酶促反應(yīng)動力學(xué)課件

第六章

酶促反應(yīng)動力學(xué)第六章酶促反應(yīng)動力學(xué)

酶促反應(yīng)動力學(xué)是研究酶促反應(yīng)速度及影響此速度的各種因素的科學(xué):

酶促反應(yīng)的速度方程-米氏方程影響速度的各種因素:底物濃度;

酶濃度;

pH;

溫度

抑制劑;

激動劑.第一節(jié)底物濃度對酶反應(yīng)速率的影響

在低底物濃度時,反應(yīng)速度與底物濃度成正比，表現(xiàn)為一級反應(yīng)特征。當(dāng)?shù)孜餄舛冗_到一定值，幾乎所有的酶都與底物結(jié)合后，反應(yīng)速度達到最大值（Vmax），此時再增加底物濃度，反應(yīng)速度不再增加，表現(xiàn)為零級反應(yīng)。E+SESE+Pk1K-1kcat提出“中間產(chǎn)物”假說解釋這種現(xiàn)象底物濃度對酶反應(yīng)速度的影響Km的定義：

酶促反應(yīng)速度達到最大反應(yīng)速度一半時的底物濃度。

Vmax酶被底物飽和時的反應(yīng)速度.當(dāng)?shù)孜餄舛确浅４髸r,反應(yīng)速度接近一個恒定值S

米氏方程Km即為米氏常數(shù)，Vmax為最大反應(yīng)速度當(dāng)反應(yīng)速度等于最大速度一半時,即V=1/2Vmax,Km=[S]上式表示,米氏常數(shù)是反應(yīng)速度為最大值的一半時的底物濃度。因此,米氏常數(shù)的單位為mol/L。Km和Vmax可以用雙倒數(shù)作圖法確定

雙倒數(shù)作圖法斜率=Km/Vmax-1/Km1/Vmax第三節(jié)溫度對酶反應(yīng)的影響一方面是溫度升高,酶促反應(yīng)速度加快。另一方面,溫度升高,酶的高級結(jié)構(gòu)將發(fā)生變化或變性，導(dǎo)致酶活性降低甚至喪失。因此大多數(shù)酶都有一個最適溫度。在最適溫度條件下,反應(yīng)速度最大。第四節(jié)pH對酶反應(yīng)的受影響

pH的影響

在一定的pH下,酶具有最大的催化活性,通常稱此pH為最適pH。抑制劑對酶活性的影響使酶的活性降低或喪失的現(xiàn)象，稱為酶的抑制作用。能夠引起酶的抑制作用的化合物則稱為抑制劑。酶的抑制劑一般具備兩個方面的特點：

a.在化學(xué)結(jié)構(gòu)上與被抑制的底物分子或底物的過渡狀態(tài)相似。

b.能夠與酶的活性中心以非共價或共價的方式形成比較穩(wěn)定的復(fù)合體或結(jié)合物。抑制劑的作用方式不可逆抑制

抑制劑與酶反應(yīng)中心的活性基團以共價形式結(jié)合，引起酶的永久性失活。如有機磷毒劑二異丙基氟磷酸酯。

可逆抑制

抑制劑與酶蛋白以非共價方式結(jié)合，引起酶活性暫時性喪失。抑制劑可以通過透析等方法被除去，并且能部分或全部恢復(fù)酶的活性。根椐抑制劑與酶結(jié)合的情況，又可以分為兩類?？赡嬉种谱饔玫膭恿W(xué)特征

加入競爭性抑制劑后，Km變大，酶促反應(yīng)速度減小。

競爭性抑制無抑制劑競爭性抑制劑1/Vmax-1/km非竟爭性抑制酶可同時與底物及抑制劑結(jié)合，引起酶分子構(gòu)象變化，并導(dǎo)至酶活性下降。由于這類物質(zhì)并不是與底物競爭與活性中心的結(jié)合，所以稱為非競爭性抑制劑。如某些金屬離子（Cu2+、Ag+、Hg2+）以及EDTA等，通常能與酶分子的調(diào)控部位中的-SH基團作用，改變酶的空間構(gòu)象，引起非競爭性抑制