抗可抗體普課程

抗可抗體普課程第1頁/共72頁是以真核細(xì)胞的核成分為靶抗原的器官非特異性自身抗體的總稱，屬自身抗體中的一組抗體。是指抗核酸和核蛋白抗體的總和。靶抗原包括細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞骨架、細(xì)胞分裂周期蛋白等。第2頁/共72頁二、抗核抗體分類抗DNA抗體：ds-DNA、ss-DNA抗組蛋白抗體：抗組蛋白亞單位H1、H2A、H2B、H3、H4及其復(fù)合物抗體。抗DNA組蛋白復(fù)合物抗體：狼瘡細(xì)胞、抗DNP抗體、抗核小體抗體抗ENA抗體：Sm、SSA、SSB

抗非組蛋白抗體抗染色體抗體：

抗著絲點(diǎn)第3頁/共72頁二、抗核抗體分類5,抗核仁抗體：抗RNA多聚酶Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ、原纖維蛋白、NOR-90和Th/To等抗體。6,抗其他細(xì)胞成分抗體：板層素、線粒體、高爾基體、溶酶體、肌動(dòng)蛋白、波形纖維蛋白、原肌球蛋白、細(xì)胞角蛋白、紡綞體、中間體等。第4頁/共72頁第5頁/共72頁三、抗核抗體檢測(cè)方法首選：間接免疫熒光法（IIF）抗原底物片選擇：1、HEp-2細(xì)胞（人喉癌上皮細(xì)胞)2、HeLa細(xì)胞（人子宮頸癌細(xì)胞）3、Ehrlich（小鼠腹水癌細(xì)胞）4、動(dòng)物器官組織切片第6頁/共72頁ANA檢測(cè)方法-IIF法ANA滴度ANA核型第7頁/共72頁第8頁/共72頁第9頁/共72頁第10頁/共72頁第11頁/共72頁第12頁/共72頁第13頁/共72頁第14頁/共72頁均質(zhì)型均質(zhì)型：分裂間期細(xì)胞核質(zhì)染色均勻一致，分裂期細(xì)胞染色質(zhì)陽性。相關(guān)抗體：抗DNP、抗dsDNA、抗核小體抗體、抗組蛋白抗體。第15頁/共72頁第16頁/共72頁第17頁/共72頁第18頁/共72頁第19頁/共72頁第20頁/共72頁第21頁/共72頁第22頁/共72頁核仁型：分裂間期細(xì)胞核仁著染熒光，分裂期細(xì)胞染色質(zhì)陰性。核仁顆粒型：與抗RNA多聚酶Ⅰ相關(guān)核仁均質(zhì)型：與PM-SCL相關(guān)核仁點(diǎn)型（1-2點(diǎn)）：與抗NOR抗體相關(guān)核仁

型(N)第23頁/共72頁第24頁/共72頁第25頁/共72頁第26頁/共72頁第27頁/共72頁第28頁/共72頁第29頁/共72頁第30頁/共72頁第31頁/共72頁著絲點(diǎn)型：分裂間期細(xì)胞核內(nèi)均勻散布大小較一致熒光顆粒（40-60），分裂期細(xì)胞染色質(zhì)著絲點(diǎn)密集排列。相關(guān)抗體：抗著絲點(diǎn)型抗體第32頁/共72頁第33頁/共72頁斑點(diǎn)型：分裂間期細(xì)胞核質(zhì)染色呈斑點(diǎn)狀，斑塊狀，核仁陰性，分裂期細(xì)胞染色質(zhì)陰性。相關(guān)抗體：與抗溶性核抗原相關(guān)第34頁/共72頁核膜型：分裂間期細(xì)胞熒光染色在核膜周圍，分裂

