國產(chǎn)CO2試劑在ALCYON生化分析儀上的應(yīng)用

國產(chǎn)CO2試劑在ALCYON生化分析儀上的應(yīng)用【關(guān)鍵詞】

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目的

為降低成本，探討能否用國產(chǎn)

CO2試劑（CO2L）代替進(jìn)口CO2試劑（CO2）在ALCYON-300生化分析儀上使用。方法北京中生CO2試劑使用要求試劑與樣品比例為200∶1,而ALCYON生化分析儀對試劑與樣品的加量要求特殊，其比例為190∶1，按ALCYON生化分析儀所要求的比例將北京中生CO2試劑應(yīng)用在ALCYON生化分析儀上，與英國RANDOXCO2試劑在ALCYON生化分析儀上的應(yīng)用進(jìn)行對比分析。結(jié)果中生CO2試劑低值、高值批內(nèi)CV分別為、（n=20），批間CV分別為、（n=20），線性范圍0～50mmol/L，與英國RANDOXCO2試劑相比，相關(guān)系數(shù)為，回歸方程：Y=+。結(jié)論評價(jià)試驗(yàn)表明，北京中生CO2試劑可以代替英國RANDOXCO2試劑按ALCYON生化分析儀所要求的比例使用?！娟P(guān)鍵詞】 試劑，診斷；血?dú)夥治鰴C(jī)體在代謝過程中可產(chǎn)生大量酸性物質(zhì)或攝入外源性的堿性物質(zhì)和酸性物質(zhì)，通常情況下不會(huì)引起過酸或過堿而使生理環(huán)境改變， 這是因?yàn)闄C(jī)體有一系列的調(diào)節(jié)系統(tǒng)，主要通過緩沖系統(tǒng)或稱緩沖對（即由一種弱酸及其弱酸鹽成對組成）、呼吸系統(tǒng)及腎臟的調(diào)節(jié)功能來調(diào)節(jié)，以維持體內(nèi)的酸堿平衡狀態(tài)。機(jī)體緩沖系統(tǒng)對酸堿平衡的調(diào)節(jié)很快，它可和體內(nèi)產(chǎn)生的或外源性的酸堿發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生弱酸和弱酸鹽，使體液中的酸堿度不會(huì)有太大的變化。在機(jī)體緩沖對中最重要的是碳酸鹽緩沖對，可看作緩沖對中的“主力”。因?yàn)樗暮慷啵x合快，易于調(diào)節(jié)，HCO3與-H?HCO3的比例對血液酸堿度起重要作用，HCO3與-H?HCO3在血漿中的濃度比是20∶1,任何原因引起HCO3或-H?HCO3濃度改變使該比例變化都將伴隨pH值的變化［1］。二氧化碳結(jié)合力（CO2CP）是指血漿HCO3中-所含的CO2量，測定這項(xiàng)指標(biāo)可直接了解體內(nèi)酸堿平衡失常的情況， 對酸堿平衡類型的診斷也有很大幫助。傳統(tǒng)的CO2CP測定方法為酸堿滴定法。目前生化分析儀所用 CO2試劑一般采用的是終點(diǎn)測定法，其原理是：磷酸烯醇式丙酮酸 +HCO3-PEPC草酰乙酸+H2PO4，-草酰乙酰+NADH+H+MDH蘋果酸+NAD+［2］。進(jìn)口試劑一般價(jià)格較高，為降低成本，我院對北京中生公司的 CO2試劑在ALCYON全自動(dòng)化分析儀上的應(yīng)用情況做了一些使用探討，現(xiàn)報(bào)告如下。材料與方法儀器 ALCYON-300全自動(dòng)生化分析儀（法國）。試劑及質(zhì)控物 （1）北京中生公司 CO2試劑（以下縮寫為 CO2L），分為R1、R2兩種試劑，R1為粉劑，R2為緩沖液，使用時(shí)取10ml緩沖液復(fù)溶即可。（2）（英國）RANDOXCO2試劑（以下縮寫為CO2），也分為R1、R2兩種試劑，用法與中生CO2試劑相同。（3）北京中生公司二氧化碳標(biāo)準(zhǔn)液，CO2濃度為25mmol/L。（4）美國Dade公司質(zhì)控血清（以下縮寫為QG1），批號(hào)：EX1―109，CO2濃度靶值為/L,范圍19～27mmol/L。（5）美國Dade公司質(zhì)控血清（以下縮寫為QG2），批號(hào)：EX2―209，CO2濃度靶值為/L，范圍～/L。方法根據(jù)試劑說明書，在ALCYON-300生化分析儀上編制應(yīng)用CO2試劑的試驗(yàn)程序如下。TYPE（反應(yīng)類型）：EndPt,Unit( 單位）：mmol/L，F(xiàn)irstreaqentVolume（試劑量）：380μl,SampleVolume（樣品量）：μl,PrimaryWavelength:340nm,Reactiondelay （延長時(shí)間）：5min。其余略。2 結(jié)果批內(nèi)試驗(yàn) 取CO2L試劑用自編試驗(yàn)程序在 ALCYON-300生化分析儀上分別對高低兩種不同濃度的標(biāo)本連續(xù)測定 CO220次，同時(shí)用英國進(jìn)口 CO2試劑和原程序進(jìn)行同樣測定，結(jié)果見表

