電子科大細(xì)胞生物學(xué)第三章細(xì)胞生物學(xué)研究方法演示文稿

電子科大細(xì)胞生物學(xué)第三章細(xì)胞生物學(xué)研究方法演示文稿當(dāng)前1頁，總共75頁。優(yōu)選電子科大細(xì)胞生物學(xué)第三章細(xì)胞生物學(xué)研究方法當(dāng)前2頁，總共75頁。概要了解細(xì)胞生物學(xué)常用研究方法，包括細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察方法、細(xì)胞組分分析方法、細(xì)胞培養(yǎng)方法、細(xì)胞工程與顯微操作技術(shù)等。本章學(xué)習(xí)要求當(dāng)前3頁，總共75頁。細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察方法細(xì)胞組分分析方法細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞工程與顯微操作技術(shù)本章主要教學(xué)內(nèi)容當(dāng)前4頁，總共75頁。第一節(jié)細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察方法一、光學(xué)顯微鏡技術(shù)（lightmicroscopy)

肉眼的分辨率：0.2mm；光鏡分辨率：0.2um；

EM分辨率可達(dá)到0.2nm1m=103mm=106um=109nm當(dāng)前5頁，總共75頁。當(dāng)前6頁，總共75頁。當(dāng)前7頁，總共75頁。2、熒光顯微鏡技術(shù)原理與應(yīng)用

直接熒光標(biāo)記技術(shù)

間接免疫熒光標(biāo)記技術(shù)

應(yīng)用：在光鏡水平用于特異蛋白質(zhì)等生物大分子的定性定位。（FluorescenceMicroscopy）當(dāng)前8頁，總共75頁。如:將標(biāo)記熒光素的純化肌動蛋白顯微注射入培養(yǎng)細(xì)胞中，可以看到肌動蛋白分子組裝成肌動蛋白纖維。將可產(chǎn)生熒光的綠色熒光蛋白（GreenFluorescentProtein，GFP）基因與某種蛋白基因融合，在表達(dá)這種融合蛋白的細(xì)胞中，便可直接觀察到該蛋白的動態(tài)變化。

當(dāng)前9頁，總共75頁。（LaserScanningConfocalMicroscopy）物鏡和聚光鏡同時聚焦到同一小點，彼此互相共聚焦。激光束（光源）經(jīng)雙色鏡反射后，通過物鏡匯聚到樣品某一焦點。從焦點發(fā)射的熒光（樣3、激光共焦掃描顯微鏡技術(shù)原理品一般經(jīng)免疫熒光標(biāo)記）經(jīng)透鏡匯聚成像，被檢測器檢出。通過樣品其他部位的激光即激光發(fā)出的熒光不會聚焦成像，因而檢測器不能檢出。當(dāng)前10頁，總共75頁。排除焦平面以外光的干擾，增強圖像反差和提高分辨率(1.4—1.7倍)，可重構(gòu)樣品的三維結(jié)構(gòu)。應(yīng)用：當(dāng)前11頁，總共75頁。4、熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)（fluorescenceresonanceenerrgytransfer,FRET）用于檢測活細(xì)胞中兩個蛋白質(zhì)分子之間的直接相互作用。供體發(fā)射的熒光與受體發(fā)色團(tuán)分子的吸收光譜重疊，且兩個探針距離在10nm范圍以內(nèi)時，會發(fā)生一種非放射性的能量轉(zhuǎn)移，產(chǎn)生FRET現(xiàn)象。當(dāng)前12頁，總共75頁。當(dāng)前13頁，總共75頁?？蛇x擇供體蛋白CFP和受體蛋白YFP分別與兩種目的蛋白融合表達(dá)。當(dāng)這兩個融合蛋白之間的距離在5-10nm的范圍內(nèi)，供體CFP發(fā)出的熒光可被YFP所吸收，并激發(fā)YFP發(fā)出黃色熒光。此時可通過測量CFP熒光強度的損失量來確定這兩個蛋白是否相互作用。兩個蛋白距離越近，CFP所發(fā)出的熒光被YFP接收的量就越多，檢測器所接收到的熒光越少。反之，不會產(chǎn)生FRET效應(yīng)。當(dāng)前14頁，總共75頁。5、熒光漂白恢復(fù)技術(shù)（fluorescencerecoveryafterphotobleaching,FRAP）該技術(shù)起源于20世紀(jì)70年代。使用與蛋白質(zhì)或脂質(zhì)耦聯(lián)的親脂性或親水性的熒光分子，如熒光素、綠色熒光蛋白等，檢測活體細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)部的分子運動以及在各種結(jié)構(gòu)上分子動態(tài)變化率的大小。當(dāng)前15頁，總共75頁。高能量激光束照射使特定區(qū)域，該區(qū)域熒光會發(fā)生不可逆淬滅。光漂白區(qū)熒光的恢復(fù)可通過非漂白區(qū)的熒光標(biāo)記分子在膜上或胞質(zhì)中運動至光漂白區(qū)來完成。原理：當(dāng)前16頁，總共75頁。當(dāng)前17頁，總共75頁。

