2022屆高三生物一輪復(fù)習(xí)動物細(xì)胞工程導(dǎo)學(xué)案

動物細(xì)胞工程【高考目標(biāo)導(dǎo)航】1、動物細(xì)胞培養(yǎng)和體細(xì)胞克隆2、動物細(xì)胞融合和單克隆抗體【基礎(chǔ)知識梳理】一、動物細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆1、動物細(xì)胞培養(yǎng)（1）概念：從動物機體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個細(xì)胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和增殖。（2）原理：細(xì)胞增殖（3）過程：（4）條件：無菌無毒的環(huán)境；營養(yǎng)；適宜的pH和溫度；氣體環(huán)境（5）應(yīng)用：生物制品的生產(chǎn)、轉(zhuǎn)基因動物的培養(yǎng)、檢測有毒物質(zhì)、醫(yī)學(xué)研究。2、核移植技術(shù)和克隆動物項目細(xì)胞核的移植概念利用一個細(xì)胞的細(xì)胞核（供體核）來取代另一個細(xì)胞中的細(xì)胞核，形成一個重建的“合子”原理動物體細(xì)胞核具有全能性類型胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植過程結(jié)果獲得與供體遺傳物質(zhì)基本相同的個體意義①有利于遺傳疾病的治療，優(yōu)良品種的培育②對物種的優(yōu)化、瀕危動物的保護和轉(zhuǎn)基因動物的擴群有重要意義③降低畜牧業(yè)的成本，縮短育種年限，提高生產(chǎn)效率存在問題成功率低，絕大多數(shù)克隆動物存在健康問題，對克隆動物食品的安全性問題也存在爭議二、動物細(xì)胞融合與單克隆抗體制備1、動物細(xì)胞融合（1）概念：也稱細(xì)胞雜交，是指兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程。融合后形成的是雜交細(xì)胞（2）原理：細(xì)胞膜的流動性、細(xì)胞增殖（3）誘導(dǎo)融合的因素：聚乙二醇（PEG）、滅活的病毒、電激等。（4）意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。（5）應(yīng)用：通過雜交瘤技術(shù)，制備單克隆抗體4、單克隆抗體：（1）概念：單一的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)培養(yǎng)篩選后產(chǎn)生的專一抗體。（2）過程（3）主要優(yōu)點：特異性強、靈敏度高，并可大量制備。（4）用途：作為診斷試劑；用于治療疾病和運載藥物?！疽c名師透析】一、動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的不同比較項目細(xì)胞融合的原理細(xì)胞融合的方法誘導(dǎo)手段用法植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞膜的流動性去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合離心、電刺激、振動，聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性，獲得雜種植株動物細(xì)胞融合細(xì)胞膜的流動性使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合除應(yīng)用植物細(xì)胞雜交手段外，再加滅活的病毒誘導(dǎo)制備單克隆抗體的技術(shù)之一二、動物細(xì)胞融合與單克隆抗體1、動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較比較項目植物體細(xì)胞雜交動物細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動性、細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動性、細(xì)胞的增殖融合方法去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合使用的酶纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶或膠原蛋白沒誘導(dǎo)手段物理法：離心、電激、震動化學(xué)法：聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)除物理法和化學(xué)法，也可用滅活得病毒誘導(dǎo)結(jié)果雜種植株雜交細(xì)胞意義克服了遠(yuǎn)緣雜交成不親和性，獲得雜種植株突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能【感悟高考真題】1、（2022·廣東高考）華南虎是國家一級保護動物，可采用試管動物技術(shù)進行人工繁殖，該技術(shù)包括的環(huán)節(jié)有()①轉(zhuǎn)基因②核移植③體外受精④體細(xì)胞克?