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文檔簡介

分子生物學(xué)試題考博歷年考題復(fù)習(xí)題名詞解釋集錦最全

名詞解釋:斷裂基因、外顯子、內(nèi)含子、C值、C值矛盾、基因家族、基因簇、衛(wèi)星DNA、ORF、微衛(wèi)星DNA、反向重復(fù)序列、正鏈/負(fù)鏈RNA病毒、重疊基因、端粒酶、假基因、Alu家族、基因組學(xué)。

斷裂基因:在真核生物基因組中,基因是不連續(xù)的,在基因的編碼區(qū)域內(nèi)部含有大量的不編碼序列,從而打斷了對(duì)應(yīng)于蛋白質(zhì)的氨基酸序列。這種不連續(xù)的基因又稱斷裂基因或割裂基因。

外顯子:斷裂基因中編碼的序列稱為外顯子(exon),即基因中對(duì)應(yīng)于信使RNA序列的區(qū)域。

內(nèi)含子:斷裂基因中不編碼的間隔序列稱為內(nèi)含子(intron),內(nèi)含子是在信使RNA被轉(zhuǎn)錄后的剪接加工中去除的區(qū)域。

C值:生物種的一個(gè)特征是一個(gè)單倍體基因組的全部DNA含量總是相對(duì)恒定的。通常稱為該物種的C值。

C值矛盾:C-值矛盾(CValueParadox)是指真核生物中DNA含量的反?,F(xiàn)象。主要表現(xiàn)為:①C值不隨生物的進(jìn)化程度和復(fù)雜性而增加;②關(guān)系密切的生物C值相差甚大;③高等真核生物具有比用于遺傳高得多的C值。

基因家族:基因家族(genefamily)是真核生物基因組中來源相同,結(jié)構(gòu)相似,功能相關(guān)的一組基因。

基因簇:基因簇(genecluster)是指基因家族中的各成員緊密成簇排列成大段的串聯(lián)重復(fù)單位,定位于染色體的特殊區(qū)域。

衛(wèi)星DNA:有些高度重復(fù)DNA序列的堿基組成和浮力密度與主體DNA不同,在氯化銫密度梯度離心時(shí),可形成相對(duì)獨(dú)立于主DNA帶的衛(wèi)星帶。這些衛(wèi)星帶稱為衛(wèi)星DNA。

ORF:指核苷酸序列的可閱讀框。

微衛(wèi)星DNA:微衛(wèi)星DNA是由更簡單的重復(fù)單位組成的小序列,分散于基因組中,大多數(shù)重復(fù)單位是二核苷酸,也有少量三或四核苷酸的重復(fù)單位。

反向重復(fù)序列:在DNA分子中核苷酸順序相同、區(qū)向相反的核苷酸序列。如:

AGTTC…CGTTA

TAACG…GCAAT

正鏈/負(fù)鏈RNA病毒:所含核酸為RNA的病毒稱為RNA病毒。如果所含單戀核酸與mRNA序列相同稱之為正鏈RNA病毒,與mRNA序列互補(bǔ)稱之為負(fù)鏈RNA病毒。

重疊基因:基因的核苷酸序列被另外的基因以不同的方式重讀,編碼在結(jié)構(gòu)、功能屬于其他種類蛋白質(zhì)的基因。

端粒酶:是一種含有RNA鏈的逆轉(zhuǎn)錄酶,能以其所含的RNA為模板合成DNA端粒結(jié)構(gòu)。

假基因:與結(jié)構(gòu)基因的核苷酸順序大部分同源,但不能表達(dá)的基因。

Alu家族:人類和哺乳動(dòng)物基因組中存在的一大類中等重復(fù)序列,因其可被限制性核酸內(nèi)切酶AluⅠ切割所以稱之為Alu家族。

一、名詞解釋

1.cDNA與cccDNA:cDNA是由mRNA通過反轉(zhuǎn)錄酶合成的雙鏈DNA;cccDNA是游離于染色體之外的質(zhì)粒雙鏈閉合環(huán)形DNA。

2.標(biāo)準(zhǔn)折疊單位:蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)單元α-螺旋與β-折疊通過各種連接多肽可以組成特殊幾何排列的結(jié)構(gòu)塊,此種確定的折疊類型通常稱為超二級(jí)結(jié)構(gòu)。幾乎所有的三級(jí)結(jié)構(gòu)都可以用這些折疊類型,乃至他們的組合型來予以描述,因此又將其稱為標(biāo)準(zhǔn)折疊單位。

3.CAP:環(huán)腺苷酸(cAMP)受體蛋白CRP(cAMPreceptorprotein),cAMP與CRP結(jié)合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白CAP(cAMPactivatedprotein)

4.回文序列:DNA片段上的一段所具有的反向互補(bǔ)序列,常是限制性酶切位點(diǎn)。

5.micRNA:互補(bǔ)干擾RNA或稱反義RNA,與mRNA序列互補(bǔ),可抑制mRNA的翻譯。

6.核酶:具有催化活性的RNA,在RNA的剪接加工過程中起到自我催化的作用。

7.模體:蛋白質(zhì)分子空間結(jié)構(gòu)中存在著某些立體形狀和拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)頗為類似的局部區(qū)域

8.信號(hào)肽:在蛋白質(zhì)合成過程中N端有15~36個(gè)氨基酸殘基的肽段,引導(dǎo)蛋白質(zhì)的跨膜。

9.弱化子:在操縱區(qū)與結(jié)構(gòu)基因之間的一段可以終止轉(zhuǎn)錄作用的核苷酸序列。

10.魔斑:當(dāng)細(xì)菌生長過程中,遇到氨基酸全面缺乏時(shí),細(xì)菌將會(huì)產(chǎn)生一個(gè)應(yīng)急反應(yīng),停止全部基因的表達(dá)。產(chǎn)生這一應(yīng)急反應(yīng)的信號(hào)是鳥苷四磷酸(ppGpp)和鳥苷五磷酸(pppGpp)。PpGpp與pppGpp的作用不只是一個(gè)或幾個(gè)操縱子,而是影響一大批,所以稱他們是超級(jí)調(diào)控子或稱為魔斑。

11.上游啟動(dòng)子元件:是指對(duì)啟動(dòng)子的活性起到一種調(diào)節(jié)作用的DNA序列,-10區(qū)的TATA、-35區(qū)的TGACA及增強(qiáng)子,弱化子等。

12.DNA探針:是帶有標(biāo)記的一段已知序列DNA,用以檢測未知序列、篩選目的基因等方面廣泛應(yīng)用。

13.SD序列:是核糖體與mRNA結(jié)合序列,對(duì)翻譯起到調(diào)控作用。

14.單克隆抗體:只針對(duì)單一抗原決定簇起作用的抗體。

15.考斯質(zhì)粒:是經(jīng)過人工構(gòu)建的一種外源DNA載體,保留噬菌體兩端的COS區(qū),與質(zhì)粒連接構(gòu)成。

16.藍(lán)-白斑篩選:含LacZ基因(編碼β半乳糖苷酶)該酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)產(chǎn)生藍(lán)色,從而使菌株變藍(lán)。當(dāng)外源DNA插入后,LacZ基因不能表達(dá),菌株呈白色,以此來篩選重組細(xì)菌。稱之為藍(lán)-白斑篩選。

17.順式作用元件:在DNA中一段特殊的堿基序列,對(duì)基因的表達(dá)起到調(diào)控作用的基因元件。

18.Klenow酶:DNA聚合酶I大片段,只是從DNA聚合酶I全酶中去除了5’→3’外切酶活性

19.錨定PCR:用于擴(kuò)增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴,然后分別用多聚dC和已知的序列作為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增。