是研究膜蛋白或膜脂流動性的基本實驗技術(shù)之一。

熒光素標(biāo)記膜蛋白或膜脂，然后用激光束照射細(xì)胞表面某一區(qū)域，使被照射區(qū)的熒光淬滅變暗。由于膜的流動性，淬滅區(qū)域的亮度逐漸增加，最后恢復(fù)到與周圍的熒光強度相等。根據(jù)熒光恢復(fù)的速度可推算出膜蛋白或膜脂擴(kuò)散速度。當(dāng)前18頁，總共75頁。抗鼠細(xì)胞膜蛋白的熒光抗體（顯綠色熒光）和抗人紅細(xì)胞蛋白的熒光抗體（顯紅色熒光）分別標(biāo)記小鼠和人的細(xì)胞表面，然后用滅活的仙臺病毒處理使兩種細(xì)胞融合。10min后不同顏色的熒光在融合細(xì)胞表面開始擴(kuò)散，40min后已分辨不出融合細(xì)胞表面綠色熒光或紅色熒光區(qū)域。證明膜蛋白的流動性當(dāng)前19頁，總共75頁。二、電子顯微鏡技術(shù)透射電鏡（TEM）1)超薄切片技術(shù)2)負(fù)染色技術(shù)3)冰凍蝕刻技術(shù)4)真空噴鍍技術(shù)5)電鏡三維重構(gòu)技術(shù)掃描電鏡（Scanningelectronmicroscope，SEM）透射電鏡的基本構(gòu)造透射電鏡主要制樣技術(shù)當(dāng)前20頁，總共75頁。（1）透射電鏡基本構(gòu)造1、透射電鏡（TEM）當(dāng)前21頁，總共75頁。

顯微鏡分辨本領(lǐng)光源透鏡真空成像原理LM200nm可見光玻璃透鏡不要求真空利用樣品對光的吸收形成明暗反差和顏色變化100nm紫外光玻璃透鏡不要求真空TEM0.1nm電子束電磁透鏡要求真空（1.33x10-5～1.33x10-3Pa）利用樣品對電子的散射和透射形成明暗反差（2）電鏡與光鏡的比較當(dāng)前22頁，總共75頁。電子束穿透力很弱，很難通過細(xì)胞、組織切片，樣品須先制備超薄切片。超薄切片厚度：40～50nm制備程序：取材固定脫水浸透包埋切片染色觀察（3）透射電鏡主要制樣技術(shù)1）超薄切片技術(shù)用于透射電鏡（TEM）觀察樣本內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)。當(dāng)前23頁，總共75頁。當(dāng)前24頁，總共75頁。戊二醛：是一種化學(xué)交聯(lián)劑，滲透速率較四氧化鋨快，能固定蛋白和糖類（特別是糖原）。一般用戊二醛進(jìn)行前固定。但對大多數(shù)脂類的固定作用不強，樣品僅用戊二醛固定后，其反差不好，最好再用四氧化鋨進(jìn)行后固定。常用的固定劑：醛類固定劑、四氧化鋨等單一固定劑不能固定細(xì)胞內(nèi)所有組分，常需聯(lián)合使用不同固定劑。常采用戊二醛和四氧化鋨雙重固定。四氧化鋨：是一種重金屬化合物，能與不飽和脂肪酸反應(yīng)，是膜結(jié)構(gòu)最佳固定劑。四氧化鋨在隨后的脫水過程中可被還原形成鋨黑，使樣品反差增強。但四氧化鋨滲透緩慢，對酶活性和抗原活性破壞較大。取材與固定當(dāng)前25頁，總共75頁。固定好的樣品一般要經(jīng)過濃度遞增的乙醇或丙酮進(jìn)行脫水。脫水后將樣品包埋在樹脂中，使之獲得一定的硬度、彈性和韌度，這樣才易于切成超薄切片，并使切片能承受電子束轟擊。環(huán)氧樹脂：國產(chǎn)618環(huán)氧樹脂、Epon812等脫水包埋常用的包埋劑為環(huán)氧樹脂和丙烯酸樹脂等丙烯酸樹脂：有LRWhite、LRGold、Lowi-crvls等當(dāng)前26頁，總共75頁。超薄切片一般收集在金屬載網(wǎng)上進(jìn)行觀察。常用銅網(wǎng)為200～400目，此外根據(jù)不同的實驗要求還可選用金網(wǎng)、鎳網(wǎng)等。載網(wǎng)上一般包被一層支持膜，以支撐載網(wǎng)上的超薄切片，增加其穩(wěn)定性。最常用的支持膜是Formvar(聚乙烯甲醛)、火棉膠、碳等。包埋好的組織塊需在超薄切片機(jī)上用玻璃刀或鉆石刀切成超薄切片。切片當(dāng)前27頁，總共75頁。生物樣品多數(shù)是由碳、氫、氧、氮等元素組成的，這些元素的原子序數(shù)低，散射電子的能力不強，在電鏡下的反差非常弱，因此通常需用高分子量的金屬鹽來對超薄切片進(jìn)行染色，由于細(xì)胞的不同結(jié)構(gòu)對金屬鹽的親和力不同，因此染色后不同結(jié)構(gòu)對電子的散射能力亦不同，從而增強了細(xì)胞結(jié)構(gòu)的反差。常用染色液:醋酸雙氧鈾和鉛染液電鏡觀察染色與觀察當(dāng)前28頁，總共75頁。大鼠骨髓干細(xì)胞的超薄切片（引自G.M.Wrightetal）

