微生物遺傳育種緒論下

四真核基因表達(dá)調(diào)控當(dāng)前1頁，總共67頁。

真核基因的表達(dá)調(diào)控系統(tǒng)與原核的區(qū)別：1、真核基因數(shù)目多，哺乳動(dòng)物有數(shù)萬～10萬，而E.coli僅有40002、大量重復(fù)序列，可能對基因的表達(dá)帶來影響3、真核DNA與組蛋白組成核小體結(jié)構(gòu)，并有許多非組蛋白結(jié)合。組蛋白、非組蛋白和核小體的組織狀態(tài)及核小體的超螺旋結(jié)構(gòu)影響基因的活性。當(dāng)前2頁，總共67頁。

4、真核基因有內(nèi)含子，轉(zhuǎn)錄的mRNA都要經(jīng)拼接加工，細(xì)胞可通過對mRNA前體的加工與否進(jìn)行調(diào)節(jié)。5、真核基因轉(zhuǎn)錄在細(xì)胞核，翻譯在胞漿，排除了轉(zhuǎn)錄衰減。6、真核mRNA壽命長，脊椎動(dòng)物mRNA平均半壽期大約為3小時(shí)。7、調(diào)控范圍大：DNA水平—轉(zhuǎn)錄水平—轉(zhuǎn)錄后水平—翻譯水平—翻譯后水平等多層次的調(diào)控。當(dāng)前3頁，總共67頁。（一）轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控

主要通過反式作用因子，順式作用元件和RNA聚合酶的相互作用來完成的。當(dāng)前4頁，總共67頁。

1、基因轉(zhuǎn)錄水平的順式作用元件

順式作用元件（cis-actingelements）:指對基因表達(dá)有調(diào)節(jié)活性的DNA序列，其活性只影響與其自身同處在一個(gè)DNA分子上的基因，同時(shí)，這種DNA序列通常不編碼蛋白質(zhì)，多位于基因旁側(cè)或內(nèi)含子中。按功能分啟動(dòng)子、增強(qiáng)子和沉默子。當(dāng)前5頁，總共67頁。

1、啟動(dòng)子（promoter）

與基因表達(dá)啟動(dòng)相關(guān)的順式作用元件，位于基因轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游。根據(jù)啟動(dòng)子中TATA盒的有無分典型的啟動(dòng)子和不典型的啟動(dòng)子。當(dāng)前6頁，總共67頁。

①典型的啟動(dòng)子：

含TATAbox，有時(shí)一個(gè)基因的啟動(dòng)子上有兩個(gè)TATAbox，它們可分別或有側(cè)重地對不同誘導(dǎo)物作出應(yīng)答，在某些情況下，也參與組織特異性的選擇，如-淀粉酶基因在唾液腺和肝臟兩種組織分別選擇了相距2.8kb，轉(zhuǎn)錄效率不同的兩個(gè)轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)，保證唾液中酶的活性遠(yuǎn)高于肝臟。當(dāng)前7頁，總共67頁。

②不典型的啟動(dòng)子：

不含TATAbox，通常含GC序列，如管家基因的啟動(dòng)子。含這類啟動(dòng)子的結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄起始往往是不規(guī)則的，并且只有基礎(chǔ)水平的表達(dá)。當(dāng)前8頁，總共67頁。

2、增強(qiáng)子(enhancer)

使基因轉(zhuǎn)錄速率顯著提高的一類順式元件。增強(qiáng)子主要通過改變DNA模板的螺旋結(jié)構(gòu)、為DNA模板提供特定的局部微環(huán)境、或?yàn)镽NA聚合酶和反式作用因子提供一個(gè)與某些順式元件聯(lián)系的結(jié)構(gòu)等方式發(fā)揮作用。作用特點(diǎn)：無自身方向性及基因特異性，也不受與基因距離遠(yuǎn)近的影響。3、沉默子(silencer)使基因轉(zhuǎn)錄降低或使基因關(guān)閉的一類順式作用元件當(dāng)前9頁，總共67頁。

2、基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)的反式作用因子1、反式作用因子的定義

Trans-actingfactor：是能直接或間接地識別或結(jié)合在各順式元件的核心序列上，參與調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄效率的一組序列特異性的DNA結(jié)合蛋白。當(dāng)前10頁，總共67頁。

