骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查

骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查骨髓骨髓:人體的主要造血器官。組成：由分布于骨小梁之間的基質(zhì)、血管、神經(jīng)、網(wǎng)狀組織和發(fā)育過程中的血細胞組成。骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查一、血細胞的生成、發(fā)育規(guī)律造血干細胞的功能特點：自我更新多向分化血細胞的生成：-造血微環(huán)境、造血細胞生長因子干細胞祖細胞各系原始細胞幼稚細胞成熟細胞骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查血細胞的發(fā)育過程髓系：紅細胞系統(tǒng)(Epo)粒-單細胞系統(tǒng)：粒系嗜中性(GM-CSF)嗜酸性嗜堿性單核系巨核細胞系統(tǒng)(Meg-CSF和Tpo)淋系：T淋巴細胞B淋巴細胞----漿細胞骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查血細胞發(fā)育中形態(tài)學(xué)演變規(guī)律細胞的大小及外形細胞質(zhì)細胞核核質(zhì)比例骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查血細胞發(fā)育、演變規(guī)律圖骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查原始→幼稚（紅系和粒系：早幼、中幼和晚幼）→成熟胞體：大→小（巨核細胞：小→大,且不規(guī)則）胞核：大?。捍蟆。t細胞核消失，巨核細胞：小→大）形狀：圓→不規(guī)則染色質(zhì)：細致稀疏→粗糙致密，淺→深核仁：多→少→無，清晰→模糊→消失胞質(zhì)：數(shù)量：少→多染色：嗜堿、深染→嗜堿、淡染→嗜酸、淡染（單核細胞和淋巴細胞仍嗜堿）特殊物質(zhì)（血紅蛋白、特殊顆粒等）：無→少→多核/質(zhì)：大→?。ê舜筚|(zhì)少→核小質(zhì)多），巨核細胞則相反。

骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查二、骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查方法和內(nèi)容骨髓涂片--骨髓穿刺術(shù)骨髓活檢--骨髓活組織檢查術(shù)骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查骨髓涂片檢查低倍鏡檢查：1.確定取材和涂片、染色是否滿意2.判斷骨髓增生程度3.巨核細胞計數(shù)4.觀察有無異常細胞油鏡檢查：1.有核細胞分類計數(shù)2.觀察細胞形態(tài)骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查骨髓涂片鏡檢結(jié)果分析骨髓增生程度：有核細胞與成熟紅細胞比值各系細胞及其各發(fā)育階段細胞的比例、形態(tài)各系細胞比例改變的臨床意義有無特殊細胞及寄生蟲骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查增生程度有核細胞/成熟紅有核細胞%常見疾病極度活躍1:150%以上各類型白血病明顯活躍1:1010%以上各類型白血病、 增生性貧血、ITP增生活躍1:205%左右正常骨髓或某些貧血增生減低1:501%以下再障、粒缺或 粒細胞減少癥增生極度減低1:3000.5%以下再障骨髓增生程度—5級骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查骨髓各系細胞比例的正常范圍粒系：50-60%，原粒<1%早幼粒<5%；紅系：20%，淋巴系：20%單核細胞系：<4%漿細胞系統(tǒng)：<2%巨核細胞：7-35個其他細胞：極少量骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查骨髓各系細胞比例改變的臨床意義骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（一）粒細胞系統(tǒng)granulocytes（1）粒系細胞增多各型粒細胞性白血病急性炎癥和感染性疾病類白血病反應(yīng)（2）粒系細胞減少再生障礙性貧血粒細胞缺乏或減少癥骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（二）紅細胞系統(tǒng)erythron（1）紅系細胞增多增生性貧血急性紅白血病真性紅細胞增多癥（2）紅系細胞減少再生障礙性貧血(純紅再障)骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（三）粒/紅比例(G/E)參考值為2-4：1比例正常：

