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文檔簡介

實驗五蛋黃中卵磷脂的提取及鑒定第1頁/共13頁實驗五

蛋黃中卵磷脂的提

取及鑒定第2頁/共13頁【實驗目的】1．掌握從動物中提取有效成分的一般原理和方法。2．熟悉從蛋黃中提取卵磷脂的操作。3．了解卵磷脂水解后的產(chǎn)物，鞏固對卵磷脂組成結(jié)構(gòu)的認識。第3頁/共13頁【實驗原理】第4頁/共13頁第5頁/共13頁【實驗步驟】

1．卵磷脂的提取

（1）取1個熟的雞蛋黃，置于研缽中研細，加入15mL95％乙醇溶液，研磨，攪拌均勻。減壓過濾，收集濾液。將漏斗的殘渣移入研缽內(nèi)，加15mL95％乙醇溶液，研磨，過濾(濾液應完全透明)，將兩次濾液合并于蒸發(fā)皿內(nèi)。第6頁/共13頁（2）將蒸發(fā)皿置于沸水浴上蒸去乙醇，至干，得到黃色油狀物。（3）冷卻后，加入2mL～3mL氯仿，攪拌使油狀物溶解。（4）在攪拌下慢慢加入10mL～15mL丙酮，即有卵磷脂析出，攪動使其成團粘附于玻棒上，溶液倒入回收瓶內(nèi)。第7頁/共13頁

2．卵磺脂的水解及其組成鑒定

（1）卵磺脂的水解取一支干凈試管，加入提取的卵磷脂和5mL10％氫氧化鈉溶液，放入沸水浴中加熱10min，并用玻棒攪拌，使卵磷脂水解。冷卻后，在玻璃漏斗中用棉花過濾，得濾液（供以下檢查用）。第8頁/共13頁（2）脂肪酸的檢查取棉花上沉淀少許，加5mL水，攪拌，有無泡沫生成？過濾，得濾液，以濃硝酸酸化后加入數(shù)滴10％醋酸鉛溶液，觀察有何現(xiàn)象?第9頁/共13頁（3）甘油的檢查取小試管一支，加入1滴5％硫酸銅溶液，2滴10％氫氧化鈉溶液，振搖，有氫氧化銅沉淀生成。加入水解液，沉淀溶解后，得深藍色甘油銅溶液。（4）膽堿的檢查取1mL濾液，滴加濃硫酸中和(以藍色石蕊試紙檢查)，加克勞特試劑1滴，有磚紅色沉淀生成。第10頁/共13頁（5）磷酸的檢查取一支干凈試管，加入10滴濾液和5滴95%乙醇溶液，用硝酸酸化，加1mL鉬酸銨試劑，觀察有何現(xiàn)象產(chǎn)生？最后直接用火加熱5min～10min，觀察有無黃色磷鉬酸銨沉淀生成？第11頁/共13頁注意事項

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