動(dòng)物微生物與免疫,培養(yǎng)細(xì)菌實(shí)驗(yàn)報(bào)告怎么寫

PAGE動(dòng)物微生物與免疫,培養(yǎng)細(xì)菌實(shí)驗(yàn)報(bào)告怎么寫篇一：動(dòng)物微生物及免疫學(xué)(實(shí)踐教學(xué))實(shí)驗(yàn)報(bào)告四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物微生物及免疫學(xué)（實(shí)踐教學(xué)）實(shí)驗(yàn)報(bào)告組長：組員：二零一二年四月一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模ㄒ唬┱莆找话闩囵B(yǎng)基的制備原理及要求，掌握培養(yǎng)基酸堿度的測定，熟悉一般培養(yǎng)基的制備過程和各種器皿滅菌方法。（二）掌握細(xì)菌分離培養(yǎng)的基本要領(lǐng)和方法，掌握細(xì)菌抹片的制備方法和革蘭氏染色法及油鏡的使用方法，并認(rèn)識(shí)革蘭氏染色的反應(yīng)特性。（三）掌握學(xué)習(xí)用微生物學(xué)原理診斷疾病的一般方法及步驟。二、實(shí)驗(yàn)用品（一）器材量筒、燒杯、電子天平、漏斗、三角燒瓶、空試劑瓶、玻璃棒、玻璃平皿、刻度吸管、pH試紙、紗布、脫脂棉、天平、電爐、試劑瓶瓶塞、扎繩、放大鏡、包裝紙、洗耳球、酒精燈、載玻片、火柴、吸水紙、剪刀、記號(hào)筆、接種環(huán)、注射器、鑷子、鉗子、毫米尺、培養(yǎng)箱、水浴培養(yǎng)箱、高壓蒸汽滅菌鍋、油鏡（二）試劑及材料肘胨、蛋白胨、豬膽鹽、氯化鈉、瓊脂、乳糖、%結(jié)晶紫水溶液、%中性紅水溶液、血清、胰化蛋白胨、酵母提取物、氫氧化鈉、鹽酸、牛血清、革蘭氏染色液、蒸餾水、小白鼠、病豬內(nèi)臟三、實(shí)驗(yàn)步驟（一）培養(yǎng)基的制備（所有用到的器皿都已121℃高壓滅菌15~30min，傾注平板在無菌操作臺(tái)內(nèi)完成，并放在無菌操作臺(tái)內(nèi)）1、麥康凱培養(yǎng)基（1）組成：蛋白胨17g、肘胨3g、豬膽鹽5g、氯化鈉5g、瓊脂17g、乳糖10g、%結(jié)晶紫水溶液10ml、%中性紅水溶液5ml、蒸餾水1000ml（2）方法：將蛋白胨、肘胨、豬膽鹽和氯化鈉溶解于400ml蒸餾水中，調(diào)節(jié)pH至。將瓊脂加入600ml蒸餾水中，并加入乳糖，加熱熔化。將兩液混合，分裝于燒瓶內(nèi)，用紗布、扎繩等捆好后，121℃高壓滅菌15~30min。待冷卻至50~55℃時(shí)，加入結(jié)晶紫和中性紅水溶液，搖勻后傾注平板。注：結(jié)晶紫和中性紅水溶液配好后需經(jīng)高壓滅菌。2、血清平板（1）組成：營養(yǎng)瓊脂、牛血清（2）方法：將滅菌的營養(yǎng)瓊脂加熱熔化，冷卻至45~50℃時(shí)，加入牛血清，并混勻，傾注平板。注：不得將牛血清一并加入后再滅菌。3、LB培養(yǎng)基（1）組成：胰化蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化鈉10g、瓊脂15g（2）方法：在950ml蒸餾水中加入胰化蛋白胨、酵母提取物、瓊脂和氯化鈉，調(diào)節(jié)pH至，加熱熔化，分裝于瓶中，用紗布、扎繩等捆好后，121℃高壓滅菌15~30min。待冷卻至50~55℃時(shí)，傾注平板。4、液體培養(yǎng)基（在LB培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，裝入大試劑瓶中，不加瓊脂，不分裝）（二）病料取材在病豬死亡后，首先用顯微鏡檢查其末梢血液膜片中是否有炭疽桿菌存在，未發(fā)現(xiàn)，則立即用消毒的器械對(duì)其進(jìn)行生理解剖，觀察其病理特征現(xiàn)象，取出病豬的十二指腸、胃、肝臟三處的組織物，并注意組織的完整性，用儲(chǔ)物袋密封保存。