NK細胞療法專題知識

NK細胞—NK細胞治療，諾貝爾獎取得項目NK細胞療法專題知識第1頁全球癌癥趨勢今后20

年全球新患人數(shù)每年1000萬→1500萬死亡人數(shù)每年600萬→1000

萬

18thInternationalCongressonAnti-Treatment,Paris,NK細胞療法專題知識第2頁中國癌癥趨勢

年發(fā)病約180-200萬死亡140-150萬0～64歲人口中，1/4死于癌癥

中國癌癥預(yù)防與控制規(guī)劃綱要（-）NK細胞療法專題知識第3頁癌癥三大常規(guī)治療１．手術(shù)---破冰船歷史悠久手術(shù)本身兩面性：消除（降低）腫瘤負荷促進轉(zhuǎn)移傾向難以去除腫瘤微小轉(zhuǎn)移灶很多患者就診時已失去手術(shù)最正確時機NK細胞療法專題知識第4頁癌癥三大常規(guī)治療２．化療---轟炸機腫瘤內(nèi)科治療基石對腫瘤細胞殺傷缺乏選擇性損傷正常組織Goldie-Coldman假說及“一級動力學(xué)”理論：化療對數(shù)殺滅細胞，不可能徹底去除腫瘤細胞NK細胞療法專題知識第5頁癌癥三大常規(guī)治療1898年發(fā)覺鐳鐳用于治療腫瘤放療有效破壞或毀滅癌細胞，甚至能夠治愈部分腫瘤放療損傷機體正常細胞，降低機體免疫力

NK細胞療法專題知識第6頁2023/3/9癌癥治療現(xiàn)實狀況靶向藥品NK免疫細胞生物治療是深入提升癌癥治療療效最有前景治療方法NK細胞療法專題知識第7頁政府全力支持

----衛(wèi)生部文件NK細胞療法專題知識第8頁政府全力支持

----衛(wèi)生部文件

NK細胞療法專題知識第9頁年生物免疫取得諾貝爾獎醫(yī)學(xué)獎

諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎評審委員會10月3日認定，本年度3名獲獎?wù)摺鞍l(fā)覺免疫系統(tǒng)激活關(guān)鍵原理，革命性地改變我們大家對免疫系統(tǒng)了解”。也為人類哪些久治不愈癌癥等疾病提升新治療出路，也是21世紀(jì)唯一有可能攻克這些疾病治療方法。NK細胞療法專題知識第10頁國內(nèi)權(quán)威報道中央新聞聯(lián)播對生物細胞免疫療法最權(quán)威報道：腫瘤生物治療取得重大突破，早期癌癥三分之一可治愈。NK細胞療法專題知識第11頁

NK細胞免疫療法也稱為生物免疫療法中細胞治療方法，詳細方法是：經(jīng)過提取患者體內(nèi)不成熟免疫細胞（采血），在試驗室中進行活化培養(yǎng)使其含有高效識別和殺滅腫瘤細胞能力后，再回輸患者體內(nèi)。患者只需配合做采血與回輸血兩個步驟，無需住院。

療法優(yōu)點突顯在：經(jīng)過采集人體本身免疫細胞，經(jīng)由體外培養(yǎng)使其數(shù)量成千上萬倍增多，進而使免疫細胞靶向性殺傷功效增強，然后再回輸?shù)饺梭w以殺滅血液及組織中病原體、癌細胞、突變細胞，打破機體免疫耐受，激活和增強機體免疫力，含有治療和防治雙重功效。

NK免疫細胞療法NK細胞療法專題知識第12頁免疫系統(tǒng)組員造血干細胞淋巴系骨髓系B細胞系T細胞系NK細胞中性球嗜酸性球嗜堿性球肥大細胞單核球系樹突細胞巨嗜細胞NK細胞療法專題知識第13頁NatureReviewsCancerVol.2,

Nov.:PP850-861NK免疫細胞反抗癌細胞三大法寶：直接摧毀癌細胞(perforin&

granzymes)開啟癌細胞凋亡開關(guān)(DeathReceptor)阻斷癌細胞營養(yǎng)供給NK細胞療法專題知識第14頁NK免疫細胞療法優(yōu)勢