2、反式作用因子的特點(diǎn)⑴具有三個(gè)功能域：DNA識別結(jié)合域，轉(zhuǎn)錄活化域，調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域⑵具有識別啟動(dòng)子和增強(qiáng)子的功能⑶對調(diào)節(jié)有正向和負(fù)向兩個(gè)方面當(dāng)前11頁，總共67頁。

3、反式作用因子結(jié)構(gòu)域的模式⑴DNA結(jié)合域①鋅指結(jié)構(gòu)(Zincfingermotif):DNA結(jié)合域中由2個(gè)Cys和2個(gè)His或4個(gè)Cys與一個(gè)鋅離子借配位鍵結(jié)合成的指狀結(jié)構(gòu)。如TFⅢ-A有9個(gè)重復(fù)的指結(jié)構(gòu)，類固醇激素受體家族有2個(gè)指結(jié)構(gòu)。當(dāng)前12頁，總共67頁。最常見的DNA結(jié)合域：

1、鋅指（zincfinger）C——CysH——His常結(jié)合GC盒當(dāng)前13頁，總共67頁。

②堿性-螺旋結(jié)構(gòu)

如CTF是結(jié)合CCAAT盒的一種轉(zhuǎn)錄因子，其DNA結(jié)合域具有-螺旋，并富含堿性氨基酸。當(dāng)前14頁，總共67頁。

2、α-螺旋常結(jié)合CAAT盒當(dāng)前15頁，總共67頁。

③同源結(jié)構(gòu)域(Homodamain)：反式作用因子中由約60個(gè)左右氨基酸的相同保守序列組成的螺旋-轉(zhuǎn)折-螺旋的區(qū)域。這類反式作用因子的DNA結(jié)合域至少有兩個(gè)-螺旋，兩螺旋之間由幾個(gè)氨基酸殘基形成的“轉(zhuǎn)折”。當(dāng)前16頁，總共67頁。當(dāng)前17頁，總共67頁。

④螺旋-環(huán)-螺旋能與免疫球蛋白鏈基因增強(qiáng)子結(jié)合的反式因子E12和E47羧基端100～200aa可形成兩個(gè)兩性-螺旋，兩螺旋之間為非螺旋的環(huán)，-螺旋氨基端有堿性區(qū)，這個(gè)堿性區(qū)對結(jié)合DNA是必須的，-螺旋對形成二聚體是必須的。當(dāng)前18頁，總共67頁。當(dāng)前19頁，總共67頁。

⑤亮氨酸拉鏈(Leucinezipper)兩個(gè)具有亮氨酸拉鏈區(qū)的反式作用因子以疏水力相互作用形成的形同拉鏈的區(qū)域。

當(dāng)前20頁，總共67頁。

⑵轉(zhuǎn)錄活化域(transcriptionalactivationdomain)

位于DNA結(jié)合域以外由80～100個(gè)aa組成的具有轉(zhuǎn)錄活化功能的區(qū)域。當(dāng)前21頁，總共67頁。

①帶負(fù)電荷的-螺旋結(jié)構(gòu)含較多酸性氨基酸能形成親脂的-螺旋，稱酸性-螺旋結(jié)構(gòu)。如糖皮質(zhì)激素受體的轉(zhuǎn)錄活化域，Jun轉(zhuǎn)錄因子的轉(zhuǎn)錄活化域等。作用：對轉(zhuǎn)錄起始的特異誘導(dǎo)活性相對較低。可與TF-ⅡD復(fù)合物中某個(gè)通用因子或RNApol結(jié)合而發(fā)揮作用。當(dāng)前22頁，總共67頁。

②富含谷氨酰胺結(jié)構(gòu)

如SP1是與啟動(dòng)子GCbox結(jié)合的一種轉(zhuǎn)錄因子，除有結(jié)合DNA的鋅指結(jié)構(gòu)外，SP1共有4個(gè)參與轉(zhuǎn)錄活化的區(qū)域，其中最強(qiáng)的轉(zhuǎn)錄活化域之一很少有極性aa，卻富含谷氨酰胺，達(dá)該區(qū)aa總數(shù)的25%左右。Oct1/2，Jun,AP2,SRF均含此區(qū)域。當(dāng)前23頁，總共67頁。

③富含脯氨酸結(jié)構(gòu)

如CTF-NF1轉(zhuǎn)錄因子的羧基端很難形成-螺旋，原因是此區(qū)域富含脯氨酸，占該區(qū)aa的20～30%，在Oct2，Jun，AP1，SRF等哺乳動(dòng)物因子中也有富含脯氨酸的結(jié)構(gòu)當(dāng)前24頁，總共67頁。

