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T100ThermalCycler中文操作手冊手冊內(nèi)容1工作環(huán)境T100ThermalCycler的介紹T100ThermalCycler創(chuàng)建、編輯和儲存程序4運行程序5管理文件夾和反應(yīng)程序文件6工具7儀器日常維護(hù)1工作環(huán)境工作溫度 15-31℃工作和存儲濕度20-80%工作電源100-240VAC(±10%),50-60HZ.PCR許可證有2T100ThermalCycler的介紹T100ThermalCycler各部分簡介T100ThermalCycler具有96孔的反應(yīng)模塊,可以使用標(biāo)準(zhǔn)96孔板、聯(lián)管或單管等多種耗材。儀器支持的樣品反應(yīng)體積為 1-100ul,推薦的反應(yīng)體積為15-50ul。儀器主要包括以下幾個部分:加熱模塊:放置裝有樣品的標(biāo)準(zhǔn)96孔板、聯(lián)管或單管熱蓋:加熱樣品管的頂部,防止樣品蒸發(fā)和冷凝觸屏:用于反應(yīng)程序的編輯、修改和運行,實時顯示運行程序USB接口:外接USB,導(dǎo)出數(shù)據(jù)LED指示燈:儀器正常運行時,指示燈亮散熱口:提供通風(fēng),用于儀器的快速升溫和降溫觸屏
儀器開機(jī)后,顯示觸屏界面,界面提供儀器的名字,日期和時間,觸屏上的四個按鍵分別代表的意義如下:NewProtocol:創(chuàng)建一個新的反應(yīng)程序SavedProtocols:查看、編輯、運行儲存的程序Incubate:可長時間運行一個恒定的溫度,與水浴鍋功能相似Tools:設(shè)置、儀器自檢、儀器信息、軟件升級2.3放置樣品向上打開儀器熱蓋,將樣品管放到相應(yīng)的位置,合上熱蓋。熱蓋的主要功能是在程序運行時,加熱樣品管的頂部,防止樣品蒸發(fā)和冷凝。放置樣品管時,要確保管子與反應(yīng)模塊完全接觸,且反應(yīng)模塊必須完全干凈。
3T100ThermalCycler創(chuàng)建、編輯和儲存程序創(chuàng)建新的程序,點擊觸屏界面的“NewProtocol”按鈕,進(jìn)入編輯界面。也可選擇編輯儲存的程序,點擊觸屏界面的“SavedProtocols”按鈕,選擇一個程序,點擊“Edite",進(jìn)入編輯界面。11:33111:331麗.0302蛤匕0053WCr0IQa77C73D5GOr&w2,2?X5新的程序編輯界面打開,如圖所示PCR反應(yīng)的模板按照需要的實驗程序,首先設(shè)置反應(yīng)體積,在Volume中輸入體積數(shù),可輸入范圍為1-100ul,推薦反應(yīng)體積為15-50ul。其次設(shè)置熱蓋的溫度,在Lid中輸入溫度,可輸入范圍為40-110℃,推薦溫度為1050c。最后,點擊反應(yīng)程序的每
步時,顯示為綠色,分別設(shè)置該步反應(yīng)的溫度和時間。點擊溫度按鈕,如95℃,出現(xiàn)數(shù)字鍵盤,輸入需要的溫度,點擊“OK”,確認(rèn)。同樣的操作編輯時間。NewPrctccoi“GOTO”可以設(shè)置反應(yīng)的循環(huán)數(shù),如“34X”,即共35個循環(huán),也可設(shè)置循環(huán)的起始反應(yīng)步驟,如“Step2”,即循環(huán)反應(yīng)從第2步開始至第4步結(jié)束,箭頭指示的過程。插入新的反應(yīng)步驟,點擊一個步驟,顯示為綠色,點擊“Insert”將在該步驟后面插入新的反應(yīng)步驟。在“InsertStep”界面選擇需要插入反應(yīng)步驟的類型,“Temperature”即可插入溫度反應(yīng),“Gradient”即可插入溫度梯度反應(yīng),“GOTO”即可插入PCR循環(huán)反應(yīng)。點擊“Delete",即可刪除選擇的步驟。
在Step1后面插入新的反應(yīng)步驟添加或刪除溫度梯度。選擇一個反應(yīng)步驟,點擊“Options",進(jìn)入步驟優(yōu)化窗口。NewProtocolStep4OptionsGradifntTtfnpfrrature1nmm?ntAtempfeycleNewProtocolStep4OptionsGradifntTtfnpfrrature1nmm?ntAtempfeycleExtentAtimekyde選擇“Gradient”,在“Backrow”輸入溫度梯度的最高溫度,在“Frontrow”輸入溫度梯度的最低溫度,右邊會顯示從A到H每一行的溫度值。注意:該儀器溫度梯度跨度范圍為1-25℃。AtimeicycleStep4OptionsA72O'CB71,3CC:70.16CAtimeicycleStep4OptionsA72O'CB71,3CC:70.16CExtendU:62.rcH:6i.