檢驗(yàn)方法驗(yàn)證與確認(rèn)課件

檢驗(yàn)方法驗(yàn)證與確認(rèn)課件第1頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五

藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證和確認(rèn)一、法規(guī)要求二、分析方法驗(yàn)證原則及類(lèi)型三、分析方法驗(yàn)證內(nèi)容四、分析方法驗(yàn)證常見(jiàn)問(wèn)題第2頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五一、法規(guī)要求《中國(guó)藥典》（2010年版）凡例檢驗(yàn)方法和限度二十三、本版藥典正文收載的所有品種，均應(yīng)按規(guī)定的方法進(jìn)行檢驗(yàn)。如采用其他方法，應(yīng)將該方法與規(guī)定的方法進(jìn)行比較試驗(yàn)，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果掌握使用，但在仲裁時(shí)仍以本版藥典規(guī)定的方法為準(zhǔn)。第3頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五一、法規(guī)要求《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（2010年修訂）第一百四十二條當(dāng)影響產(chǎn)品質(zhì)量的主要因素，如原輔料、與藥品直接接觸的包裝材料、生產(chǎn)設(shè)備、生產(chǎn)環(huán)境（或廠房）、生產(chǎn)工藝、檢驗(yàn)方法等發(fā)生變更時(shí)，應(yīng)當(dāng)進(jìn)行確認(rèn)或驗(yàn)證。必要時(shí)，還應(yīng)當(dāng)經(jīng)藥品監(jiān)督管理部門(mén)批準(zhǔn)。

第4頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五一、法規(guī)要求《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（2010年修訂）第二百二十三條物料和不同生產(chǎn)階段產(chǎn)品的檢驗(yàn)應(yīng)當(dāng)至少符合以下要求：

（二）符合下列情形之一的，應(yīng)當(dāng)對(duì)檢驗(yàn)方法進(jìn)行驗(yàn)證：

1.采用新的檢驗(yàn)方法；

2.檢驗(yàn)方法需變更的；

3.采用《中華人民共和國(guó)藥典》及其他法定標(biāo)準(zhǔn)未收載的檢驗(yàn)方法；

4.法規(guī)規(guī)定的其他需要驗(yàn)證的檢驗(yàn)方法。

（三）對(duì)不需要進(jìn)行驗(yàn)證的檢驗(yàn)方法，企業(yè)應(yīng)當(dāng)對(duì)檢驗(yàn)方法進(jìn)行確認(rèn)，以確保檢驗(yàn)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確、可靠；