（三）細(xì)菌粗培養(yǎng)1、消毒滅菌：操作人員先用消毒水清洗手或戴好實(shí)驗(yàn)手套，再用消毒水對(duì)無菌操作臺(tái)內(nèi)桌面及用酒精燈外焰對(duì)待用器械進(jìn)行火焰滅菌。2、接種（1）在無菌操作臺(tái)酒精燈旁打開用儲(chǔ)物袋密封保存的病料，先左手持鑷子右手持剪刀，把病料剪出一個(gè)小口。（2）右手持滅過菌的接種環(huán)，左手持平板，并用拇指、食指及中指將平皿揭開約20左右，然后將接種環(huán)前端插入小口旋轉(zhuǎn)一下后，再用劃線接種的方法接種到一個(gè)血清平板上。（3）用記號(hào)筆在平板底部作好日期、操作人員、部位等標(biāo)記，并將平板倒放。以此方法，分別接種十二指腸、胃粘膜、肝臟于血清平板上，各接種2個(gè)血清平板。3、培養(yǎng)：將接種好的血清平板倒扣放入37℃培養(yǎng)箱中，反向培養(yǎng)24小。時(shí)。注：劃線接種時(shí)盡量劃開，以保證長出單個(gè)菌落，且劃線時(shí)接種環(huán)應(yīng)盡量傾斜，以免劃破培養(yǎng)基（后同）；待接種完畢后熄滅無菌操作臺(tái)內(nèi)酒精燈，關(guān)閉好無菌操作臺(tái)窗口，打開無菌操作臺(tái)內(nèi)的紫外燈。（四）1、細(xì)菌純培養(yǎng)菌落特征判斷待粗培養(yǎng)的細(xì)菌培養(yǎng)24小時(shí)后，取出用放大鏡觀察記錄單個(gè)小菌落的形態(tài)特征并用實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙記錄好，并在平板底部上做好觀察標(biāo)記，其形態(tài)特征包括大小、形狀、菌落邊緣、表面構(gòu)造、隆起度、濕潤度、透明度、顏色等。2、取單個(gè)菌落進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢（1）取干凈的載玻片，用記號(hào)筆在其一面做好正反面標(biāo)記，再在載玻片另一面中央滴上一小滴蒸餾水。（2）將接種環(huán)在火焰上滅菌，待冷卻后，在酒精燈旁從標(biāo)記的單個(gè)小菌落中取少許細(xì)菌置于蒸餾水中混勻（同時(shí)蓋好平板倒扣置于一旁），用接種環(huán)涂成直徑約的菌膜，再在酒精燈火焰上方以鐘擺速度通過固定好細(xì)菌，待冷卻進(jìn)行染色。（3）先滴加草酸結(jié)晶紫溶液染色1~2min，再水洗；然后滴加革蘭氏碘液溶液染色1~2min，再水洗；隨后滴加95%的酒精脫色30~60s，再水洗；最后滴加稀釋的品紅進(jìn)行復(fù)染30~60s，再水洗；待干燥或吸水紙吸干后鏡檢。（4）將干燥的載玻片放在1000倍油鏡下，滴加一滴松柏油進(jìn)行鏡檢，觀察其形態(tài)特征，判斷細(xì)菌的種屬。3、細(xì)菌接種培養(yǎng)（1）消毒滅菌：操作人員先用消毒水清洗手或戴好實(shí)驗(yàn)手套，再用消毒水對(duì)無菌操作臺(tái)內(nèi)桌面及用酒精燈外焰對(duì)待用器械進(jìn)行火焰滅菌。（2）接種：右手持滅過菌的接種環(huán)，左手持平板，并用拇指、食指及中指將平皿揭開約20左右，然后將接種環(huán)插入揭開的平板口內(nèi)蘸去一下鏡檢標(biāo)記的小菌落，再用劃線接種的方法接種到一個(gè)血清平板、LB平板或麥康凱平板上。并用記號(hào)筆在平板底部作好日期、操作人員、菌種、部位等標(biāo)記，將平板倒放。（3）將接種好的平板倒扣放入37℃培養(yǎng)箱中，反向培養(yǎng)24小時(shí)。