、菖咛ヒ浦睞.①③B.①④C.②⑤D.③⑤【解析】試管動物技術(shù)利用了體外受精和胚胎移植，未涉及轉(zhuǎn)基因、核移植以及體細(xì)胞克隆技術(shù)?！敬鸢浮緿2、（2022·江蘇高考）關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯誤的是()A.蛋白質(zhì)工程可合成自然界中不存在的蛋白質(zhì)B.體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動物和制備單克隆抗體C.植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于植物莖尖脫毒D.動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動物的培育【解析】因為動物體細(xì)胞核移植技術(shù)可用于克隆動物，動物細(xì)胞融合可用于制備單克隆抗體，由此分析B選項是錯誤的。【答案】B3、（2022·福建高考）[生物—現(xiàn)代生物科技專題](10分)紅細(xì)胞生成素(EPO)是體內(nèi)促進紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病由于天然EP0來源極為有限，目前臨床使用的紅細(xì)胞生成素主要來自于基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人紅細(xì)胞生成素(rhEPO）期間要生產(chǎn)流程如右圖（1）圖中①所指的是技術(shù)。（2）圖中②所指的物質(zhì)是，③所指的物質(zhì)是。（3）培養(yǎng)重組CHO細(xì)胞時，為便于清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞嚴(yán)物積累對細(xì)胞自身造成危害，應(yīng)定期更換。（4）檢測rhEPO外活性需用抗rhEPO單克隆抗體。分泌單克隆抗體的細(xì)胞，可由rhEPO免疫過的小鼠B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合而成【解析】本題主要以人紅細(xì)胞生成素生產(chǎn)為材料來考查基因工程和細(xì)胞工程中動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、制備單克隆抗體技術(shù)。獲取目的基因的方法有四種（從基因文庫中獲取、用PCR擴增技術(shù)、用反轉(zhuǎn)錄法、用化學(xué)合成法）由圖以核DNA為模板獲得目的基因的方法可知①為PCR技術(shù)。進行反轉(zhuǎn)錄的模板是mRNA。由題意可知重組CHO細(xì)胞適用于生產(chǎn)重組人紅細(xì)胞生成素(rhEPO），所以重組CHO細(xì)胞能過表達出重組人紅細(xì)胞生成素(rhEPO）或者紅細(xì)胞生成素。培養(yǎng)動物細(xì)胞是用液體培養(yǎng)基——即培養(yǎng)液，細(xì)胞從培養(yǎng)液中吸收營養(yǎng)，并同時向培養(yǎng)液中排放代謝廢物，當(dāng)代謝廢物積累時會危害細(xì)胞，因此要不斷更新培養(yǎng)液。制備單克隆抗體是讓淋巴B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，然后由雜交瘤細(xì)胞來分泌抗體。【答案】（1）PCR（2）mRNArhEPO（3）培養(yǎng)液（4）雜交瘤4、（2022·浙江高考）下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是(D)A. 培養(yǎng)保留接觸抵制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞B. 克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程上多數(shù)細(xì)胞的基因型會發(fā)生改變C. 二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的D. 惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進行付代培養(yǎng)【解析】本題主要考查細(xì)胞工程的有關(guān)知識，動物細(xì)胞培養(yǎng)可以分為原代培養(yǎng)，原代培養(yǎng)到一定程度后要進行傳代,因為細(xì)胞有接觸抑制現(xiàn)象,當(dāng)細(xì)胞接觸時就會停止分裂(在細(xì)胞培養(yǎng)過程中進行的為有絲分裂,所以培養(yǎng)出來的多數(shù)細(xì)胞基因型相同),但是細(xì)胞在培養(yǎng)過程中,傳代次數(shù)也是有限的,一般為50次就會死亡,留下來的細(xì)胞就是發(fā)生了癌變的細(xì)胞,遺傳物質(zhì)發(fā)生改變,具有不死性,但是仍保留接觸抑制現(xiàn)象,所以還是要傳代培養(yǎng),這個也就是人體中癌細(xì)胞會轉(zhuǎn)移的原因,所以答案為D.