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本文格式為Word版,下載可任意編輯——各種培養(yǎng)基成分1.營養(yǎng)肉湯
成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化鈉5g,蒸餾水1000mL,pH7.4。
制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,121℃高壓滅菌15min。
2.營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基
成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化鈉5g,瓊脂17g,蒸餾水1000mL,pH7.2。
制法:將除瓊脂外的各成分溶解于蒸餾水中,校正pH,參與瓊脂,分裝于燒瓶內(nèi),121℃,15min高壓滅菌備用。
3.MRS培養(yǎng)基
成分:蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母粉5g,K2HPO42g,檸檬酸二銨2g,乙酸鈉5g,葡萄糖20g,吐溫801mL,MgSO4.7H2O0.58g,MnSO44H2O0.25g,(瓊脂15~20g),蒸餾水1000mL。
制法:將以上成分參與到蒸餾水中,加熱使完全溶解,調(diào)pH至6.2~6.4,分裝于三角瓶中,121℃,滅菌15min。
4.脫脂乳培養(yǎng)基
成分:牛奶,蒸餾水。
制法:將適量的牛奶加熱煮沸20~30min,過夜冷卻,脂肪即可上浮。除去上層乳脂即得脫脂乳。將脫脂乳盛在試管及三角瓶中,封口后置于滅菌鍋中在108℃條件下蒸汽滅菌10~15min,即得脫脂乳培養(yǎng)基。
5.培養(yǎng)基A
成分:蛋白胨10.0g,酵母提取物1.0g,葡萄糖10.0g,NaCL5.0g,瓊脂15.0g,水1000mL。制法:將以上成分參與到蒸餾水中,加熱使完全溶解,調(diào)pH至7.0~7.2,分裝于三角瓶中,121℃,滅菌15min。
6.PTYG培養(yǎng)基
成分:胰胨Tryptone(Oxoid)5g,大豆蛋白胨5g,酵母粉(Oxoid)10g,葡萄糖10g,吐溫8001mL,瓊脂15~20g,L-半胱氨酸鹽酸鹽0.05g,鹽溶液4mL。
制法:將以上成分參與到蒸餾水中,加熱使完全溶解,調(diào)pH至6.8~7.0,分裝于三角瓶中,115℃滅菌30min。
鹽溶液制備:無水氯化鈣0.2g,K2HPO41.0g,KH2PO41.0g,MgSO4。7H2O0.48g,NaCO3
10g,NaCL2g,蒸餾水1000mL,溶解后備用。
7.豆芽汁液體培養(yǎng)基
成分:豆芽汁10mL,磷酸氫二銨1g,KCL0.2g,MgSO4.7H2O0.2g,瓊脂20g。
制法:將以上成分參與到蒸餾水中,加熱使完全溶解,調(diào)pH至6.2~6.4,分裝于三角瓶中,0.04%的溴甲酚紫酒精溶液(黃色5.2~6.8紫色)作為指示劑,115℃滅菌20min。
豆芽汁制備:將黃豆芽或綠豆芽200g洗凈,在1000mL中煮沸30min,紗布過濾得豆芽汁、補足水分至1000mL。
8.麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基
成分:優(yōu)質(zhì)大麥或小麥,蒸餾水,碘液。
制法:取優(yōu)質(zhì)大麥或小麥若干,浸泡6~12h,置于深約2cm的木盤上攤平,上蓋紗布,每日早、中、晚各淋水一次,麥根伸長至麥粒兩倍時,中止發(fā)芽晾干或烘干。
稱取300g麥芽磨碎,加1000mL水,38℃保溫2h,再升溫至45℃,30min,再提高到50℃,30min,再升至60℃,糖化1~1.5h。
取糖化液少許,加碘液1~2滴,如不為藍色,說明糖化完畢,用文火煮半小時,四層紗布過濾。如濾液不清,可用一個雞蛋清加水約20mL調(diào)勻,打至起沫,倒入糖化液中攪拌煮沸再過濾,即可得澄清麥芽汁。用波美計檢測糖化液濃度,加水稀釋至10倍,調(diào)pH5~6,用于酵母菌培養(yǎng);稀釋至5~6倍,調(diào)pH7.2,可用于培養(yǎng)細菌,121℃滅菌20min。