20.融合蛋白:真核蛋白的基因與外源基因連接,同時(shí)表達(dá)翻譯出的原基因蛋白與外源蛋白結(jié)合在一起所組成的蛋白質(zhì)。

1.中心法則(centraldogma):生物體遺傳信息流動(dòng)途徑。最初由Crick(1958)提出,經(jīng)后人的不斷補(bǔ)充和修改,現(xiàn)包括反轉(zhuǎn)錄和RNA復(fù)制等replication):親代雙鏈DNA以每條鏈為模板,按堿基配對(duì)原則各合成一條互補(bǔ)鏈,這樣一條親代DNA雙螺旋,形成兩條完全相同的子代DNA螺旋,子代DNA分子中都有一條合成的“新”鏈和一條來自親代的舊鏈,稱為半保留復(fù)制。

3.DNA聚合酶(DNApolymerase):指以脫氧核苷三磷酸為底物,按5’→3’方向合成DNA的一類酶,反應(yīng)條件:4種脫氧核苷三磷酸、Mg+、模板、引物。DNA聚合酶是多功能酶,除具有聚合作用外,還具有其它功能,不同DNA聚合酶所具有的功能不同。

4.解旋酶(helicase):是一類通過水解ATP提供能量,使DNA雙螺旋兩

條鏈分開的酶,每解開一對(duì)堿基,水解2分子ATP。

5.拓?fù)洚悩?gòu)酶(topoisomerase):是一類引起DNA拓?fù)洚悩?gòu)反應(yīng)的酶,分為兩類:類型I的酶能使DNA的一條鏈發(fā)生斷裂和再連接,反應(yīng)無需供給能量,類型Ⅱ的酶能使DNA的兩條鏈同時(shí)發(fā)生斷裂和再連接,當(dāng)它引入超螺旋時(shí),需要由ATP供給能量。

6.單鏈DNA結(jié)合蛋白(single-strandbindingprotein,SSB):是一類特異性和單鏈區(qū)DNA結(jié)合的蛋白質(zhì)。它的功能在于穩(wěn)定DNA解開的單鏈,阻止復(fù)性和保護(hù)單鏈部分不被核酸酶降解。

7.DNA連接酶(DNAligase):是專門催化雙鏈DNA中缺口共價(jià)連接的酶,不能催化兩條游離的單鏈DNA鏈間形成磷酸二酯鍵。反應(yīng)需要能量。

8.引物酶及引發(fā)體(primase&primosome):以DNA為模板,以核糖核苷酸為底物,在DNA合成中,催化形成RNA引物的酶稱為引物酶及引物體。大腸桿菌的引物酶單獨(dú)沒有活性,只有與其它蛋白質(zhì)結(jié)合在一起,形成一個(gè)復(fù)合體,即引發(fā)體才有生物活性。

9.復(fù)制叉(replicationfork):復(fù)制中的DNA分子,末復(fù)制的部分是親代雙螺旋,而復(fù)制好的部分是分開的,由兩個(gè)子代雙螺旋組成,復(fù)制正在進(jìn)行的部分呈丫狀叫做復(fù)制叉。

10.復(fù)制眼θ結(jié)構(gòu):在一段DNA上,正在復(fù)制的部分形成眼狀結(jié)構(gòu)。復(fù)制眼在環(huán)狀DNA上形成的結(jié)構(gòu)與希臘字母θ相象,所以叫θ結(jié)構(gòu)。

11.前導(dǎo)鏈(1eadingstrand):在DNA復(fù)制過程中,以親代鏈(3’→5’為模板時(shí),子代鏈的合成(5’→3’)是連續(xù)的.這條能連續(xù)合成的鏈稱前導(dǎo)鏈。

12.岡崎片段(Okazakifragment)、后隨鏈(1aggingstrand):在DNA復(fù)制過程中,以親代鏈(5’→3’)為模板時(shí),子代鏈的合成不能以3’→5’方向進(jìn)行,而是按5’→3’方向合成出許多小片段,因?yàn)槭菍榈热搜芯堪l(fā)現(xiàn),因此稱岡崎片段。由許多岡崎片段連接而成的子代鏈稱為后隨鏈。

13.半不連續(xù)復(fù)制(Semidiscontinuousreplication):在DNA復(fù)制過程中,一條鏈的合成是連續(xù)的,另一條鏈的合成是不連續(xù)的,所以叫做半不連續(xù)復(fù)制。

14.逆轉(zhuǎn)錄(reversetranscription):以RNA為模板合成DNA的過程。

15.逆轉(zhuǎn)錄酶(reversetranseriptase):催化以RNA為模板合成DNA的逆轉(zhuǎn)錄過程的酶。Temin(1960)首次從勞氏肉瘤病毒中發(fā)現(xiàn)。逆轉(zhuǎn)錄酶具有多種酶活性:依賴RNA的DNA聚合酶活性;依賴DNA的DNA聚合酶活性,RNA水解酶活性,DNA合成方向5’→3’。合成時(shí)需要引物與模板。

16.突變(mutation):基因組DNA順序上的任何一種改變都叫做突變。分點(diǎn)突變和結(jié)構(gòu)畸變。

17.點(diǎn)突變(Pointmutation):是指一個(gè)或幾個(gè)堿基對(duì)被置換(replacement),這種置換又分兩種形式:轉(zhuǎn)換(transition)一--指用一個(gè)嘌呤堿置換另一個(gè)嘌呤堿,一個(gè)嘧啶堿置換另一個(gè)嘧啶堿;顛換(transversion)一--指用嘌呤堿置換嘧啶堿或用嘧啶堿置換嘌呤堿。

18.結(jié)構(gòu)畸變:基因中的缺口、或插入(insertion)或缺失(deletion)某些堿基造成移碼突變使DNA的模板鏈?zhǔn)スδ堋?/p>

19.誘變劑(mutagen):使基因組發(fā)生突變的物理、化學(xué)、生物因素叫誘變劑。

20.修復(fù)(repair):除去DNA上的損傷,恢復(fù)DNA的正常結(jié)構(gòu)和功能是生物機(jī)體的一種保護(hù)功能。

21.光裂合酶修復(fù)(又稱光復(fù)活)(photoreactivation):可見光將光裂合酶激活,它分解DNA上由紫外線照射而形成的嘧啶二聚體,使它們恢復(fù)成兩個(gè)單獨(dú)

的嘧啶堿。

22.切除修復(fù)(excisionrepair):在一系列酶的作用下,將DNA分子中受損傷部分切除,以互補(bǔ)鏈為模板,合成出空缺的部分,使DNA恢復(fù)正常結(jié)構(gòu)的過程。

23.重組修復(fù)(recombinationrepair):DNA在有損傷的情況下也可以復(fù)制,復(fù)制時(shí)子代鏈躍過損傷部位并留下缺口,通過分子間重組,從完整的另一條母鏈上將相應(yīng)的核苷酸序列片段移至子鏈缺口處,然后用再合成的多核苷酸的序列補(bǔ)上母鏈的空缺,此過程稱重組修復(fù)。

24.誘導(dǎo)修復(fù)和應(yīng)急反應(yīng)(inductionrepairandSOSresponse)(SOS修復(fù)):由于DNA受到損傷或復(fù)制系統(tǒng)受到抑制所誘導(dǎo)引起的一系列復(fù)雜的應(yīng)急效應(yīng),稱為應(yīng)急反應(yīng)。SOS反應(yīng)主要包括兩個(gè)方面:DNA損傷修復(fù)(SOS修復(fù)或稱誘導(dǎo)修復(fù))和誘變效應(yīng)。SOS修復(fù)是一種易出差錯(cuò)的修復(fù)過程,雖能修復(fù)DNA的損傷而避免死亡。但卻帶來高的變異率。