【答案】D5、（2022·山東高考）（生物一現(xiàn)代生物科技專題）人類在預(yù)防與診療傳染性疾病過程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原，且疾苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如下圖：②①提取病毒②①提取病毒RNADNAA基因A基因表達載體受體細(xì)胞A蛋白小鼠皮下小鼠骨髓瘤細(xì)胞效應(yīng)B淋巴細(xì)胞X抗A蛋白的單克隆抗體請回答：（1）過程①代表的是。（2）過程②構(gòu)建A基因表過載體時，必須使用和兩種工具酶。③（3）過程③采用的實驗技術(shù)是，獲得的X是。③（4）對健康人進行該傳染病免疫預(yù)防時，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的所制備的疫苗。對該傳染病疑似患者確診時，可以疑似患者體內(nèi)分離病毒，與已知病毒進行比較；或用圖中的進行特異性結(jié)合檢測。【解析】本題以圖展示了疫苗的生產(chǎn)和單克隆抗體的制備的過程，考察了中心法則、基因工程、動物細(xì)胞工程等現(xiàn)代生物科技。（1）中心法則中，對于少數(shù)的以RNA為遺傳物質(zhì)的病毒，其遺傳信息的傳遞過程需要補充的過程有RNA的逆轉(zhuǎn)錄和RNA的復(fù)制的過程，圖中過程=1\*GB3①正代表的是逆轉(zhuǎn)錄的過程（2）基因工程的步驟是：目的基因的提取——構(gòu)建基因表達載體——導(dǎo)入受體細(xì)胞——目的基因的檢測和表達，其中構(gòu)建基因表達載體中需要限制酶來切割以獲取目的基因，同時需要相同的限制酶切割運載體以獲取與目的基因相同的黏性末端，再通過DNA連接酶連接目的基因和運載體。（3）過程=3\*GB3③是將瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合的過程，獲得的叫雜交瘤細(xì)胞，其具備了瘤細(xì)胞的無限增殖的特性和B淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生抗體的特性，從而制備單克隆抗體。（4）本題考察了免疫預(yù)防的操作過程，以及欲確診疑似患者而采取的方法。本題中提示該RNA病毒表面的A蛋白為主要的抗原，故而可選用通過基因工程生產(chǎn)的A蛋白制備疫苗；確診時為判斷該病毒是否為題目中的RNA病毒，可以進行核酸序列的比對，也可以利用單克隆抗體具備特異性，利用抗A蛋白的特異性單克隆抗體通過能否特異性結(jié)合判斷病毒表面是否有A蛋白的存在進一步進行檢測是否為目的RNA病毒?！敬鸢浮浚?）逆轉(zhuǎn)錄（2）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶、限制性內(nèi)切酶）DNA連接酶（兩空可以互換）（3）細(xì)胞融合雜交瘤細(xì)胞（4）A蛋白核酸（基因）序列抗A蛋白的單克隆抗體6、（2022·浙江高考）用動、植物成體的體細(xì)胞進行離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是A．都需用培養(yǎng)箱B．都須用液體培養(yǎng)基C．都要在無菌條件下進行D．都可體現(xiàn)細(xì)胞的全能性【解析】動、植物成體的體細(xì)胞進行離體培養(yǎng)都要在無菌條件下進行，動物成體的體細(xì)胞離體培養(yǎng)用液體培養(yǎng)基，不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，植物成體的體細(xì)胞離體培養(yǎng)不一定用液體培養(yǎng)基，能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性。故C正確?！敬鸢浮緾7、（2022·四川高考）（22分）回答下列Ⅰ、Ⅱ兩個小題。Ⅰ.將小鼠胚胎干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化成一種特定的細(xì)胞（命名為M細(xì)胞），再將M細(xì)胞移植到糖尿病模型小鼠（胰島細(xì)胞被特定藥物破壞的小鼠）體內(nèi)，然后小鼠的血糖濃度，結(jié)果如圖所示（虛線表示正常小鼠的血糖濃度值）。請回答相關(guān)問題：（1）實驗用的胚胎干細(xì)胞取自小鼠的早期囊胚，取出胚胎后一般用酶將其分散成單個細(xì)胞。（2）根據(jù)實驗結(jié)果可以判定M細(xì)胞已具有細(xì)胞的功能。說明判定的理由。（3）用胰島素基因片段做探針，對小鼠胚胎干細(xì)胞和M細(xì)胞進行檢測。請在下表的空格中填上檢測結(jié)果（用“+”表示能檢測到，用“-”表示不能檢測到）。用探針檢測細(xì)胞的DNA用探針檢測細(xì)胞的RNA胚胎干細(xì)胞M細(xì)胞胚胎干細(xì)胞M細(xì)胞上述實驗結(jié)果表明，胚胎干細(xì)胞通過定向分化為M細(xì)胞。（4）若將M細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中，重組細(xì)胞能否分化為其他類型細(xì)胞？，請說明理由?！窘馕觥勘绢}考查的知識點如下：糖尿病的機制細(xì)胞的全能性和基因表達的相關(guān)知識1．