當(dāng)前29頁，總共75頁。染色背景，襯托出樣品的精細(xì)結(jié)構(gòu)。Examplesofnegtivelystainedandmetal-shadowedspecimens.Electronmicrographsofatobaccorattlevirusafternegtivestainingwithpotassiumphosphotungstate(a)orshadowcastingwithchromium(b).2）負(fù)染色技術(shù)常用染色劑：2％磷鎢酸水溶液（Negativestaining）當(dāng)前30頁，總共75頁。家蠶細(xì)小病毒負(fù)染色電鏡照片(病毒直徑20nm)（陳立華、翟中和）

當(dāng)前31頁，總共75頁。制備過程簡單，只需將樣品制成懸液，直接滴于載網(wǎng)上，然后用重金屬物質(zhì)染液染色。即可在EM下觀察。重金屬物質(zhì)散射電子的能力較樣品本身強，電鏡下兩者顯示出明顯的明暗對比，樣品呈亮色，而其周圍的背景將呈暗色，這樣樣品表面的微細(xì)結(jié)構(gòu)就被襯托出來。常用染色劑：2％磷鎢酸水溶液當(dāng)前32頁，總共75頁。真空噴鍍一般在噴鍍儀中進(jìn)行，將鉑、鉻、金等重金屬在高真空條件下加熱，使其蒸發(fā)，蒸發(fā)出來的金屬粒子以一定的角度斜向噴鍍于樣品表面，這樣凸出的樣品表面將比周圍背景優(yōu)先包被一層金屬薄膜，二者之間的反差加大，樣品輪廓清晰地顯示出來。單方向噴鍍，樣品向著金屬發(fā)射源一面沉積金屬粒子較多，而背側(cè)面較少，形成投影。增強樣品反差，樣品富立體感。旋轉(zhuǎn)噴鍍，可使樣品表面的金屬薄膜均勻一致。3）真空噴鍍技術(shù)當(dāng)前33頁，總共75頁。a）快速冷凍b）低溫斷裂c）蝕刻d）復(fù)型主要用來觀察膜斷裂面的蛋白質(zhì)顆粒和膜表面結(jié)構(gòu)。4）冰凍蝕刻技術(shù)（Freezeetching）當(dāng)前34頁，總共75頁。樣品在低溫下迅速冷凍（液氮或液氦中）和低溫下，結(jié)構(gòu)“脆弱”部位（膜脂雙分子層疏水端）斷裂，顯示出膜脂中的蛋白質(zhì)顆粒，真空中冰升華，進(jìn)一步增強“浮雕”式蝕刻效果，鉑金噴鍍形成凹凸電子反差，真空噴鍍碳膜，樣品再經(jīng)消化液消化，收集復(fù)型膜在電鏡下觀察。當(dāng)前35頁，總共75頁。2、掃描電鏡（SEM）CO2臨界點干燥法防止主要觀察樣品表面的形貌特征。應(yīng)用原理溫度以上使CO2以氣態(tài)形式逸去。

