人類疾病的動(dòng)物模型

人類疾病的動(dòng)物模型第1頁(yè)/共43頁(yè)第二節(jié)動(dòng)物模型分類及設(shè)計(jì)原則一、動(dòng)物模型分類(一)按產(chǎn)生原因分類1．自發(fā)性動(dòng)物模型(spontaneousanimalmodels)

概念：是指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物未經(jīng)任何有意識(shí)的人工處理，在自然情況下所發(fā)生的疾病。方法：自然篩選。如突變系的遺傳疾病和近交系的腫瘤疾病模型，突變系的遺傳疾病很多，可分為代謝性疾病、分子疾病和特種蛋自質(zhì)合成異常性疾病。如無(wú)胸腺裸鼠，肌肉萎縮癥小鼠，肥胖癥小鼠，癲癇大鼠，高血壓大鼠，無(wú)脾小鼠和青光眼兔等。優(yōu)點(diǎn)：為生物醫(yī)學(xué)研究提供了許多有價(jià)值的動(dòng)物模型。第2頁(yè)/共43頁(yè)2．誘發(fā)性或?qū)嶒?yàn)性動(dòng)物模型(experimentalanimalmodels)

概念：是指人工地誘發(fā)出特定疾病的動(dòng)物模型。方法：用物理的、化學(xué)的和生物的致病因素作用于動(dòng)物，造成動(dòng)物組織、器官或全身一定的損害，出現(xiàn)某些類似人類疾病的功能、代謝或形態(tài)結(jié)構(gòu)方面的病變。如用化學(xué)致癌劑、放射線、致癌病毒誘發(fā)動(dòng)物的腫瘤等。優(yōu)點(diǎn)：誘發(fā)性疾病動(dòng)物模型具有能在短時(shí)間內(nèi)復(fù)制出大量疾病模型，并能嚴(yán)格控制各種條件使復(fù)制出的疾病模型適合研究目的的需要等特點(diǎn)。第3頁(yè)/共43頁(yè)（二）按系統(tǒng)范圍分類1．生物醫(yī)學(xué)動(dòng)物模型

(1)生物醫(yī)學(xué)動(dòng)物模型概念：是指根據(jù)動(dòng)物生物學(xué)特征來(lái)提供人類疾病相似表現(xiàn)的疾病模型。實(shí)例：兔甲狀旁腺分布比較分散，位置不固定，有的附著在主動(dòng)脈弓附近，摘除甲狀腺不影響甲狀旁腺功能，是摘除甲狀腺實(shí)驗(yàn)較理想動(dòng)物的模型；沙鼠缺乏完整的基底動(dòng)脈環(huán)，左右大腦供血相對(duì)獨(dú)立，是研究中風(fēng)的理想模型；鹿的正常紅細(xì)胞是鐮刀形的，多年來(lái)被供作鐮刀形紅細(xì)腦貧血的研究。第4頁(yè)/共43頁(yè)