糖尿病的機制由于胰島B細(xì)胞受損導(dǎo)致無法合成胰島素來降血糖，血糖濃度過高隨尿排出，導(dǎo)致糖尿病的產(chǎn)生。本題中通過曲線反應(yīng)了未移植M細(xì)胞和移植M細(xì)胞下血糖濃度的變化，可見移植M細(xì)胞血糖濃度降低，顯然M細(xì)胞發(fā)揮了胰島B細(xì)胞的功能2．細(xì)胞的全能性和基因表達的相關(guān)知識第（4）小問中考查了動物細(xì)胞核具有全能性的原因，即細(xì)胞核含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)；第（3）問中通過表格的形式要求學(xué)生補充實驗的結(jié)果，首先學(xué)生要明確這里的M細(xì)胞是通過小鼠的胚胎干細(xì)胞經(jīng)過細(xì)胞增殖、分化而產(chǎn)生的，由于是通過有絲分裂增殖，所以M細(xì)胞和胚胎干細(xì)胞的DNA是一樣的，然而細(xì)胞分化的實質(zhì)為基因的選擇性表達，追究到原因就是相同的DNA轉(zhuǎn)錄形成了不同的RNA，進一步合成了不同的蛋白質(zhì)，所以M細(xì)胞和胚胎干細(xì)胞中的RNA是不一樣的，從而在進行DNA探針雜交試驗時出現(xiàn)了如表格中顯示的雜交結(jié)果?！敬鸢浮竣?（12分）（1）胰蛋白酶（2）胰島B胰島B細(xì)胞分泌的胰島素是唯一降血糖的激素（3）基因的選擇性表達（胰島素基因的表達）（4)能細(xì)胞核含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)（細(xì)胞核的全能性）8、（2022·江蘇高考）（8分）動物器官的體外培養(yǎng)技術(shù)對于研究器官的生理、病理過程及其機制意義重大。下圖是一個新生小鼠的肝臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖。請回答下列問題。（1）肝臟切成小薄片，這有利于肝臟細(xì)胞。（2）氣室中充入5％C02：氣體的主要作用是。（3）培養(yǎng)液中添加抗生素是為了抑制細(xì)菌生長，但要注意選擇抗生素的，以保證抗生素對肝臟無害。（4）有機物X有毒性，可誘發(fā)染色體斷裂。利用上圖所示裝置和提供的下列材料用具，探究肝臟小塊對有機物X是否具有解毒作用。材料用具：肝臟小塊，外周血淋巴細(xì)胞，淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液，植物凝集素（刺激淋巴細(xì)胞分裂）；顯微鏡，載玻片，蓋玻片，玻璃皿，滴管；吉姆薩染液（使染色體著色），有機物X溶液等。實驗過程：①在淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中加入植物凝集素培養(yǎng)淋巴細(xì)胞，取4等份，備用。②利用甲、乙、丙、丁4組上圖所示裝置，按下表步驟操作（“√”表示已完成的步驟）。甲乙丙丁步驟一：加人肝臟培養(yǎng)液√√√√步驟二：加入有機物X溶液√√步驟三：放置肝臟小塊√上表中還需進行的操作是。③培養(yǎng)一段時間后，取4組裝置中的等量培養(yǎng)液，分別添加到4份備用的淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。④一段時間后取淋巴細(xì)胞分別染色、制片。在顯微鏡下觀察，并對比分析。若丙組淋巴細(xì)胞出現(xiàn)異常，而甲組的淋巴細(xì)胞正常，則說明。【解析】本題考查動物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識。（1）把肝臟切成小薄片，有利于肝臟細(xì)胞的呼吸代謝，即吸收氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物（2）氣室中充入5％C02的作用是形成碳酸來維持培養(yǎng)液適宜的pH，（3）同時也要注意選擇抗生素的種類和數(shù)量來抑制細(xì)菌生長（4）乙組或丁組沒有處理向乙(或丁)組裝置中放置肝臟小塊作為對照實驗，有機物X有毒性，可誘發(fā)染色體斷裂所以要觀察淋巴細(xì)胞的染色體形態(tài)和數(shù)量是否變化。甲組添加肝臟小塊淋巴細(xì)胞染色體正常，丙組沒有添加出現(xiàn)染色體異常，說明肝臟小塊對有機物X具有解毒作用，所以甲組正常?！敬鸢浮浚?）吸收氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物（2）維持培養(yǎng)液適宜的pH（3）種類和劑量（4）向乙（或?。┙M裝置中放置肝臟小塊染色體形態(tài)和數(shù)量肝臟小塊對有機物X具有解毒作用【考點模擬演練】一、選擇題1、下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是()A．動物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得大量的分泌蛋白B．通過動物細(xì)胞培養(yǎng)獲得細(xì)胞株或細(xì)胞系，證明了動物細(xì)胞也是有全能性的C．動物細(xì)胞培養(yǎng)一般不需要脫分化過程D．胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)時，加滋養(yǎng)層細(xì)胞是為了促進干細(xì)胞分化【解析】脫分化是植物細(xì)胞工程中的一個重要過程，動物細(xì)胞培養(yǎng)過程一般沒有脫分化過程。【答案】C2、(2022·南京模擬)以H1N1病毒核衣殼蛋白為抗原，采用細(xì)胞工程制備單克隆抗體，下列敘述正確的是()A．用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清為單克隆抗體B．體外培養(yǎng)單個漿細(xì)胞可以獲得大量針對H1N1病毒的單克隆抗體C．將等量漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞D．利用該單克隆抗體與H1N1病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可以診斷該病毒感染體【解析】單克隆抗體是相應(yīng)的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的，單個漿細(xì)胞的培養(yǎng)不能獲得單克隆抗體，用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，血清中的抗體不是單一抗體，還含有體內(nèi)已存在的其他抗原的抗體；等量漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，可以形成三種雜交細(xì)胞，但只有漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合而成的細(xì)胞稱為雜交瘤細(xì)胞?！敬鸢浮緿3、利用細(xì)胞工程方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是()A．用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體B．體外培養(yǎng)單個漿細(xì)胞可以獲得大量針對SARS病毒的單克隆抗體C．將等量漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞不一定為雜交瘤細(xì)胞D．利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法不一定能診斷出SARS病毒感染者【解析】經(jīng)過特定抗原刺激后的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體為單克隆抗體。在細(xì)胞融合過程中，可產(chǎn)生三種類型的雜交細(xì)胞，要進行篩選；利用抗原—抗體反應(yīng)可以診斷出病毒感染者?！敬鸢浮緾4、（2022·鄭州模擬）英國科學(xué)家維爾莫特首次用羊的體細(xì)胞乳腺細(xì)胞成功地培育出一只小母羊，取名為“多利”，這種方法被稱之為“克隆”。以下四項中與此方法在本質(zhì)上最相近的是A．將兔的早期胚胎分割后，分別植入兩只母兔子宮內(nèi)，并最終孕育成兩只一樣的兔B．將人的抗病毒基因嫁接到煙草的DNA分子上，培育出了具有抗病毒能力的煙草新品種C．將鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過免疫的脾細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞D．將人的精、卵在體外受精，待受精卵發(fā)育到囊胚期時，再植入女性子宮內(nèi)發(fā)育成“試管嬰兒”【答案】A5、（2022·大同模擬）單克隆抗體（單抗）實質(zhì)上是單個效應(yīng)B細(xì)胞通過克隆形成的細(xì)胞群產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的免疫球蛋白。下列有關(guān)敘述中，錯誤的是A．單抗作為生物導(dǎo)彈能定向到達癌細(xì)胞所在部位B．單抗制備的過程要用到動物細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞融合技術(shù)C在單抗制備的過程中必須經(jīng)過至少兩次細(xì)胞篩選D．只有用物理或化學(xué)方法誘導(dǎo)，才能促使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞【解析】誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞的融合有三種方法：滅活病毒、物理方法、化學(xué)方法?！敬鸢浮緿6、單克隆抗體產(chǎn)生于()A．促融劑作用下形成的雜交瘤細(xì)胞B．單個雜交瘤細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群C．B淋巴細(xì)胞分化形成的漿細(xì)胞D．胚胎干細(xì)胞定向誘導(dǎo)形成的淋巴細(xì)胞【解析】單克隆抗體是由單個雜交瘤細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群產(chǎn)生的?！