⑶調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域

如糖皮質(zhì)激素受體是一種反式作用因子，它有與糖皮質(zhì)激素結(jié)合的區(qū)域，這個(gè)區(qū)域稱調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域。當(dāng)前25頁，總共67頁。

3、基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控中蛋白質(zhì)與DNA及蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的相互作用1.蛋白質(zhì)與DNA的相互作用—非共價(jià)鍵相互作用1)氫鍵:供氫基團(tuán):G,A,C的氨基受氫體:Glu,Asp的殘基側(cè)鏈2)疏水鍵:DNA分子大溝側(cè)緣的T的-CH3與疏水性氨基酸等均可建立疏水鍵聯(lián)系。3)堿性氨基酸殘基與DNA分子中戊糖-磷酸骨架之間建立電荷聯(lián)系當(dāng)前26頁，總共67頁。

2.蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的相互作用—非共價(jià)鍵相互作用1)氫鍵:蛋白質(zhì)分子中帶部分正電性的氫原子與帶電負(fù)性的原子靠靜電相互作用形成氫鍵。如NH3,-NH2,-OH的氫帶部分正電性,-C=O,-C00-帶負(fù)電性2)離子鍵:存在于兩個(gè)完全或部分帶相反電荷的原子或基團(tuán)之間的相互作用力。主要發(fā)生在堿性氨基酸側(cè)鏈,N-末端自由氨基,酸性氨基酸側(cè)鏈及C-末端羧基等帶電基團(tuán)之間3)疏水相互作用:主要發(fā)生在疏水性氨基酸側(cè)鏈之間當(dāng)前27頁，總共67頁。4、轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)控機(jī)制解除組蛋白對基因的封閉作用;反式作用因子活性的調(diào)節(jié)順式作用元件與反式作用因子的相互作用。當(dāng)前28頁，總共67頁。

帶正電荷的組蛋白與DNA中帶負(fù)電荷的磷酸基結(jié)合,于是組蛋白遮蔽了DNA分子,降低了DNA的模板活性。組蛋白的修飾作用可明顯解除染色體的抑制作用。已證明高乙?；M蛋白特異地聚集于活性染色質(zhì)功能區(qū),低乙?；M蛋白聚集于無轉(zhuǎn)錄活性的非功能區(qū),這一結(jié)果表明組蛋白乙?；杉せ钷D(zhuǎn)錄。此外,核小體組蛋白乙酰水平升高,可使DNA－組蛋白抑制性結(jié)構(gòu)破裂,有利于基本轉(zhuǎn)錄因子與轉(zhuǎn)錄起始部位結(jié)合。組蛋白對基因的封閉作用當(dāng)前29頁，總共67頁。蛋白質(zhì)與DNA結(jié)合時(shí)主要是DNA結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,DNA柔性加強(qiáng)了蛋白質(zhì)－DNA的相互作用,識別螺旋沿DNA大溝,在大溝一側(cè)接觸到堿基,接觸堿基數(shù)目一般不超過5bp。識別螺旋的氨基酸殘基分為3類:(1)與DNA堿基接觸的殘基,大多是極性的;(2)與主鏈磷酸基因接觸的殘基,大多是堿性的;(3)與蛋白質(zhì)其余部分接觸的殘基,往往以疏水殘基背向DNA。順式作用元件與反應(yīng)作用因子的相互作用當(dāng)前30頁，總共67頁。

體外轉(zhuǎn)錄器組裝的第一步即為TFⅡD結(jié)合到TATA盒上,形成包括TATA結(jié)合蛋白和約10個(gè)TBP相關(guān)因子的復(fù)合物。是TFⅡD還是TBP還是兩者同時(shí)結(jié)合TATA盒尚不清楚。體外轉(zhuǎn)錄試驗(yàn)表明,TAFs在對激活因子的應(yīng)答中起作用。TFⅡD和TBP在基礎(chǔ)轉(zhuǎn)錄中含量相似,但只有TFⅡD能對激活劑產(chǎn)生應(yīng)答。而且不同物種的活性結(jié)構(gòu)域是和特異性的TAFs相互作用的。激活蛋白能刺激TFⅡD－TFⅡA－TATA復(fù)合物形成,活性結(jié)構(gòu)和TAFs的多重接觸能增強(qiáng)TFⅡD與TATA盒的結(jié)合,激活轉(zhuǎn)錄。TFⅡD中心論當(dāng)前31頁，總共67頁。