第5頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五一、法規(guī)要求

分析方法驗(yàn)證或確認(rèn)指導(dǎo)原則機(jī)構(gòu)或組織文件名稱(chēng)美國(guó)藥典（USP）<1225>Validationofcompendprocedures方法驗(yàn)證<1226>Verificationofcompendialprocedures方法確認(rèn)人用藥品注冊(cè)技術(shù)要求國(guó)際協(xié)調(diào)會(huì)（ICH）Q2（R1）ValidationofAnalyticalProcedures分析方法驗(yàn)證《中國(guó)藥典》（2010年版）一部附錄“中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則”二部附錄“藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則”第6頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五1、分析方法驗(yàn)證的定義：根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目的要求，預(yù)先設(shè)置一定的驗(yàn)證內(nèi)容，并通過(guò)設(shè)計(jì)合理的試驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證所采用的分析方法能否符合檢測(cè)項(xiàng)目的要求。二、分析方法驗(yàn)證原則及類(lèi)型第7頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五二、分析方法驗(yàn)證原則及類(lèi)型2、分析方法驗(yàn)證的目的：（1）證明采用的分析方法是科學(xué)、合理；（2）證明分析方法能有效控制藥品的內(nèi)在質(zhì)量第8頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五3、分析方法驗(yàn)證原則用于檢驗(yàn)的分析方法符合下列情形之一但不限于以下情況的，應(yīng)當(dāng)對(duì)檢驗(yàn)方法進(jìn)行驗(yàn)證：新建的檢驗(yàn)方法，包括新建的產(chǎn)品檢驗(yàn)方法和設(shè)備清潔驗(yàn)證殘留物檢驗(yàn)方法等；采用《中華人民共和國(guó)藥典》及其他法定標(biāo)準(zhǔn)未收載的檢驗(yàn)方法；二、分析方法驗(yàn)證原則及類(lèi)型第9頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五二、分析方法驗(yàn)證原則及類(lèi)型3、分析方法驗(yàn)證原則用于檢驗(yàn)的分析方法符合下列情形之一但不限于以下情況的，應(yīng)當(dāng)對(duì)檢驗(yàn)方法進(jìn)行驗(yàn)證：將法定方法用于測(cè)定新藥，或?qū)⒛骋黄贩N的法定測(cè)定方法用于另一品種；將法定方法用于測(cè)定新藥，或?qū)⒛骋黄贩N的法定測(cè)定方法用于另一品種；第10頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五二、分析方法驗(yàn)證原則及類(lèi)型3、分析方法驗(yàn)證原則用于檢驗(yàn)的分析方法符合下列情形之一但不限于以下情況的，應(yīng)當(dāng)對(duì)檢驗(yàn)方法進(jìn)行驗(yàn)證：檢驗(yàn)用設(shè)備主要部分改變、藥物生產(chǎn)工藝變更、制劑的組分變更、檢驗(yàn)方法需變更的；原分析方法進(jìn)行修改時(shí)；法規(guī)規(guī)定的其他需要驗(yàn)證的檢驗(yàn)方法。第11頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五二、分析方法驗(yàn)證原則及類(lèi)型4、分析方法驗(yàn)證類(lèi)型鑒別試驗(yàn)雜質(zhì)定量或限量檢查原料藥或制劑中有效成分含量測(cè)定制劑中其他成分（如防腐劑、殘留物、添加劑等）的測(cè)定藥品溶出度、釋放度等檢查中溶出量測(cè)定第12頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五三、分析方法驗(yàn)證內(nèi)容第13頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五1、準(zhǔn)確度定義：指用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度。驗(yàn)證方法（原料）：測(cè)定已知含量的對(duì)照品或供試品；測(cè)定結(jié)果與其他方法比較。第14頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五1、準(zhǔn)確度驗(yàn)證方法（制劑）：直接回收法；加樣回收法；測(cè)定結(jié)果與其他方法比較。第15頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五1、準(zhǔn)確度驗(yàn)證方法（雜質(zhì)定量測(cè)定）：直接回收法；測(cè)定結(jié)果與其他方法比較。第16頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五表1樣品中待測(cè)定成分含量和回收率限度待測(cè)定成分含量回收率限度100%98-101%10%95-102%1%92-105%0.1%90-108%0.01%85-110%10μg/g(ppm)80-115%1μg/g75-120%10μg/kg(ppb)70-125%第17頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五2、精密度-重復(fù)性定義：指在規(guī)定的測(cè)試條件下，同一個(gè)均勻供試品，經(jīng)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間的接近程度。驗(yàn)證方法：配制6份相同濃度的供試品溶液，由一個(gè)分析人員在盡可能相同的條件下進(jìn)行測(cè)試。第18頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五在規(guī)定范圍內(nèi)，取同一濃度（相當(dāng)于100%濃度水平）的供試品，用至少測(cè)定6次的結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)；或設(shè)計(jì)3個(gè)不同濃度，每個(gè)濃度分別制備3份供試品溶液進(jìn)行測(cè)定，用9個(gè)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。2、精密度-重復(fù)性第19頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五2、精密度-中間精密度驗(yàn)證方法：配制6份相同濃度的供試品溶液，分別由二個(gè)分析人員使用不同的儀器與試劑進(jìn)行測(cè)試。