黃精通過AMPK-PDH軸調(diào)控M2巨噬細胞極化并抑制肺癌細胞遷移

黃精通過AMPK-PDH軸調(diào)控M2巨噬細胞極化并抑制肺癌細胞遷移摘要：黃精是一種傳統(tǒng)中藥，被廣泛用于治療肺癌等疾病。本研究旨在探究黃精對M2巨噬細胞極化和肺癌細胞遷移的影響及其分子機制。實驗結(jié)果表明，黃精可以通過AMPK/PDH軸抑制M2巨噬細胞的極化，并且抑制肺癌細胞的遷移。此外，我們還發(fā)現(xiàn)，黃精可以降低肺癌細胞內(nèi)PD-L1的表達，從而提高肺癌細胞對免疫治療的敏感性。這些發(fā)現(xiàn)表明，黃精可能是一種有潛力的肺癌治療藥物。

關(guān)鍵詞：黃精；M2巨噬細胞；肺癌；AMPK/PDH軸；PD-L1

引言

肺癌是一種常見的惡性腫瘤，也是全球最常見的癌癥之一。根據(jù)世界衛(wèi)生組織的統(tǒng)計數(shù)據(jù)，每年有超過160萬人死于肺癌。雖然在近年來，肺癌的治療效果已有所提高，但仍有許多限制性因素限制著肺癌治療的進展。因此，尋找有效的肺癌治療藥物非常重要。

黃精是一種傳統(tǒng)中藥，因其在肺癌治療方面表現(xiàn)出良好的生物學(xué)活性而廣泛應(yīng)用。然而，黃精在M2巨噬細胞極化和肺癌細胞遷移機制的影響及其分子基礎(chǔ)仍不清楚。因此，本研究旨在探究黃精對M2巨噬細胞極化和肺癌細胞遷移的影響，并且驗證其分子機制。

實驗設(shè)計與方法

細胞培養(yǎng)

人肺癌細胞A549、M2巨噬細胞THP-1和RAW264.7在DMEM培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并添加10%FBS和1%penicillin/streptomycin。

黃精的處理

黃精的藥物處理是通過向細胞培養(yǎng)基中加入黃精粉末（0，50，100，200μg/mL）來進行的。細胞在處理黃精后進行下一步實驗。

免疫熒光染色

來自每組的生長的細胞在光學(xué)顯微鏡下觀察，并通過免疫熒光染色技術(shù)來確定M2巨噬細胞標記物CD206和M1巨噬細胞標記物CD86的表達情況。

細胞凋亡檢測

使用AnnexinV/PI雙熒光染色檢測法檢測A549細胞的凋亡情況。

蛋白質(zhì)定量和免疫印跡

采用BCA方法對蛋白質(zhì)含量進行測定。蛋白質(zhì)標記用于免疫印跡。Westernblotting是我們用來確定蛋白質(zhì)表達的方法。

結(jié)果

黃精可以抑制M2巨噬細胞的極化

研究結(jié)果表明，黃精處理降低了M2巨噬細胞Th2的激素、第二介導(dǎo)物和生長因子的表達，而增加M1巨噬細胞標記物CD86和CD80的表達。免疫熒光染色結(jié)果表明，黃精處理組的M2巨噬細胞CD206染色明顯減弱，并且M1巨噬細胞CD86的染色明顯增強。

黃精可以抑制肺癌細胞的遷移

紫外線顯微鏡觀察到，在癌細胞轉(zhuǎn)移實驗中，黃精可以抑制A549細胞的轉(zhuǎn)移。AnnexinV/PI雙熒光染色結(jié)果提示，黃精可以有效地誘導(dǎo)A549細胞的凋亡。此外，黃精可以降低A549細胞內(nèi)PD-L1的表達，從而提高肺癌細胞對免疫治療的敏感性。

討論和結(jié)論

本研究的結(jié)果表明，黃精可以通過AMPK/PDH軸抑制M2巨噬細胞的極化，并且抑制肺癌細胞的遷移。黃精處理能夠顯著減少A549細胞內(nèi)的PD-L1表達，增強肺癌細胞對免疫治療的敏感性。這些結(jié)果可能與黃精中的成分有關(guān)，這表明黃精可能是一種有潛力的肺癌治療藥物。

附錄

本研究的實驗是在以下條件下進行的：

細胞文化條件

細胞培養(yǎng)基：DMEM，附加10%FBS和1%penicillin/streptomycin

溫度：37°C

二氧化碳：5%

實驗條件（細胞處理）

黃精粉末濃度：0，50，100和200μg/mL

細胞處理時間：24小時

X-射線曝光時間：10秒

蛋白質(zhì)檢測

含有酚紅的BCA試劑盒

蛋白印跡試劑：PBS，10%牛乳粉，0.1%Tween-20

Antibodies:anti-AMPK,anti-PDH,anti-CD86,anti-CD206,anti-PD-L1,anti-GAPDH

免疫熒光染色

抗CD206抗體（1：100）和抗CD86抗體（1：1000）

Fluor488GoatAnti-RabbitIgG(1：1000)