25.DNA重組(recombination):DNA重組是指在真核生物減數(shù)分裂過程中,細(xì)菌細(xì)胞的轉(zhuǎn)化中、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)中等發(fā)生的DNA片段的交換或插入。

26.基因工程(又稱基因重組技術(shù))(gene/geneticengineering):是將外源基因經(jīng)過剪切加工,再插入到一個(gè)具有自我復(fù)制能力的載體DNA中,將新組合的DNA轉(zhuǎn)移到一個(gè)寄主細(xì)胞中,外源基因就可以隨著寄主細(xì)胞的分裂進(jìn)行繁殖,寄主細(xì)胞也借此獲得外源基因所攜帶的新特性。

27.轉(zhuǎn)錄(transcription):由依賴于DNA的RNA聚合酶催化,以DNA的一條鏈的一定區(qū)段為模板,按照堿基配對(duì)原則,合成一條與DNA鏈互補(bǔ)的RNA鏈的過程。

28.模板鏈(templatestrand)[又稱負(fù)(-)鏈,反意義鏈(antisensestrand)]:轉(zhuǎn)錄過程中用作模板的這條DNA鏈,稱模板鏈。

29.非模板鏈(nontemplatestrand)[又稱正(+)鏈,編碼鏈(codingstrand),有意義鏈(sensestrand)]:與模板鏈互補(bǔ)的那條DNA鏈,稱非模板鏈。

30.不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄(asymmetrictranscription):因?yàn)镽NA的轉(zhuǎn)錄只在DNA的任一條鏈上進(jìn)行,所以把RNA的合成叫做不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄。

31.啟動(dòng)子(promoter):DNA鏈上能指示RNA轉(zhuǎn)錄起始的DNA序列稱啟動(dòng)子。

32.轉(zhuǎn)錄單位(transcriptionunit):RNA的轉(zhuǎn)錄只在DNA的一個(gè)片段上進(jìn)行,這段DNA序列叫轉(zhuǎn)錄單位。

33.內(nèi)含子(intron):真核生物基因中,不為蛋白質(zhì)編碼的、在mRNA加工過程中消失的DNA序列,稱內(nèi)含子。

34.外顯子(exon):真核生物基因中,在mRNA上出現(xiàn)并代表蛋白質(zhì)的DNA序列,叫外顯子。

35.轉(zhuǎn)錄加工(post-transcriptionalprocessing):細(xì)菌中很多RNA分子和幾乎全部真核生物的RNA在合成后都需要不同程度的加工,才能形成成熟的RNA分子,這個(gè)過程叫轉(zhuǎn)錄后加工。

36.核內(nèi)不均一RNA(hnRNA):是真核生物細(xì)胞核內(nèi)的mRNA前體分子,分子量較大,并且不均一,含有許多內(nèi)含子。

37.RNA的復(fù)制(RNAreplication):某些病毒RNA既可以做為模板合成病毒蛋白質(zhì)又可在RNA復(fù)制酶(RNAreplicase)的催化下,以自身RNA為模板,合成互補(bǔ)的RNA新鏈,合成方向5’→3’,這一過程叫RNA復(fù)制。

1.質(zhì)?!|(zhì)粒是染色體外能夠進(jìn)行自主復(fù)制的遺傳單位,包括真核生物的細(xì)胞器和細(xì)菌細(xì)胞中染色體以外的脫氧核糖核酸(DNA)分子?,F(xiàn)在習(xí)慣上用來專

指細(xì)菌、酵母菌和放線菌等生物中染色體以外的DNA分子。在基因工程中質(zhì)粒常被用做基因的載體。

2.啟動(dòng)子——是DNA分子可以與RNA聚合酶特異結(jié)合的部位,也就是使轉(zhuǎn)錄開始的部位。在基因表達(dá)的調(diào)控中,轉(zhuǎn)錄的起始是個(gè)關(guān)鍵。常常某個(gè)基因是否應(yīng)當(dāng)表達(dá)決定于在特定的啟動(dòng)子起始過程。

3.信號(hào)肽:在蛋白質(zhì)合成過程中N端有15~36個(gè)氨基酸殘基的肽段,引導(dǎo)蛋白質(zhì)的跨膜。

4.核受體——細(xì)胞內(nèi)受體分布于胞漿或核內(nèi),本質(zhì)上都是配體調(diào)控的轉(zhuǎn)錄因子,均在核內(nèi)啟動(dòng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)并影響基因轉(zhuǎn)錄,統(tǒng)稱核受體。

5.hnRNA——核不均一RNA,即mRNA的前體,經(jīng)過5’加帽和3’酶切加多聚A,再經(jīng)過RNA的剪接,將外顯子連接成開放閱讀框,通過核孔進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)就可以作為蛋白質(zhì)合成的模板了。

6.分子雜交——互補(bǔ)的核苷酸序列通過Walson-Crick堿基配對(duì)形成穩(wěn)定的雜合雙鏈分子DNA分子的過程稱為雜交。雜交過程是高度特異性的,可以根據(jù)所使用的探針已知序列進(jìn)行特異性的靶序列檢測。

7.基因組文庫——將某種生物的基因組DNA切割成一定大小的片段,并與合適的載體重組后導(dǎo)入宿主細(xì)胞,進(jìn)行克隆。這些存在于所有重組體內(nèi)的基因組DNA片段的集合,即基因組文庫,它包含了該生物的所有基因。

8.密碼的簡并性——由一種以上密碼子編碼同一個(gè)氨基酸的現(xiàn)象稱為密碼的簡并性

名詞解釋

1、基因:能夠表達(dá)和產(chǎn)生蛋白質(zhì)和RNA的DNA序列,是決定遺傳性狀的功能單位。

2、基因組:細(xì)胞或生物體的一套完整單倍體的遺傳物質(zhì)的總和。

3、端粒:以線性染色體形式存在的真核基因組DNA末端都有一種特殊的結(jié)構(gòu)叫端粒。該結(jié)構(gòu)是一段DNA序列和蛋白質(zhì)形成的一種復(fù)合體,僅在真核細(xì)胞染色體末端存在。

4、操縱子:是指數(shù)個(gè)功能上相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因串聯(lián)在一起,構(gòu)成信息區(qū),連同其上游的調(diào)控區(qū)(包括啟動(dòng)子和操縱基因)以及下游的轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)所構(gòu)成的基因表達(dá)單位,所轉(zhuǎn)錄的RNA為多順反子。

5、順式作用元件:是指那些與結(jié)構(gòu)基因表達(dá)調(diào)控相關(guān)、能夠被基因調(diào)控蛋白特異性識(shí)別和結(jié)合的特異DNA序列。包括啟動(dòng)子、上游啟動(dòng)子元件、增強(qiáng)子、加尾信號(hào)和一些反應(yīng)元件等。

6、反式作用因子:是指真核細(xì)胞內(nèi)含有的大量可以通過直接或間接結(jié)合順式作用元件而調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄活性的蛋白質(zhì)因子。

7、啟動(dòng)子:是RNA聚合酶特異性識(shí)別和結(jié)合的DNA序列。

8、增強(qiáng)子:位于真核基因中遠(yuǎn)離轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn),能明顯增強(qiáng)啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄效率的特殊DNA序列。它可位于被增強(qiáng)的轉(zhuǎn)錄基因的上游或下游,也可相距靶基因較遠(yuǎn)。