期細(xì)胞染色質(zhì)陰性。相關(guān)抗體：抗板層素抗體、gp-210抗體

第35頁/共72頁第36頁/共72頁第37頁/共72頁第38頁/共72頁第39頁/共72頁第40頁/共72頁第41頁/共72頁第42頁/共72頁第43頁/共72頁第44頁/共72頁第45頁/共72頁第46頁/共72頁第47頁/共72頁第48頁/共72頁第49頁/共72頁第50頁/共72頁第51頁/共72頁第52頁/共72頁第53頁/共72頁五、ANA在各疾病中陽性率

疾病陽性率（%）系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）活動(dòng)期95-100非活動(dòng)期80-100藥物性狼瘡（DLE）95-100混合性結(jié)締組織?。∕CTD）95-100系統(tǒng)性硬化（SSc）

70-90干燥綜合癥（SS）

60-80第54頁/共72頁五、ANA在各疾病中陽性率

疾病

陽性率（%）多發(fā)性肌炎/皮膚炎（PM/DM）

40-60類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）30-50

幼年類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（JRA）20-40慢性活動(dòng)性肝炎（CAH）10-20重癥肌無力（MG）10-20慢性淋巴性甲狀腺炎10-20正常人5-10第55頁/共72頁六、各型ANA臨床意義抗DNA抗體1、抗ds-DNA臨床意義SLE診斷標(biāo)準(zhǔn)之一活動(dòng)期SLE陽性率80%-90%,未治療SLE病人特異性90%，敏感性70%SLE活動(dòng)指標(biāo)之一，用于監(jiān)視SLE病情變化，活動(dòng)期判斷、藥物治療效果觀察30%-90%的活動(dòng)期SLE患者此抗體陽性,且抗體滴度的消長(zhǎng)與SLE的活動(dòng)程度相關(guān)，隨著疾病活動(dòng)的控制，抗dsDNA抗體滴度可以下降或消失,可作為治療監(jiān)測(cè)和預(yù)后評(píng)價(jià)的指標(biāo)?？筪sDNA抗體與DNA結(jié)合成為免疫復(fù)合物在腎小球基底膜沉積，或抗dsDNA抗體直接作用于腎小球抗原造成SLE患者的腎損害?？贵w高水平伴補(bǔ)體低水平，提示狼瘡性腎炎危險(xiǎn)性大抗dsDNA抗體陽性的患者較陰性患者發(fā)生腎炎的危險(xiǎn)性高12倍。第56頁/共72頁2、抗ss-DNA臨床意義對(duì)疾病診斷缺乏特異性，SLE陽性率70%以上，DIL：60%-80%，MCTD：20%-50%，PM/DM：40-50%，SSc：14%，SS：13%，RA：8%。非風(fēng)濕疾病（慢活肝、細(xì)菌、病毒感染等）、正常老年人也存在抗ss-DNA一般不用于常規(guī)檢測(cè)第57頁/共72頁抗組蛋白抗體（AHA）具有H1、H2A、H2B、H3和H4四個(gè)亞單位，常以四聚體形式存在,與DNA構(gòu)成的復(fù)合物稱為染色質(zhì),染色質(zhì)最基本的單位是核小體(nucleosome).所有組蛋白各成分均可能成為自身抗體的靶抗原.1.SLE的陽性率約30%-80%,并常伴有抗dsDNA抗體陽性,主要以抗H2A、H2A-H2B復(fù)合物和抗H1的IgG型抗體為主.2.藥物性狼瘡的陽性率達(dá)95％以上，但不伴有抗dsDNA抗體陽性,主要以抗H2A-H2B為主.常見的藥物有肼苯達(dá)嗪、異煙肼及氯丙嗪.AHA可以在多種結(jié)締組織病中出現(xiàn)，不具有診斷特異性。