1、反式作用因子的活性調(diào)節(jié)⑴表達(dá)式調(diào)節(jié)

這類反式作用因子合成出來就有活性，需要時(shí)就合成，不需要時(shí)就降解失活。當(dāng)前32頁，總共67頁。

如STAT家族(Signaltransducersandactivatorsoftranscription)。

⑵共價(jià)修飾這類反式因子合成出來沒有活性，需要修飾才具有活性，如是磷蛋白則通過磷酸化與去磷酸化調(diào)節(jié)其活性；如是糖蛋白，則通過糖基化與去糖基化調(diào)節(jié)其活性。當(dāng)前33頁，總共67頁。

⑶配體結(jié)合

許多激素受體是反式作用因子，本身對基因轉(zhuǎn)錄無調(diào)節(jié)作用，由激素激活后具有表達(dá)調(diào)控作用。當(dāng)前34頁，總共67頁。

⑷蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的相互作用有些反式作用因子單獨(dú)不能發(fā)揮作用，需與另一種蛋白結(jié)合成復(fù)合物才能發(fā)揮作用，如C-myc蛋白單獨(dú)結(jié)合DNA的能力很低，與max蛋白結(jié)合成二聚體就可調(diào)節(jié)基因表達(dá)。當(dāng)前35頁，總共67頁。

2、反式作用因子與順式元件結(jié)合

反式作用因子有激活基因表達(dá)的反式作用因子和阻遏表達(dá)的反式作用因子，值得一提的是：有些反式因子先激活，再與DNA結(jié)合，少數(shù)反式作用因子先與DNA結(jié)合，再被激活。當(dāng)前36頁，總共67頁。

3、反式作用因子的作用方式⑴成環(huán)假說

位于不同DNA結(jié)合位點(diǎn)上的兩個(gè)蛋白質(zhì)通過兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)之間DNA彎曲成環(huán)，而彼此靠近，直接接觸而發(fā)揮作用。如一個(gè)反式因子與增強(qiáng)子結(jié)合，RNApol與啟動(dòng)子結(jié)合，通過DNA柔曲性，彎曲成環(huán)使兩個(gè)蛋白質(zhì)靠近，為它們的相互作用提供條件。當(dāng)前37頁，總共67頁。

當(dāng)前38頁，總共67頁。

⑵滑動(dòng)假說一種反式因子結(jié)合DNA的特定序列后，沿著DNA滑動(dòng)到另一個(gè)特定序列并與那里的蛋白質(zhì)發(fā)生相互作用促進(jìn)轉(zhuǎn)錄的起始。⑶扭曲假說反式因子與DNA結(jié)合時(shí)，DNA發(fā)生變形，這種構(gòu)型的改變可使DNA解旋，有利轉(zhuǎn)錄的起始。當(dāng)前39頁，總共67頁。

⑷接力假說一個(gè)反式因子與DNA特定序列結(jié)合，促進(jìn)另一種蛋白質(zhì)結(jié)合于相鄰的DNA序列，由此再促進(jìn)別的蛋白質(zhì)的結(jié)合，最后一直伸展到轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)，對轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生調(diào)控作用。在短距離內(nèi)，這種機(jī)制是可能的，但遠(yuǎn)距離無法采用這種機(jī)制。當(dāng)前40頁，總共67頁。

4、中介因子在轉(zhuǎn)錄起始調(diào)節(jié)中的作用

許多核受體與通用轉(zhuǎn)錄因子之間并不直接相互作用,而是通過中介因子在核受體與通用轉(zhuǎn)錄因子之間發(fā)揮作用。如CBP在CREB(cAMPresponseelementbindingprotein)與通用轉(zhuǎn)錄因子(TFⅡB)之間發(fā)揮作用。當(dāng)前41頁，總共67頁。

第一類為RNA聚合酶II(polII)和基本轉(zhuǎn)錄因子(GTFs),它們結(jié)合在靶基因的啟動(dòng)子上,形成前起始復(fù)合物(PIC),啟動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄;第二類為調(diào)節(jié)蛋白(如激活因子和抑制因子),它們是一類與靶基因啟動(dòng)子和增強(qiáng)子特異結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子,具有細(xì)胞及基因特異性,可以增強(qiáng)或抑制靶基因的轉(zhuǎn)錄;第三類是協(xié)調(diào)因子,協(xié)調(diào)因子分為協(xié)同激活(抑制)因子和中介因子二類：它們往往在轉(zhuǎn)錄因子和前起始復(fù)合物之間發(fā)揮橋梁作用。另外,這些因子還可以改變局部染色質(zhì)的構(gòu)象,對基因轉(zhuǎn)錄的起始具有推動(dòng)作用。參與轉(zhuǎn)錄過程的蛋白因子:當(dāng)前42頁，總共67頁。