⑴正常人骨髓；

⑵兩系細胞同時或成比例增多或減少，如再生障礙性貧血、骨髓纖維化、骨髓瘤、骨髓轉(zhuǎn)移癌等。

骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查G/E比例增加：

G/E>5:1

⑴粒系細胞增多⑵紅系細胞生成受抑比例減低：

G/E<2:1

⑴粒系細胞減少

⑵紅系細胞增多骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（四）淋巴細胞系統(tǒng)lymphocytes（1）淋巴細胞絕對性增多急、慢性淋巴細胞性白血病淋巴瘤傳染性淋巴細胞增多癥傳染性單核細胞增多癥病毒感染（2）淋巴細胞相對性增多再生障礙性貧血粒細胞缺乏或減少癥骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（五）單核細胞系統(tǒng)monocytes增多急性單核細胞性白血病急性粒單細胞性白血病骨髓增生異常綜合征感染性疾病自身免疫性疾病惡性腫瘤骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（六）漿細胞系統(tǒng)plasmacytes增多多發(fā)性骨髓瘤漿細胞白血病巨球蛋白血癥反應(yīng)性漿細胞增多：慢性炎癥，感染，腫瘤，自身免疫性疾病，過敏性疾病再生障礙性貧血、粒細胞缺乏骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（七）巨核細胞系統(tǒng)megakaryocytes

增高：（1）特發(fā)性血小板減少性紫癜，

（2）Evans綜合征（3）骨髓增殖性疾?。?）脾功能亢進和大出血后（5）AML-M7

減低：（1）再生障礙性貧血（2）急性白血病（除外AML-M7）（3）其他骨髓病、放射病（4）急性感染、中毒骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查三、血細胞的細胞化學(xué)染色過氧化物酶（peroxidase，POX)蘇丹黑染色（SudanblackBstain，SB）中性粒細胞堿性磷酸酶(Neutrophlialkalinephosphatase，NAP)非特異性酯酶染色（NSE）+NaF抑制試驗糖原染色(periodicacid–Schiff’sreaction，AS)鐵染色酸性磷酸酶染色（acidphosphatase，ACP）特異性酯酶染色（specificesterase，SE）骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查POX【原理】

【結(jié)果】強陽性：胞質(zhì)中藍黑色顆粒粗大而密集弱陽性：胞質(zhì)中藍黑色顆粒細小而稀疏陰性:胞質(zhì)中無藍黑色顆粒者【正常參考值】

POX主要存在于粒細胞系統(tǒng)，原粒細胞為陰性,隨細胞的成熟反應(yīng)越強，但嗜堿性粒細胞為陰性?！九R床意義】陽性反應(yīng)：急性粒細胞性白血病。陰性反應(yīng)：急性淋巴細胞性白血病。骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查SB【原理】【結(jié)果和正常參考值】與POX染色大致相同。【臨床意義】同POX染色反應(yīng)。骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查NAP【原理】【結(jié)果】