第58頁/共72頁抗DNA組蛋白復(fù)和物抗體1、狼瘡細(xì)胞臨床意義LE細(xì)胞在活動(dòng)性SLE中陽性率50%-80%，在緩解期和治療后性率低。在SS、MCTD、慢活肝、結(jié)核、腎炎、白血病中亦可見到LE細(xì)胞。2、抗DNP抗體臨床意義陽性主要見于SLE，活動(dòng)期陽性率80%-90%，非活動(dòng)期20%左右。其它結(jié)締組織病陽性率低于10%，且部分合并SLE第59頁/共72頁抗DNA組蛋白復(fù)和物抗體1、抗核小體抗體核小體含4種核心組蛋白，形成組蛋白八聚體，占據(jù)核小體頂部，通過聯(lián)結(jié)DNA與相鄰核小體連接。臨床意義該自身抗體產(chǎn)生早先于其它抗體，與腎小球腎炎有關(guān)。多見于活動(dòng)性狼瘡。在SLE中診斷敏感性58%-71%，特異性高達(dá)7%-99%。第60頁/共72頁抗可提取性核抗原抗體1、抗Sm抗體以患者Smith名字命名,Sm抗原是U族小分子細(xì)胞核核糖核蛋白（UsnRNP），具有抗原性的蛋白的分子量是29KD、28KD、13.5KD。Sm抗體和SnRNP是同一分子復(fù)合物中的不同抗原位點(diǎn)，故抗Sm抗體很少單獨(dú)出現(xiàn)，它常于U1RNP抗體相伴，約60％抗U1RNP抗體與抗Sm抗體中的28/29KD有交叉反應(yīng)?？筍m抗體陽性均伴有抗U1RNP抗體，而抗U1RNP抗體可以單獨(dú)存在。①.在SLE中陽性率為30.2%。雖然敏感性較低，但特異性較高。在全部抗Sm陽性的病例中，92.2%為SLE。因此，抗Sm抗體為SLE的標(biāo)記抗體。②.另外，有人還發(fā)現(xiàn)SLE病人由活動(dòng)期轉(zhuǎn)為緩解期后，狼瘡細(xì)胞可轉(zhuǎn)陰，ANA、抗DNA抗體效價(jià)可降低，但Sm抗體依然存在。因此，對(duì)早期、不典型的SLE或經(jīng)治療緩解后的回顧性診斷有一定意義第61頁/共72頁2、抗U1RNP臨床上應(yīng)用較多為U1RNP抗體，U1snRNP由U1RNP和9種不同的蛋白質(zhì)組成。具有抗原性的分子量有70KD、32KD和22KD。因?yàn)橐钥购藘?nèi)的核糖核蛋白得名，所作用的抗原是U1小分子細(xì)胞核核糖核蛋白（U1snRNP），所以又稱抗U1RNP抗體。①.混合性結(jié)締組織病(MCTD)：幾乎均為陽性，且滴度很高，對(duì)確立MCTD的診斷很有幫助。高滴度的抗RNP，尤其在沒有其他自身抗體存在的情況下，一般認(rèn)為是混合性結(jié)締組織病（MCTD）的診斷標(biāo)志。MCTD的抗RNP陽性率>95%。此種抗體陽性的患者，常有雙手腫脹、雷諾現(xiàn)象、肌炎和指（趾）端硬化。②.系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）：抗RNP抗體在SLE中的陽性率為40%左右，僅產(chǎn)生抗RNP抗體的SLE病人，常?？笵NA抗體陰性，腎臟受累較少，一般來說皮質(zhì)激素類藥物有很好的治療效果，預(yù)后理想，定期監(jiān)測(cè)抗RNP對(duì)療效觀察及預(yù)后判斷有實(shí)際意義?？筊NP抗體如和抗ds-DNA抗體、抗Sm抗體同時(shí)存在，則發(fā)生狼瘡腎炎的可能性較大。③.其他結(jié)締組織?。嚎筊NP抗體在其他結(jié)締組織病陽性率較低且滴度低?；旌闲越Y(jié)締組織病陽性率>95%,SLE30%-40%SS14%SSc12%,PM/DM15%。