸（Lys,

K）精氨酸（Arg,

R）組氨酸（His,

H）胍基咪唑基第50頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一芳香族氨基酸苯丙氨酸（Phe,

F）酪氨酸（Tyr,

Y）色氨酸（Trp,

W）第51頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一雜環(huán)氨基酸組氨酸（His,H）脯氨酸（Pro,P）第52頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一非極性氨基酸第53頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一極性中性氨基酸第54頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一帶正電荷的氨基酸(酸性)帶負(fù)電荷的氨基酸（堿性）第55頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一幾種特殊氨基酸

脯氨酸（亞氨基酸）第56頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一半胱氨酸：2個(gè)Cys通過脫氫后可以二硫鍵相結(jié)合，形成胱氨酸。

+胱氨酸二硫鍵-HH第57頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一三、蛋白質(zhì)中的修飾性AA在少數(shù)蛋白質(zhì)中分離出一些不常見的氨基酸，通常稱為不常見蛋白質(zhì)氨基酸。這些氨基酸都是在蛋白質(zhì)合成后由相應(yīng)的基本氨基酸衍生而來的，如彈性蛋白和膠原蛋白中的羥脯氨酸和羥賴氨酸等。第58頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一四、非蛋白質(zhì)氨基酸非蛋白質(zhì)AA：存在于生物體內(nèi)，但不組成蛋白質(zhì)的游離或結(jié)合態(tài)的AA，約150種，具有多種生理功能（1）L-α-氨基酸的衍生物

L-瓜氨酸和L-鳥氨酸是合成精氨酸的中間產(chǎn)物。（2）D-α-氨基酸

D-Ala存在于肽聚糖中，D-Phe是短桿菌肽S的組分（3）β、γ、δ-氨基酸

β-Ala是泛酸的前體，γ-氨基丁酸是傳遞神經(jīng)沖動(dòng)的化學(xué)介質(zhì)。

第59頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一五、AA的重要理化性質(zhì)狀態(tài)：無色晶體或粉末溶解性：各種氨基酸在水中的溶解度差別很大，一般能溶解于稀酸或稀堿中，但不能溶解于有機(jī)溶劑。熔點(diǎn)：極高，一般在200℃以上。味感：氨基酸的味感與其立體構(gòu)象有關(guān)。D-氨基酸多數(shù)帶有甜味。L-氨基酸有甜、苦、鮮、酸四種不同味感。如谷氨酸鈉—味精成分旋光性：除甘氨酸外，氨基酸都具有旋光性。（一）氨基酸的物理性質(zhì)第60頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一氨基酸的手性：D型與L型氨基酸22種蛋白質(zhì)氨基酸分子中，除了甘氨酸，均至少含有一個(gè)不對稱碳原子，因此除甘氨酸以外的21種蛋白質(zhì)氨基酸都具有手性性質(zhì)。如果以L型甘油醛為參照物，具有不對稱碳原子的氨基酸就有D型和L型兩種對映異構(gòu)體。實(shí)驗(yàn)證明，蛋白質(zhì)分子中的不對稱氨基酸都是L型。D型氨基酸僅存在于一些特殊的抗菌肽和某些細(xì)菌的細(xì)胞壁成分之中，它們不能參入到在核糖體上合成的多肽或蛋白質(zhì)分子之中。氨基酸的構(gòu)型與其旋光方向沒有必然的聯(lián)系。第61頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一第62頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一（二）紫外吸收性質(zhì)：只有芳香族氨基酸有紫外吸收能力Lambert-Beer定律紫外區(qū)（200—400nm）：Tyr/Trp/Phe

原因：-C=C-C=C-C=C-C=C-第63頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一第64頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一Trp280nmTyr275nmPhe257nm蛋白質(zhì)含量測定280nm第65頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一（三）化學(xué)性質(zhì)1、氨基酸的兩性性質(zhì)和等電點(diǎn)氨基酸是兩性電解質(zhì)，其解離方式和程度取決于所處溶液的酸堿度。(1)等電點(diǎn)(isoelectricpoint,pI)

在某一pH溶液中，氨基酸解離成陽離子和陰離子的趨勢及程度相等，成為兼性離子，呈電中性。此時(shí)溶液的pH值稱為該氨基酸的等電點(diǎn)。氨基酸等電點(diǎn)的特點(diǎn)：凈電荷為零，在電場中不移動(dòng)；此時(shí)氨基酸的溶解度最小。第66頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一pH=pI+OH-pH>pI+H++OH-+H+pH<pI氨基酸的兼性離子

陽離子陰離子第67頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一(2)等電點(diǎn)pI計(jì)算公式氨基酸的pI