敬鸢浮緽7、(2022·佛山聯(lián)考)下列有關(guān)制備單克隆抗體的敘述，不正確的是()A．對小動物注射多種抗原B．用動物細(xì)胞核移植技術(shù)構(gòu)建雜交瘤細(xì)胞C．用選擇性培養(yǎng)基篩選雜交瘤細(xì)胞D．利用抗原—抗體反應(yīng)對雜交瘤細(xì)胞進行陽性檢測【解析】應(yīng)該對小動物注射特定抗原，這樣才能產(chǎn)生特定的漿細(xì)胞。構(gòu)建雜交瘤細(xì)胞利用的是動物細(xì)胞融合技術(shù)?！敬鸢浮緼B8、某研究小組為測定藥物對體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性，準(zhǔn)備對某種動物的肝腫瘤細(xì)胞(甲)和正常肝細(xì)胞(乙)進行動物細(xì)胞培養(yǎng)。下列說法正確的是()A．在利用兩種肝組織塊制備肝細(xì)胞懸液時，也可用胃蛋白酶處理B．細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行，CO2的作用是刺激細(xì)胞的呼吸C．甲、乙細(xì)胞在持續(xù)的原代培養(yǎng)過程中，乙會出現(xiàn)停止增殖的現(xiàn)象D．僅用該培養(yǎng)液也能用來培養(yǎng)乙肝病毒【解析】胃蛋白酶最適pH值接近于2，呈酸性，而細(xì)胞培養(yǎng)液的pH值接近于中性，所以不能用胃蛋白酶處理。CO2的作用是調(diào)節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)液的pH值。由于存在細(xì)胞接觸抑制現(xiàn)象，在原代培養(yǎng)過程中，會出現(xiàn)停止增殖的現(xiàn)象，需要傳代培養(yǎng)獲得細(xì)胞株和細(xì)胞系；病毒在活細(xì)胞內(nèi)才能增殖，不能用培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)液進行培養(yǎng)?！敬鸢浮緾9、在動物體細(xì)胞克隆技術(shù)中，不一定涉及()A．卵母細(xì)胞的培養(yǎng)B．細(xì)胞核移植C．早期胚胎培養(yǎng)D．導(dǎo)入外源基因【解析】體細(xì)胞克隆過程的實質(zhì)是體細(xì)胞的細(xì)胞核移植，即將體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的卵母細(xì)胞中，形成重組細(xì)胞再發(fā)育為重組胚胎，故A、B、C項都涉及。在轉(zhuǎn)基因克隆動物中需要導(dǎo)入外源基因。【答案】D10、用動物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實驗步驟中錯誤的是 ()A．將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞B．用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞C．用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合D．篩選雜交瘤細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體【解析】將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞，把小鼠骨髓瘤細(xì)胞與能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞在聚乙二醇或滅活的仙臺病毒的誘導(dǎo)下融合，融合后的雜交瘤細(xì)胞具有兩個親本細(xì)胞的特性，可以分泌化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體，即單克隆抗體。【答案】B11、在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，下列處理不恰當(dāng)?shù)氖?)A．培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具要進行無菌處理B．提供種類齊全的營養(yǎng)物質(zhì)C．提供純氧以保證細(xì)胞的呼吸作用D．保證提供適宜的溫度和pH【解析】動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件是無毒、無菌的環(huán)境，營養(yǎng)，溫度和pH以及氣體環(huán)境適宜。氣體環(huán)境所需的主要氣體除氧氣外還有二氧化碳，其中二氧化碳的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH?！敬鸢浮緾12、動物細(xì)胞融合的原理是(C)A．動物細(xì)胞的細(xì)胞膜無識別異物的能力B．動物細(xì)胞容易被病毒感染C．細(xì)胞膜具有一定的流動性D．動物細(xì)胞的細(xì)胞膜薄，易被擊穿【解析】動物細(xì)胞膜上的糖蛋白具有識別能力，動物細(xì)胞和植物細(xì)胞一樣都容易被微生物感染，需要無菌操作。