NAP主要存在于成熟粒細胞胞漿中，其他血細胞均為陰性反應(yīng)?！菊⒖贾怠?/p>

陽性率：平均為10％～40％，以“十”陽性反應(yīng)為主。積分值：陽性積分值40～80（分）。骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查【臨床意義】慢性粒細胞性白血病與類白血病反應(yīng)的鑒別：CML時NAP活性明顯減低，類白血病反應(yīng)NAP活性極度增高。陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿與再生障礙性貧血的鑒別:前者NAP活性減低，后者增高。急性白血病類型的鑒別：急性淋巴細胞白血病時NAP活性增高，急性粒細胞白血病時減低。其他血液?。毫馨土?、骨髓增值性疾病、慢性淋巴細胞性白血病等NAP活性中度增高。其他情況：腎上腺皮質(zhì)激素功能亢進、妊娠及應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素、雌激素等，NAP積分可增高。骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查NSE+NaF抑制試驗【正常參考值】NSE主要存在于單核細胞中，從原單核細胞到成熟單核細胞逐漸增強，粒細胞一般呈陰性或弱陽性?！九R床意義】急性單核細胞性白血病為強陽性，且可被氟化鈉所抑制。急性粒細胞性白血病與均為陰性或弱陽性,但陽性反應(yīng)不被氟化鈉所抑制。急性淋巴細胞性白血病為陰性反應(yīng)。骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查PAS【正常參考值】有核紅細胞呈陰性反應(yīng)；淋巴細胞多呈陰性，少數(shù)弱陽性；粒系中，原粒細胞糖原染色（－），早幼粒以下階段為（+），逐漸增強；單核細胞呈弱陽性反應(yīng)巨核細胞和血小板呈陽性反應(yīng)骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查【臨床意義】鑒別紅白血病與其他幼紅細胞增多的疾?。杭t白血病時幼紅細胞的PAS染色呈強陽性反應(yīng)，積分值增高。鑒別良性與惡性淋巴細胞增生性疾?。簮盒粤馨图毎錾约膊。淞馨图毎腜SA染色積分值增高；病毒感染等淋巴細胞良性增生時，淋巴細胞積分值正常。骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查三種急性白血病類型的鑒別：急性粒細胞白血病時，原始及幼稚粒細胞PAS染色常呈陰性反應(yīng)；急性淋巴細胞白血病時，原始及幼稚淋巴細胞常呈陽性反應(yīng)，陽性物質(zhì)呈粗顆?；驂K狀；急性單核細胞白血病時，原始及幼稚單核細胞多呈強陽性反應(yīng)，陽性物質(zhì)呈均勻彌漫或細顆粒狀。骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查鑒別某些細胞類型：（1）不典型的巨核細胞與李-斯（Reed-sternberg）細胞的鑒別：前者呈陽性反應(yīng)，后者一般為陰性或弱陽性反應(yīng)。（2）高雪細胞與尼曼匹克細胞的鑒別：前者呈陽性反應(yīng)，后者一般為陰性或弱陽性反應(yīng)。（3）腺癌細胞呈強陽性反應(yīng)，骨髓轉(zhuǎn)移時有助于與白血病細胞的鑒別。骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查細胞化學(xué)染色急淋急粒急單過氧化物酶（-）分化差的原始細胞（-）~（±

）（POX）（-）~（+）分化好的幼稚細胞（+）~（++）糖原染色粗顆?；驂K狀彌漫性淡紅色淡紅色細顆粒狀（PAS）（+）（-）/（±）（+）非特異酯酶（-）NaF抑制不敏感可被NaF抑制（NSE）（-）~（+）（+）~（++）堿性磷酸酶增加減少或（-）正?；蛟黾樱∟AP）PAS（糖原染色）用于鑒別紅白血病M6（強陽性）和巨幼貧

骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查鐵染色【結(jié)果】細胞外鐵：按陽性強度（藍色物質(zhì)、藍色顆粒、藍色小珠）分為5級。細胞內(nèi)鐵：以鐵粒幼細胞所占的百分率表示。

環(huán)狀鐵粒幼細胞：10個以上的粗大鐵粒，環(huán)繞細胞核排列超過核周徑的2/3以上。骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查【參考值】細胞外鐵：一般為+或++

細胞內(nèi)鐵：陽性率為20-90％，平均為65%。細胞漿內(nèi)常見1～5個鐵染色顆粒。骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查【臨床意義】缺鐵性貧血：細胞外鐵明顯降低或消失，細胞內(nèi)鐵陽性率減低，常<15%，細胞漿內(nèi)鐵粒變小、變淡。非缺鐵性貧血：惡性貧血、再生障礙性貧血、溶血性貧血時，細胞外鐵多為++到+++，細胞內(nèi)鐵陽性率增加。鐵粒幼細胞性貧血：細胞內(nèi)鐵陽性率明顯增加，并可見到環(huán)狀鐵粒幼細胞。骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查ACP毛細胞呈陽性反應(yīng)且不為L-酒石酸所抑制，有助于毛細胞白血病的診斷。鑒別T淋巴細胞與B淋巴細胞。鑒別高雪病和尼曼-匹克病:前者呈陽性反應(yīng)，后者為陰性。網(wǎng)狀細胞、吞噬細胞、組織細胞和單核細胞均呈陰性反應(yīng)。骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查SE急性粒細胞性白血病呈強陽性反應(yīng)急性單核細胞白血病和急性淋巴細胞白血病均呈陰性反應(yīng)急性粒-單核細胞性白血病時，白血病細胞部分陽性，部分陰性骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查四、常見血液病血液學(xué)特點骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（一）貧血按照病因和發(fā)病機制：造血不良性貧血、溶血性貧血及失血性貧血按照細胞形態(tài)特點：大細胞性、正常細胞性、小細胞及小細胞低色素性。按照骨髓增生情況：

