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關(guān)于酵母細(xì)胞的固定化第一頁,共十二頁,編輯于2023年,星期三基礎(chǔ)知識(一)固定化酶的應(yīng)用實例1.利用固定化酶技術(shù)生產(chǎn)高果糖漿的實例(1)高果糖漿的生產(chǎn)需要酶葡萄糖異構(gòu)(2)葡萄糖異構(gòu)酶的優(yōu)點穩(wěn)定性好、可以持續(xù)發(fā)揮作用(3)在生產(chǎn)中直接使用酶有什么缺點?酶溶解于葡萄糖溶液后,無法回收,造成浪費(fèi)第二頁,共十二頁,編輯于2023年,星期三2.固定化酶的反應(yīng)柱示意圖第三頁,共十二頁,編輯于2023年,星期三3.固定化酶在生產(chǎn)實踐中的優(yōu)點
反應(yīng)柱能連續(xù)使用半年,大大降低了生產(chǎn)成本,提高了果糖的產(chǎn)量和質(zhì)量。第四頁,共十二頁,編輯于2023年,星期三(二)固定化細(xì)胞技術(shù)1.將酶或細(xì)胞固定化的方法將酶(或細(xì)胞)包埋在細(xì)微網(wǎng)格里將酶(或細(xì)胞)相互連接起來將酶(或細(xì)胞)吸附在載體表面上包埋法化學(xué)結(jié)合法吸附法第五頁,共十二頁,編輯于2023年,星期三2.固定化酶和固定化細(xì)胞的聯(lián)系與區(qū)別聯(lián)系:應(yīng)用相同,都能催化某些反應(yīng)區(qū)別1)固定化細(xì)胞技術(shù)操作容易,成本低,容易回收;2)固定化細(xì)胞技術(shù)對酶活性影響更小;3)固定化細(xì)胞固定的一系列酶;4)由于大分子難以通過細(xì)胞膜,因此固定化細(xì)胞的應(yīng)用有一定的限制;第六頁,共十二頁,編輯于2023年,星期三3.固定化酶和固定化細(xì)胞常用的載體材料明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素和聚丙烯酰胺等,其共同的特點是不溶于水的多孔性載體第七頁,共十二頁,編輯于2023年,星期三(一)制備固定化酵母細(xì)胞實驗操作1、酵母細(xì)胞的活化2、配制物質(zhì)的量濃度為0.05mol/L
的CaCl23、配制海藻酸鈉的溶液4、海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合5、固定化酵母細(xì)胞第八頁,共十二頁,編輯于2023年,星期三(二)用固定化酵母細(xì)胞發(fā)酵實驗操作1、將固定化的酵母細(xì)胞(凝膠珠)用蒸餾水沖洗2到3次。2、將150ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的葡萄糖溶液轉(zhuǎn)移到200ml的錐形瓶中,再加入固定好的酵母細(xì)胞,置于25攝氏度下發(fā)酵24h。第九頁,共十二頁,編輯于2023年,星期三
在缺水的狀態(tài)下,微生物會處于休眠狀態(tài)?;罨褪亲屘幱谛菝郀顟B(tài)的微生物重新恢復(fù)正常的生活狀態(tài)。酵母細(xì)胞所需要的活化時間較短,一般需要0.5~1h,教師需要提前做好準(zhǔn)備。此外,酵母細(xì)胞活化時體積會變大,因此活化前應(yīng)該選擇體積足夠大的容器,以避免酵母細(xì)胞的活化液溢出容器外。
(一)酵母細(xì)胞的活化實驗操作過程中要注意的下列問題第十頁,共十二頁,編輯于2023年,星期三
(二)加熱使海藻酸鈉溶化是操作中最重要的一環(huán),涉及到實驗的成敗,教師一定要提醒學(xué)生按照教材的提示進(jìn)行操作。海藻酸鈉的濃度涉及到固定化細(xì)胞的質(zhì)量。如果海藻酸鈉濃度過高,將很難形成凝膠珠;如果濃度過低,形成的凝膠珠所包埋的酵母細(xì)
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