1、術(shù)后治療鞏固療效,預(yù)防腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)，降低轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)風(fēng)險41%左右；早期部分患者長久生存率達70%；2、加強放、化療治療效果，增加放、化療對癌細胞敏感性和殺傷率，減輕放療副作用，提升機體免疫力；3、對于癌末病患改進生活品質(zhì)，提升生活質(zhì)量，延長生命周期；4、NK免疫細胞療法適應(yīng)癥廣，對各種早期腫瘤有效率達93%，中晚期達75%；NK細胞療法專題知識第15頁

1、適應(yīng)癥廣：有效治療大多數(shù)實體惡性腫瘤，并能毀滅對放、化療不敏感及轉(zhuǎn)移腫瘤細胞；

2、安全性：利用人體本身細胞殺死腫瘤細胞，毒副作用微乎其微；

3、持久性：開啟機體免疫系統(tǒng)，恢復(fù)機體免疫功效，持久殺傷腫瘤細胞；

4、徹底性：提升機體免疫能力，徹底去除體內(nèi)殘留腫瘤細胞和微小轉(zhuǎn)移病灶；

5、針對性：DC細胞特異性識別腫瘤細胞，CIK細胞非特異性殺傷廣譜腫瘤細胞；

6、全方面性：重建和提升患者本身機體免疫功效，全方面識別、搜索、殺傷腫瘤細胞，有效預(yù)防腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移；NK免疫細胞療法主要特點NK細胞療法專題知識第16頁乳腺癌、子宮頸癌、卵巢癌腦腫瘤、原發(fā)性肝癌、肺癌胃癌、食道癌、大腸癌血癌、淋巴癌膽嚢癌、胰臓癌、癌性腹水等腎癌、前列腺癌NK免疫細胞療法技術(shù)應(yīng)用NK細胞療法專題知識第17頁禁忌癥：①、懷孕或正在哺乳期婦女；

②、臟器移植者；

③、嚴(yán)重本身免疫性疾病患者；

④、不可控制感染性疾病患者；

⑤、對生物制劑過敏者；

⑥、T細胞淋巴瘤患者；

⑦、正在進行全身放療、化療患者；

⑧、晚期腫瘤造成惡病質(zhì)、外周血象過低患者。。適應(yīng)癥：①、手術(shù)后患者，可預(yù)防腫瘤轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)；

②、無法進行手術(shù)、放療、化療中晚期患者；

③、放療、化療失敗患者；

④、放療或化療后患者綜合治療；

⑤、骨髓移植后或化療緩解后白血病患者；

⑥、癌性胸、腹腔積液患者。細胞療法臨床應(yīng)用適應(yīng)癥和禁忌癥NK細胞療法專題知識第18頁NK免疫細胞治療項目一、自然殺傷細胞(Naturalkellcell,NK)；二、NK細胞因子誘導(dǎo)殺傷細胞(CIK)；NK細胞療法專題知識第19頁（一）NK自然殺傷細胞（NKcells）PBMNC（50ml外周血）NK細胞培養(yǎng)NK細胞數(shù)量可達0.5~3×109培養(yǎng)12-14天NK細胞療法專題知識第20頁用正常健康人由來PBMC試驗例用正常健康人由來PBMC，經(jīng)由NK誘導(dǎo)Kit共存培養(yǎng)后，NK細胞被誘導(dǎo)出來36yr／maleday0day12CD56CD1622.77%=5.08%+17.69%94.81%=3.81%+91%/meneki//meneki/NK細胞療法專題知識第21頁ＮＫ療法ＮＫ細胞濃度CD33.0%（Ｔ細胞）CD16CD5674.8%（ＮＫ細胞）CD5618.8%（ＮＫ細胞）∴ＮＫ細胞濃度?

93.6％ＮＫ療法ＮＫ細胞濃度CD33.0%（Ｔ細胞）CD16CD5640.7%（ＮＫ細胞）CD5652.4%（ＮＫ細胞）∴ＮＫ細胞濃度?