第62頁/共72頁3、抗SS-A抗體臨床意義原發(fā)性SS中陽性率40%-95%,SLE20%-60%，SSc24%,PBC20%?？贵w陽性可引起亞急性皮膚型狼瘡（SCLE）；IgG類抗體通過胎盤可引起新生兒狼瘡綜合癥（NLE），造成先天性心臟傳導(dǎo)阻滯。4、抗SS-B抗體臨床意義是SS的血清特異性抗體，原發(fā)性SS中陽性率65%-85%,SLE10%-15%，且大多為SLE合并SS。亦可引起新生兒狼瘡綜合癥（NLE），造成先天性心臟傳導(dǎo)阻滯?？筍SB和抗SSA抗體相伴出現(xiàn)，有單獨(dú)的SSA出現(xiàn)，但單獨(dú)的SSB出現(xiàn)的少。抗SSA和抗SSB抗體陽性，可造成新生兒狼瘡及先天性房室傳導(dǎo)阻滯。且常與血管炎、淋巴結(jié)腫大、白細(xì)胞減少、光過敏、皮損、紫癜等臨床癥狀相關(guān)。第63頁/共72頁5、抗核糖體抗體（抗-rRNP抗體）①抗rRNP抗體主要見于SLE，常在SLE活動(dòng)期中存在，陽性率在10%～20%左右，是診斷SLE的特異性抗體。如僅有抗rRNP抗體陽性的SLE患者，ANA常為陰性?？箁RNP抗體陽性患者中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變發(fā)生率高。②抗rRNP抗體與抗dsDNA抗體的消長(zhǎng)相平行，但與抗dsDNA抗體不同的是不會(huì)隨病情好轉(zhuǎn)立即消失，可持續(xù)1～2年后才轉(zhuǎn)陰。6、抗ScL-70抗體①PSS病人陽性率達(dá)30%～40%。雖然陽性率不高，但對(duì)PSS（SSC）有較高特異性（特異性達(dá)100%）。有抗Scl-70抗體陽性表示病性進(jìn)展較迅速，皮膚病變往往彌散廣泛，易發(fā)生肺間質(zhì)纖維化和指骨末端吸收。②重癥彌漫性PSS（SSc）中抗Scl-70抗體陽性率高達(dá)75％。有雷諾現(xiàn)象的患者存在抗Scl-70抗體，提示可能發(fā)展為PSS?？筍cl-70抗體與惡性腫瘤有明顯相關(guān)。第64頁/共72頁7、抗Jo-1抗體①Jo-1抗體對(duì)多發(fā)性肌炎的診斷具有較強(qiáng)的特異性，是目前公認(rèn)的多發(fā)性肌炎（PM）的血清標(biāo)記抗體。在多發(fā)性肌炎（PM）中陽性率達(dá)25％左右。在皮肌炎（DM）中陽性率為7.1%。合并肺間質(zhì)病變的PM／DM患者，陽性率高達(dá)60％。67％抗Jo-1抗體陽性的患者有HLA－DR3抗原。②其他結(jié)締組織病為陰性。③在抗JO-1和抗SSA二項(xiàng)陽性，約80%的多發(fā)性肌炎和皮肝炎患者合并有干燥綜合征。④而抗JO-1與抗RNP兩項(xiàng)陽性者臨床上都發(fā)現(xiàn)有雷諾氏現(xiàn)象。⑤抗Jo-1抗體綜合征：抗Jo-1抗體陽性、急性發(fā)熱、對(duì)稱性關(guān)節(jié)炎、“技工手”、雷諾現(xiàn)象、肌炎、肺間質(zhì)病變。8、抗增殖性細(xì)胞核抗原（PCAN）抗體臨床意義是SLE的血清標(biāo)記性抗體，但敏感性較低，僅3%-6%，與SLE活動(dòng)性及彌漫增殖性腎小球腎炎相關(guān)。第65頁/共72頁9、抗Mi-2抗體臨床意義是肌炎高度特異性抗體（>97%），成人DM（15%-25%）幼年型DM（10%-15%）PM/DM（5%-10%）?？贵w陽性患者95%有皮膚病變，多表現(xiàn)為V型及“圍巾”型皮疹與表皮增生，對(duì)治療的反應(yīng)及預(yù)后