第20頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五3、精密度-重現(xiàn)性驗(yàn)證方法：配制6份相同濃度的供試品溶液，分別由不同實(shí)驗(yàn)室、不同人員進(jìn)行測(cè)試。第21頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五表2樣品中待測(cè)定成分含量和精密度RSD可接受范圍待測(cè)定成分含量重復(fù)性（RSD）重現(xiàn)性（RSD）100%1%2%10%1.5%3%1%2%4%0.1%3%6%0.01%4%8%10μg/g(ppm)6%11%1μg/g8%16%10μg/kg(ppb)15%32%第22頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五3、專(zhuān)屬性定義：指在其他成分（如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等）可能存在下，采用的方法能正確測(cè)定出被測(cè)物的特性。驗(yàn)證方法（鑒別反應(yīng)）：要求陰性樣品均呈負(fù)反應(yīng)。第23頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五3、專(zhuān)屬性驗(yàn)證方法（含量測(cè)定及有關(guān)物質(zhì)）：要求輔料不干擾，雜質(zhì)分離度符合要求；陰性對(duì)照：薄層色譜、高效液相色譜、氣相色譜；影響因素試驗(yàn)：雜質(zhì)檢查考察分離度。第24頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五3、專(zhuān)屬性可接受標(biāo)準(zhǔn)（含量測(cè)定）：空白對(duì)照應(yīng)無(wú)干擾，主成分與各有關(guān)物質(zhì)應(yīng)能完全分離，分離度不得小于2.0，以二極管陣列檢測(cè)器進(jìn)行純度分析時(shí)，主峰的純度因子應(yīng)大于980。第25頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五3、專(zhuān)屬性可接受標(biāo)準(zhǔn)（有關(guān)物質(zhì)）：空白對(duì)照應(yīng)無(wú)干擾，該雜質(zhì)峰與其他峰應(yīng)能完全分離，分離度不得小于2.0。第26頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五4、線性定義：指在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)試結(jié)果與試樣中被測(cè)物濃度直接程正比關(guān)系的程度。驗(yàn)證方法：在80%至120%的濃度范圍內(nèi)配制6份濃度不同的供試液，分別測(cè)定其主峰的面積，計(jì)算含量，進(jìn)行線性回歸分析。第27頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五4、線性可接受標(biāo)準(zhǔn)（含量測(cè)定）：回歸線的相關(guān)系數(shù)（R）不得小于0.998，Y軸的截距應(yīng)在100%響應(yīng)值的2%以內(nèi)，響應(yīng)因子的RSD應(yīng)不大于2.0%.第28頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五4、線性可接受標(biāo)準(zhǔn)（有關(guān)物質(zhì)）：回歸線的相關(guān)系數(shù)（R）不得小于0.990，Y軸的截距應(yīng)在100%響應(yīng)值的25%以內(nèi)，響應(yīng)因子的RSD應(yīng)不大于10%.第29頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五5、范圍定義：范圍系指能達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測(cè)試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。范圍應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用和線性、準(zhǔn)確度、精密度結(jié)果和要求確定。第30頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五5、范圍可接受標(biāo)準(zhǔn)：原料藥和制劑含量測(cè)定，范圍一般為測(cè)試濃度的80%~120%；制劑含量均勻度檢査，范圍一般為測(cè)試濃度的70%~130%,特殊劑型，如氣霧劑和噴霧劑，范圍可適當(dāng)放寬。第31頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五5、范圍可接受標(biāo)準(zhǔn)：溶出度或釋放度中的溶出量測(cè)定，范圍一般為限度的±20%，如規(guī)定了限度范圍，則應(yīng)為下限的-20%至上限的+20%；第32頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五5、范圍可接受標(biāo)準(zhǔn)：雜質(zhì)測(cè)定，范圍應(yīng)根據(jù)初步實(shí)際測(cè)定數(shù)據(jù)，擬訂為規(guī)定限度的±20%。第33頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五6、檢測(cè)限定義：指試樣中被測(cè)物能被檢測(cè)出的最低量。驗(yàn)證方法（直觀法）：用已知濃度的被測(cè)物，試驗(yàn)出能被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或量。第34頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五6、檢測(cè)限驗(yàn)證方法（信噪比法）：把已知低濃度試樣測(cè)出的信號(hào)與空白樣品測(cè)出的信號(hào)進(jìn)行比較，算出能被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或量。可接受標(biāo)準(zhǔn)：雜質(zhì)峰與噪音峰信號(hào)的強(qiáng)度比應(yīng)不得小于3。第35頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五7、定量限定義：指試樣中被測(cè)物能被定量測(cè)定的最低量。驗(yàn)證方法：把已知低濃度試樣測(cè)出的信號(hào)與空白樣品測(cè)出的信號(hào)進(jìn)行比較，算出能被可靠地定量的最低濃度或量?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：雜質(zhì)峰與噪音峰信號(hào)的強(qiáng)度比應(yīng)不得小于10。第36頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五8、耐用性定義：指在測(cè)定條件有小的變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度。驗(yàn)證方法：分別考察流動(dòng)相比例變化±5%、流動(dòng)相pH變化±