(2)抗疾病型動(dòng)物模型概念：是指特定的疾病不會(huì)在某種動(dòng)物身上發(fā)生，或用轉(zhuǎn)基因方法構(gòu)建抵抗某種疾病的動(dòng)物模型。意義：探討為何種動(dòng)物對(duì)該疾病有天然的抵抗力。如哺乳類動(dòng)物均感染血吸蟲(chóng)病，而洞庭湖流域的東方地鼠卻不會(huì)感染血吸蟲(chóng)病，因而可用于血吸蟲(chóng)感染和抗病的研究。培育抗病動(dòng)物新品種。第5頁(yè)/共43頁(yè)2．疾病的基本病理過(guò)程動(dòng)物模型概念：是指致病因素在一定條件下作用于動(dòng)物后，所出現(xiàn)的共同性的功能、代謝和形態(tài)結(jié)構(gòu)某些改變的動(dòng)物模型。諸如發(fā)熱、炎癥、休克、電解質(zhì)紊亂等疾病的基本病理過(guò)程。比如發(fā)熱，是各種病原微生物、細(xì)菌、病毒、寄生蟲(chóng)感染所致：又如給動(dòng)物注射內(nèi)毒素或異性蛋白、某些化學(xué)物質(zhì)等則可使動(dòng)物體溫調(diào)節(jié)中樞功能障礙而引起發(fā)熱。切斷動(dòng)物頸部雙側(cè)迷走神經(jīng)，可復(fù)制典型的肺動(dòng)脈高壓動(dòng)物模型。這類動(dòng)物模型是研究疾病機(jī)制和藥物篩選理想的方法。第6頁(yè)/共43頁(yè)3．各系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型是指與人類各系統(tǒng)疾病相應(yīng)的人類疾病動(dòng)物模型，如神經(jīng)、心血管、呼吸、消化、造血、生殖、內(nèi)分泌、泌尿、骨骼等系統(tǒng)疾病相應(yīng)的動(dòng)物模型，還包括按科分類，如：傳染病、婦科病、兒科病、皮膚科病、五官科病、外科病、奇生蟲(chóng)病、地方病、維生素缺乏病、物理?yè)p傷疾病和職、比病等動(dòng)物模型。第7頁(yè)/共43頁(yè)二、動(dòng)物模型設(shè)計(jì)原則(一)設(shè)計(jì)原則1．相似性所復(fù)制的模型應(yīng)盡可能近似于人類疾病的情況.2．重復(fù)性理想的動(dòng)物模型應(yīng)該是可重復(fù)的，甚至是可以標(biāo)準(zhǔn)化的。3．可靠性復(fù)制的動(dòng)物模型還應(yīng)該力求可靠地反映人類疾病，即對(duì)特異地、可靠地反映某種疾病或某種功能、代謝、結(jié)構(gòu)變化，應(yīng)具備該種疾病的主要癥狀和體征，經(jīng)化驗(yàn)或x線照片、心電圖、病理切片等證實(shí)。第8頁(yè)/共43頁(yè)4．適用性和可控性供醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究用的動(dòng)物模型，在復(fù)制時(shí)，應(yīng)盡量考慮到今后臨床應(yīng)用和便于控制其疾病的發(fā)展，以利于研究的開(kāi)展。5．易行性和經(jīng)濟(jì)性在復(fù)制動(dòng)物模型時(shí)，采用的方法應(yīng)盡量做到容易執(zhí)行和合乎經(jīng)濟(jì)原則。第9頁(yè)/共43頁(yè)第三節(jié)設(shè)計(jì)動(dòng)物模型的注意事項(xiàng)

