藥物分析第六章課件

第六章芳酸類藥物的分析學習目標掌握水楊酸、苯甲酸類藥物化學結構與分析方法間的關系；鑒別與含量測定的方法；特殊雜質的檢驗方法與雜質限量計算；兩步滴定法和雙相測定法的原理。熟悉紫外分光光度法、高效液相色譜法在芳酸類藥物中的應用。了解其他芳酸類藥物的分析。第六章芳酸類藥物的分析本章目錄

概述第一節(jié)水楊酸類藥物分析第二節(jié)苯甲酸類藥物分析第六章芳酸類藥物的分析第一節(jié)水楊酸類藥物分析水楊酸類藥物結構理化性質鑒別檢查含量測定

第六章芳酸類藥物分析藥物結構理化性質與分析方法①在乙醇中易溶，在水中溶解度小，多以醇為溶劑分析；②具游離羧基，呈酸性；③含酯鍵，不穩(wěn)定，易水解；④水解后生成游離的酚羥基，可與鐵離子發(fā)生呈色反應⑤有苯環(huán)，在紫外光區(qū)有吸收

②③④⑤阿司匹林結構與理化性質的關系

第六章芳酸類藥物分析酸性：用于定性、定量反應酚羥基：FeCl3呈色反應苯環(huán)：紫外吸收水楊酸

第六章芳酸類藥物分析酯鍵：水解，可生成酚羥基和醋酸酯鍵：水解，可生成酚羥基和羧基酰胺鍵：水解，可生成芳伯氨基苯環(huán)苯環(huán)貝諾酯返回

第六章芳酸類藥物分析一、鑒別試驗1.三氯化鐵反應含酚羥基結構的藥物在中性或弱酸性條件下，可與Fe3＋反應，形成有色配位化合物。（1）水楊酸：加三氯化鐵試液1滴，即呈紫色。（2）阿司匹林：煮沸水解后，放冷，加三氯化鐵試液1滴，呈紫堇色。（3）貝諾酯：加入氫氧化鈉試液，煮沸，放冷，濾液調成微酸性，加三氯化鐵試液2滴，呈紫堇色。

第六章芳酸類藥物分析反應式如下：貝諾酯和阿司匹林需水解，生成水楊酸，才能發(fā)生該反應

（紫堇色）

第六章芳酸類藥物分析

第六章芳酸類藥物分析3.紫外吸收光譜法貝諾酯溶液，在240nm的波長處有最大吸收，按干燥品計算，吸收系數(shù)（）為730～760。4.紅外吸收光譜法水楊酸、阿司匹林、貝諾酯、對氨基水楊酸鈉均采用紅外吸收光譜法，供試品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜一致。對氨基水楊酸鈉水溶液還可呈鈉鹽鑒別反應。

第六章芳酸類藥物分析二、雜質檢查（一）阿司匹林的雜質檢查阿司匹林原料主要控制的特殊雜質有“溶液的澄清度”“水楊酸”“易炭化物”

第六章芳酸類藥物分析2.游離水楊酸水楊酸可由合成過程中乙?；煌耆虬⑺酒チ衷谫A藏過程中水解產生。水楊酸對人體有毒，并有刺激性，其進一步氧化產物使藥物變色，影響藥物的質量。故應嚴格控制阿司匹林中的水楊酸。中國藥典（2010）采用高效液相法測定。

第六章芳酸類藥物分析【實例分析】阿司匹林中游離水楊酸檢查游離水楊酸照高效液相色譜法（附錄ⅤD）測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-四氫呋喃-冰醋酸-水（20：5：5：70）為流動相；檢測波長為303nm。理論板數(shù)按水楊酸峰計算不低于5000，阿司匹林主峰與水楊酸主峰分離度應符合要求。供試品溶液的制備取本品約100mg，精密稱定，置10ml量瓶中，加1%冰醋酸甲醇溶液適量，振搖使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，即得（臨用前新配）。對照品溶液的制備取水楊酸對照品約10mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加1%冰醋酸甲醇溶液適量使溶解，并稀釋至刻度，搖勻；精密量取5ml，置50ml量瓶中，用1%冰醋酸甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。測定法立即精密量取供試品溶液、對照品溶液各10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液色譜圖中如顯水楊酸色譜峰，按外標法以峰面積計算供試品中水楊酸含量，含水楊酸不得過0.1%。

第六章芳酸類藥物分析原則上，制劑不必重復檢查原料藥項下檢查的雜質，但在制劑制備或制劑貯存過程中，有可能再引入的雜質，應檢查控制。阿司匹林片在制備或貯存過程中，因酯鍵易水解，而生成水楊酸，故阿司匹林片劑、栓劑均要檢查水楊酸。

第六章芳酸類藥物分析(4)有關物質照高效液相色譜法（附錄ⅤD）測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-四氫呋喃-冰醋酸-水（20：5：5：70）為流動相A，乙腈為流動相B，按下表進行線性梯度洗脫；檢測波長為276nm。阿司匹林峰的保留時間約為8分鐘，理論板數(shù)按阿司匹林峰計算不低于5000，阿司匹林峰與水楊酸峰分離度應符合要求。時間（分鐘）流動相A（%）流動相B（%）0.0100060.02080

第六章芳酸類藥物分析測定法取本品約0.1g，精密稱定，置10ml量瓶中，加1%冰醋酸甲醇溶液適量，振搖使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液；精密量取供試品溶液1ml，置200ml量瓶中，用1%冰醋酸甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，即得對照溶液；精密量取對照溶液10ml，置100ml量瓶中，用1%冰醋酸甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，即得靈敏度試驗溶液。分別精密量取供試品溶液、對照溶液、靈敏度試驗溶液及水楊酸檢查項下的水楊酸對照品溶液各10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液色譜圖中如顯雜質峰，除小于靈敏度試驗溶液中阿司匹林主峰面積的單個雜質峰、溶劑峰及水楊酸峰不計外，其余各雜質峰面積的和不得大于對照溶液主峰峰面積（0.5%）。