增生性貧血：包括缺鐵性貧血、溶血性貧血、急性失血性貧血和巨幼細胞性貧血。

增生不良性貧血：主要為再生障礙性貧血。骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查缺鐵性貧血（irondeficiencyanemia)最常見鐵缺乏骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查缺鐵性貧血血象特點Hb、RBC均減少，以血紅蛋白減少更為明顯；

成熟紅細胞大小不一，以小為主，中空區(qū)擴大；網(wǎng)織紅細胞正常或輕度增多；

粒細胞、血小板正常。若由于寄生蟲所致，如鉤蟲病，嗜酸粒細胞增多。骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查IDA骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查缺鐵性貧血骨髓象特點增生活躍或明顯活躍，粒紅比值減低，有核紅細胞增多。紅系增生明顯，以中、晚幼細胞為主，“老核幼漿”。成熟紅細胞體積小，中空區(qū)擴大。粒系和巨核細胞變化不大，基本正常。骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查巨幼細胞貧血(megaloblasticanemia)葉酸缺乏維生素B12缺乏骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查巨幼細胞性貧血血象特點Hb、RBC均減少，為大細胞性貧血；

成熟紅細胞大小不一，以大為主，偶見幼紅細胞；網(wǎng)織紅細胞正常或輕度增多；白細胞多正常，可見核分葉過多現(xiàn)象；血小板可正?；驕p少；嚴重時全血細胞減少；骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查巨幼細胞性貧血骨髓象特點骨髓增生明顯活躍紅系常可達40-50%，伴有巨幼變粒系相對減少，巨粒細胞可較早出現(xiàn)，可伴分葉過多巨核細胞大致正?；蛟龆?，可有核分葉過多骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查MA骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查溶血性貧血(hemolyticanemia)紅細胞破壞增多貧血、黃疸、脾大骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查溶血性貧血血象特點正細胞、正色素性貧血紅細胞大小不等，畸形常見，網(wǎng)織紅細胞明顯增多白細胞和血小板多為正常，急性溶血時可增多骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查溶血性貧血骨髓象特點骨髓增生明顯活躍紅系?？?gt;30%，急性溶血可達>50%，以中、晚幼紅為主，粒系相對減少，各階段比例及形態(tài)大致正常G/E倒置巨核細胞系大致正常骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查HA骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查再生障礙性貧血（aplsticanemia,AA)造血干細胞數(shù)量或質(zhì)量的異常全血細胞減少根據(jù)疾病發(fā)展和血液學(xué)特點，可分為：急性型慢性型骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查再生障礙性貧血血象特點紅細胞和血紅蛋白平行下降，貧血為正細胞、正色素性白細胞明顯減少，中性粒細胞減少淋巴細胞相對增高血小板明顯減少網(wǎng)織紅細胞減少骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查再生障礙性貧血骨髓象特點增生減低或極度減低；粒系及紅系均減少，淋巴細胞相對增多；漿細胞、網(wǎng)狀細胞、組織嗜堿細胞增多；巨核細胞減少甚至缺乏；若為慢性再障，可出現(xiàn)骨髓呈灶性增生，表現(xiàn)為骨髓象增生活躍，但巨核細胞明顯減低或缺乏。骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（二）白血病Leukemia白血病是造血系統(tǒng)的一種惡性腫瘤，其特征為造血組織中某一類血細胞過度增生，并浸潤和破壞其它組織，骨髓和外周血中常有血細胞質(zhì)和量的異常。臨床常有貧血、發(fā)熱、出血和肝、脾、淋巴結(jié)腫大等表現(xiàn)。根據(jù)自然病程及血細胞的分化程度而分急性、慢性。根據(jù)白血病細胞類型不同而分為髓細胞性和淋巴細胞性。Leukemia-1骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查急性白血?。╝cuteleukemia,AL）：病程短，<6個月。骨髓和血液中以分化差的原始/幼稚細胞大量增殖為主。慢性白血病(chronicleukemia,CL)：骨髓和血液中以成熟或接近成熟的異常細胞為主。Leukemia-2骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查急性白血病血象特點正細胞、正色素性貧血，少數(shù)可出現(xiàn)幼紅細胞白細胞計數(shù)可增多、減少或正常，可出現(xiàn)幼稚細胞血小板計數(shù)減少骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查急性白血病骨髓象特點骨髓增生明顯活躍或極度活躍某一系或兩系的血細胞過度異常增生，原始/幼稚細胞明顯增多，?30%ANC其他系列細胞受抑細胞特殊形態(tài)或結(jié)構(gòu)：Auer小體，藍細胞Leukemia-4骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查白血病FAB分型急性髓細胞白血?。ˋML/ANLL，M1-M7）急性淋巴細胞白血病（ALL，L1，L2，L3）慢性粒細胞白血?。–ML）慢性淋巴細胞白血?。–LL）Leukemia-3骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查急性粒細胞白血病Leukemia-5骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查早幼粒細胞白血病Leukemia-6骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查早幼粒細胞白血病POXLeukemia-7骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查急性單核細胞白血病Leukemia-8骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查急性淋巴細胞白血病Leukemia-9骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查慢性粒細胞白血病