引起樣品變形的表面張力問題。常用液態(tài)CO2浸透樣品，然后在臨界當(dāng)前36頁，總共75頁。成像立體感強，一般掃描電鏡分辨率為3nm。近年來研制的低壓高分辨掃描電鏡其分辨率可達(dá)0.7nm，可用于觀察核孔復(fù)合體等更精細(xì)結(jié)構(gòu)。當(dāng)前37頁，總共75頁。當(dāng)前38頁，總共75頁。瘧疾破壞的兩個紅細(xì)胞當(dāng)前39頁，總共75頁。當(dāng)前40頁，總共75頁。ScanningTunnelingMicroscope,STM80年代發(fā)展起來的檢測樣品微觀結(jié)構(gòu)的儀器包括：STM、AFM、磁力顯微鏡、摩擦力顯微鏡等。掃描探針與樣品接觸或達(dá)到很近距離時，即產(chǎn)生彼此間相互作用力，如量子力學(xué)中的隧道效應(yīng)（隧道電流）、原子間作用力、磁力、摩擦力等，并在計算機(jī)顯示出來，從而反映出樣品表面形貌信息、電特性或磁特性等。原理裝置掃描的壓電陶瓷、逼近裝置、電子學(xué)反饋控制系統(tǒng)和數(shù)據(jù)采集、處理、顯示系統(tǒng)。三、掃描遂道顯微鏡當(dāng)前41頁，總共75頁。1）可對晶體或非晶體成像，無需復(fù)雜計算，且分辨本領(lǐng)高（側(cè)分辨率為0.1～0.2nm，縱分辨率可達(dá)0.01nm）。2）可實時得到樣品表面三維圖象，可測量厚度信息。3）可在真空、大氣、液體等多種條件下工作；非破壞性測量。4）可連續(xù)成像，進(jìn)行動態(tài)觀察。特點納米生物學(xué)研究領(lǐng)域中的重要工具,在原子水平上揭示樣本表面的結(jié)構(gòu)。用途當(dāng)前42頁，總共75頁。

離心分離技術(shù)

細(xì)胞內(nèi)核酸、蛋白質(zhì)、酶、糖與脂類等的顯示方法

特異蛋白抗原的定位與定性

細(xì)胞內(nèi)特異核酸的定位與定性

放射自顯影技術(shù)

定量細(xì)胞化學(xué)分析技術(shù)第二節(jié)細(xì)胞組分的分析方法當(dāng)前43頁，總共75頁。一、離心分離技術(shù)用于分離細(xì)胞器與生物大分子及其復(fù)合物。①破碎細(xì)胞：低滲勻漿、超聲波破碎、研磨等。②差速離心：利用不同離心速度分離密度不同的細(xì)胞組分。③密度梯度離心：精細(xì)組分或生物大分子的分離。用途基本操作過程當(dāng)前44頁，總共75頁。當(dāng)前45頁，總共75頁。二、細(xì)胞內(nèi)核酸、蛋白質(zhì)、酶、糖與脂類等的顯示方法利用一些顯色劑與所檢測物質(zhì)中一些特殊基團(tuán)特異性結(jié)合的特性，通過顯色劑在細(xì)胞中的定位及顏色的深淺來判斷某種物質(zhì)在細(xì)胞中的分布和含量。原理當(dāng)前46頁，總共75頁。顯示DNA分布福爾根染色（FeulgenStain）酸水解可除去RNA，僅保留DNA，并除去DNA上的嘌呤，使脫氧核糖的醛基暴露，所暴露的自由醛基與schiff試劑反應(yīng)呈紫紅色。當(dāng)前47頁，總共75頁。PAS反應(yīng)可確定多糖存在。原理是利用schiff試劑與醛基之間的反應(yīng)，但其醛基來自碘酸氧化多糖的1、2-乙二醇基。四氧化鋨與不飽和脂肪酸反應(yīng)呈黑色，用以證明脂肪滴存在。糖類顯色反應(yīng)脂類顯色反應(yīng)當(dāng)前48頁，總共75頁。氮汞試劑與組織中的蛋白質(zhì)側(cè)鏈上的酪氨酸殘基反應(yīng)呈紅色。檢測方法有多種氫氧化重氮與酪氨酸、色氨酸和組氨酸，形成有色復(fù)合物?？捎昧虼见}共價鍵的試劑進(jìn)行檢測。如檢測堿性磷酸酶可用格莫瑞（Gomori）方法。蛋白質(zhì)顯色反應(yīng)米倫（Millon）反應(yīng)重氮反應(yīng)蛋白質(zhì)-SH檢測酶檢測當(dāng)前49頁，總共75頁。三、特異蛋白抗原的定位與定性快速、靈敏、有特異性，但其分辨率有限。免疫鐵蛋白技術(shù)免疫酶標(biāo)技術(shù)免疫膠體金技術(shù)應(yīng)用：通過對分泌蛋白的定位，可以確定某種蛋白的分泌動態(tài)；胞內(nèi)酶的研究；膜蛋白的定位與骨架蛋白的定位等。免疫熒光技術(shù)免疫電鏡技術(shù)當(dāng)前50頁，總共75頁。當(dāng)前51頁，總共75頁。四、細(xì)胞內(nèi)特異核酸的定位與定性光鏡水平的原位雜交技術(shù)