1。表1

CO2L和CO2試劑測定

CO2濃度的批內(nèi)重復(fù)性（略）批間試驗(yàn) 按與批內(nèi)試驗(yàn)基本相同的方法，在 4天內(nèi)分別對兩份不同濃度的標(biāo)本各測定 20次，結(jié)果見表2。表2 CO2L和CO2試劑測定CO2濃度的批間重復(fù)性（略）線性試驗(yàn) 用CO2濃度分別為、、、、、、、、/L的系列標(biāo)準(zhǔn)液按試驗(yàn)程序與CO2試劑反應(yīng)后，在ALCYON-300生化分析儀上測得其吸光度分別為、、、、、、、、，坐標(biāo)紙上作圖可見線性范圍為0～50mmol/L，與說明書［1］提供的相同。準(zhǔn)確度試驗(yàn) 在ALCYON生化分析儀上用CO2L、CO2試劑及各自的試驗(yàn)程序分別對兩份不同濃度的質(zhì)控血清進(jìn)行測定，結(jié)果見表

3。表3

CO2L和CO2測定不同濃度質(zhì)控血清的結(jié)果

（略）對比試驗(yàn)

用CO2L和CO2試劑分別對

20例任意標(biāo)本進(jìn)行測定

,對兩者的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì),相關(guān)系數(shù)為,回歸方程:Y=+。從上述中得出：批內(nèi) CV分別為、n=20），批間CV分別為、（n=20），線性范圍0～50mmol/L，與英國RANDOXCO2試劑相比，相關(guān)系數(shù)為，回歸方程：Y=+。評價(jià)試驗(yàn)［3］表明北京中生CO2試劑可以代替英國RANDOXCO2試劑按ALCYON生化分析儀所要求的比例使用。討論CO2結(jié)合力測定方法以往都以酸堿滴定法手工操作為主，該方法酸堿試劑標(biāo)定較麻煩，手工操作影響因素多，而且靈敏度低，準(zhǔn)確度及精密度差，已逐漸被淘汰［4］?，F(xiàn)采用終點(diǎn)法上機(jī)測定，操作簡單、省時(shí)、省力，不僅提高了靈敏度，同時(shí)也提高了準(zhǔn)確度和精密度，但英國RANDOXCO2試劑價(jià)格較貴，且由于供貸渠道等原因難以保證及時(shí)供應(yīng)。北京中生CO2試劑分粉劑和緩沖液可保存至出廠規(guī)定的保質(zhì)期，使用時(shí)只需復(fù)溶即可，但混合后保存時(shí)間不長，為避免浪費(fèi)，可將當(dāng)天余下試劑放入冰箱冰凍層保存，第二天放于37℃水溶箱中溶解便可照常使用，復(fù)溶時(shí)，不要來回振搖試劑，以免引起過量的CO2吸收。另外，不要將試劑長時(shí)間暴露于空氣中，貯存時(shí)一定將蓋擰緊，否則試劑失效可影響試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。ALCYON-300全自動(dòng)生化分析儀的試劑量只允許在180～380μl間選擇，標(biāo)本量只允許在2～30μl間遞增，這就給北京中生CO2試劑在ALCYON-300生化分析儀上的試驗(yàn)程序編制帶來麻煩，因?yàn)樵撛噭┮笤噭┡c標(biāo)本的比例為200∶1,為解決這個(gè)矛盾，本試驗(yàn)采取試劑與標(biāo)本的比例為190∶1，完全可保證反應(yīng)所需的主要成分。按該比例所做評價(jià)試驗(yàn)中，重復(fù)性試驗(yàn)表明， ALCYON-300全自動(dòng)生化分析儀所測得的 CO2結(jié)果符合要求，從批內(nèi)到批間，其 CV值逐漸增大，符合實(shí)際情況。準(zhǔn)確性試驗(yàn)表明，測定值與靶值非常接近，測得結(jié)果準(zhǔn)確可靠。線性試驗(yàn)表明，該試驗(yàn)在0～50mmol/L線性良好，超出此范圍可將標(biāo)本稀釋后再行測定。評價(jià)試驗(yàn)結(jié)果的精密度、準(zhǔn)確性都能滿足臨床要求，這表明北京中生CO2試劑可按試劑與樣本的比例為 190∶1應(yīng)用于試驗(yàn)程序?qū)υ噭┡c標(biāo)本有特殊加量要求的ALCYON-300全自動(dòng)生化分析儀上。此外，北京中生 CO2試劑還具有價(jià)格比較便宜、供應(yīng)方便等優(yōu)點(diǎn)，值得臨床推廣?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】周新，涂植光.臨床生物化學(xué)和生物化學(xué)檢驗(yàn)