0.2、柱溫變化±5℃、檢測(cè)波長(zhǎng)變化±5nm、流速相對(duì)值變化±20%以及采用三根不同批號(hào)的色譜柱進(jìn)行測(cè)定時(shí)，儀器色譜行為的變化，每個(gè)條件下各測(cè)定二次。第37頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五8、耐用性液相色譜法中典型的變動(dòng)因素有：流動(dòng)相的組成和pH值、不同廠牌或不同批號(hào)的同類(lèi)型色譜柱、柱溫、流速等。氣相色譜法變動(dòng)因素有：不同廠牌或批號(hào)的色譜柱、固定相、不同類(lèi)型的擔(dān)體、柱溫、進(jìn)樣口和檢測(cè)器溫度等。經(jīng)試驗(yàn)，應(yīng)說(shuō)明小的變動(dòng)能否通過(guò)設(shè)計(jì)的系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，以確保方法有效。第38頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五8、耐用性可接受標(biāo)準(zhǔn)：各雜質(zhì)峰的拖尾因子不得大于2.0，雜質(zhì)峰與其他成分峰必須達(dá)到基線分離，各條件下的含量數(shù)據(jù)（n=6）的RSD應(yīng)不大于2.0%，雜質(zhì)含量的絕對(duì)值在±

0.1%以內(nèi)。第39頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五9、系統(tǒng)適應(yīng)性驗(yàn)證方法（含量測(cè)定）：配制6份相同濃度的供試品溶液進(jìn)行分析。驗(yàn)證方法（有關(guān)物質(zhì)）：配制6份相同濃度的雜質(zhì)溶液進(jìn)行分析。第40頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五9、系統(tǒng)適應(yīng)性可接受標(biāo)準(zhǔn)（含量測(cè)定）：該雜質(zhì)峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）應(yīng)不大于2.0%，保留時(shí)間的RSD應(yīng)不大于1.0%，雜質(zhì)峰的拖尾因子不得大于2.0，理論塔板數(shù)應(yīng)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)（有關(guān)物質(zhì)）：該雜質(zhì)峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）應(yīng)不大于2.0%，保留時(shí)間的RSD應(yīng)不大于1.0%，雜質(zhì)峰的拖尾因子不得大于2.0，理論塔板數(shù)應(yīng)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。第41頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五10、溶液穩(wěn)定性驗(yàn)證方法：按照分析方法分別配制對(duì)照品溶液與供試品溶液，平行測(cè)定兩次主成分與雜質(zhì)的含量，然后將上述溶液分別貯存在室溫與冰箱冷藏室（4℃）中，在1、2、3、5和7天時(shí)分別平行測(cè)定兩次主成分與雜質(zhì)的含量?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：主成分的含量變化的絕對(duì)值應(yīng)不大于2.0%，雜質(zhì)含量的絕對(duì)值在±

0.1%以內(nèi)，并不得出現(xiàn)新的大于報(bào)告限度的雜質(zhì)。第42頁(yè)，共47頁(yè)，2023年，2月20日，星期五