注：油鏡用完后應(yīng)立即清理物鏡上的松柏油；劃線接種時(shí)盡量劃開，以保證長出單個(gè)菌落；待接種完畢后熄滅無菌操作臺(tái)內(nèi)酒精燈，關(guān)閉好無菌操作臺(tái)窗口，打開無菌操作臺(tái)內(nèi)的紫外燈。。（五）1、菌液的制備鏡檢：用革蘭氏染色法在1000倍油鏡下鏡檢，觀察并記錄是否為純培養(yǎng)的細(xì)菌。篇二：動(dòng)物微生物及免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)一顯微鏡油鏡的使用及維護(hù)+實(shí)驗(yàn)二細(xì)菌基本形態(tài)及結(jié)構(gòu)觀察一、藥品配制1、擦鏡液500ml：乙醚150ml+無水乙醇350ml（先乙醚后乙醇）；二、玻璃器皿與耗材1、載玻片（1瓶/組）2、火柴3、酒精棉球（1瓶/組）4、紗布5、菌種（燒杯2個(gè)、試管4支、移液管、洗耳球）（1套/組）6、蒸餾水（1瓶/組）7、洗液缸（1個(gè)/組）8、擦鏡紙（顯微鏡室一組一套）9、擦鏡液（顯微鏡室）10、廢液缸（顯微鏡室）11、香柏油（顯微鏡室）三、器材1、試管架（1個(gè)/組）2、接種環(huán)（3支/組）3、酒精燈（2個(gè)/組）4、鑷子（2把/組）實(shí)驗(yàn)三細(xì)菌抹片、制片及染色一、藥品配制第二種（1）將載玻片在肥皂水中沸浴5－10min.（2）在熱水中洗去殘留物。（3）清水沖洗后，讓水滴流干。（4）浸入洗液（200g重鉻酸鉀，1000ml清水，1000ml濃硫酸（工業(yè)用）。將重鉻酸鉀先溶于水中，然后將濃硫酸逐滴加入重鉻酸鉀水溶液中去，不使硫酸濺出。配好后，盛在有玻璃塞的玻璃容器內(nèi)，防止空氣氧化。洗液可重復(fù)使用直至變?yōu)樗{(lán)黑色為止。）約30min.(5)清水沖洗后用蒸餾水洗凈，并讓水滴流干。（6）浸入95%酒精中貯存?zhèn)溆?。使用時(shí)從酒精中取出蓋玻片和載玻片，用清潔紗布同時(shí)擦拭玻片的兩面，在擦拭蓋玻片時(shí)要小心，用力要均勻，避免碎裂。第三種①將待處理的載玻片放入清潔劑（雕牌玻璃清潔劑加水稀釋至1%）浸泡20分鐘，②從清潔劑中將載玻片取出，流水沖洗干凈，用軟布擦干，放入95%的酒精中備用。二、玻璃器皿與耗材1、載玻片（1瓶/組）2、革蘭氏染液（結(jié)晶紫溶液、革蘭氏碘液、95%酒精、稀釋的復(fù)紅）（1套/組）3、蒸餾水（1瓶/組）4、菌種（燒杯2個(gè)、試管4支、移液管、洗耳球）（1套/組）5、酒精棉球（1瓶/組）6、洗液缸（1個(gè)/組）7、洗瓶（1個(gè)/組）8、燒杯9、擦鏡紙（顯微鏡室一組一套）10、擦鏡液（顯微鏡室）11、廢液缸（顯微鏡室）12、香柏油（顯微鏡室）三、器材1、酒精燈（2個(gè)/組）2、鑷子（2把/組）3、接種環(huán)（3個(gè)/組）4、火柴5、廢物缸（1個(gè)/組）6、試管架（1個(gè)/組）實(shí)驗(yàn)四培養(yǎng)基的制作一、玻璃器皿與耗材1、量筒（500ml，100ml/200ml各1個(gè)/組）2、燒杯（500ml1個(gè)，50ml/100ml2個(gè)/組）3、三角燒瓶（250ml2個(gè)/組）4、試管（2支人數(shù)/組）5、培養(yǎng)皿（2套人數(shù)/組）6、玻棒（1支/組）7、PH試紙（公用）8、紗布（公用）9、脫脂棉（公用）10、試管塞（公用）11、扎繩（公用）12、報(bào)紙（公用）13、蛋白胨（1瓶/2組）14、氯化鈉（1瓶/2組）15、瓊脂粉（1瓶/2組）16、牛肉膏（1瓶/2組）17、%氫氧化鈉溶液（公用）18.