一、注意致模因素的選擇致模因素的選擇是復(fù)制動(dòng)物模型的關(guān)鍵步驟。應(yīng)明確研究目的，清楚相應(yīng)人類疾病的發(fā)生、臨床癥狀和發(fā)病機(jī)制，熟悉致病因素對(duì)動(dòng)物所產(chǎn)生的臨床癥狀和發(fā)病情況，致病因素的劑量。選擇適當(dāng)?shù)闹虏∫蛩睾捅M量選擇與人類相似性小的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物作動(dòng)物模型，以增加所復(fù)制動(dòng)物模型與人類疾病的相似性。第10頁(yè)/共43頁(yè)二、注意動(dòng)物因素的選擇復(fù)制動(dòng)物模型應(yīng)注意選用標(biāo)準(zhǔn)化和實(shí)用價(jià)值的動(dòng)物。復(fù)制動(dòng)物模型時(shí)應(yīng)遵循適于大多數(shù)研究者使用，容易復(fù)制、便于操作和采集各種標(biāo)本。動(dòng)物來(lái)源應(yīng)注意選用標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，家畜和野生動(dòng)物作模型資源的補(bǔ)充。標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用作模型資源其優(yōu)點(diǎn)：①生活在標(biāo)準(zhǔn)化的環(huán)境內(nèi)，有清楚的遺傳背最和微生物控制標(biāo)準(zhǔn)，具有較強(qiáng)的敏感性、較好的重復(fù)性和反應(yīng)均一的特點(diǎn)，②有嚴(yán)格的飼養(yǎng)規(guī)程，②易獲取大樣本實(shí)驗(yàn)和觀察。缺點(diǎn)在人工控制下培育的動(dòng)物與自然生長(zhǎng)繁育的動(dòng)物有所不同，而且標(biāo)推化環(huán)境的維持消耗大量的資金。第11頁(yè)/共43頁(yè)三、注意近交系的應(yīng)用近交系的選擇應(yīng)注意遺傳背景清楚、反應(yīng)均一、個(gè)體差小，廣泛地應(yīng)用于動(dòng)物模型復(fù)制。但在設(shè)計(jì)中必須慎里考慮以下因意：①近交系的繁殖方法與自然狀態(tài)不同。例如自發(fā)性糖尿病BBWistarRat具人糖尿病臨床特征但實(shí)踐常并發(fā)有周圍神經(jīng)系統(tǒng)嚴(yán)重病、睪丸萎縮、甲狀腺炎、惡性淋巴瘤等。因此，要有目的選擇，不可盲目的采用近交系；②近交系形成的亞系不能視為同一品系。要充分了解新品系的特征及有關(guān)資料；③即使已形成模型的品系由于育種和環(huán)境改變，仍有可能發(fā)生的基因突變和遺傳演變。即存在變種甚至斷種的危險(xiǎn)；④國(guó)外常用兩種近交系的雜一代(F1)作為模型。其個(gè)體之間均一性好，實(shí)驗(yàn)的耐受性強(qiáng)。封閉群動(dòng)物(遠(yuǎn)交系)雖然個(gè)體間的重復(fù)性和一致性沒(méi)有近交系、F1動(dòng)物好，但遺傳特性及反應(yīng)性保持相對(duì)穩(wěn)定，其生活力強(qiáng)，蟹殖率高、抗病力強(qiáng)、可以大量生產(chǎn)，在某些方西可選用。第12頁(yè)/共43頁(yè)第四節(jié)腫瘤學(xué)研究中的動(dòng)物模型

一、腫瘤學(xué)動(dòng)物模型的概念建立實(shí)驗(yàn)?zāi)[瘤模型的目的，是在于利用其體內(nèi)及體外生長(zhǎng)的腫瘤，探討腫瘤病因?qū)W、腫瘤生物學(xué)行為學(xué)、腫瘤發(fā)病機(jī)制研究，以及用來(lái)尋找對(duì)腫瘤成因及發(fā)展有抑制作用的藥物及治療方法等。特別是在諸如腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移規(guī)律及其機(jī)制的研究、腫瘤細(xì)胞與細(xì)胞外間質(zhì)相互作用、腫瘤細(xì)胞與宿主免疫細(xì)胞和免疫因子的相互作用以及血管生成和抗腫瘤藥物藥代動(dòng)力學(xué)等方面的研究，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型是體外實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ退鶡o(wú)法取代或無(wú)法完全取代的。腫瘤的動(dòng)物模型有兩大型，既實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自發(fā)性腫瘤和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物誘發(fā)性腫瘤。第13頁(yè)/共43頁(yè)二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自發(fā)性腫瘤(—)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自發(fā)性腫瘤是指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物未經(jīng)任何有意識(shí)的人工處置，在白然情況下所發(fā)生的腫瘤。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自發(fā)性腫瘤主要發(fā)生于近交系動(dòng)物，隨實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬、品系的不同，腫瘤的發(fā)生類型和發(fā)病率有很大差異。其中，小鼠的各種自發(fā)性腫瘤在腫瘤發(fā)生、發(fā)展的研究中具有重要意義。目前，可用于腫瘤實(shí)驗(yàn)研究的小鼠品系或亞系就有200多個(gè)。在近交系小鼠中，各種腫瘤的發(fā)生率因品系不同而存在很大差異。第14頁(yè)/共43頁(yè)