9、基因表達(dá):是指生物基因組中結(jié)構(gòu)基因所攜帶的遺傳信息經(jīng)過轉(zhuǎn)錄、翻譯等一系列過程,合成特定的蛋白質(zhì),進(jìn)而發(fā)揮其特定的生物學(xué)功能和生物學(xué)效應(yīng)的全過程。

信息分子:調(diào)節(jié)細(xì)胞生命活動(dòng)的化學(xué)物質(zhì)。其中由細(xì)胞分泌的調(diào)節(jié)靶細(xì)胞生命活動(dòng)的化學(xué)物質(zhì)稱為細(xì)胞間信息分子;而在細(xì)胞內(nèi)傳遞信息調(diào)控信號(hào)的化學(xué)物質(zhì)稱為細(xì)胞內(nèi)信息分子。

10受體:是存在于靶細(xì)胞膜上或細(xì)胞內(nèi)能特異識(shí)別生物活性分子并與之結(jié)合,

進(jìn)而發(fā)生生物學(xué)效應(yīng)的的特殊蛋白質(zhì)。

11分子克?。涸隗w外對(duì)DNA分子按照即定目的和方案進(jìn)行人工重組,將重組分子導(dǎo)入合適宿主,使其在宿主中擴(kuò)增和繁殖,以獲得該DNA分子的大量拷貝。12蛋白激酶:是指能夠?qū)⒘姿峒瘓F(tuán)從磷酸供體分子轉(zhuǎn)移到底物蛋白的氨基酸受體上的一大類酶。

13蛋白磷酸酶:是具有催化已經(jīng)磷酸化的蛋白質(zhì)分子發(fā)生去磷酸化反應(yīng)的一類酶分子,與蛋白激酶相對(duì)應(yīng)存在,共同構(gòu)成了磷酸化和去磷酸化這一重要的蛋白質(zhì)活性的開關(guān)系統(tǒng)。

14基因工程:有目的的通過分子克隆技術(shù),人為的操作改造基因,改變生物遺傳性狀的系列過程。

15載體:能在連接酶的作用下和外源DNA片段連接并運(yùn)送DNA分子進(jìn)入受體細(xì)胞的DNA分子。

16轉(zhuǎn)化:指質(zhì)粒DNA或以它為載體構(gòu)建的重組DNA導(dǎo)入細(xì)菌的過程。

17感染:以噬菌體、粘性質(zhì)粒和真核細(xì)胞病毒為載體的重組DNA分子,在體外經(jīng)過包裝成具有感染能力的病毒或噬菌體顆粒,才能感染適當(dāng)?shù)募?xì)胞,并在細(xì)胞內(nèi)擴(kuò)增。

18轉(zhuǎn)導(dǎo):指以噬菌體為載體,在細(xì)菌之間轉(zhuǎn)移DNA的過程,有時(shí)也指在真核細(xì)胞之間通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)移和獲得細(xì)胞DNA的過程。

19轉(zhuǎn)染:指病毒或以它為載體構(gòu)建的重組子導(dǎo)入真核細(xì)胞的過程。

20DNA變性:在物理或化學(xué)因素的作用下,導(dǎo)致兩條DNA鏈之間的氫鍵斷裂,而核酸分子中的所有共價(jià)鍵則不受影響。

21DNA復(fù)性:當(dāng)促使變性的因素解除后,兩條DNA鏈又可以通過堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合形成DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)。

22退火:指將溫度降至引物的TM值左右或以下,引物與DNA摸板互補(bǔ)區(qū)域結(jié)合形成雜交鏈。

23筑巢PCR:先用一對(duì)外側(cè)引物擴(kuò)增含目的基因的大片段,再用內(nèi)側(cè)引物以大片段為摸板擴(kuò)增獲取目的基因。可以提高PCR的效率和特異性。

24原位PCR:以組織固定處理細(xì)胞內(nèi)的DNA或RNA作為靶序列,進(jìn)行PCR反應(yīng)的過程。

25定量PCR:基因表達(dá)涉及的轉(zhuǎn)錄水平的研究常需要對(duì)mRNA進(jìn)行定量測定,對(duì)此采用的PCR技術(shù)就叫定量PCR。

26基因打靶:是指通過DNA定點(diǎn)同源重組,改變基因組中的某一特定基因,從而在生物活體內(nèi)研究此基因的功能。

27DNA芯片:DNA芯片技術(shù)是指在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接將大量的DNA探針以顯微打印的方式有序地固化于支持物表面,然后與標(biāo)記的樣品雜交,通過對(duì)雜交信號(hào)的檢測分析,即可獲得樣品的遺傳信息。由于常用計(jì)算機(jī)硅芯片作為固相支持物,所以稱為DNA芯片。

28錯(cuò)義突變:DNA分子中堿基對(duì)的取代,使得mRNA的某一密碼子發(fā)生變化,由它所編碼的氨基酸就變成另一種的氨基酸,使得多肽鏈中的氨基酸順序也相應(yīng)的發(fā)生改變的突變。

29無義突變:由于堿基對(duì)的取代,使原來可以翻譯某種氨基酸的密碼子變成了終止密碼子的突變。

30同義突變:堿基對(duì)的取代并不都是引起錯(cuò)義突變和翻譯終止,有時(shí)雖然有堿基被取代,但在蛋白質(zhì)水平上沒有引起變化,氨基酸沒有被取代,這是因?yàn)橥蛔兒蟮拿艽a子和原來的密碼子代表同一個(gè)氨基酸的突變。

31移碼突變:在編碼序列中,單個(gè)堿基、數(shù)個(gè)堿基的缺失或插入以及片段的缺

失或插入等均可以使突變位點(diǎn)之后的三聯(lián)體密碼閱讀框發(fā)生改變,不能編碼原來的蛋白質(zhì)的突變。

32癌基因:是細(xì)胞核酸探針:探針是指能與某種大分子發(fā)生特異性相互作用,并在相互作用之后可以檢測出來的生物大分子。核酸探針是指能識(shí)別特異堿基順序的帶有標(biāo)記的一段DNA或RNA分子。

47周期蛋白:是一類呈細(xì)胞周期特異性或時(shí)相性表達(dá)、累積與分解的蛋白質(zhì),它與周期素依賴性激酶共同影響細(xì)胞周期的運(yùn)行。

48CAP:是大腸桿菌分解代謝物基因活化蛋白,這種蛋白可將葡萄糖饑餓信號(hào)傳遞個(gè)許多操縱子,使細(xì)菌在缺乏葡萄糖時(shí)可以利用其他碳源。

(一)名詞解釋

1.翻譯(translation):以mRNA為模板,氨酰-tRNA為原料直接供體,在多種蛋白質(zhì)因子和酶的參與下,在核糖體上將mRNA分子上的核苷酸順序表達(dá)為有特定氨基酸順序的蛋白質(zhì)的過程。

2.密碼子(codon):mRNA中堿基順序與蛋白質(zhì)中氨基酸順序的對(duì)應(yīng)關(guān)系是通過密碼實(shí)現(xiàn)的,mRNA中每三個(gè)相鄰的堿基決定一個(gè)氨基酸,這三個(gè)相鄰的堿基稱為一個(gè)密碼子。