動物細(xì)胞的融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜是具有流動性的?！敬鸢浮緾13、下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是()A．培養(yǎng)中的人效應(yīng)T細(xì)胞能產(chǎn)生單克隆抗體B．培養(yǎng)中的人B細(xì)胞能夠無限地增殖C．人的成熟紅細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)能形成組織D．用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個肝細(xì)胞【解析】本題考查單克隆抗體的制備原理和動物細(xì)胞培養(yǎng)原理、方法方面的知識。單克隆抗體是由不能無限增殖但能分泌專一性抗體的漿細(xì)胞與不能分泌抗體但能無限增殖的骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞所產(chǎn)生。人的成熟紅細(xì)胞無細(xì)胞核，不可能分裂形成組織。胰蛋白酶可水解動物組織內(nèi)的細(xì)胞間質(zhì)，使其分散成單個細(xì)胞。【答案】D14、一般來說，動物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足以下條件（）①無毒的環(huán)境②無菌的環(huán)境③合成培養(yǎng)基需加血漿④溫度與動物體溫相近⑤需要O2，不需要CO2⑥CO2能調(diào)節(jié)培養(yǎng)液pHA．①②③④⑤⑥B．①②③④C．①③④⑤⑥D(zhuǎn)．①②③④⑥【解析】動物細(xì)胞體外培養(yǎng)要求其環(huán)境無菌、無毒，培養(yǎng)液中要添加一定量的抗生素；合成培養(yǎng)基中需加入動物血清、血漿等天然成分；適宜的溫度、pH分別為℃±0.5℃、～；O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2可維持培養(yǎng)液的pH【答案】D15、從母羊甲的體細(xì)胞中取出細(xì)胞核，注入到母羊乙的去核卵母細(xì)胞中，誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞通過卵裂形成早期胚胎，再植入到另一母羊丙的子宮內(nèi)，一段時間后，生出的小羊大多數(shù)性狀是（）A．既像甲又像乙B．像甲C．像乙D．像丙【解析】本題只要理解細(xì)胞核是生命系統(tǒng)的控制中心，這也是克隆的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)。本題考查動物克隆的原理。生物的性狀遺傳可分為細(xì)胞核遺傳和細(xì)胞質(zhì)遺傳，遺傳物質(zhì)DNA主要分布于細(xì)胞核內(nèi)，故生物性狀主要由細(xì)胞核控制的，細(xì)胞核是生物性狀的控制中心。故克隆動物的性狀主要與供核母體相像，即是母羊甲?！敬鸢浮緽二、非選擇題16、(2022·濟寧模擬)科學(xué)家通過對鼠和人控制抗體產(chǎn)生的基因進行拼接，實現(xiàn)了對鼠源雜交瘤抗體的改造，生產(chǎn)出對人體的不良反應(yīng)減少、效果更好的鼠—人嵌合抗體，用于癌癥治療。下圖表示形成鼠—人嵌合抗體的過程。請據(jù)圖回答：(1)鼠源雜交瘤抗體就是從免疫小鼠的脾臟細(xì)胞中獲取B淋巴細(xì)胞，在誘導(dǎo)劑的作用下與________融合，形成____________細(xì)胞，并通過體內(nèi)培養(yǎng)或體外培養(yǎng)生產(chǎn)單克隆抗體。這種抗體與普通血清抗體相比較，最主要的優(yōu)點在于__________________________，可大量制備。(2)與植物原生質(zhì)體的融合相比，動物細(xì)胞融合在誘導(dǎo)融合方法方面的主要區(qū)別是還常用________________________誘導(dǎo)融合。(3)生產(chǎn)單克隆抗體一般不直接培養(yǎng)漿細(xì)胞，主要原因是________________________________________________________________________。(4)科學(xué)家通過基因拼接，將鼠源抗體基因改造成鼠—人嵌合抗體基因，然后導(dǎo)入到鼠淋巴細(xì)胞中，這個過程中用到的工具酶有________、________，改造抗體屬于________工程的范疇?！窘馕觥?1)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，形成雜交瘤細(xì)胞，培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體，單克隆抗體的優(yōu)點是特異性強、靈敏度高。(2)動物細(xì)胞融合可用滅活的病毒誘導(dǎo)。(3)生產(chǎn)單克隆抗體一般不直接培養(yǎng)漿細(xì)胞，因為漿細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞，不能無限增殖。(4)基因的拼接用到限制酶和DNA連接酶。改造抗體是通過改造基因?qū)崿F(xiàn)