腫瘤實(shí)驗(yàn)研究中選用自發(fā)性腫瘤模型為對(duì)象進(jìn)行研究有一定的優(yōu)點(diǎn)；首先是自發(fā)性腫瘤通常比用實(shí)驗(yàn)方法誘發(fā)的腫瘤與人類所患的腫瘤更為相似，有利于將動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)用到人；其次是這類腫瘤發(fā)生的條件比較自然，有可能通過(guò)細(xì)致觀察和統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)原來(lái)沒(méi)有發(fā)現(xiàn)的環(huán)境或其他的因素，可以觀察遺傳因素在腫瘤發(fā)生上的作用：但應(yīng)用自發(fā)性腫瘤模型也存在一些缺點(diǎn)：腫瘤的發(fā)生情況可能參差不齊，不可能在短時(shí)間內(nèi)獲得大量腫瘤學(xué)材料、觀察時(shí)間可能較長(zhǎng)，實(shí)驗(yàn)耗費(fèi)較大。第15頁(yè)/共43頁(yè)(二)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自發(fā)腫瘤的研究注意事項(xiàng)1．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品系關(guān)系到自發(fā)腫瘤發(fā)病率的穩(wěn)定性，一般近交系動(dòng)物較穩(wěn)定，同時(shí)亦利于進(jìn)行移植研究，而遠(yuǎn)交系動(dòng)物就不如近交系動(dòng)物發(fā)病率那樣穩(wěn)定。

2．不同品系動(dòng)物自發(fā)腫瘤的發(fā)病率差異是很大的，如C3H雌鼠自發(fā)乳腺腫瘤發(fā)病率幾乎為100％，而C57BL則沒(méi)有自發(fā)性乳腺腫瘤。

3．自發(fā)腫瘤的發(fā)病率與動(dòng)物年齡有關(guān)，小鼠自發(fā)性腫瘤6—18月齡鼠發(fā)病率最高，但一般幼年和老年動(dòng)物自發(fā)腫瘤的發(fā)病率就很低。

4．自發(fā)腫瘤的發(fā)病率與雌鼠的生育狀態(tài)密切相關(guān)：A系小鼠生育后雌鼠乳腺腫瘤的發(fā)病率為60—80％，而未生育過(guò)的雌鼠乳腺腫瘤的發(fā)病率僅為5％‘，

5動(dòng)物自發(fā)腫瘤的研究要注意動(dòng)物遺傳背景和環(huán)境因素，以便為腫瘤發(fā)生的內(nèi)因和外因提供實(shí)驗(yàn)資料。第16頁(yè)/共43頁(yè)

三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物誘發(fā)性腫瘤(一)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物誘發(fā)性腫瘤的概念利用化學(xué)致病物質(zhì)來(lái)誘發(fā)實(shí)驗(yàn)性腫瘤的動(dòng)物模型，也是進(jìn)行腫瘤實(shí)驗(yàn)研究的常用方法。目前使用較多的化學(xué)致癌物有多環(huán)碳?xì)浠衔?、亞硝胺和偶氮、染料等。?qiáng)烈的致癌物誘發(fā)出來(lái)的腫瘤，惡性程度高，容易將其做成功(指一個(gè)可移植的動(dòng)物腫瘤)。第17頁(yè)/共43頁(yè)(二)常用誘發(fā)腫瘤動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法

1．經(jīng)口給藥法，食管癌、胃癌、大腸癰等腫瘤常用此方法.2.涂抹法，主要用于誘發(fā)皮膚腫瘤。

3．注射法，將化學(xué)致癌物制成溶液或懸浮物，經(jīng)皮下、肌肉、靜脈或體腔等途徑注入動(dòng)物體內(nèi)而誘發(fā)腫瘤。

4．氣管灌注法，常用于誘發(fā)肺癌。

5.穿線法，將一定量的致癌物放置于無(wú)菌試管內(nèi)，加熱使致癌物升華，吸附于預(yù)制的線結(jié)上；將含有致癌物的線結(jié)穿入靶器官或靶組織而誘發(fā)腫瘤。