3.密碼的簡并性(degeneracy):—個(gè)氨基酸具有兩個(gè)以上密碼子的現(xiàn)象。

4.同義密碼子(synonymcodon):為同—種氨基酸編碼的各個(gè)密碼子,稱為同義密碼了。

5.變偶假說(wobblehypothesis):指反密碼子的前兩個(gè)堿基(3’-端)按照標(biāo)準(zhǔn)與密碼子的前兩個(gè)堿基(5’-端)配對(duì),而反密碼子中的第三個(gè)堿墓則有某種程度的變動(dòng),使其有可能與幾種不同的堿基配對(duì)。

6.移碼突變(frame-shiftmutation):在mRNA中,若插入或刪去一個(gè)核苷酸,就會(huì)使讀碼發(fā)錯(cuò)誤,稱為移碼,由于移碼而造成的突變、稱移碼突變。

7,同功受體(isoacceptor):轉(zhuǎn)運(yùn)同一種氨基酸的幾種tRNA稱為同功受體。

8.反密碼子(anticodon):指tRNA反密碼子環(huán)中的三個(gè)核苷酸的序列,在蛋白質(zhì)合成過程中通過堿基配對(duì),識(shí)別并結(jié)合到mRNA的特殊密碼上。

9.多核糖體(polysome):mRNA同時(shí)與若干個(gè)核糖體結(jié)合形成的念珠狀結(jié)構(gòu),稱為多核糖體。

核酸的生物合成

(一)名詞解釋

基因(gene):基因是細(xì)胞和個(gè)體世代遺傳信息貯存和傳遞的基本單位;其化學(xué)本質(zhì)是DNA(RNA病毒除外);一個(gè)基因是DNA分子中編碼RNA或多肽鏈的核苷酸排列順序的一個(gè)區(qū)段。

Hoogsteen配對(duì)(Hoogsteenpair):DNA雙螺旋中的核苷酸除了前述A/T,G/C之間氫鍵外,還能形成一些附加氫鍵,如:另一個(gè)T與A/T堿基對(duì)的A之間,可形成額外的2個(gè)氫鍵,使得這3個(gè)堿基形成了T*A/T配對(duì);當(dāng)PH降低時(shí),胞嘧啶的N-3可以質(zhì)子化,質(zhì)子化的胞嘧啶與G/C堿基對(duì)的G又可形成2個(gè)氫鍵,3個(gè)堿基形成了C*G/C的配對(duì)。這種配對(duì)是K.Hoogsteen在1963年發(fā)現(xiàn)的,因此稱為Hoogsteen配對(duì)。

核小體(nucleosome):真核生物染色質(zhì)由DNA與蛋白質(zhì)構(gòu)成,其基本單位是核小體。各兩分子的H2A、H2B、H3、H4構(gòu)成八聚體的核心組蛋白,雙鏈DNA纏繞在這一核心上形成核小體的核心顆粒。顆粒之間再由DNA和組蛋白H1構(gòu)成的鏈接區(qū)相連形成串珠樣結(jié)構(gòu)。

復(fù)制(replication):以親代DNA分子為模板按照堿基配對(duì)原則合成子代DNA分子的過程。廣義也指DNA或RNA基因組的擴(kuò)增過程。

轉(zhuǎn)錄(transcription):以DNA為模板合成RNA的過程稱為轉(zhuǎn)錄。

翻譯(translation):以RNA為模板合成蛋白質(zhì)的過程稱為翻譯。

結(jié)構(gòu)基因(structuregene):基因中編碼RNA或蛋白質(zhì)的DNA序列。調(diào)控區(qū)域(regulatoryregion):與轉(zhuǎn)錄有關(guān)的,結(jié)構(gòu)基因以外的序列。斷裂基因(splitgene):真核生物編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因最突出的特點(diǎn)是不連續(xù)性。由若干個(gè)編碼區(qū)和非編碼區(qū)互相間隔開但又連續(xù)鑲嵌而成。

外顯子(exon):在結(jié)構(gòu)基因序列中,與成熟mRNA分子相對(duì)應(yīng)的序列稱為外顯子。

內(nèi)含子(intron):位于外顯子之間,與mRNA剪接過程中刪除部分相對(duì)應(yīng)

的序列則稱為內(nèi)含子。

啟動(dòng)子(promoter):是RNA聚合酶特異性識(shí)別和結(jié)合的DNA序列。位于結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的上游,啟動(dòng)子本身并不被轉(zhuǎn)錄。但有一些啟動(dòng)子(tRNA)可以位于轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的下游,這些DNA序列可以被轉(zhuǎn)錄。

普里布諾盒(pribnowbox):大腸桿菌的啟動(dòng)子區(qū)的三個(gè)功能區(qū)之一,位于-10bp區(qū)的RNA聚合酶結(jié)合部位,有著“TATAAT”的共有特征序列。

操縱元件或操縱序列(operator):被阻遏蛋白識(shí)別與結(jié)合的一小段DNA序列(阻遏蛋白與操縱元件結(jié)合后抑制下游結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄)。

順式作用元件(cis-actingelement):存在于基因旁側(cè)序列中能影響基因表達(dá)的序列。順式作用元件包括啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、加尾信號(hào)和可誘導(dǎo)元件等,它們的作用是參與基因表達(dá)的調(diào)控。順式作用元件本身不編碼任何蛋白質(zhì),僅僅提供一個(gè)作用位點(diǎn),要與反式作用因子相互作用而起作用。

反式作用因子(trans-actingfactors):通過直接結(jié)合或間接作用于DNA、RNA等核酸分子,對(duì)基因表達(dá)發(fā)揮不同調(diào)節(jié)作用(激活或抑制)的各類蛋白質(zhì)因子。

轉(zhuǎn)錄因子(transcriptionfactor):是在轉(zhuǎn)錄過程中所必需的除RNA聚合酶以外的蛋白質(zhì)因子,與反式作用因子含義相同,參加轉(zhuǎn)錄起始和延長。轉(zhuǎn)錄因子一般含有三個(gè)不同的功能結(jié)構(gòu)域:DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域、轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域、和與其他蛋白質(zhì)結(jié)合的結(jié)構(gòu)域。

增強(qiáng)子(enhancer):是一種較短的DNA序列,能夠被反式作用因子識(shí)別與結(jié)合,與增強(qiáng)子元件結(jié)合后能夠增強(qiáng)鄰近基因轉(zhuǎn)錄,位于轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游-100——-300bp處。

沉默子(silencer):可抑制基因轉(zhuǎn)錄的特定序列,結(jié)合一些反式作用因子對(duì)基因的轉(zhuǎn)錄起阻遏作用,使基因沉默。

poly(A)信號(hào)(poly(A)signal):Ⅱ類基因除了調(diào)控轉(zhuǎn)錄起始的序列外,在結(jié)構(gòu)基因的3′端下游還有加尾信號(hào),有AATAAA和GT豐富區(qū),或T豐富區(qū)組成。作用:終止mRNA轉(zhuǎn)錄和為其加上polyA尾。

開放閱讀框或多臺(tái)連編碼區(qū)(ORF,):在mRNA分子中,中間的一部分序列是一個(gè)特定多肽鏈的序列信息,這一段核苷酸序列稱為ORF。

三聯(lián)體密碼子(tripletcode):ORF通常從mRNA分子5’端的第一個(gè)AUG開始,每三個(gè)核苷酸為一組,決定肽鏈上一個(gè)氨基酸,稱為三聯(lián)體密碼或密碼子。

非翻譯區(qū)(UTR):在開放閱讀框的5’上游和3’端下游的核苷酸序列沒有編碼功能,稱為非編碼區(qū)。

m7GpppN結(jié)構(gòu)或帽結(jié)構(gòu):大部分真核細(xì)胞的mRNA的5’末端以7-甲基鳥嘌呤-三磷酸鳥苷為起始結(jié)構(gòu)。