（chronicmyelocyticleukemia，CML）慢性起病，青壯年多見粒細胞顯著增高和脾臟顯著增大Ph染色體和abl/bcr融合基因骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查CML血象特點早期可無貧血，病情進展可出現(xiàn)正色素正細胞性貧血白細胞顯著增高，以中性晚幼粒細胞為主，原粒細胞和早幼粒細胞<10%，嗜堿性粒細胞增高血小板早期增高或正常，晚期可進行性下降骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查CML骨髓象特點骨髓增生極度活躍粒系顯著增生，G/E明顯增高，以中幼粒以下階段細胞為主，原、早幼<10%，嗜堿、嗜酸細胞<10%紅系增生受抑巨核細胞早期增多，晚期減少骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查慢性粒細胞白血病Leukemia-10骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查慢性淋巴細胞白血病

（chroniclymphocyticleukimia，CLL）老年男性，歐美多見全身淋巴結(jié)進行性腫大，脾大皮膚病變及免疫缺陷病程長Leukemia-11骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查CLL血象特點早期可無貧血，病情進展或并發(fā)溶血時，可出現(xiàn)正色素正細胞性貧血白細胞顯著增高，以小淋巴細胞為主中性粒細胞減少血小板早期增高或正常，晚期可進行性下降骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查CLL骨髓象特點骨髓增生明顯活躍或極度活躍淋巴系顯著增生，>50%，以成熟小淋巴細胞為主粒系、紅系增生受抑，并發(fā)溶血時，紅系可增生巨核細胞早期增多，晚期減少骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（三）原發(fā)性血小板減少性紫癜(idiopathicthrombocytopenicpurpura，ITP)自身免疫性疾病血小板抗體產(chǎn)生，導(dǎo)致血小板破壞過多巨核細胞成熟受抑臨床分為：急性型慢性型骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查ITP血象特點紅細胞和血紅蛋白常正常，急性或慢性出血時可合并貧血白細胞計數(shù)多正常血小板減少骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查ITP骨髓象特點骨髓增生明顯活躍紅系和粒系比例、形態(tài)常無明顯異常，合并出血時紅系可增多巨核細胞增多，伴成熟障礙骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查五、細胞免疫分型即細胞免疫標記檢測，是利用單克隆抗體及免疫學(xué)技術(shù)對細胞膜表面和/或細胞內(nèi)存在的特異性抗原進行檢測。常用：流式細胞儀（FCM）骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查臨床應(yīng)用識別不同系列的細胞識別不同的淋巴細胞檢測T淋巴細胞亞群識別不同分化階段的細胞識別不同功能狀態(tài)的細胞分離、鑒定不同系列和不同分化階段的細胞白血病免疫分型白血病微小殘留病的檢測骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查AML免疫分型

M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7CD13+ + + + + - -CD33 + + + + + + +CD14 - +- - + + - -CD41 - - - - - - +Ret - - - - - + +骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查ALL免疫分型

CD2CD7 CD19 HLA-DR

CD33T ++- - -B - - ++-骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查六、細胞遺傳學(xué)分析骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查臨床常見白血病染色體改變

染色體改變?nèi)诤匣騇2t(8;21)(q22;q22)AML1/ETOM3t(15:17)(q22;Q21)PML/RARα，RARα/PMLM4Eo