（同位素標(biāo)記或熒光素標(biāo)記的探針）電鏡水平的原位雜交技術(shù)

（生物素標(biāo)記的探針與抗生物素抗體相連的膠體金標(biāo)記結(jié)合）

PCR技術(shù)當(dāng)前52頁，總共75頁。五、放射自顯影技術(shù)原理：利用同位素的放射自顯影，對細(xì)胞內(nèi)生物大分子進(jìn)行定性、定位與半定量研究。應(yīng)用：實現(xiàn)對細(xì)胞內(nèi)生物大分子進(jìn)行動態(tài)和追蹤研究。

步驟：前體物摻入細(xì)胞（標(biāo)記：持續(xù)標(biāo)記和脈沖標(biāo)記）；放射自顯影。當(dāng)前53頁，總共75頁。鴨瘟病毒感染雞胚成纖維細(xì)胞24小時后，用3H－尿嘧啶核苷脈沖標(biāo)記10分鐘的電鏡放射自顯影圖片。在病毒大量復(fù)制與裝配的宿主細(xì)胞中，核仁（Nu）依然存在，并保持其轉(zhuǎn)錄功能

SG：

銀顆粒；

N：

細(xì)胞核；

Nu：

核仁；

C：

細(xì)胞質(zhì)。

當(dāng)前54頁，總共75頁。六、定量細(xì)胞化學(xué)分析技術(shù)細(xì)胞顯微分光光度術(shù)（Microspectrophotometry）利用細(xì)胞內(nèi)某些物質(zhì)對特異光譜的吸收，測定這些物質(zhì)（如核酸與蛋白質(zhì)等）在細(xì)胞內(nèi)的含量。包括：紫外光顯微分光光度測定法可見光顯微分光光度測定法當(dāng)前55頁，總共75頁。流式細(xì)胞儀（FlowCytometry）①用于定量測定細(xì)胞中的DNA、RNA或某一特異蛋白的含量；②測定細(xì)胞群體中不同時相細(xì)胞的數(shù)量；③從細(xì)胞群體中分離某些特異染色的細(xì)胞； ④分離DNA含量不同的中期染色體。主要應(yīng)用：當(dāng)前56頁，總共75頁。當(dāng)前57頁，總共75頁。細(xì)胞的培養(yǎng)細(xì)胞工程第三節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞工程與顯微操作技術(shù)當(dāng)前58頁，總共75頁。一、細(xì)胞的培養(yǎng)類型：原代培養(yǎng)細(xì)胞（primaryculturecell）繼代培養(yǎng)細(xì)胞（sub-culturecell）細(xì)胞株（cellstrain）:正常二倍體，接觸抑制（是指細(xì)胞在生長過程中達(dá)到相互接觸時停止分裂的現(xiàn)象）細(xì)胞系（cellline）：亞二倍體，接觸抑制喪失動物細(xì)胞培養(yǎng)當(dāng)前59頁，總共75頁。

