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關(guān)于氨基酸的

定量分析

03化學(xué)3班

氨基酸的分析方法化學(xué)分析法——甲醛滴定法甲醛滴定法用于氨基氮的測(cè)定,可以測(cè)出樣品中總氨基酸的含量,其原理是在中性或弱堿性水溶液中,氨基酸的α—氨基與醛類反應(yīng)生成Schiff堿:α—氨基酸與甲醛反應(yīng)生成亞甲基亞氨基衍生物

亞甲基甲氨基衍生物用堿滴定,從而得到樣品中總氨基酸的含量。但是，甲醛法準(zhǔn)確度差,終點(diǎn)較難掌握。我們還學(xué)過(guò)凱氏定氮法，測(cè)定樣品中總氮的含量。雖然準(zhǔn)確度高,但操作步驟復(fù)雜,試劑耗量多,測(cè)定周期長(zhǎng)。亮黃色化合物紫色化合物衍生反應(yīng)溶液的pHpH5-pH6的弱酸性130℃

茚三酮衍生顯色反應(yīng)的靈敏度可達(dá)2×10-10～5×10-10mol/L,衍生物穩(wěn)定性較好。衍生劑能同時(shí)與一級(jí)和二級(jí)氨基酸反應(yīng)并同步檢測(cè)但是，衍生反應(yīng)條件要求較高,需附設(shè)加溫衍生裝置,儀器造價(jià)高并專一性強(qiáng)。分析時(shí)間長(zhǎng),分析成本高,工作效率低。

L-胱氨酸含量的測(cè)定

水解液—中和—沉淀過(guò)濾—粗品—酸溶—除Fe等雜質(zhì)—脫色—中和—沉淀過(guò)濾—干燥—精制品。溴能將胱氨酸氧化成α-氨基-β-磺基-丙酸,過(guò)量的溴又將碘化鉀中碘離子氧化成游離碘,用碘量法測(cè)定碘的量,從而可進(jìn)行L-胱氨酸的間接測(cè)定。HO2S—CH2—CHNH2—COOH氫氧化鈉溶液:10g/L,鹽酸,碘化鉀溶液:450g/L,用時(shí)配制,溴液:C(Br2)=0.1mol/L,稱取溴酸鉀3g,溴化鉀15g,加水溶解成1000mL,置于棕色瓶中保存，淀粉溶液:5g/L,新鮮配制,硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液:C(Na2S2O3)=0.1mol/L。KBrO3+5KBr+6HCl——3Br2+6KCl+3H2OS—CH2—CHNH2—COOH5Br2+︱+6H2OS—CH2—CHNH2—COOH——2HO2S—CH2—CHNH2—COOH+10HBrBr2+2KI——I2+2KBrI2+2Na2S2O3——2NaI+Na2S4O6

V1———空白實(shí)驗(yàn)消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積/mL;V2———試樣滴定消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積/mL;C———硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度/mol/L;m———試樣的質(zhì)量/g;0.02403———與1.

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