(re步驟優(yōu)化窗口顯示溫度梯度中,點擊“OK”,返回程序主界面,最低和最高溫度的溫度梯度顯示在反應(yīng)步驟可以點擊溫度,直接修改溫度梯度,不用再進(jìn)入“0加0口”。中,Backandfrontrowtemperatures顯示62X>72七的溫度梯度Backandfrontrowtemperatures顯示62X>72七的溫度梯度溫度的遞增、時間的延伸和改變升溫速率。選擇一個反應(yīng)步驟,點擊“Options",進(jìn)入步驟優(yōu)化窗口。每一個實驗步驟都包括“ Increment”、“Extend"、“RampRate”,“7小6巾6叱”輸入X,即每個循環(huán)后溫度增加X℃,“Extend”輸入Y,即每個循環(huán)后時間延長Y秒,“RampRate”輸入Z,即升溫速率為Z。點擊“OK”,確認(rèn)。Step4設(shè)置了溫度遞增,每循環(huán)增加1C改變“GOTO”參數(shù)?!癎OTOStep”表示多個步驟的重復(fù)循環(huán)反應(yīng)。選擇一個"GOTOStep”,點擊“Step”按鈕,進(jìn)入數(shù)字鍵盤,修改數(shù)字為X,即可決定循環(huán)反應(yīng)的起始步驟為X,如“Step2”,即循環(huán)反應(yīng)從第2步開始至第4步結(jié)束,箭頭指示的過程。點擊“X”按鈕,進(jìn)入數(shù)字鍵盤,修改數(shù)字為Y,即表示再重復(fù)Y個循環(huán),總循環(huán)數(shù)為Y+1,如“34X”,即共35個循環(huán)。
MewProtocol反應(yīng)程序中GOTOStep2和34個循環(huán)點擊“Run”,無需儲存,直接運行編輯好的反應(yīng)程序。也可點擊“Save”按鈕,進(jìn)入儲存界面,在Folder后輸入或選擇儲存程序的文件,在Name后輸入反應(yīng)程序命稱,點擊“Save”,返回程序主界面。然后點擊“Run”,運行程序。4運行程序開始運行程序,有如下方法:?創(chuàng)建新的程序,點擊“Run”從“SavedProtocols”中選擇程序,點擊“Run”從“SavedProtocols”中選擇程序,點擊“Edite”,修改后,點擊“Run”前面已經(jīng)詳細(xì)介紹了創(chuàng)建和編輯新的反應(yīng)程序,下面介紹從“SavedProtocols”中選擇程序,運行。首先從開機(jī)界面中,點擊“SavedProtocols”,進(jìn)入選擇界面。其次從“Folders”文件夾中選擇文件,如“MAIN”。再次選擇“Files”文件中的反應(yīng)程序,如“ISCRIPT",“Preview”中會顯示所選程序的詳細(xì)設(shè)置,包括每一步的反應(yīng)溫度和時間等信息。。量空VHome FoldtfOpticmFM?Option* E(fit Run從“S已vedProtoc口回'中選擇"ISCR1PT”程序選擇好程序后,點擊“Run”,出現(xiàn)對話框,詢問是否修改反應(yīng)體積,點擊“OK”直接運行程序,或者點擊“Volume”修改體積后,再運行程序。
運行確認(rèn)對話框程序運行后,運行進(jìn)程可以通過兩種狀態(tài)顯示,分別是“Status”和“Clock”?!癝tatus”狀態(tài)顯示整個實驗程序的每個步驟,以及正在進(jìn)行的步驟?!癈lock”狀態(tài)顯示整個實驗程序的剩余時間。點擊“ViewStatus”和“ViewClock",可在二者之間進(jìn)行自由切換。暫停和恢復(fù)程序運行一個PCR反應(yīng)程序允許暫停的,暫停時,加熱模塊會維持在當(dāng)前實驗步驟的反應(yīng)溫度,熱蓋也維持原本的溫度,直到反應(yīng)程序恢復(fù)繼續(xù)運行。當(dāng)正在升溫或降溫時,程序暫停,儀器會繼續(xù)升溫或降溫,直到到達(dá)設(shè)定的溫度,才會保持不變。在“Status”狀態(tài)時,點擊“Pause”按鈕,反應(yīng)程序暫停。點擊“Resume”反應(yīng)程序在Step4時暫停按鈕,反應(yīng)程序繼續(xù)運行。3g0:30 0:30 1:00 34X 5:00 896反應(yīng)程序在Step4時暫停按鈕,反應(yīng)程序繼續(xù)運行。3g0:30 0:30 1:00 34X 5:00 896CC95"C17CNama:MINETimeRemaining:1151:22VokJine;10川49℃Sample跳過反應(yīng)程序中的某一步,可以縮短反應(yīng)時間。在在“Status”狀態(tài)時,點擊“SkipStep”按鈕,即可跳過當(dāng)前步驟,多次點擊“SkipStep”按鈕,即可跳過多個步驟。取消反應(yīng)程序。當(dāng)程序取消時,加熱模塊立刻停止溫度加熱。不要立即關(guān)閉儀器電源,儀器需要時間使加熱模塊降溫。在在“Status”狀態(tài)時,點擊“Cancel”按鈕,選擇“Yes”確認(rèn)。孵育功能。開機(jī)主界面,點擊“如313包6”按鈕,進(jìn)入孵育功能界面。編輯“Blocktemperature",輸入溫度值,即設(shè)置孵育溫度。編輯“Holdtime",輸入時間,即設(shè)置孵育時間,也可設(shè)為無窮時間。編輯“Lidtemperature",輸入溫度值,推薦105c保持熱該溫度,防止樣品蒸發(fā)或冷凝。點擊“Run”,運行孵育程序。結(jié)束孵育功能時,點擊“Cancel”。