基因組(genome):細(xì)胞或生物體中,一套完整的單倍體的遺傳物質(zhì)的總和。

核小體(nucleosome):真核生物染色質(zhì)由DNA和蛋白質(zhì)組成,其基本單位是核小體。各兩分子H2A、H2B、H3和H4組成八聚體的核心組蛋白,雙鏈DNA纏繞在這一核心上形成核心顆粒。顆粒之間由H1組蛋白和DNA形成的鏈接區(qū)形成串珠樣結(jié)構(gòu)。

轉(zhuǎn)座子(transposon/Tn):細(xì)菌基因組中可移動(dòng)成分能產(chǎn)生轉(zhuǎn)座現(xiàn)象。操縱子(operator):原核生物的結(jié)構(gòu)基因與調(diào)控序列以操縱子形式組織在一起,如乳糖操縱子、色氨酸操縱子等。

多基因家族(multigenefamily):指由某一祖先基因經(jīng)過重復(fù)和變異所產(chǎn)生的一組基因。

假基因(pseudogene):多基因家族中并不產(chǎn)生有功能的基因產(chǎn)物的成員。線粒體DNA(mtDNA):是核外遺傳物質(zhì),雙鏈環(huán)狀閉合分子;結(jié)構(gòu)緊湊,沒有重復(fù)序列;有基因重疊,無內(nèi)含子;編碼22種tRNA,13種蛋白質(zhì),2種rRNA。

多順反子mRNA(polycistron):原核生物mRNA分子攜帶了幾個(gè)多肽鏈的編碼信息。

質(zhì)粒(plasmid):是細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的,染色體外的共價(jià)閉合的環(huán)狀DNA分子。能夠獨(dú)立于細(xì)胞染色質(zhì)DNA進(jìn)行復(fù)制;對(duì)宿主細(xì)胞生存不是必需的;能賦予細(xì)菌特定的遺傳性狀。

復(fù)制起始點(diǎn)(originofreplication):復(fù)制總是在DNA分子上的一個(gè)或多個(gè)位點(diǎn)開始。這些位點(diǎn)稱為復(fù)制起點(diǎn),簡寫為oriC。

半保留復(fù)制(semiconservativereplication):在子代的雙鏈DNA分子中一條單鏈來自親代,另一條單鏈則是新合成的。遺傳信息以這種半保留復(fù)制方式忠實(shí)地從親代傳給子代。

半不連續(xù)復(fù)制(semi-discontinuousreplication):親代雙螺旋DNA鏈的一條鏈?zhǔn)沁B續(xù)被復(fù)制的,而另一條鏈則采用了以短片段分段的方式進(jìn)行復(fù)制,由此避免了DNA空間結(jié)構(gòu)的阻礙。這種復(fù)制方式被稱為半不連續(xù)復(fù)制。

復(fù)制子(replicon):從一個(gè)復(fù)制起始點(diǎn)開始所復(fù)制的DNA分子或DNA片段是一個(gè)基本的復(fù)制單位,稱為復(fù)制子。

復(fù)制叉(replicationfork):親代DNA在復(fù)制起點(diǎn)處解鏈后即形成一個(gè)復(fù)制泡,又可稱為兩個(gè)復(fù)制叉。

前導(dǎo)鏈(leadingstrand):在復(fù)制過程中,連續(xù)復(fù)制的鏈的前進(jìn)方向始終與復(fù)制叉前進(jìn)方向一致,稱為前導(dǎo)鏈。

隨后鏈(laggingstrand):不連續(xù)復(fù)制的鏈在另一條模板上的復(fù)制方向則與復(fù)制叉前進(jìn)方向相反,稱為隨后鏈。

岡崎片段(Okazakifragment):隨后鏈?zhǔn)欠侄魏铣傻?,這些分段合成的DNA片段稱為Okazakifragment。

Tus(terminatorutilizationsubstance)蛋白:大腸桿菌基因組復(fù)制的終點(diǎn)是在復(fù)制起點(diǎn)對(duì)側(cè)的終止區(qū)域內(nèi),終止區(qū)域中心兩側(cè)的終止序列可以與特異性的Tus蛋白結(jié)合,使復(fù)制叉無法通過。

q復(fù)制(qreplication):環(huán)狀DNA在復(fù)制起點(diǎn)解螺旋,成為單鏈狀態(tài),分別以兩條鏈作為模板,各自合成其互補(bǔ)鏈,形態(tài)象q稱為q復(fù)制??蓡坞p向復(fù)制。大部分革蘭氏陰性菌質(zhì)粒及多瘤病毒等環(huán)狀DNA采用q復(fù)制。

PCNA(增殖細(xì)胞核抗原):DNA聚合酶δ在復(fù)制叉上具有高延伸能力的關(guān)鍵原因在于它們與被稱為PCNA的蛋白質(zhì)間的結(jié)合。

端粒(telomere):真核生物染色體線性DNA分子末端由DNA和蛋白質(zhì)組成的一種特殊結(jié)構(gòu),由短的高度重復(fù)序列組成,維持染色體的穩(wěn)定性和DNA復(fù)制的完整性。

端粒酶(telomerase):由蛋白質(zhì)和RNA共同組成,能以自身的RNA(與端粒DNA序列互補(bǔ))為模板,逆轉(zhuǎn)錄反復(fù)延伸端粒DNA的重復(fù)序列。

D環(huán)復(fù)制(displacementloopreplication):動(dòng)物線粒體和植物葉綠體環(huán)狀雙鏈DNA常采用D環(huán)復(fù)制模式。復(fù)制開始時(shí),雙鏈環(huán)狀DNA的特殊位點(diǎn)先解鏈形成一個(gè)復(fù)制泡。復(fù)制泡中的一條親代DNA鏈作為模板合成前導(dǎo)鏈,前導(dǎo)鏈繼續(xù)合成,使另一條親本鏈上的復(fù)制起點(diǎn)出現(xiàn)在單鏈區(qū),隨后鏈即開始復(fù)制。D環(huán)復(fù)制的特點(diǎn)是兩條鏈的復(fù)制是不同步的。

DNA損傷(DNAdamage):各種體內(nèi)外因素所導(dǎo)致的DNA組成和結(jié)構(gòu)變

化稱為DNA損傷

三核苷酸重復(fù)序列擴(kuò)增(triplet-repeatexpansion):重復(fù)序列CAG的拷貝數(shù)在世代相傳的過程中發(fā)生了擴(kuò)增,造成基因編碼的蛋白質(zhì)產(chǎn)物功能障礙,致使相應(yīng)的疾病在患病個(gè)體的后代中進(jìn)行性加重。

活性氧(ROS):機(jī)體代謝過程中產(chǎn)生的活性氧可以直接作用于堿基,修飾鳥嘌呤產(chǎn)生8-羥基脫氧鳥嘌呤。

顛換(transversion):嘌呤被嘧啶取代或反之。

轉(zhuǎn)換(transition):DNA鏈中一種嘌呤被另一種嘌呤取代,或嘧啶被另一種嘧啶所取代。

DNA鏈間交聯(lián)(DNAinterstrandcross-linking):DNA損傷產(chǎn)生多種的交聯(lián)形式,DNA雙螺旋鏈中的一條鏈上的堿基與另一條鏈上的堿基以共價(jià)鍵結(jié)合,稱為鏈間交聯(lián)

DNA鏈內(nèi)交聯(lián)(DNAintrastrandcross-linking):DNA分子中同一條鏈中的兩個(gè)堿基以共價(jià)鍵結(jié)合,稱為鏈內(nèi)交聯(lián)。