9.查(察)氏培養(yǎng)基
成分:NaNO32g,K2HPO41g,MgSO4.7H2O0.5g,KCL0.5g,F(xiàn)eSO4.7H2O0.01g,蔗糖30g,瓊脂15~20g,蒸餾水1000mL,pH值自然。
制法:加熱溶解,分裝后121℃滅菌20min。
10.馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)
成分:馬鈴薯(去皮)200g,葡萄糖(或蔗糖)20g,瓊脂20g,水1000mL。
制法:pH值自然。將馬鈴薯去皮、洗凈、切成小塊,稱取200g參與1000mL蒸餾水,煮沸20min,用紗布過濾,濾液補足水至1000mL,再參與糖和瓊脂,溶化后分裝,121℃滅菌20min。另外,用少量乙醇溶解0.1g氯霉素,參與1000mL培養(yǎng)基中,分裝滅菌后可用于食品中霉菌和酵母菌計數(shù)、分開。
11.PY基礎(chǔ)培養(yǎng)基
成分:蛋白胨0.5g,酵母提取物1.0g,胰酶解酪胨(Trypticase)0.5g,鹽溶液Ⅱ4.0mL,蒸餾水1000mL。
鹽溶液Ⅱ成分:CaCL20.2g,MgSO4.7H2O0.48g,K2HPO41.0g,KH2PO41.0g,NaHCO310.0g,NaCL2.0g,蒸餾水1000mL。
制法:加熱溶解,分裝后121℃滅菌20min。
12.甘露醇瓊脂培養(yǎng)基(MSA)
成分:牛肉浸膏1g,月示胨NO.3(Difco)10g,D-甘露醇10g,NaCL75g,瓊脂約13g,酚紅0.025g,水1000mL,pH7.2~7.6
制法:按量將各成分(酚紅除外)混合,加熱使完全溶解,調(diào)pH至7.4±0.2。加1%的酚紅溶液2.5mL,混勻。121℃高壓滅菌15min
13.高氏一號(淀粉瓊脂)培養(yǎng)基(主用于放線菌、霉菌培養(yǎng))
可溶性淀粉20g,KNO31g,NaCL0.5g,K2HPO40.5g,MgSO4.7H2O0.5g,F(xiàn)eSO4.7H2O0.01g,瓊脂20g,蒸餾水1000mL,pH7.2~7.4,121℃滅菌20min。
14.淀粉銨鹽培養(yǎng)基(主要用于霉菌、放線菌培養(yǎng))
可溶性淀粉10g,(NH4)2SO42g,K2HPO4lg,MgSO4.H2Olg,NaCL1g,CaCO33g,蒸餾水1000mL,pH7.2~7.4,121℃滅菌20min。若參與15~20g瓊脂即成固體培養(yǎng)基。
15.麥?zhǔn)吓囵B(yǎng)基(醋酸鈉瓊脂培養(yǎng)基)
葡萄糖1.0g,KCL1.8g,酵母汁2.5g,醋酸鈉8.2g,瓊脂15g,蒸餾水1000mL,pH自然,0.7kg/cm2滅菌30min。
16.高鹽察氏培養(yǎng)基(用于霉菌和酵母菌計數(shù)、分開用)
硝酸鈉2g,磷酸二氫鉀1g,硫酸鎂(MgSO47H2O)0.5g,氯化鉀0.5g,硫酸亞鐵0.01g,氯化鈉60g,蔗糖30g,瓊脂20g,蒸餾水1000mL,115℃滅菌30min。
注:①分開食品和飲料中的霉菌和酵母可選用馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養(yǎng)基和/或孟加拉紅培養(yǎng)基。②分開糧食中的霉菌可用高鹽察氏培養(yǎng)基。
17.糖、醇類發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基
(1)一般細菌常以休和利夫森二氏培養(yǎng)基
蛋白胨5g,NaCL5g,K2HPO40.2g,糖醇(葡萄糖或其它糖、醇)10g,瓊脂5~6g,1%溴甲酚紫(溴百里香草酚藍)3mL,蒸餾水1000mL,pH7.0~7.2,分裝試管,培養(yǎng)基高度約4.5cm,115℃滅菌20min。
(2)芽孢菌培養(yǎng)基