孵育功能界面5管理文件夾和反應(yīng)程序文件開機(jī)進(jìn)入主界面,點擊“SavedProtocols”,進(jìn)入選擇界面,包括以下文件夾:Ltd105仁VoDume2。Ltd105仁VoDume2。pl6066cm07TC.730GOTO虱目02.29X72邙:QQMAINfolder:儀器自帶的一些標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)程序,可以編輯、刪除和重命名RECENTfolder:儲存的是最近使用過的20個程序CUSTOMfolder:可以設(shè)置為實驗室成員的個人文件夾USBfolder:外接SUB里的反應(yīng)程序新建文件夾,從"SavedProtocols”選擇界面,點擊“FolderOptions”,選擇,360”,輸入8個字節(jié)的名稱,點擊“OK”,完成。SavedProtocols il:U105-CLme:20ptIgO30iS*C.005:(rc.oioZC.73OOTOStep229XZC.500TC.g?函曲人"?Horrw Fo4d?fOplion*Fil?OpUocis Edit Run新建文件夾界面復(fù)制文件夾或文件,從“SavedProtocols”選擇界面,選擇文件夾或文件,點擊“FolderOptions”或“FileOption",選擇“Copy”,最后選擇文件或文件夾新的儲存位置,點擊“Save”,即可完成。刪除文件夾或文件,從“SavedProtocols”選擇界面,選擇文件夾或文件,點擊“FolderOptions”或“FileOption",選擇“Delete”,即可完成完整的文件夾或單個文件的刪除。重命名文件夾或文件,從“SavedProtocols”選擇界面,選擇文件夾或文件,點擊“FolderOptions”或“FileOption",選擇“Rename”,輸入新的名稱,點擊“OK”,確認(rèn)。6工具開機(jī)進(jìn)入主界面,點擊“丁。?;ā?,進(jìn)入選擇界面,包括以下文件夾:工具界面Settings:儀器的系統(tǒng)設(shè)置Self-Test:儀器自檢設(shè)置,檢測各部件的功能Logs:觀察反應(yīng)運行程序界面,可以被拷貝到USBAbout:觀察軟件的版本和儀器的機(jī)身號UpdateFirmware:升級儀器的版本ServiceLogin:可以從Bio-Rad廠家獲得幫助服務(wù)儀器的系統(tǒng)設(shè)置,從“Tools”界面,選擇“Settings”,進(jìn)入界面,會看到儀器的系統(tǒng)設(shè)置,包括“Cyclername”設(shè)置儀器的名稱,“Date”設(shè)置日期年月日等信息,“Time”設(shè)置詳細(xì)時間信息,“Displaybrightness”設(shè)置顯示屏亮度,“samplevolume”設(shè)置默認(rèn)的樣反應(yīng)體積,“Standbydelay”設(shè)置一段時間后,為了節(jié)約電資源,儀器會進(jìn)入待機(jī)狀態(tài),"Endofrunbeep”設(shè)置運行結(jié)束后,儀器會發(fā)出聲音,提醒用戶。
Stdndby中0裊TlmnStdndby中0裊TlmnHH;MU:SS?。緇qhriqhTflimDdlE系統(tǒng)設(shè)置界面儀器自檢功能,從“Tools”界面,選擇“Self-Test”,點擊“Start",儀器運行自檢程序,檢測儀器各部件的性能。儀器自檢界面升級儀器版本,從“Tools”界面,選擇“UpdateFirmware”,點擊“Start”,儀器運行升級程序,可升級到最新版本。UpdateFirmware IIMlFirmwareversion: L153Toupdatefirmware,insertaUSBflashdrivewiththelatestfirmwarefileandpressStart觀察軟件的版本和儀器的機(jī)身號,從“Tools”界面,選擇“About",即可看到儀器版本,機(jī)身號和儀器運行的總時間。AboutFirmwareversion1.153Serialnumber:TC121456Totalhoursrun:9423About界面7儀器日常
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