離體蛙心灌流及某些離子課件

離體蛙心灌流及某些離子、藥物

對離體蛙心活動的影響(perfusionoffrog’sheart)主要內(nèi)容相關(guān)理論知識實驗部分實驗目的實驗對象實驗儀器與藥品實驗步驟結(jié)果分析與討論相關(guān)理論知識

正常的蛙心能按靜脈竇的節(jié)律性自動產(chǎn)生興奮，心臟的自動節(jié)律性活動，需要有一個合適的理化環(huán)境。

蟾蜍心臟離體后，用任氏液灌流，在一定時間內(nèi)仍能保持節(jié)律性興奮和收縮活動。由于心臟的正?；顒舆€有賴于內(nèi)環(huán)境因素的相對穩(wěn)定，改變灌流液的成分可引起心臟活動的改變。影響心肌細胞電生理特性的原因1.心肌的自動節(jié)律性（1）最大復極電位與閾電位的差距（2）4期自動除極速度2.心肌的興奮性

（1）靜息電位水平：依賴于細胞外K+濃度

（2）Na+通道的性狀相關(guān)理論知識3.心肌的傳導性主要取決于動作電位0期除極速度和幅度4.心肌的收縮性依賴于細胞外鈣離子濃度相關(guān)理論知識影響心肌細胞電生理特性的原因相關(guān)理論知識離子對心臟活動的影響鉀離子

K+參與心肌細胞的復極化和自律細胞的4期自動去極化過程，其改變不僅取決于細胞內(nèi)外K+濃度梯度，還與細胞膜對K+通透性有關(guān)，因此其影響是多方面的相關(guān)理論知識迷走神經(jīng)和乙酰膽堿迷走神經(jīng)興奮時，節(jié)后纖維釋放Ach,激動心肌細胞膜上M型膽堿受體，產(chǎn)生負性變力、負性傳導、負性變時等效應。心交感神經(jīng)與去甲腎上腺素心交感神經(jīng)節(jié)后纖維釋放的遞質(zhì)是去甲腎上腺素，激動心肌細胞膜上的?受體，產(chǎn)生正性變力、正性傳導、正性變時等效應。實驗目的1.本實驗的目的是學習離體蛙心的灌流方法。2.用離體蛙心灌流的方法觀察：①

K+、Ca2+②

酸、堿度③

腎上腺素（E）乙酰膽堿（Ach）對心臟活動的影響實驗對象

蟾蜍實驗步驟一、離體蟾蜍心臟標本制備1.破壞腦和脊髓2.暴露心臟一、離體蟾蜍心臟標本制備

1.觀察心臟的解剖結(jié)構(gòu)實驗步驟（腹面）

（背面）實驗步驟

一、離體蟾蜍心臟標本制備1.蛙心插管1.1

在主A干下穿一線打一松結(jié)；在左主A下再穿一線結(jié)扎。1.用試管夾將蛙心管固定在鐵支架上2.把張力換能器固定鐵支架支臺上，在心室舒張期將與換能器相連的蛙心夾夾在心尖上。實驗步驟二、連接儀器和裝置注意事項1.蛙心插管內(nèi)液面勿過高或過低，每次換液時，必須用任氏液沖洗3次。2.每次加藥，心搏曲線出現(xiàn)變化后立即將插管內(nèi)液體吸出。3.隨時滴加任氏液于心臟表面使之保持濕潤。4.換能器頭端應向下傾斜以免液體進人換能器。5.各種試劑的滴管不要混淆,以免影響實驗結(jié)果。觀察項目

一、描記正常心搏曲線

曲線幅度——收縮的程度曲線疏密——心率曲線基線——舒張的程度實驗結(jié)果實驗項目收縮強度心率處理前處理后處理前處理后任氏液2%CaCl21%KCl1：10000E1：10000Ach2.5%NaHCO33%乳酸結(jié)果分析與討論1.任氏液：正常對照2.3%CaCl2灌流：[Ca2+]o↑Ca2+內(nèi)流↑[Ca2+]i↑興奮-收縮耦聯(lián)↑收縮力↑結(jié)果分析與討論3.1%KCl灌流：[K+]o↑AP平臺期縮短Ca2+內(nèi)流↓興奮-收縮耦聯(lián)↓收縮力↓結(jié)果分析與討論5.1:10000Ach灌流與心肌M受體結(jié)合K+外流↑,Ca2+內(nèi)流↓E-C耦聯(lián)↓收縮力↓最大復極電位↑4期K+外流↑

自律性↓心率↓[Ca2+]i↓碳酸氫鈉乳酸結(jié)果分析與討論6.2.5％NaHCO3灌流中和H+，Ca2+與肌鈣蛋白結(jié)合