6．埋藏法，將致痛物包埋于皮下或其他組織內(nèi)或?qū)⒁灾掳┪镒饔眠^(guò)的器官、組織移植于同種系動(dòng)物皮下進(jìn)行腫瘤的誘發(fā)實(shí)驗(yàn)。第18頁(yè)/共43頁(yè)(三)誘發(fā)腫瘤的基本要求1.誘發(fā)腫瘤的方法簡(jiǎn)單易行，可重復(fù)性強(qiáng)。2.腫瘤的誘發(fā)率應(yīng)較高；3.所誘發(fā)的腫瘤與人類腫瘤具有相似性：4.要注意選擇對(duì)所用致癌劑較敏感的動(dòng)物種系。5.用致癌物劑量要適當(dāng)。不能使動(dòng)物中毒死亡。又要在較短期內(nèi)誘發(fā)較高比率的腫瘤6.誘癌動(dòng)物要輔以適當(dāng)?shù)娘曫B(yǎng)條件。7．誘癌過(guò)程最好伴行明顯的癌前病變，以便研究腫瘤發(fā)病學(xué)。第19頁(yè)/共43頁(yè)(四)誘發(fā)腫瘤的注意事項(xiàng)1．應(yīng)設(shè)置嚴(yán)格的陽(yáng)性和陰性對(duì)照。2．有些實(shí)驗(yàn)除應(yīng)用致癌劑外，還需輔以促癌劑，方能誘癌成功。3．動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果常常不能類推到人類，在解釋實(shí)驗(yàn)的意義時(shí)應(yīng)注意到種屬的區(qū)別。4．誘癌實(shí)驗(yàn)中應(yīng)十分注意對(duì)實(shí)驗(yàn)人員和環(huán)境的保護(hù)。5．誘癌實(shí)驗(yàn)要注意將腫瘤發(fā)生的內(nèi)因和外因結(jié)合起來(lái)分析。第20頁(yè)/共43頁(yè)(五)誘發(fā)性肝癌動(dòng)物模型1．模型簡(jiǎn)述利用外源性化學(xué)致癌因素引起細(xì)胞遺傳特性異常，呈現(xiàn)出異常生長(zhǎng)和高增殖活性，形成腫瘤，常用口服致肝癌的物質(zhì)有乙基亞硝胺(DEN)，4—二甲基氨基偶氮苯(DBA)、2—乙酰氨基酸(2AAF)，亞胺基偶氮中苯（OAAT）和黃曲霉素。2．造模方法(1)DEN誘發(fā)大鼠肝癌給與0.25％DEN水溶液0.25-1ml灌胃，或稀釋10倍放在飲水瓶中自由飲水，劑量為每天2—10ml/kg喂養(yǎng)半年左右。(2)DBA誘發(fā)大鼠肝癌用含0.06％DBA的飼料飼養(yǎng)大鼠，連續(xù)喂養(yǎng)4—6個(gè)月。第21頁(yè)/共43頁(yè)(3)2AAF誘發(fā)大鼠肝癌給成年大鼠喂食含0.03％2AAF的標(biāo)準(zhǔn)飼料，連續(xù)3—4個(gè)月。(4)OAAT誘發(fā)小鼠肝癌用含1％OAAT苯溶液(0.1ML含1mg)涂在動(dòng)物的兩肩腫間皮膚上，隔日1次，每次2-3滴．一般涂100次，連續(xù)7—8周。(5)黃曲霉素誘發(fā)大鼠肝癌用含0.001—0.015PPm黃曲霉素的飼料喂6個(gè)月。第22頁(yè)/共43頁(yè)(六)小鼠誘發(fā)性皮膚癌動(dòng)物模型1．模型簡(jiǎn)述常用誘發(fā)皮膚癌的方法是用甲基膽蒽等強(qiáng)烈致癌物，雖然實(shí)驗(yàn)間期較長(zhǎng)，但成功率較高。2．造模方法取24—30g的小鼠，雌雄不限，用硫化鈉溶液在背部脫毛，于脫毛部位涂抹0.5％甲基膽蒽蓖麻油溶液，每周3次，每次2滴，滴后用小毛刷涂勻。每日觀察小鼠一般狀況及背部皮膚變化，如背部毛又長(zhǎng)出，仍用硫化鈉脫毛或剪毛，以便涂抹甲基膽蒽。每天稱體重1次，適時(shí)取瘤組織作病理檢查，并攝影。此后取腫瘤及各臟器鏡檢。第23頁(yè)/共43頁(yè)3模型特點(diǎn)及應(yīng)用涂抹中基膽思后150-200天(平均178天)，存活鼠皆出現(xiàn)鱗狀上皮癌，單發(fā)或多發(fā)，有在乳頭狀瘤部位癌變，亦有在其他部位突然出現(xiàn)者。鱗癌出現(xiàn)后，即停止涂抹甲基膽蒽。癌生長(zhǎng)迅速，小鼠通常在1—2周內(nèi)死亡，但有的存活時(shí)間較長(zhǎng)。第24頁(yè)/共43頁(yè)第四節(jié)心血管系統(tǒng)疾病的動(dòng)物模型一、高血壓疾病研究中的動(dòng)物模型(animalmodelofhypertension)(一)高血壓的概念高血壓是一種動(dòng)脈收縮壓和(或)舒張壓升高，并常伴有心、腦、腎和外周血管功能性或器質(zhì)性改變的全身性疾病。高血壓病在歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家已成為主要致死性疾病，占全部死亡的40％。所以培育高血壓模型動(dòng)物和誘發(fā)高血壓動(dòng)物模型，是開(kāi)展高血壓疾病及其繼發(fā)癥研究的重要手段。第25頁(yè)/共43頁(yè)(二)應(yīng)用于高血壓研究的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇

對(duì)于高血壓的研究，雖然有時(shí)使用豬、猴、羊等，但常選用的動(dòng)物是犬和大鼠。犬與人類的高血壓有許多相似之處：1高血壓早期血壓波動(dòng)大，以后逐漸升高，并維持在高水平②環(huán)境和緊張刺激引起血壓明顯升高；③高血壓發(fā)展過(guò)程中出現(xiàn)高級(jí)神經(jīng)活動(dòng)障礙；④部分動(dòng)物血中兒茶酚胺含量增加。特別是對(duì)神經(jīng)精神性高血壓研究，犬極為合適。大鼠的飼養(yǎng)管理、手術(shù)和血壓測(cè)定比其他動(dòng)物方便，對(duì)藥物的反應(yīng)與人類相似，故也常被選用。因兔的血壓不夠穩(wěn)定，一般不用。第26頁(yè)/共43頁(yè)

若是研究高血壓病理、生理和藥理，自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)是良好的模型，因它和人類的自發(fā)性高血壓有很多相似之處。實(shí)驗(yàn)性高血壓通常以刺激中樞神經(jīng)系統(tǒng)反射性而成，或注射加壓物質(zhì)以及分次手術(shù)結(jié)扎腎動(dòng)脈，誘發(fā)腎原性高血壓。不過(guò)，要根據(jù)實(shí)驗(yàn)的目的不同進(jìn)行選擇。第27頁(yè)/共43頁(yè)

(三)自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)

