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微生物的分布與消毒滅菌第1頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四看書找答案1、什么是正常菌群?2、什么是滅菌、消毒、防腐、無菌及無菌操作?想想消毒、滅菌和防腐有什么區(qū)別?2023/4/82第2頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四第一節(jié)微生物的分布一、微生物在自然界的分布(一)土壤中的微生物(二)水中的微生物(三)空氣中的微生物2023/4/83第3頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四二、微生物在人體的分布(一)正常菌群的定義

-分布在人類的體表及其與外界相通的腔道中,在機體免疫機能正常時是無害的微生物群體。2023/4/84第4頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四(二)人體微生物的分布2023/4/85第5頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四

(三)正常菌群的作用1、生物拮抗作用——屏障

2、免疫作用—

免疫刺激3、營養(yǎng)與代謝作用——合成維生素4、抑制腫瘤的作用

2023/4/86第6頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四占位性生物屏障作用2023/4/87第7頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四細菌方面機體方面正常菌群/非致病菌條件致病菌?寄生部位改變菌群失調(diào)免疫功能下降(四)、條件致病菌和菌群失調(diào)2023/4/88第8頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四第二節(jié)消毒與滅菌消毒滅菌概念物理方法化學方法生物學方法2023/4/89第9頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四消毒:殺死物體或介質中的病原微生物的方法(芽胞及非病原微生物不一定能殺死)。滅菌:殺死物體或介質中所有微生物的

方法(包括所有細菌繁殖體及芽

胞)。判斷標準?消毒滅菌有關概念防腐(抑菌):防止或抑制微生物生長繁殖的方法。(微生物不一定死亡)2023/4/810第10頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四無菌操作:防止細菌進入機體或對象的技術,稱無菌操作。無菌:在一定范圍內(nèi)沒有活的微生物存在。2023/4/811第11頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四無菌操作2023/4/812第12頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四一、物理方法常用方法(一)熱力法(干熱、濕熱)(二)輻射(紫外線、電離幅射、微波)(三)濾過除菌(除菌濾器、適用物品)(四)超聲波(機制:裂解細菌,主要用于粉碎細胞、提取抗原)(五)干燥(六)低溫

2023/4/813第13頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四(一)熱力滅菌法原理:使微生物蛋白質變性凝固,酶失活;核糖體解體破壞細胞膜的結構;微生物體內(nèi)的DNA斷裂。熱力滅菌法干熱滅菌法濕熱滅菌法2023/4/814第14頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四

焚燒----最徹底的滅菌方法燒灼----直接用火焰滅菌方法如接種環(huán)、試管口、三角瓶口干烤----加熱160-170℃2h

藥粉、玻璃器皿、陶瓷1、干熱滅菌法紅外線----熱效應,與干烤類似滅菌效果:可殺死營養(yǎng)體和芽胞2023/4/815第15頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四灼燒滅菌法紅外線接種環(huán)滅菌器2023/4/816第16頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四干烤滅菌法電熱烘箱真空干燥滅菌箱實驗室常用設備2023/4/817第17頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四濕熱滅菌與干熱滅菌的比較同一溫度下,濕熱滅菌比干熱滅菌效果好原因1、濕熱中細菌菌體蛋白較易凝固2、濕熱的穿透力比干熱強3、濕熱的蒸汽有潛熱2023/4/818第18頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四2、濕熱滅菌法高壓蒸汽滅菌法最有效的濕熱滅菌法121℃15-20mim(殺芽胞)煮沸消毒法水煮100℃5mim(殺繁殖體)-5h(殺芽胞)流通蒸汽消毒法巴氏消毒法間歇滅菌法水蒸汽100℃15-30mim(殺繁殖體)反復多次流動蒸汽間歇加熱滅菌(殺芽胞)較低的溫度61℃30mim/71℃30s(殺致病菌)2023/4/819第19頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四方法:水中煮沸15min滅菌效果:可殺死所有營養(yǎng)細胞和一部分芽胞適用對象:玻璃注射器和外科器械的消毒。Cncnc-micro(1)煮沸法2023/4/820第20頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四方法:100℃蒸汽持續(xù)15-30min效果:殺繁殖體適用范圍:外科手術器械、注射器、膠管或食具等(2)流通蒸汽消毒法2023/4/821第21頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四奶瓶消毒器2023/4/822第22頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四方法:常壓蒸汽反復幾次進行滅菌。適用對象:不宜高壓滅菌的培養(yǎng)基,

不耐熱的藥物和營養(yǎng)物、發(fā)酵車間的管道等。滅菌效果:可殺死芽胞。(3)間歇滅菌法2023/4/823第23頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四適用對象:牛奶、奶酪、果汁、酒類、糖漿等食品消毒。方法:61.7-62.8oC處理30min或71.6oC度處理15秒或82℃處理4秒效果:消毒(4)巴氏消毒法(低溫消毒法)2023/4/824第24頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四2023/4/825第25頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四UHT技術(超高溫滅菌瞬時滅菌)135℃~152℃2023/4/826第26頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四2023/4/827第27頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四