稀釋鹽酸溶液（公用）配滴管19、試管架（1個(gè)/組）三、器材1、托盤天平、稱量紙、培養(yǎng)皿（2個(gè)）、藥勺：（2、電爐3、高壓蒸汽鍋（檢查底部是否有水）1套/1組）實(shí)驗(yàn)五細(xì)菌分離培養(yǎng)及移植一、藥品配制二、玻璃器皿與耗材1、培養(yǎng)皿（做好的培養(yǎng)基）（2套人數(shù)/組）2、玻璃推棒（1支/組）3、棉簽（1包/2組）4、試管（做好的培養(yǎng)基）（2支人數(shù)/組）5、試管架（一個(gè)/組）6、土壤（用50-100ml燒杯裝，1瓶/2組）7、污水（用50-100ml燒杯裝，1瓶/2組）三、器材1、接種環(huán)（2-3支/組）2、酒精燈（2個(gè)/組）3、火柴實(shí)驗(yàn)七細(xì)菌的生理生化實(shí)驗(yàn)一、玻璃器皿與耗材（糖類分解實(shí)驗(yàn)）1、菌種（老師提供）（1套/組）2、發(fā)酵管（2支人數(shù)/組，用小燒杯盛裝），需讓每個(gè)組均有以下幾種類型的發(fā)酵管：乳糖微量發(fā)酵管+蔗糖微量發(fā)酵管+葡萄糖微量發(fā)酵管+麥芽糖微量發(fā)酵管3、燒杯（1個(gè)/組）4、酒精棉球（1瓶/組）5、酒精燈（1個(gè)/組）三、器材1、接種環(huán)（2-3支/組）2、鑷子3、廢物缸實(shí)驗(yàn)八凝集及沉淀實(shí)驗(yàn)一、藥品配制1、瓊脂板制備：稱取1g瓊脂粉，加入100ml生理鹽水或%NaCl溶液（禽類），煮沸使之溶解。待溶解的瓊脂溫度降至60℃左右時(shí)倒入平皿中，厚度為2-3mm。二、玻璃器皿與耗材A、雞白痢平板凝集試驗(yàn)1、移液槍（20微升，1把/組）2、槍頭：（20微升，1盒/組）3、載玻片：（1瓶/組）4、牙簽：（1盒/組）5、標(biāo)簽紙、糨糊（綜合一套）B、瓊脂擴(kuò)散沉淀試驗(yàn)1、瓊脂粉1瓶、氯化鈉1瓶：（1套/2組）2、托盤天平、稱量紙、藥勺：（1套/2組）3、搪瓷盅（1000ml）、量筒（500ml）、燒杯（150ml，2個(gè)）：（4、打孔器（孔徑約3-5mm）：（1把/組）5、培養(yǎng)皿：（1套/人）6、酒精燈：（1個(gè)/組）7、移液槍+槍頭（公共用）8、雞血清：（公共用）9、廢液缸：（1個(gè)/組）1套/2組）篇三：13畜牧微生物與免疫實(shí)驗(yàn)1農(nóng)工商學(xué)院XX級(jí)畜牧獸醫(yī)專業(yè)《動(dòng)物微生物與免疫》課程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)一顯微鏡油鏡的使用和細(xì)菌標(biāo)本片的制備及觀察實(shí)驗(yàn)?zāi)康模毫私馄胀ü鈱W(xué)顯微鏡油鏡原理及使用；掌握細(xì)菌標(biāo)本片的制備方法，掌握細(xì)菌形態(tài)的觀察和描繪。實(shí)驗(yàn)器材：1.顯微鏡、香柏油、二甲苯、擦鏡紙；2.大腸桿菌、金黃色葡萄球菌培養(yǎng)物；3.載玻片、接種環(huán)、酒精燈、打火機(jī)、堿性美蘭染色液、生理鹽水、滴管、吸水紙、計(jì)時(shí)器。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：一、油鏡使用的原理對(duì)于個(gè)體微小，用高倍鏡仍觀察不清的微生物，則必須使用油鏡。使用時(shí)，需要在標(biāo)本和物鏡間加入一種鏡頭油。如香柏油，所以叫油浸接物鏡，簡稱油鏡。一般在鏡頭上有一黑圈或紅圈的，表示為油鏡物鏡，也有的“以IO”或“HI”字樣來表示。由于油鏡鏡面很小，使用時(shí)檢視物與鏡面又非?？拷▇左右），因而使進(jìn)入鏡頭的光線較少。當(dāng)光線由反光鏡通過玻片與鏡頭之間的空氣時(shí)，由于玻片與物鏡之間的介質(zhì)為空氣（接物鏡干燥系）?？諝庹凵渎蕿?，由于空氣與玻片的密度不同，使光線受到曲折，發(fā)生散射現(xiàn)象，結(jié)果進(jìn)入物鏡的光線必然減少，這樣就降低了視野的照明度。