中介因子是多亞基的復(fù)合體,酵母中介因子復(fù)合體由20多種蛋白組成（一)中介因子在激活基因轉(zhuǎn)錄中的作用中介因子復(fù)合體可與轉(zhuǎn)錄因子直接作用。但不同的轉(zhuǎn)錄因子可能與同一復(fù)合體的不同亞基相互作用。例如,干擾素(IFN)介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)錄的激活需要中介因子復(fù)合體DRIP的參與;在核受體激活基因轉(zhuǎn)錄時(shí),DRIP/TRAP復(fù)合體是通過DRIP205/TRAP220與核受體來直接作用中介因子復(fù)合體的組成及作用機(jī)制當(dāng)前43頁，總共67頁。

(二)中介因子對轉(zhuǎn)錄的抑制作用各種中介因子在基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控中的作用不盡相同。中介因子DRIP、ARC、CRSP、SUR2的主要功能是激活基因轉(zhuǎn)錄,NAT可以抑制轉(zhuǎn)錄,而TRAP/SMCC在不同條件下既可以活化轉(zhuǎn)錄又可以抑制轉(zhuǎn)錄中介因子復(fù)合體的組成及作用機(jī)制當(dāng)前44頁，總共67頁。

5、反式作用因子的組合式調(diào)控

幾種反式作用因子通過組合共同完成基因的表達(dá)調(diào)控。如有A、B、C三種反式因子結(jié)合A基因的調(diào)控區(qū)，其中A、C兩種因子起正調(diào)控，B因子起負(fù)調(diào)控，其綜合效應(yīng)則是激活轉(zhuǎn)錄，又如有A、B、D三種因子結(jié)合B基因的調(diào)控區(qū)，其中A起正調(diào)控，B、D起負(fù)調(diào)控，其綜合效應(yīng)則抑制B基因的轉(zhuǎn)錄。當(dāng)前45頁，總共67頁。當(dāng)前46頁，總共67頁。

6、轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成

在轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成過程中，RNApol與啟動(dòng)子結(jié)合都是關(guān)鍵的一步。細(xì)菌的RNApol識別的是一段DNA序列，真核生物RNApol識別的不是單純的DNA，是由轉(zhuǎn)錄因子與DNA形成的蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物，真核生物有3種RNApol，分別識別不同的啟動(dòng)子，轉(zhuǎn)錄不同的產(chǎn)物，需不同的轉(zhuǎn)錄因子。當(dāng)前47頁，總共67頁。當(dāng)前48頁，總共67頁。（三）轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控當(dāng)前49頁，總共67頁。

（一）5′端加帽和3′端加多聚腺苷酸化的調(diào)控意義加帽和Poly(A)尾不是mRNA穩(wěn)定的唯一因素，但是十分重要的因素。這兩個(gè)因素至少保證mRNA在轉(zhuǎn)錄過程中不被降解。核糖體在核內(nèi)組裝，rRNA受到蛋白質(zhì)的保護(hù)而不被降解。tRNA在合成后，形成特殊的空間結(jié)構(gòu)可抵抗降解。mRNA如果沒有5′帽和3′poly(A)尾，在合成過程中就會(huì)被迅速降解。當(dāng)前50頁，總共67頁。

（二）mRNA的選擇性剪接對基因表達(dá)的調(diào)控作用1、mRNA的選擇剪接真核細(xì)胞的剪接過程中，參加拼接的外顯子可以不按其在基因組的線性分布次序拼接，內(nèi)含子也可以不被切除而保留，即一個(gè)外顯子或內(nèi)含子是否出現(xiàn)在成熟的mRNA中是可選擇的，這種剪接方式稱為選擇剪接(alternativesplicing)。⑴外顯子選擇(optionalexon)⑵內(nèi)含子選擇(optionalintron)⑶互斥外顯子（mutuallyexclusiveexon）⑷內(nèi)部剪接位點(diǎn)(internalsplicesite)當(dāng)前51頁，總共67頁。