是由α-羧基和α-氨基的解離常數(shù)的負(fù)對數(shù)決定的。對側(cè)鏈R基不解離的中性氨基酸來說：

pI=1/2（pK1+pK2)

pK1為α-羧基的解離常數(shù)

pK2為α-氨基的解離常數(shù)第68頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一中性氨基酸：以Gly為例K1=[Gly±][H+][Gly+]K2=[Gly-][H+][Gly±]pI時(shí)，[Gly+]=[Gly-][Gly±][H+]K1=[Gly±]K2[H+][H+]2=K1K2pH=（pK1+pK2）/2pI=（pK1+pK2）/2pI=（2.34+9.60）/2=5.97Gly第69頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一②酸性氨基酸的pI(Asp)第70頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一③堿性氨基酸的pI(Lys)第71頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一氨基酸的pI

酸性氨基酸：pI=(兩個(gè)小的pK值)/2

堿性氨基酸：pI=(兩個(gè)大的pK值)/2

側(cè)鏈不含離解基團(tuán)的中性氨基酸，其等電點(diǎn)是它的pK′1和pK′2的算術(shù)平均值；對于側(cè)鏈含有可解離基團(tuán)的氨基酸，其pI值也決定于兩性離子兩邊的pK′值的算術(shù)平均值。

中性氨基酸：pI=(pK′1+pK′2)/2

所以，等電點(diǎn)的pH與離子濃度無關(guān)，其值取決于兩性離子兩邊的pK值。處于等電點(diǎn)時(shí)的氨基酸溶解度最小，導(dǎo)電性最小，粘度、滲透性最小。第72頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一

在等電點(diǎn)以上的任何pH，氨基酸帶凈負(fù)電荷，在電場中將向正極移動(dòng)；結(jié)論：

在低于等電點(diǎn)的任何pH，氨基酸帶凈正電荷，在電場中將向負(fù)極移動(dòng)。

在一定pH范圍內(nèi)，氨基酸溶液的pH離等電點(diǎn)愈遠(yuǎn)，氨基酸所攜帶的凈電荷愈大。氨基酸的酸堿性質(zhì)第73頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一以弱酸HA為例，其解離常數(shù)為KaKa=[H+][A-]/[HA]兩邊取對數(shù)：lgKa=lg[H+]+lg([A-]/[HA])由于-lgKa=pKa所以pKa=pH-lg([A-]/[HA])=pH+lg([HA]/[A-])故溶液pH=pKa+lg([A-]/[HA])=pKa+lg(堿/共軛酸)[A-]和[HA]互為共軛酸堿對，即[A-]為[HA]的共軛堿，反過來，[HA]是[A-]的共軛酸，可以用來估算緩沖體系的pHHAA-+H+亨德森-哈塞爾巴爾赫(Henderson-Hasselbalchd)方程第74頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一例題：Gly的-NH3+有1/3解離時(shí)，溶液的pH值？pH=pK2+lg([Gly-]/[Gly0])pH=9.6+lg(1/2)pH=9.3第75頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一（三）AA的化學(xué)性質(zhì)氨基酸與茚三酮水合物共熱，可生成藍(lán)紫色化合物，其最大吸收峰在570nm處。由于此吸收峰值與氨基酸的含量存在正比關(guān)系，因此可作為氨基酸定量分析方法。2、氨基酸的化學(xué)反應(yīng)（1）茚三酮反應(yīng)與α-NH2、α-COOH和R側(cè)鏈基團(tuán)有關(guān)，多用于氨基酸分析鑒定。第76頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一茚三酮水合茚三酮第77頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一+3H20水合茚三酮(無色)NH3CO2RCHO+還原型茚三酮(弱酸)加熱水合茚三酮+NH3+還原型茚三酮

藍(lán)紫色化合物λmax=570nm第78頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一脯氨酸和羥脯氨酸與茚三酮反應(yīng)產(chǎn)生黃色物質(zhì)，其余所有的α-氨基酸與茚三酮反應(yīng)均產(chǎn)生藍(lán)紫色物質(zhì)。加熱黃色，λmax=440nm

第79頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一（2）與甲醛反應(yīng)：氨基酸的甲醛滴定OH-中和滴定NaOH羥甲基氨基酸二羥甲基氨基酸判斷蛋白質(zhì)水解或合成的進(jìn)度第80頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一第81頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一（3）與2,4二硝基氟苯(DNFB)反應(yīng)

氨基酸α-氨基的一個(gè)氫原子可被2,4二硝基氟苯（DNFB)取代，產(chǎn)生黃色的二硝基苯基氨基酸（DNP-氨基酸），可用乙酸乙酯或乙醚抽提，用于鑒定蛋白質(zhì)N-末端氨基酸。+弱堿中+F-第82頁，共90頁，2023年，2月20日，星期一

多肽或蛋白質(zhì)N端氨基酸的α-氨基也能與DNFB反應(yīng)，生成DNP-多肽或DNP-蛋白質(zhì)。后者用酸水