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實驗培養(yǎng)基的配制詳解演示文稿當前1頁,總共21頁。優(yōu)選實驗培養(yǎng)基的配制當前2頁,總共21頁。1、計算2、稱量牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0gH2O1000mL瓊脂2.0g當前3頁,總共21頁。3、熔化4、調(diào)節(jié)pH當前4頁,總共21頁。5、分裝當前5頁,總共21頁。6、滅菌當前6頁,總共21頁。滅菌——高壓滅菌1.05kg/cm2、121℃,15—30min滅菌鍋高壓滅菌作用:殺死所有活的微生物及芽孢當前7頁,總共21頁。(補充:倒“平板”)超凈工作臺當前8頁,總共21頁。倒平板約50℃防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠滴落污染培養(yǎng)基灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基當前9頁,總共21頁。7、恒溫培養(yǎng)(恒溫培養(yǎng)箱)當前10頁,總共21頁。培養(yǎng)基的配制
稱量
熔化
滅菌
調(diào)節(jié)pH
分裝加熱熔化瓊脂(攪拌)倒入三角燒瓶,與其他器具一起放入滅菌鍋高壓滅菌定容調(diào)節(jié)PH至計算恒溫培養(yǎng)當前11頁,總共21頁。(一般需要作無菌檢查)核心:保證無菌操作超凈工作臺超凈工作臺、酒精燈火焰旁操作當前12頁,總共21頁。分析與討論1、如何檢驗培養(yǎng)基是無菌的?2、常用滅菌方法有哪些?將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫培養(yǎng)箱中適宜條件下培養(yǎng)2-3d,如果無菌落產(chǎn)生,則培養(yǎng)基是無菌的。高壓(蒸氣)滅菌灼燒滅菌用于培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、錐形瓶等用于接種環(huán)等金屬器具當前13頁,總共21頁。3、消毒與滅菌的區(qū)別(1)消毒(如巴氏消毒法62℃,30min、酒精擦拭等)僅殺死活的微生物,不能殺死芽孢。(2)滅菌(高壓滅菌1.05kg/cm2、121℃、15-30min;灼燒滅菌、干熱滅菌等)能殺死所有微生物及其芽孢。當前14頁,總共21頁。微生物重點實驗2——微生物的培養(yǎng)掌握劃線法接種方法與作用當前15頁,總共21頁。單個菌體2.特征:大小、形狀、光澤度、顏色、硬度、透明度等。3.功能:1.定義:補充:菌落鑒定菌種的重要依據(jù)固體培養(yǎng)基上大量繁殖子細胞群體菌落是由單個細胞分裂形成的種群當前16頁,總共21頁。常用工具圖示接種環(huán)玻璃刮鏟當前17頁,總共21頁。微生物(如大腸桿菌)的培養(yǎng):㈠制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基1.計算2.稱量3.熔化4.調(diào)節(jié)pH5.分裝6.滅菌7.恒溫培養(yǎng)當前18頁,總共21頁。二.大腸桿菌的培養(yǎng):㈠制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基㈡培養(yǎng)大腸桿菌:(超凈工作臺上、酒精燈火焰旁進行)劃線法菌種1.接種:接種環(huán)劃線法接種冷卻后刮取菌苔劃線法接種:使接種物逐漸稀釋,培養(yǎng)后出現(xiàn)單個菌落當前19頁,總共21頁。枯草桿菌菌落菌落灰白色,較大,邊緣比較粗糙大腸桿菌菌落菌落灰白色,圓形,透明或半透明滕黃八疊球菌菌落菌落黃色,圓形、邊緣光滑當前20頁,總共21頁。問題討論為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時,仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了防止接種環(huán)上的微生物污染培養(yǎng)物殺死殘留的菌種,保證使下一次劃線時,菌種直接來源于上次劃線
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