(NH4)2HPO41.0g,KCL0.2g,MgSO4.7H2O0.2g,酵母膏0.2g,瓊脂5~6g,糖或醇類10.0g,蒸餾水1000mL,溴甲酚紫(0.04%)15mL,pH7.0~7.2,分裝試管,培養(yǎng)基高度約4~5cm,112℃滅菌30min。
(3)乳酸菌培養(yǎng)基
蛋白胨5g,牛肉膏5g,酵母膏5g,吐溫80(Tween80)0.5mL,糖或醇10g,瓊脂5~6g,蒸餾水(自來水)1000mL,參與1.6%溴甲酚紫溶液約1.4mL。以上調(diào)pH6.8~7.0,分裝試管,112℃滅菌30min。
18.硝酸鹽培養(yǎng)基(硝酸鹽還原試驗用)
蛋白胨5.0g,KNO30.2g,蒸餾水1000mL,pH7.4,每管分裝4~5mL,121℃滅菌15~20min。
吲哚試驗培養(yǎng)基:1%胰蛋白胨,調(diào)pH7.2~7.6,分裝1/3~1/4試管,115℃滅菌30min。
19.硫化氫試驗(紙條法)培養(yǎng)基
蛋白胨10g,NaCL5g,牛肉膏10g,半胱氨酸0.5g,蒸餾水1000mL,pH7.0~7.4,分裝試管,每管液層高度4~5cm,112℃滅菌20~30min。另外將普通濾紙剪成0.5~1cm寬的紙條,長度根據(jù)試管與培養(yǎng)基高度而定。用5%~10%的醋酸鉛將紙條浸透,然后用烘箱烘干,放于培養(yǎng)皿中滅菌備用。
20.尿素培養(yǎng)基(尿酶試驗)
成分:蛋白胨1.0g,葡萄糖1.0g,NaCL5.0g,KH2PO42.0g,0.4%酚紅3.0mL,瓊脂20.0g,20%尿素100.0mL,pH7.1~7.4。
制法:將除尿素和瓊脂以外的成分派好,并校正pH值,參與瓊脂,加熱熔化并分裝于三角瓶,121℃滅菌15min,冷卻至50~55℃,參與過濾除菌的尿素溶液,分裝于滅菌試管內(nèi),擺成瓊脂斜面?zhèn)溆谩?/p>
21.氮源利用基礎(chǔ)培養(yǎng)基
KH2PO41.36g,NaH2PO42.13g,MgSO47H2O0.2g,F(xiàn)eSO4.7H2O0.2g,CaCL20.5g,葡萄糖10.0g,蒸餾水1000mL。
將需要測定的氨基酸、氨態(tài)氮(如磷酸氫二氨)、硝態(tài)氮(如硝酸鉀)參與到上述基礎(chǔ)培養(yǎng)
基中,使其終濃度為0.05~0.1%,如測定菌不能利用葡萄糖為碳源,可用其它碳源代替(終濃度為0.2~0.5%),另做一份不加氮源的空白對照,調(diào)pH7.0~7.2,分裝于試管,每管4~5mL,112℃滅菌20~30min,制備出的培養(yǎng)基要求無沉淀。
22.甲基紅培養(yǎng)基(M.R及V-P試驗用)
蛋白胨7.0g,葡萄糖5.0g,K2HPO4(或NaCL)5g,水1000mL,pH7.0~7.2,每管分裝4~5mL,115℃滅菌30min。
23.動力、靛基質(zhì)、尿素(MIU)綜合培養(yǎng)基(用于檢驗細菌運動性、吲哚、尿素酶用)
蛋白胨(含色氨酸)30g,KH2PO42g、NaCL5g、瓊脂3g、0.2%酚紅酒精溶液2mL、尿素20g、蒸餾水1000mL。分裝于小試管,112℃滅菌15min,滅菌后液體應(yīng)呈淡黃色。
24.半固體培養(yǎng)基(用于細菌的動力試驗)
牛肉膏5.0g,蛋白胨10.0g,瓊脂3~5g,蒸餾水1000mL,pH7.2~7.4,熔化后分裝試管(8mL)121℃滅菌15min,取出直立試管待凝固。
25.M17瓊脂培養(yǎng)基(分開、培養(yǎng)乳球菌等的選擇培養(yǎng)基)
植物蛋白胨5g,酵母粉5g,聚蛋白胨5g,抗壞血酸0.5g,牛肉膏2.5g,MgSO47H2O0.01g,-甘油磷酸二鈉19g,蒸餾水1000mL,121℃滅菌15min。
26.蛋白胨水溶液(靛基質(zhì)試驗用)
蛋白胨20.0g,NaCL5.0g,蒸餾水1000mL,pH7.4,121℃滅菌15min。
27.精氨酸雙水解酶試驗培養(yǎng)基
成分:蛋白胨1g,氯化鈉5g,K2HPO40.3g,L-精氨酸10g,瓊脂10g,酚紅0.01g,蒸餾水1000
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