第六章芳酸類藥物分析（二）對氨基水楊酸鈉中間氨基酚的檢查間氨基酚易被氧化，氧化產物導致藥物變色，并且對人體有毒性作用，應嚴格控制其限量間氨基酚引入的途徑有二：一是未反應完全的原料；二是對氨基水楊酸鈉遇熱或日光照射脫羧

第六章芳酸類藥物分析三、含量測定1.酸堿滴定法1.基本原理：阿司匹林結構中有羧基有酸性（Ka＞10－5），可用氫氧化鈉滴定液直接滴定。滴定生成的乙酰水楊酸鈉偏堿性，故用酚酞為指示劑

第六章芳酸類藥物分析【實例分析】阿司匹林原料的含量測定取本品約0.4g，精密稱定，加中性乙醇（對酚酞指示液顯中性）20ml溶解后，加酚酞指示液3滴，用氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)相當于18.02mg的C9H8O4。阿司匹林的百分含量％＝式中V:氫氧化鈉滴定液消耗的體積，ml；T：滴定度（18.02mg）；F:滴定液濃度校正系數(shù)；W：供試品取樣量。

第六章芳酸類藥物分析照高效液相色譜法（附錄ⅤD）測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-四氫呋喃-冰醋酸-水（20：5：5：70）為流動相；檢測波長為276nm。理論板數(shù)按阿司匹林峰計算不低于3000，阿司匹林峰與水楊酸峰分離度應符合要求。測定法取本品20片，精密稱定，充分研細，精密稱取細粉適量（約相當于阿司匹林10mg），置100ml量瓶中，用1%冰醋酸的甲醇溶液強烈振搖使溶解，并用1%冰醋酸的甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，用有機相濾膜（孔徑：0.45μ）濾過，精密量取續(xù)濾液10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取阿司匹林對照品約20mg，精密稱定，置200ml量瓶中，用1%冰醋酸的甲醇溶液強烈振搖使溶解，并用1%冰醋酸的甲醇稀釋到刻度，搖勻，同法測定。按外標法以峰面積計算，即得。第六章芳酸及其酯類藥物的分析第二節(jié)苯甲酸類藥物的分析

苯甲酸及其鈉鹽結構理化性質鑒別檢查含量測定第六章芳酸藥物的分析藥物結構理化性質與分析方法

2.羧基4.苯環(huán)3.芳酸1.在乙醇、氯仿或乙醚中易溶，在水中微溶，在沸水中溶解；其鈉鹽在水中易溶，乙醇中略溶2.酸性，用于定量3.三氯化鐵呈色反應4.共軛雙鍵，紫外吸收

1.溶解性一、苯甲酸及其鈉鹽的結構、主要理化性質與分析方法返回

第六章芳酸藥物的分析二、苯甲酸及其鈉鹽分析（一）鑒別試驗1.三氯化鐵反應在堿性溶液和苯甲酸鈉在中性溶液，苯甲酸與三氯化鐵試液生成沉淀。第六章芳酸藥物的分析2.分解產物的反應苯甲酸鈉升華試驗：苯甲酸鈉固體，加硫酸，加熱，可見白色苯甲酸凝結在試管內壁。此反應收載于中國藥典（2005年版）附錄“一般鑒別試驗”中。3.紅外光譜法供試品紅外光吸收圖譜與對照的圖譜比較應一致。第六章芳酸藥物的分析(二)含量測定1.苯甲酸直接酸堿滴定法

基本原理：苯甲酸酸性較強，水中溶解度小，而其鈉鹽在水中溶解度大，故以中性稀乙醇為溶劑,可用氫氧化鈉滴定液直接滴定。終點產物為苯甲酸鈉，偏堿性，以酚酞為指示劑。第六章芳酸藥物的分析【實例分析】苯甲酸的含量測定取苯甲酸約0.25g,精密稱定，得0.2478g。加中性稀乙醇（對酚酞指示液顯中性）25ml溶解后，加酚酞指示液3滴，用氫氧化鈉滴定液(0.1033mol/L)滴定，消耗滴定液19.72ml，每1ml氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)相當于12.21mg的C7H6O2。第六章芳酸藥物的分析分析：

苯甲酸的百分含量％＝F＝

苯甲酸的百分含量％＝

＝100.4％第六章芳酸藥物的分析2.苯甲酸鈉的雙相滴定法基本原理：苯甲酸鈉易溶于水，苯甲酸易溶于乙醚，在乙醚和水組成雙相體系中，用鹽酸直接滴定水相的苯甲酸鈉，生成的苯甲酸溶于乙醚，降低了水相的酸性，增大滴定突越，使滴定完全，終點易于判定，定量準確。第六章芳酸藥物的分析【實例分析】苯甲酸鈉的雙相滴定法取苯甲酸鈉約1.5g，精密稱定得1.574g，置分液漏斗中，加水25ml，振搖使溶解。加乙醚50ml，甲基橙指示液2滴，用鹽酸滴定液(0.5012mol/L)滴定，隨滴隨振搖，至水層顯橙紅色；分取水層，置具塞錐形瓶中，乙醚層用水5ml洗滌，洗液并入錐形瓶中，加乙醚20ml，繼續(xù)用鹽酸滴定液(0.5012mol/L)滴定，隨滴隨振搖，至水層顯持續(xù)的橙紅色，消耗鹽酸滴定液21.52ml。已知每1ml鹽酸滴定液(0.5mol/L)相當于72.06mg的C7H5NaO