首先從健康動物取出組織塊，剪碎，用胰酶或膠原酶與EDTA（螯合劑）等將細(xì)胞連接處消化分散，給予良好的營養(yǎng)液與無菌的培養(yǎng)環(huán)境（接近體溫與體內(nèi)pH）,在培養(yǎng)瓶中進(jìn)行靜止或慢速轉(zhuǎn)動培養(yǎng)。不論用何種培養(yǎng)液，一般都要加一定量的小牛血清，這樣才有利于細(xì)胞的貼壁生長與分裂。

動物原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟當(dāng)前60頁，總共75頁。原代細(xì)胞（primarycell）傳代細(xì)胞（sub-culturecell）將肌體取出的細(xì)胞或組織進(jìn)行實效培養(yǎng)。實效培養(yǎng)的細(xì)胞大約增殖10代左右，這樣的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞。

原代培養(yǎng)的細(xì)胞繼續(xù)轉(zhuǎn)接培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)。用于傳代培養(yǎng)的稱為傳代細(xì)胞。當(dāng)前61頁，總共75頁。

原代細(xì)胞一般傳至10代左右就不易傳下去了，細(xì)胞生長出現(xiàn)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，但有極少數(shù)細(xì)胞可能渡過“危機(jī)”而傳下去。這些存活的細(xì)胞一般又可順利地傳代40-50次，并且仍保持原來染色體的二倍體數(shù)量及接觸抑制的行為，這種傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞株。細(xì)胞株（cellstrain）：當(dāng)前62頁，總共75頁。

由能進(jìn)行無限次傳代培養(yǎng)的細(xì)胞群稱為細(xì)胞系。細(xì)胞系細(xì)胞與體內(nèi)原來的細(xì)胞比，其形態(tài)、結(jié)構(gòu)、遺傳上存在不同程度的變異。細(xì)胞系（cellline）：

細(xì)胞系細(xì)胞的特點是染色體明顯改變，一般呈亞二倍體或非整倍體，接觸抑制喪失，容易傳代培養(yǎng)。如Hela細(xì)胞系、BHK21細(xì)胞系、CHO細(xì)胞系等。當(dāng)前63頁，總共75頁。Hela細(xì)胞（左）、CHO細(xì)胞（右）的培養(yǎng)當(dāng)前64頁，總共75頁。1、貼附型細(xì)胞（1）成纖維細(xì)胞型細(xì)胞

細(xì)胞長梭形,核圓位中央,胞質(zhì)常外伸2-3個長短突起,多數(shù)細(xì)胞排列疏散,有較大細(xì)胞間隙,有時也相互平行排列，成群細(xì)胞呈放射狀、旋渦狀等形式。當(dāng)前65頁，總共75頁。（2）上皮型細(xì)胞

類似上皮細(xì)胞而故名。細(xì)胞扁平狀，排列較規(guī)則，貼壁后呈三角形及不規(guī)則扁平多角形，中央有偏圓形核，生長時彼此緊密連接成單層細(xì)胞，相互擁擠呈現(xiàn)“鋪路石塊狀”，局部可形成單層上皮“膜片組織”。當(dāng)前66頁，總共75頁。（3）游走型細(xì)胞

在支持物分散生長，一般不連接成片形成群落；細(xì)胞質(zhì)常伸出偽足和突起；在培養(yǎng)皿壁上生長位置不固定，呈活躍的游走和變形運動，速度快且方向不規(guī)則；細(xì)胞內(nèi)易出現(xiàn)色暗吞噬顆粒；細(xì)胞外形不規(guī)則且多變，細(xì)胞密度增大連接成片時，形狀類似成纖維細(xì)胞型或上皮細(xì)胞型。當(dāng)前67頁，總共75頁。（4）多形型細(xì)胞

常見形式：神經(jīng)細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。

細(xì)胞多形不規(guī)則。其不規(guī)則形態(tài)不象成纖維細(xì)胞那樣由胞質(zhì)突起所致，而是一般分胞體和胞突兩部分，胞突細(xì)長，胞體多形不規(guī)則。當(dāng)前68頁，總共75頁。當(dāng)前69頁，總共75頁。2、非貼附型細(xì)胞

細(xì)胞體外生長時不貼壁，在懸浮培養(yǎng)液中生長而故名，又稱懸浮型細(xì)胞。細(xì)胞呈球形。常見形式：血液白細(xì)胞、淋巴組織細(xì)胞、某些腫瘤細(xì)胞、雜交細(xì)胞、轉(zhuǎn)化細(xì)胞系等。培養(yǎng)時，細(xì)胞密度大，