當(dāng)前52頁，總共67頁。

(三)mRNA運(yùn)輸?shù)目刂苖RNA的運(yùn)輸是受到控制的。成熟的mRNA大約只有20%的mRNA進(jìn)入胞漿，留在核內(nèi)的RNA約在1小時(shí)內(nèi)降解成小片段。mRNA通過核膜的運(yùn)輸是一個(gè)主動(dòng)運(yùn)輸過程，核膜上的核孔是大約9-nm的通道，但可以運(yùn)輸大于9nm的顆粒，如核糖體（15nm）。核糖體均在核內(nèi)組裝，再運(yùn)輸?shù)桨麧{。RNA從核運(yùn)輸至胞漿的運(yùn)輸?shù)恼{(diào)控機(jī)理目前還不清楚。當(dāng)前53頁，總共67頁。（四）翻譯水平的調(diào)控當(dāng)前54頁，總共67頁。

1、翻譯起始的調(diào)控1、5′帽子結(jié)構(gòu)（m7GpppN）對翻譯的調(diào)控作用①m7G帽有增強(qiáng)翻譯效率的作用②5′帽子結(jié)構(gòu)有利于mRNA從細(xì)胞核向細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)和增加其穩(wěn)定性③5′帽子結(jié)構(gòu)與3′poly(A)尾對mRNA的翻譯效率的調(diào)節(jié)有協(xié)同作用當(dāng)前55頁，總共67頁。

2、5′AUG對翻譯的調(diào)控作用翻譯時(shí)，90～95%的真核mRNA符合第一AUG規(guī)律。某些mRNA5′端非編碼區(qū)存在一個(gè)或數(shù)個(gè)AUG，存在起始位點(diǎn)上游的其它AUG密碼或5′AUG，它抑制下游閱讀框的翻譯效率。5′AUG閱讀框與正常閱讀框不一致，從5′AUG翻譯很快遇到終止密碼子。當(dāng)前56頁，總共67頁。

如酵母反式因子GCN4mRNA，其5′-UTR有4個(gè)AUG，含4個(gè)短的閱讀框，它們對正常閱讀框的翻譯有抑制作用。TGF-3mRNA5′-UTR含11個(gè)AUG

當(dāng)前57頁，總共67頁。

3、mRNA5′端非編碼區(qū)長度對翻譯的影響

5′-UTR長度在17-80核苷酸之間，體外翻譯效率與長度呈正比，若第一個(gè)AUG與5′帽結(jié)構(gòu)之間的距離在12個(gè)核苷酸以內(nèi)時(shí)，則有一半以上的核糖體小亞基滑過第一個(gè)AUG當(dāng)前58頁，總共67頁。

4、阻遏蛋白的調(diào)控作用

控制mRNA的可翻譯性。阻遏蛋白與mRNA5′端結(jié)合，阻止mRNA的翻譯，如鐵調(diào)節(jié)結(jié)合蛋白未與鐵結(jié)合時(shí)，可與鐵蛋白mRNA的莖環(huán)結(jié)構(gòu)結(jié)合，而抑制其翻譯。有鐵時(shí)，該蛋白與鐵結(jié)合，從鐵蛋白mRNA莖環(huán)結(jié)構(gòu)解離，鐵蛋白的翻譯效率提高100多倍。當(dāng)前59頁，總共67頁。當(dāng)前60頁，總共67頁。

5、翻譯起始因子的功能調(diào)控⑴elF-4F因子的磷酸化對蛋白質(zhì)合成速率的激活作用

4F由、、三個(gè)亞基組成，結(jié)合mRNA5′-m7G,40s小亞基，elF-2，GTP，Met-tRNA三元復(fù)合物才能與mRNA相連，進(jìn)入翻譯的起始階段。

elF-4FPKCelF-4F-p

亞基磷酸化可促使4F的三個(gè)亞單位復(fù)合物形成，這類復(fù)合物是起始因子識別mRNA的活性形式，亞基磷酸化的意義有待研究。當(dāng)前61頁，總共67頁。

⑵elF-2的磷酸化對翻譯的抑制作用elF-2是蛋白質(zhì)合成過程中重要的起始因子。其活性因磷酸化而降低。而磷酸化則由一種cAMP依賴性蛋白激酶所催化，由于血紅素能抑制cAMP依賴性蛋白激酶的活化，從而防止或減少elF-2失活，促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成。當(dāng)前62頁，總共67頁。