若載玻片與物鏡之間的介質(zhì)不是空氣，而是一層油質(zhì)，一般常用香柏油，其折射率為，與玻璃的折射率（）相近。光線通過載玻片可直接通過香柏油進(jìn)入物鏡而幾乎不發(fā)生折射（接物鏡油浸系），使視野增加進(jìn)光量，這樣就能使物像更加清晰，見圖1。圖1干燥物鏡與油浸系統(tǒng)物鏡光線通路二、顯微鏡油鏡的使用方法1.用前檢查從顯微鏡箱中取出顯微鏡時(shí)，用左手拿鏡臂，左手托鏡座，直立移動(dòng)，輕放在平穩(wěn)的桌面上，檢查各部零件是否齊全，鏡頭是否清潔。2.調(diào)節(jié)光照正確的照明是獲得良好檢查效果的前提、用粗調(diào)節(jié)器提升鏡筒，將低倍物鏡旋到鏡筒下方，使鏡頭和載物臺(tái)距離約為5mm左右，左眼看目鏡調(diào)節(jié)反光鏡鏡面角度（在天然的光線下觀察，一般用平面反鏡；若以燈光為光源，則一般多用凹面反光鏡）。調(diào)節(jié)光線強(qiáng)弱，然后調(diào)節(jié)聚光鏡的位置（酌予升降），直至視野內(nèi)得到最均勻最適宜的光度為止。3.低倍鏡觀察低倍物鏡視野面廣，焦點(diǎn)深度較深，易于發(fā)現(xiàn)目標(biāo)確定觀察位置，故應(yīng)先用低倍鏡觀察為宜。將載片標(biāo)本（涂面朝上）置于載物臺(tái)的標(biāo)本夾上，并將標(biāo)本部位處于物鏡的正下方，轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，使鏡頭下降至鏡面距離檢視物大約10mm處。然后以左眼看目鏡，另一眼睜開，一邊觀察視野，一邊扭動(dòng)粗調(diào)節(jié)器使鏡頭緩慢地升高，至視野內(nèi)出現(xiàn)物像后，改用細(xì)調(diào)節(jié)器上下微微轉(zhuǎn)動(dòng)，仔細(xì)調(diào)節(jié)焦距和照明，直至視野內(nèi)獲得清晰的物像，選擇適宜部位，移到視野中心，待換中、高倍鏡觀察。4.依次再進(jìn)行中倍、高倍觀察在物鏡依次由低倍至中倍、高倍的觀察過程中，應(yīng)逐次上升聚光鏡以調(diào)節(jié)光線亮度，同樣選擇適宜的部位移至視野中央。5.油鏡觀察將聚光鏡提升至最高點(diǎn)，轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，移開高倍鏡，使高倍鏡和油鏡成“八”字形，在標(biāo)本中央滴一小滴香柏油，使油鏡鏡頭浸入香柏油中，微微轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)器，可見清晰物像，如果油鏡上升已離開油面還未看清物像的話。需重新調(diào)節(jié)。此時(shí)可從側(cè)面注視，用粗調(diào)節(jié)器將鏡筒小心地降下，使油鏡浸在香柏油中，其鏡頭幾乎與標(biāo)本相接。應(yīng)特別注意不能壓在標(biāo)本上，更不能用力過猛否則不僅壓碎玻片，也會(huì)損壞鏡頭。用左手向上轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，當(dāng)視野中有模糊的標(biāo)本物像時(shí)改用細(xì)調(diào)節(jié)器，直到看清物象為止。6.換片另換新的標(biāo)本片，必須從第三條開始操作。7.用后必須清潔、復(fù)原觀察完畢，上旋鏡筒，先用擦鏡紙擦去鏡頭上的油，然后再用擦鏡紙沾取少許二甲苯（注意不能過多，防止溶解固定鏡頭的樹脂）擦去鏡頭上的殘留油跡，最后再用擦鏡紙擦去殘留的二甲苯。機(jī)械部件用細(xì)軟布擦去灰塵和冷凝水，下降鏡筒，將物鏡轉(zhuǎn)成八字形置于載物臺(tái)上。下降聚光鏡，（切勿使物鏡與聚光鏡相碰受損），反光鏡垂直于鏡座。放進(jìn)顯微鏡箱中鎖好，