SHR大鼠的病態(tài)表現(xiàn)與人原發(fā)性高血壓的病態(tài)表現(xiàn)極為相似，高血壓的發(fā)病率接近100％。SHR大鼠被廣泛應(yīng)用于高血壓的發(fā)病機(jī)制、預(yù)防、治療和診斷等諸多方面研究。第28頁(yè)/共43頁(yè)(四)實(shí)驗(yàn)性高血壓動(dòng)物模型1．腎動(dòng)脈狹窄性高血壓模型(1)造模機(jī)制狹窄腎動(dòng)脈可造成腎臟缺血，引起腎小球旁器分泌腎素增多。腎素能使血漿中α2-球蛋白(血管緊張素原)變?yōu)檠芫o張素Ⅰ，后者又經(jīng)轉(zhuǎn)換酶(主要存在于肺臟)的作用變?yōu)槟苁寡苁湛s的血管緊張素Ⅱ，血管緊張素Ⅱ的參與，加重了全身小動(dòng)脈的痙攣，血壓也就更高而持續(xù)，形成較持久、恒定的高血壓。腎性高血壓晚期，高血壓維持因素也包括神經(jīng)血管機(jī)制。(2)造模方法腎動(dòng)脈手術(shù)套環(huán)或接扎。(3)模型特點(diǎn)及應(yīng)用手術(shù)后數(shù)天，血壓開(kāi)始升高，1-3個(gè)月后血壓上升達(dá)高峰，并可長(zhǎng)期維持下去。第29頁(yè)/共43頁(yè)2腎外包扎性高血壓模型(1)造模機(jī)制腎外異物包扎，可致腎周圍炎，在腎外形成一層纖維素性鞘膜，壓迫腎實(shí)質(zhì)造成腎組織缺血，使腎素形成增加，血壓上升。(2)造模方法手術(shù)后左腎包扎、右腎切除。(3)模型特點(diǎn)及應(yīng)用術(shù)后20天，20%大鼠出現(xiàn)高血壓。第30頁(yè)/共43頁(yè)3．神經(jīng)內(nèi)分泌型高血壓模型(1)模型機(jī)制電刺激和條件刺激鈴聲結(jié)合，可造成動(dòng)物高度緊張狀態(tài)，血壓上升；附加垂體后葉素肌內(nèi)注射，可促進(jìn)動(dòng)物高血壓發(fā)展與鞏固。

(2)造模方法非條件刺激為電刺激，條件刺激為電鈴。進(jìn)行電刺激時(shí)，大鼠可置放于特別籠中，籠底是以銅絲織成柵狀，分正負(fù)兩電極，籠有許多格，每格內(nèi)可放大鼠1只，犬的刺激電極可于實(shí)驗(yàn)時(shí)固定在動(dòng)物頸部。利用6v感應(yīng)電極板引出的導(dǎo)線進(jìn)行刺激；刺激強(qiáng)度依動(dòng)物反應(yīng)而異，通常以引起動(dòng)物顫抖、逃跑、跳躍、低聲叫為止。第31頁(yè)/共43頁(yè)二、高血脂和動(dòng)脈粥祥硬化癥動(dòng)物模型雞和鴿能自發(fā)主動(dòng)脈粥樣硬化，主要是形成脂紋期病變。短期飼喂膽固醇，主動(dòng)脈局部發(fā)生病變。因而，在研究該病早期病變時(shí)，應(yīng)用這類動(dòng)物具有重要價(jià)值。目前，已有多種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被應(yīng)用于動(dòng)脈粥樣硬化研究，包括大鼠、小鼠、豬、犬、非人靈長(zhǎng)類。其似人靈長(zhǎng)類，特別是恒河猴，可發(fā)生廣泛的主動(dòng)脈粥樣硬化，廣泛的心冠、腦、腎和股等處動(dòng)脈的動(dòng)脈強(qiáng)樣硬化癥，而且它還是心肌梗死常發(fā)的少數(shù)動(dòng)物之一。第32頁(yè)/共43頁(yè)

