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文檔簡介
病毒感染的檢查方法和防治原則第1頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一第一節(jié)病毒感染的檢測方法一、病毒分離培養(yǎng)與鑒定:1.標(biāo)本的采集與運送(1)急性期標(biāo)本;(2)根據(jù)感染性質(zhì)取不同的標(biāo)本;(3)標(biāo)本置于轉(zhuǎn)運液中;(4)冷藏快運。第2頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一2.病毒的分離培養(yǎng)動物接種雞胚培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)原代細(xì)胞培養(yǎng)二倍體細(xì)胞株傳代細(xì)胞系第3頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一第4頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一絨毛尿囊膜痘病毒特異性損傷第5頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一(1)原代細(xì)胞培養(yǎng)動物或人組織直接用蛋白酶消化所得的細(xì)胞經(jīng)體外培養(yǎng)后可貼壁或懸浮生長;
(2)二倍體細(xì)胞株在體外連續(xù)培養(yǎng)50~60代仍保持其二倍染色體數(shù)目的單型細(xì)胞。為生產(chǎn)人用疫苗的首選細(xì)胞株。(3)傳代細(xì)胞系
能在體外連續(xù)傳代、來自癌細(xì)胞或發(fā)生自發(fā)轉(zhuǎn)化、突變的原代細(xì)胞或二倍體細(xì)胞株。第6頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一3.病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖的檢測與鑒定(1)細(xì)胞病變效應(yīng):cytopathiceffect,CPE
病毒感染宿主細(xì)胞后,細(xì)胞形態(tài)的變化,如細(xì)胞團(tuán)縮、腫大、融合等。第7頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一第8頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一第9頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一第10頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一NegriBody第11頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一第12頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一第13頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一*包涵體形成的觀察第14頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一(2)紅細(xì)胞吸附:
某些病毒感染的宿主細(xì)胞能吸附脊椎動物的紅細(xì)胞而發(fā)生血吸現(xiàn)象。(3)干擾現(xiàn)象:(4)病毒蛋白、核酸的檢測:第15頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一FigHSV熒光抗體法查抗原第16頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一4.病毒數(shù)量與感染性的測定蝕斑測定
plaqueformingunit/PFU50%組織細(xì)胞感染量50%tissuecultureinfectivedoseTCID50第17頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一TCID(50%tissuecultureinfectivedose):在半數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)板孔或試管內(nèi)引起細(xì)胞病變(CPE)的病毒量空斑試驗:在細(xì)胞培養(yǎng)表面覆蓋一層半固體物質(zhì)使細(xì)胞病變形成空斑第18頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一二、檢測病毒的基本組成蛋白抗原病毒核酸第19頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一第20頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一第21頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一PCRcycler第22頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一三、檢測機(jī)體的體液免疫應(yīng)答:1、單份血清檢測:IgMIgG2、雙份血清檢測:IgG恢復(fù)期/早期4:1第23頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一FigIdentificationofspecificIgMantibodybycaptureandELISA.第24頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一第二節(jié)病毒感染的防治原則
第25頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一一、抗病毒治療1.抗病毒藥物或制劑
核苷類藥物
阻抑子代病毒結(jié)構(gòu)基因的合成與表達(dá)。
病毒蛋白酶的抑制劑
阻止大分子病毒蛋白的降解。
其他:IFN、TNF、IL-2、中草藥等抑制病毒復(fù)制。
抗病毒基因治療:asODN、asON、ribozyme
策略:作用于病毒復(fù)制周期的不同環(huán)節(jié)2.免疫制劑第26頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一吸附擬受體制劑擬配體制劑中和抗體穿入金剛烷胺脫殼生物合成裝配、釋放核苷類似物干擾素反義技術(shù)等第27頁,共29頁,2023年,2月20日,星期一FigA)HIVattachtoaCD4receptor.B)Asolublesyntheticversionofthereceptor
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