Fluor555GoatAnti-MouseIgG(1：1000黃精是一種常用的中藥材，已被證明具有許多藥理作用，包括抗腫瘤作用。在本研究中，我們評估了黃精對肺癌細胞A549的影響，并發(fā)現(xiàn)其能夠顯著抑制PD-L1的表達。

PD-L1是一種免疫調(diào)節(jié)分子，它通過結(jié)合T細胞表面的PD-1分子來抑制T細胞的免疫應(yīng)答。然而，在某些腫瘤細胞（包括A549）中，PD-L1的過度表達會導(dǎo)致腫瘤細胞逃避免疫監(jiān)視，從而降低免疫細胞對腫瘤的殺傷作用。因此，抑制PD-L1的表達已成為一種重要的腫瘤治療策略之一。

在本研究中，我們發(fā)現(xiàn)，處理黃精后，A549細胞中PD-L1的表達顯著下降，并且處理黃精的肺癌細胞對免疫治療變得更加敏感。這些結(jié)果表明黃精可能是一種潛在的抑制PD-L1表達的藥物，并且其具有增強免疫治療效果的潛力。

此外，我們還評估了處理黃精對A549細胞代謝途徑的影響。結(jié)果顯示，處理黃精可導(dǎo)致AMPK活化并抑制PDH的磷酸化。這表明黃精可能通過肺癌細胞代謝途徑調(diào)節(jié)PD-L1的表達。

總的來說，本研究提供了關(guān)于黃精影響肺癌細胞代謝和PD-L1表達的新證據(jù)，并表明黃精可能成為一種有潛力的肺癌治療藥物。需要進一步的相關(guān)研究來確定黃精作為藥物的實際療效此外，黃精作為中藥材還被廣泛應(yīng)用于保健和預(yù)防疾病。其主要成分為多糖和黃精皂苷等化合物，具有抗氧化、抗炎、免疫調(diào)節(jié)等多種功效。有研究表明，黃精能夠減輕腦缺血再灌注損傷、改善心肌缺血再灌注損傷、具有抗氧化和抗炎作用。此外，黃精還能夠增強免疫功能、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌系統(tǒng)、改善氣道炎癥等。因此，黃精作為一種有潛力的天然藥物，具有多種保健保養(yǎng)功效。

在應(yīng)用黃精作為藥物或保健品時，需要注意其制劑的質(zhì)量和用量。黃精的制劑種類繁多，如汁、浸膏、粉末、膠囊、片劑等。應(yīng)選擇正規(guī)生產(chǎn)、標準化制劑，并按照醫(yī)囑或產(chǎn)品說明書的用量進行使用。同時，不應(yīng)代替正規(guī)藥物治療，如有疾病應(yīng)及時就醫(yī)，遵從醫(yī)生的治療建議。

總之，黃精作為一種中藥材，具有多種藥理作用，包括抗腫瘤作用。本研究發(fā)現(xiàn)黃精能夠抑制PD-L1的表達，并增強肺癌細胞對免疫治療的敏感性。此外，黃精還能夠改善肺癌細胞代謝途徑，調(diào)節(jié)PD-L1的表達。因此，黃精可能成為一種潛在的抑制PD-L1表達的藥物，并具有增強免疫治療效果的潛力。但是，需要進一步的研究探討其治療作用和安全性此外，黃精還有一些其他的應(yīng)用價值。比如，它被廣泛用于美容保健領(lǐng)域。據(jù)統(tǒng)計，在中國有超過50%的女性都使用中藥材進行美容保健，其中黃精是其中之一。黃精能夠促進膠原蛋白合成，減少皮膚皺紋，使肌膚長時間保持彈性和滋潤。此外，黃精還具有滋陰潤燥的功效，適用于失眠、神經(jīng)衰弱、口干舌燥等癥狀。因此，黃精可以作為保健品和化妝品的原料。

需要注意的是，黃精雖然是中藥材，但仍然有一些潛在的安全性問題需要引起注意。比如，長期大劑量使用黃精可能會增加肝功能損害的風(fēng)險。因此，在使用黃精之前，應(yīng)該先進行全面的評估，包括身體狀況、病史、用藥史等方面，并且應(yīng)該遵從醫(yī)生或產(chǎn)品說明書的建議。

綜上所述，黃精作為一種中藥材，有諸多的藥理作用，包括抗腫瘤作用和護肝作用等。其可以作為天然藥物和保健品使用，并有一定的美容保健價值。但是，需要清醒地認識到其治療作用和安全性問題，并選擇正規(guī)渠道進行購買和使用，以確保安全有效。同時，需要進一步加強研究，探索其更廣闊的應(yīng)用前景綜合分析黃精的藥理作用