滅菌效果:殺芽孢適用范圍:耐高溫的物體,如普通培養(yǎng)基、生理鹽水、玻璃器皿、敷料、手術器械、某些注射液、手術衣等。濕熱滅菌法中效果最好的方法(5)高壓蒸氣滅菌2023/4/828第28頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四①高壓蒸汽滅菌法溫度/℃壓力/kPa(kg/cm2)時間/min11040.52(0.4)4011570.91(0.7)30120101.3(1.0)20125141.82(1.4)15130182.34(1,8)10滅菌條件最常用是:121℃,103.1kPa,15-20min2023/4/829第29頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四高壓蒸汽滅菌鍋2023/4/830第30頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四常用設備:手提式熱壓滅菌器2023/4/831第31頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四①高壓蒸汽滅菌法常用設備:臥式熱壓滅菌柜2023/4/832第32頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四高壓蒸氣滅菌注意點:檢查壓力表是否靈敏,壓力與溫度是否對應滅菌初期先排凈鍋內(nèi)冷空氣;滅菌時間計算:達到規(guī)定壓力和溫度開始計。鍋內(nèi)水分要充足;滅菌物品裝量不宜太滿;滅菌結束需緩慢減壓;滅菌結束,趁熱取出物品。2023/4/833第33頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四(二)輻射1、日光與紫外光

紫外線殺菌機理:波長265nm的殺菌作用最強干擾DNA的復制與轉錄

穿透力較弱表面消毒:不耐熱物品特點:適用范圍:空氣消毒:手術室、傳染病房、車間、微生物實驗室

滅菌效果:殺營養(yǎng)體使用時注意防護!2023/4/834第34頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四殺菌機理:適用范圍:2、電離輻射包括高速電子、X射線和γ射線產(chǎn)生游離基,破壞DNA。一次性醫(yī)用塑料制品的消毒食品的消毒-不破壞其營養(yǎng)成分

2023/4/835第35頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四(三)濾過除菌法物理阻留方法:

除去液體或空氣中的細菌濾菌器濾膜孔徑0.22-0.45μm,

不能除病毒、支原體

適用范圍血清、毒素、輸液、生物制品、抗生素以及空氣等的除菌2023/4/836第36頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四過濾滅菌2023/4/837第37頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四2023/4/838第38頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四2023/4/839第39頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四2023/4/840第40頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四2023/4/841第41頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四(四)超聲與超聲波:使微生物細胞裂解破碎。2023/4/842第42頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四(五)干燥:脫水和鹽類濃度增高。2023/4/843第43頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四(六)低溫:抑制生長繁殖。4-10℃存活數(shù)月;-273℃可長期保存菌種。2023/4/844第44頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四2023/4/845第45頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四

常用的物理消毒滅菌方法種類方法效果適用范圍干熱滅菌法焚燒法直接燃燒滅菌廢棄污染物、或焚燒爐有傳染性的內(nèi)燃燒動物尸體等

燒灼法直接用火焰燒滅菌接種環(huán)、試管口或瓶口干烤法干烤箱內(nèi)滅菌耐高溫物品160~170℃2-3h滅菌玻璃物品、瓷器等

2023/4/846第46頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四種類方法效果適用范圍濕熱滅菌法

巴氏消毒法62.1-62.8℃30min

消毒牛奶、酒類、

或71.1℃15~30s

糖漿、果汁

煮沸法l00℃5-10min

殺死繁殖體外科手術器械、

注射器、

膠管或

食具等流通蒸氣消毒法阿諾氏滅菌器消毒同上或普通蒸籠進行間歇滅菌法反復多次的滅菌不耐熱物流通蒸氣品或特殊條

件下的滅菌

2023/4/847第47頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四種類方法效果適用范圍高壓蒸氣滅菌法高壓蒸汽滅菌耐高溫高

滅菌器內(nèi)

壓手術器

15磅121.3℃15~20min

械、手術

衣、敷料等

一般培養(yǎng)基

10磅115℃15~30min含糖培養(yǎng)基

或注射劑2023/4/848第48頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四種類方法效果適用范圍紫外線消毒法紫外線燈照射消毒空氣或物體30—60min

表面消毒品過濾除菌法細菌濾器血清、抗毒素、

生物制品、維生素、蛋白質

2023/4/849第49頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四二、化學方法利用化學藥物破壞微生物的化學組成、物理結構和生理活動,達到防腐滅菌目的。2023/4/850第50頁,共53頁,2023年,2月20日,星期四類型名稱及使用方法作用原理應用范圍醇類70%—75%乙醇脫水、蛋白質變性皮膚、器皿醛類0.5%—10%甲醛2%戊二醛(pH=8)蛋白質變性房間、物品消毒

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