93.1％NK細胞療法專題知識第22頁NKNK細胞治療策略抽腫瘤患者外周血(50ml)體外誘導(dǎo)NK細胞每星期回輸一次NK細胞給患者（最少4次）回輸NK細胞能提升機體免疫功效殺傷殘留腫瘤細胞，抑制腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移NK細胞療法專題知識第23頁蔵前內(nèi)科クリニック

NK細胞培養(yǎng)技術(shù)

「三高」優(yōu)勢：

高數(shù)量

(健康人每劑可達5～30億顆以上細胞)高純度(NK細胞純度最高可達90~95%)高活性

(與當(dāng)前市面慣用CIK細胞比較)NK細胞療法專題知識第24頁NKNK細胞之其它應(yīng)用NK免疫疾病

如：紅斑性踉蹌、硬皮癥、異位性皮膚炎…預(yù)防醫(yī)學(xué)、保養(yǎng)（保?。?/p>

如：增強身體免疫力、使身體年輕化、增加身心和生活滿意度…NK細胞療法專題知識第25頁總結(jié)1.確立高活性、高純度NK細胞培養(yǎng)方法。2.將高純度活性化NK細胞，實際應(yīng)用在對腫瘤及病毒感染疾病免疫療法上。3.NK細胞免疫療法是一個専屬于個人(tailormade)醫(yī)療，亦是一個提升免疫體質(zhì)理想醫(yī)療。4.應(yīng)用無副作用NK細胞免疫療法治療癌癥，可維持病患良好QOL(QualityofLife)，對身體不會產(chǎn)生任何負擔(dān)而且逹到延命效果。NK細胞療法專題知識第26頁(二)NKCIK細胞免疫治療PBMNC0.5-3×107（50ml）CIK細胞培養(yǎng)12-14days1~1.5×1010NK細胞療法專題知識第27頁CIK細胞表型NK細胞療法專題知識第28頁NK細胞療法專題知識第29頁NKCIK細胞治療策略抽腫瘤患者外周血(50ml)體外誘導(dǎo)CIK細胞(1x1010以上)每星期回輸一次CIK細胞給患者（最少4次）回輸CIK細胞能提升機體免疫功效殺傷殘留腫瘤細胞，抑制腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移NK細胞療法專題知識第30頁CIK細胞免疫治療作用

1、改進生活質(zhì)量（包含食欲增強，睡眠改進）；2、經(jīng)過手術(shù)、介入和放療使腫瘤負荷下降后，結(jié)合CIK細胞治療，對抑制腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移含有很好作用；3、在化療間隙中，選擇適當(dāng)時間進行CIK治療對保護機體免疫功效含有很好作用；4、一些肝癌患者經(jīng)過CIK治療后甲胎球蛋白值下降，肝功效好轉(zhuǎn)，乙肝DNA復(fù)制素降低；5、血液中抗腫瘤效應(yīng)細胞數(shù)量和抗腫瘤細胞因子有所提升。NK細胞療法專題知識第31頁NK免疫細胞生產(chǎn)流程搜集30-50毫升周圍靜脈血

20-40

毫升

含抗凝劑肝素采血管周圍單核球(PBMC)起源

10毫升

不含抗凝劑采血管NK血清起源NK細胞療法專題知識第32頁周圍單核球進入為時5~7天NK免疫細胞誘導(dǎo)程序。經(jīng)過5~7天NK免疫細胞誘導(dǎo)程序后，進入NK免疫細胞擴增階段。NK免疫細胞生產(chǎn)流程NK細胞療法專題知識第33頁污染檢測細菌培養(yǎng)檢測:方法:

含血瓊脂48小時培養(yǎng)。結(jié)果:

若展現(xiàn)陽性，則將停頓NK細胞培養(yǎng)。實施時程:

第7、12、14天施行。內(nèi)毒素檢測:方法:鱟試劑凝集法。結(jié)果:若展現(xiàn)陽性（產(chǎn)生凝集現(xiàn)象），則將不得使用于病人。實施時程:

第14天（出廠當(dāng)日）施行。生菌數(shù)檢測:方法:HygieneSwab結(jié)果:若展現(xiàn)陽性，則將不得使用於病人實施時程：出廠當(dāng)日～回輸前（24小時內(nèi)）。NK細胞療法專題知識第34頁NK免疫細胞治療后療效評定

按照國家食品藥品監(jiān)督管理局相關(guān)生物制品療效評定方法，主要以腫瘤病灶大小改變和患者生存期評定療效,及患者生活質(zhì)量等：1、免疫學(xué)指標(biāo)改進評價按統(tǒng)計學(xué)結(jié)果判定：治療前后T淋巴亞群改變；比如CD4/CD8比值增高，NK細胞數(shù)量有所改進等；2、無進展生存期(PFS)和生存期；3、對有可測量病灶患者經(jīng)過影像檢驗按RECIST標(biāo)準(zhǔn)評價，分為完全緩解(CR)，部分緩解(PR)，穩(wěn)定(SD)和進展(PD)；4、腫瘤患者腫瘤標(biāo)識物改變情況。NK細胞療法專題知識第35頁53歲男性，結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移。經(jīng)過2劑NK治療后，肝轉(zhuǎn)移病灶消退。臨床實例一：結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移PreNKPostNKAug.31,Sep.27,Mar.14,Private&ConfidentialNK細胞療法專題知識第36頁經(jīng)過NKNK治療后，其腦部病灶顯著消退。（分別是8劑和6劑NK）臨床實例二:腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤27-yr-oldfemale16-yr-oldfemalePrivate&ConfidentialNK細胞療法專題知識第37頁臨床實例三：乳癌56歲女性，乳癌末期，腋下、鎖骨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。經(jīng)過本企業(yè)17劑NK治療，其轉(zhuǎn)移病灶顯著消退。PreNKPostNKNK細胞療法專題知識第38頁臨床實例四：丙型肝炎53歲女性，丙型肝炎。經(jīng)過8劑NK治療，丙型肝炎病毒指數(shù)顯著下降。Private&ConfidentialNK細胞療法專題知識第39頁臨床實例五：卵巢癌(33-yr/female,bilateralovariancancerstageIIIc)

33歲女性，卵巢癌。經(jīng)過9劑NK治療，CA125指數(shù)顯著下降。NK細胞療法專題知識第40頁傳統(tǒng)療法+免疫細胞療法七年存活率為52%傳統(tǒng)療法七年存活率為24%兩者存活率相差一倍!!肺癌患者接收傳統(tǒng)療法和細胞免疫療法成效傳統(tǒng)療法(即手術(shù)療法後接收化學(xué)療法和放射線治療)搭配細胞免疫治療後，肺癌病患七年存活率明顯高於僅接收傳統(tǒng)療法者。K

imuraH,etal.,1997NK細胞療法專題知識第41頁分類年紀(jì)/性別接收NK前之簡史接收NK后之結(jié)果簡述效果副作用原發(fā)性肝癌77/男HBV(+),微創(chuàng)消融手術(shù)，CIK治療B型肝炎病毒DNA指數(shù)顯著下降(5.37×1051.51×105copies/ml).從正子掃瞄片觀察得知并無癌細胞活動現(xiàn)象。好無原發(fā)性肝癌43/男HbsAg(+),肝拴篩手術(shù),微創(chuàng)消融手術(shù)，CIK治療HbsAg(-)（病毒表面抗原陰性）,AFP:2.02ng/ml(0-25)位于正常值。從正子掃瞄片觀察得知，未有癌復(fù)發(fā)覺象。好無直腸癌肝轉(zhuǎn)移71/女直腸切除術(shù)，肝臟微創(chuàng)消融手術(shù),CIK治療由斷層掃瞄觀察，肝病灶無復(fù)發(fā)。好無結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移女右結(jié)腸切除,肝拴篩手術(shù)，肝臟微創(chuàng)消融手術(shù),CIK治療從核磁共振觀察，肝病灶無復(fù)發(fā)。好