DNA蛋白交聯(lián)(DNAproteincross-linking):DNA分子還可以與蛋白質(zhì)以共價(jià)鍵結(jié)合。

DNA直接修復(fù)(DNAdirectrepairing):是最簡單的一種DNA損傷修復(fù)方式。直接作用于受損的DNA,將之恢復(fù)為原來的結(jié)構(gòu)。包括光復(fù)活修復(fù)、堿基切除修復(fù)和核苷酸切除修復(fù)。

切除修復(fù)(excisionrepairing):是最普遍的一種修復(fù)方式,通過修復(fù)系統(tǒng)將不正常的堿基或核苷酸除去并替換掉。包括堿基切除修復(fù)和核苷酸切除修復(fù)。

錯(cuò)配修復(fù)(mismatchrepairing):是堿基切除修復(fù)的一種特殊形式,糾正復(fù)制和重組中的堿基配對(duì)錯(cuò)誤及因堿基損傷所致的堿基配對(duì)錯(cuò)誤,堿基插入、缺失等損傷

重組修復(fù)(recombinationrepairing):是指依靠重組酶系將另一段未受損傷的DNA移到損傷部位,提供正確的模板,進(jìn)行修復(fù)的過程。

SOS修復(fù)(SOSrepairing):DNA損傷部位失去了模板作用而終止復(fù)制是,細(xì)胞可以誘導(dǎo)一個(gè)或多個(gè)應(yīng)急途徑,跨過損傷部位先進(jìn)行復(fù)制,在設(shè)法修復(fù)。研究最多的誘導(dǎo)途徑是SOS反應(yīng)。

不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄(asymmetrictranscription):RNA聚合酶以不對(duì)稱的方式與啟動(dòng)子結(jié)合,使得轉(zhuǎn)錄只能沿著一個(gè)方向進(jìn)行,一個(gè)基因的兩條互補(bǔ)鏈中也只能有一條鏈被轉(zhuǎn)錄成RNA。這種現(xiàn)象稱為不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄。

雜化螺旋(hybridhelix):在大腸桿菌中,RNA鏈的延長階段,正在合成的RNA鏈的模板DNA局部雙鏈解開約17bp長的區(qū)域。在此區(qū)域內(nèi),新合成的RNA與模板DNA形成約12bp長的局部雜化螺旋。

轉(zhuǎn)錄泡(transcriptionbubble):在RNA鏈合成延伸過程中,雙鏈DNA模板不斷被打開,完成RNA合成又恢復(fù)的現(xiàn)象使得DNA分子在電子顯微鏡下呈現(xiàn)一泡狀結(jié)構(gòu),稱為轉(zhuǎn)錄泡。由局部解鏈的DNA模板、RNA聚合酶及新生的RNA構(gòu)成。

選擇性剪接(alternativesplicing):初級(jí)轉(zhuǎn)錄物以不同剪接方式選擇性地使用外顯子、得到不同的mRNA分子的現(xiàn)象。

RNA編輯(RNAediting):RNA編輯時(shí)對(duì)mRNA前體的序列進(jìn)行的改編,在mRNA前體分子的堿基序列中C被U取代,A被G取代,使成熟mRNA的序列與基因組DNA序列不同。

遺傳密碼(geneticcodon):在mRNA分子中蛋白質(zhì)序列編碼區(qū)內(nèi),每3個(gè)核酸組成一個(gè)密碼子,編碼多肽鏈上的一個(gè)氨基酸。mRNA中的4種核苷酸

通過不同排列組合,可組成64個(gè)密碼子,其中有3個(gè)是終止密碼子。

起始因子(initiationfactor):真核生物中蛋白質(zhì)合成起始階段所需要的可溶性蛋白因子。有十幾種,是翻譯起始復(fù)合體的組分,各起不同的作用。如,識(shí)別并結(jié)合信使核糖核酸(mRNA)5′端的帽子結(jié)構(gòu),與核糖體亞基結(jié)合,穩(wěn)定翻譯起始復(fù)合體等。

延長因子(elongationfactor):原核生物的EF由三部分組成:EF-Tu,EF-Ts,和EF-G。

EF-Tu介導(dǎo)氨酰-tRNA進(jìn)入核糖體的空位;EF-Ts充當(dāng)EF-Tu亞基的鳥嘌呤核苷酸交換因子,催化EF-Tu釋放GDP;EF-G催化tRNA的移位和多肽延伸的每個(gè)循環(huán)后期mRNA從核糖體上掉下來。

在真核生物中分為:eEF-1和eEF-2。

eEF-1有兩個(gè)亞基,α和βγ。α相當(dāng)于原核生物中的EF-Tu亞基,它介導(dǎo)氨酰-tRNA進(jìn)入核糖體的空位。Βγ相當(dāng)于原核生物中EF-Ts,核苷酸交換因子α,催化GDP從α上釋放。

eEF-2相當(dāng)于原核生物的EF-G,催化tRNA的移位和多肽延伸的每個(gè)循環(huán)后期mRNA從核糖體上掉下來。

釋放因子(releasefactor):在終止階段,合成完畢的肽鏈被水解釋放,核糖體和tRNA從mRNA上脫落。這一階段需要釋放因子或稱終止因子的參與。

核糖體循環(huán)(ribosomalcycle):肽鏈在核糖體從mRNA的5′端向3′端移動(dòng)過程中依據(jù)密碼子順序從N端開始向C端延長。這是一個(gè)在核糖體上重復(fù)進(jìn)行的進(jìn)位、成肽、轉(zhuǎn)位的循環(huán)過程,每完成一個(gè)循環(huán),肽鏈上即可增加一個(gè)氨基酸殘基。該過程被稱為核糖體循環(huán)。

分子伴侶(molecularchaperone):幫組新生多肽鏈折疊成高級(jí)結(jié)構(gòu)的一類蛋白質(zhì)。

基因表達(dá)調(diào)控(geneexpressionregulation):生物體通過特定的蛋白質(zhì)與DNA,蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間的相互作用來控制基因是否表達(dá),或調(diào)節(jié)表達(dá)產(chǎn)物的多少以滿足生物體的自身需求以及適應(yīng)環(huán)境變化的過程。

時(shí)間特異性或階段特異性(temporalspecificity):在細(xì)胞生長、發(fā)育過程中,相應(yīng)的基因按一定的時(shí)間順序開啟或關(guān)閉,決定細(xì)胞向特定的生長分化和發(fā)育。

空間特異性或組織特異性(spatialspecificity):同一基因在不同的組織或器官中的表達(dá)也不一樣。同一基因產(chǎn)物在不同的組織器官中的分布是不同的。

管家基因(housekeepinggene):有些基因參與生命的全過程,因此必須在一個(gè)生物體的所有細(xì)胞中持續(xù)地表達(dá)。這樣的基因被稱為管家基因。

組成性表達(dá)(constitutiveexpression):管家基因的表達(dá)只與啟動(dòng)子和RNA聚合酶有關(guān),基本不受環(huán)境因素和其他因素的影響。這樣的基因表達(dá)方式稱為組成性表達(dá)。

誘導(dǎo)(induction):在特定的信號(hào)刺激下,有的基因表現(xiàn)出開放性或增強(qiáng)性的表達(dá)。

阻遏(repression):而另一些則表現(xiàn)出關(guān)閉性或抑制性的表達(dá)。

轉(zhuǎn)錄衰減(attenuation):色氨酸操縱子的有效關(guān)閉還有一種屬于促進(jìn)已經(jīng)開始轉(zhuǎn)錄的mRNA合成終止的方式來進(jìn)一步加強(qiáng)。