小型豬可自發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化，在用高脂飼料誘發(fā)下，對(duì)加速動(dòng)脈粥樣硬化的形成.其病變特點(diǎn)及分布情況都與人類相似，主要分布在主動(dòng)脈、冠狀動(dòng)脈和腦動(dòng)脈，由增生的血管平滑肌細(xì)胞、少量泡沫細(xì)胞、膽固醇結(jié)晶、纖維帽和灶性鈣化組成。由于小型豬在生理解剖和粥樣硬化病變的特點(diǎn)方面接近于人類，近年來(lái)常被用作動(dòng)脈粥樣硬化研究的最佳模型。當(dāng)然，該動(dòng)物也存在飼養(yǎng)管理麻煩、成本高、試驗(yàn)數(shù)目難以過(guò)多，不便作遺傳分析等缺點(diǎn)。第33頁(yè)/共43頁(yè)

(一)高脂飼料誘發(fā)高血脂及動(dòng)脈粥樣硬化癥模型1．造模機(jī)制在動(dòng)物飼料中加入過(guò)量的膽固醇和脂肪，飼養(yǎng)一定時(shí)間后，其主動(dòng)脈及冠狀動(dòng)脈處逐漸形成粥樣硬化斑塊，并出現(xiàn)高血脂癥。2．造模方法小型豬：用1％—2％高脂食物飼喂6個(gè)月即可形成動(dòng)脈粥樣硬化病變。大鼠：飼喂配方一：飼料(1％—4％膽固醇、10％豬油，0.2％甲基硫氧嘧啶、89％—86%％基礎(chǔ)飼料)，喂服7—10天，可形成高膽固醉血癥。第34頁(yè)/共43頁(yè)(二)非喂養(yǎng)法誘發(fā)高血脂及動(dòng)脈粥樣硬化癥檢型1．誘發(fā)模型將大鼠主動(dòng)脈勻漿給兔注射，可引起血膽因醇、β—脂蛋白及甘油三酯升高。給兔注射馬血清每次10mg/kg，共4次，每次間隔17大，動(dòng)脈內(nèi)膜損傷率為88％冠狀動(dòng)脈亦有粥樣硬化的病變，若同時(shí)給予高膽固醇飼料，病變更加明顯。第35頁(yè)/共43頁(yè)

三、心肌缺血?jiǎng)游锬Ｐ腿?、豬和大鼠都可用于建立心肌缺血?jiǎng)游锬Ｐ停喝切募∪毖囼?yàn)良好的模型動(dòng)物。犬的心臟解剖與人類相似，占體重的比例很大，冠狀血管容易操作，心臟抗心律紊亂能力較強(qiáng)，此外，犬較容易馴服，可供慢性觀察。豬心臟的側(cè)支循環(huán)和傳導(dǎo)系統(tǒng)血液供應(yīng)類似于人的心臟，也是心肌缺血試驗(yàn)良好的模型動(dòng)物。第36頁(yè)/共43頁(yè)(一)造模機(jī)制常采用電刺激法和藥物注射法使動(dòng)物心臟冠狀動(dòng)脈發(fā)生痙攣性收縮可造成人工急性心肌缺血?jiǎng)游锬Ｐ汀?二)造模方法1．藥物法

(1)垂體后葉素選用成年健康家兔，體重2—2.5kg。自尾靜脈或舌下靜脈快速注射垂體后葉素0.5—1.0Iu／kg體重(容積為1—1.5ml/kg)，注射后的1min內(nèi)，每5—10s記錄一次心電圖，以后每1—3min記錄一次，一直記錄到注射后10min。觀察心率、s—T段、T波的變化。第37頁(yè)/共43頁(yè)(2)異丙腎上腺素選用100-170g休重的大鼠：皮下注射4％異丙基腎上腺素，每日2次。也可選用2kg左右的家兔，異丙基腎上腺素加入500ml鹽水中，由耳靜脈勻速滴入，每公斤體重給藥10、20或30mg；或直接注入腹腔，每日2次。2．電刺激法選用成年雄性家兔，麻醉后用定向儀插入兩支涂絕緣漆的不銹鋼針弱、強(qiáng)刺激(弱刺激為0.8-1.6mA，強(qiáng)刺激為4-8mA)交替刺激右側(cè)下丘腦背內(nèi)側(cè)核，每