超敏位點(diǎn)(hypersensitivesite):當(dāng)染色質(zhì)活化后,常出現(xiàn)一些對(duì)核酸酶高度敏感的位點(diǎn)。

表觀遺傳(epigeneticinheritance):染色質(zhì)結(jié)構(gòu)對(duì)基因表達(dá)的影響可以遺傳給子代細(xì)胞,其機(jī)制是細(xì)胞內(nèi)存在著具有維持甲基化作用的DNA甲基轉(zhuǎn)移酶,可以在DNA復(fù)制后,依照親本DNA鏈的甲基化位置催化子鏈DNA在相同位置

上發(fā)生甲基化。

基因治療(genetherapy):指利用基因轉(zhuǎn)移和重組技術(shù),將正常的目的基因?qū)牖颊呒?xì)胞內(nèi),用以糾正或代替其異?;虻墓δ埽_(dá)到治療疾病的目的。

基因置換(ganereplacement):通過同源重組(基因打靶技術(shù))將正?;蚨c(diǎn)整合到靶細(xì)胞基因組上,以原位替換致病基因。

自殺基因治療(suicideganetherapy):將某些病毒或細(xì)菌的基因?qū)氚屑?xì)胞中,其表達(dá)的酶可催化無毒的藥物前體轉(zhuǎn)變?yōu)榧?xì)胞毒性物質(zhì),從而殺死腫瘤細(xì)胞。

基因是核酸中貯存遺傳信息的遺傳單位,是貯存有功能的蛋白質(zhì)多肽鏈或RNA序列信息及表達(dá)這些信息所必需的全部核苷酸序列。

基因組(gencme):細(xì)胞或生物中,一套完整單倍體遺傳物質(zhì)的總和(包括一種生物所需的全套基因及間隔序列)稱為基因組。基因組的功能是貯存和表達(dá)遺傳信息。

SD序列(Shine-Dalgarnosequence,SDsequence)是mRNA能在細(xì)菌核糖體上產(chǎn)生有效結(jié)合和轉(zhuǎn)譯所需要的序列。SD序列與16SrRNA的3’末端堿基(AUUCCUCCAC-UAG-5’)互補(bǔ),以控制轉(zhuǎn)譯的起始

分子克?。嚎寺。╟lone):是指單細(xì)胞純系無性繁殖,現(xiàn)代概念是將實(shí)驗(yàn)得到的人們所需的微量基因結(jié)構(gòu),引入適當(dāng)?shù)乃拗骷?xì)胞中去,在合適的生理環(huán)境中進(jìn)行無性繁殖,從而利用宿主的生理機(jī)制繁衍人們所需要的基因結(jié)構(gòu),并進(jìn)行表達(dá)。由于整個(gè)操作在分子水平上進(jìn)行,所以稱為分子克?。╩olecularcloning)。

動(dòng)物克隆(Animalcloning)就是不經(jīng)過受精過程而獲得動(dòng)物新個(gè)體的方法.基因診斷:就是利用現(xiàn)代分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的技術(shù)方法,直接檢測基因結(jié)構(gòu)

(DNA水平)及其表達(dá)水平(RNA水平)是否正常,從而對(duì)疾病做出診斷的方法。

基因治療就是將有功能的基因轉(zhuǎn)移到病人的細(xì)胞中以糾正或置換致病基因的一種治療方法,是指有功能的目的基因?qū)氚屑?xì)胞后有的可與宿主細(xì)胞內(nèi)的基因發(fā)生整合,成為宿主細(xì)胞遺傳物質(zhì)的一部分,目的基因的表達(dá)產(chǎn)物起到對(duì)疾病的治療作用。

轉(zhuǎn)基因動(dòng)物就是把外源性目的基因?qū)雱?dòng)物的受精卵或其囊胚細(xì)胞中,并在細(xì)胞基因組中穩(wěn)定整合,再將合格的重組受精卵或囊胚細(xì)胞篩選出來,采用借腹懷孕法寄養(yǎng)在雌性動(dòng)物(fostermother)的子宮內(nèi),使之發(fā)育成具有表達(dá)目的基因的胚胎動(dòng)物,并能傳給下一代。這樣,生育的動(dòng)物為轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。

探針:在核酸雜交分析過程中,常將已知順序的核酸片段用放射性同位素或生物素進(jìn)行標(biāo)記。這種帶有一定標(biāo)記的已知順序的核酸片段稱為探針。

限制性核酸內(nèi)切酶:限制性核酸內(nèi)切酶(restrictionendonuclease)是一類專門切割DNA的酶,它們能特異結(jié)合一段被稱為限制酶識(shí)別順序的特殊DNA序列并切割dsDNA。

載體:要把一個(gè)有用的基因(目的基因-研究或應(yīng)用基因)通過基因工程手段送到生物細(xì)胞(受體細(xì)胞),需要運(yùn)載工具攜帶外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞,這種運(yùn)載工具就叫做載體(vector)。

限制性片段長度多肽性分析(RFLP):DNA片段長度多態(tài)性分析(restrictionfragmentlengthpolymer-phism,RFLP)基因突變導(dǎo)致的基因堿基組成或(和)順序發(fā)生改變,會(huì)在基因結(jié)構(gòu)中產(chǎn)生新的限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)或使原有的位點(diǎn)消失.用限制酶對(duì)不同個(gè)體基因組進(jìn)行消化時(shí),其電泳條帶的數(shù)目和大小就會(huì)產(chǎn)生改變,根據(jù)這些改變可以判斷出突變是否存在。

1、質(zhì)粒——是細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)攜帶的染色體外的DNA分子,是共價(jià)閉合的環(huán)狀DNA分子,能獨(dú)立進(jìn)行復(fù)制。質(zhì)粒只有在宿主細(xì)胞內(nèi)才能夠完成自己的復(fù)制。

2、基因——指貯存有功能的蛋白質(zhì)多肽鏈或RNA序列及表達(dá)這些信息所需的全部核苷酸序列,是核酸分子中貯存遺傳信息的遺傳單位。

3、癌基因——是細(xì)胞內(nèi)控制細(xì)胞生長和分化的基因,具有潛在的誘導(dǎo)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的特性,它的結(jié)構(gòu)異?;虮磉_(dá)異常,可以引起細(xì)胞癌變。

4、基因克隆——是指把一個(gè)生物體的遺傳信息(基因片段)轉(zhuǎn)入另一個(gè)生物體內(nèi)進(jìn)行無性繁殖,得到一群完全相同的基因片段,又稱DNA克隆。

5、抑癌基因——是指存在于正常細(xì)胞內(nèi)的一大類可抑制細(xì)胞生長并具有潛在抑癌作用的基因,當(dāng)這類基因在發(fā)生突變、缺失或失活時(shí)可引起細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化而導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。

6、基因診斷——是以DNA和RNA為診斷材料,通過檢查基因的存在、缺陷或表達(dá)異常,對(duì)人體狀態(tài)和疾病作出診斷的方法和過程。

7、管家基因——是在生命過程都是必需的,是在一個(gè)生物個(gè)體的幾乎所有細(xì)胞中持續(xù)表達(dá)的基因,它較少受環(huán)境因素的影響,其表達(dá)方式為組成性基因表達(dá)。

8、klenow片段——亦稱DNA聚合酶1大片段,為DNA聚合酶I經(jīng)枯草桿菌蛋白酶裂解后產(chǎn)生的大片段,它除了保留5′→3′聚合酶活性及3

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