細胞因子的檢測

細胞因子的檢測第一頁，共三十九頁，2022年，8月28日

第一節(jié)細胞因子檢測概述一、細胞因子的類型與作用特點二、細胞因子檢測的特點與方法第二頁，共三十九頁，2022年，8月28日由非神經(jīng)—內(nèi)分泌細胞產(chǎn)生的一大類與免疫應答活動密切相關(guān)的低分子蛋白與多肽。細胞因子第三頁，共三十九頁，2022年，8月28日細胞因子的類型與作用特點1、細胞因子的分類2、細胞因子的作用特點第四頁，共三十九頁，2022年，8月28日以生物學作用進行劃分的分類白細胞介素（Interleukin）——IL-1、IL-2、……IL-18干擾素（Interferon）——IFN-、IFN-、IFN-腫瘤壞死因子（Tumornecrosisfactor）——TNF-、TNF-集落刺激因子（Colony-stimulatingfactor）——M-CSF、G-CSF轉(zhuǎn)化生長因子（Transforminggrowthfactor）——TGF-趨化因子（Chemokine）——IL-8、GROs、MCP-1生長因子（Growthfactor）——EGF、FGF、IGF、PDGF第五頁，共三十九頁，2022年，8月28日TNFsILsIFNsTGFsChemokinesCSFs各類細胞因子間關(guān)系第六頁，共三十九頁，2022年，8月28日1、旁分泌（paracrine）、自分泌（autocrine）性2、多源與同源性3、高效性4、多效性（pleiotropy）5、豐余性（redundancy）6、協(xié)同性7、拮抗性8、網(wǎng)絡性第七頁，共三十九頁，2022年，8月28日細胞因子細胞因子細胞因子受體細胞因子受體細胞因子的自分泌與旁分泌性第八頁，共三十九頁，2022年，8月28日

IL-2IFN-TNF-細胞因子的同源性與多源性IFN-T細胞T細胞NK細胞第九頁，共三十九頁，2022年，8月28日IL-4Th細胞肥大細胞Th細胞B細胞細胞因子的多效性第十頁，共三十九頁，2022年，8月28日Th細胞B細胞細胞因子的豐余性IL-2IL-4IL-5第十一頁，共三十九頁，2022年，8月28日Th細胞B細胞細胞因子的協(xié)同性IL-4IL-5第十二頁，共三十九頁，2022年，8月28日Th2細胞B細胞細胞因子的拮抗性Th1細胞IL-4

IFN-第十三頁，共三十九頁，2022年，8月28日細胞因子的網(wǎng)絡性IL-3、IL-5、IL-4、IL-6、GM-CSFTNFTGFIL-1IFNIL-1IFNTNFIL-1TGFIFNIL2IL-4IFNIL2IL-4IL-5IL-6TNFIFNIL-1TGFTNFIL-1IFNIL-5GM-CSFG-CSFM-GSFTNFTNFIL-1TGFIL-1IL-6GM-CSFG-CSFM-GSF

IL-1IL-6IL-1IL-6GM-CSFG-CSFM-GSFIFN內(nèi)皮細胞成纖維細胞TB第十四頁，共三十九頁，2022年，8月28日細胞因子檢測的特點與方法1、檢測的特點2、檢測的方法

第十五頁，共三十九頁，2022年，8月28日細胞因子檢測的特點免疫原性較弱樣品含量低樣品具有時效性生物效應特異性差第十六頁，共三十九頁，2022年，8月28日細胞因子檢測的方法免疫學檢測方法——抗原性檢測細胞生物學檢測方法——生物活性檢測分子生物學檢測方法——基因表達檢測第十七頁，共三十九頁，2022年，8月28日

第二節(jié)細胞因子檢測的方法與原理一、細胞因子的細胞生物學檢測二、細胞因子的免疫學檢測三、細胞因子的分子生物學檢測第十八頁，共三十九頁，2022年，8月28日細胞因子的細胞生物學檢測1、檢測方法與原理2、檢測中的操作注意要點

第十九頁，共三十九頁，2022年，8月28日檢測方法與原理細胞增殖或增殖抑制試驗細胞病變抑制試驗細胞毒試驗細胞趨化試驗第二十頁，共三十九頁，2022年，8月28日濾膜：計數(shù)受趨化細胞趨化因子細胞趨化試驗原理示意第二十一頁，共三十九頁，2022年，8月28日檢測中的操作注意要點靶細胞的選擇與培養(yǎng)檢測標本的制備顯示檢測結(jié)果第二十二頁，共三十九頁，2022年，8月28日靶細胞的選擇與培養(yǎng)1、對所測的細胞因子有特異的敏感性2、易培養(yǎng)、保存、生物學特性穩(wěn)定3、有良好的生長狀態(tài)4、種屬適配第二十三頁，共三十九頁，2022年，8月28日各類細胞因子檢測的常用靶細胞細胞因子實驗系統(tǒng)干擾因素IL-1D10（M）增殖法IL-2、IL-4EL-4（M）增殖法IL-4A352（H）增殖抑制法IL-2CTLL（M）增殖法IL-4IL-3KG-1（H）增殖法

TF-1（H）增殖法GN-CSF、IL-5IL-6、EPOIL-4CTLL（M）增殖法IL-2IL-5BCL-1（M）增殖法IL-4第二十四頁，共三十九頁，2022年，8月28日各類細胞因子檢測的常用靶細胞細胞因子實驗系統(tǒng)干擾因素IL-6B9（M）增殖法IL-4、IL-11BM60（H）增殖法IL-7Clone-IXN/2b（M）增殖法IL-8中性粒細胞（M、H）趨化法GM-CSFTF-1（H）增殖法IL-3、IL-5IL-6、IL-5TNF/L929（M、H）細胞毒法IFNwish（H）病變保護法IFN-、IFN-L929（M）病變保護法IFN-、IFN-

第二十五頁，共三十九頁，2022年，8月28日檢測標本的準備1、分離特定的產(chǎn)生細胞2、對產(chǎn)生細胞進行誘導、激活3、選擇適當?shù)氖占瘯r間第二十六頁，共三十九頁，2022年，8月28日顯示檢測結(jié)果1、細胞增殖狀態(tài)的顯示：放射性核素摻入法、胞內(nèi)酶活性顯示法活細胞染色法細胞熒光測定法2、細胞毒或細胞病變狀態(tài)的顯示活細胞染色法胞內(nèi)酶活性顯示法

DNA斷片測定法第二十七頁，共三十九頁，2022年，8月28日細胞因子的免疫學檢測分泌型細胞因子的檢測細胞內(nèi)細胞因子的檢測第二十八頁，共三十九頁，2022年，8月28日ELISPOT第二十九頁，共三十九頁，2022年，8月28日細胞內(nèi)細胞因子檢測技術(shù)激活膜抗原標記細胞內(nèi)細胞因子標記第三十頁，共三十九頁，2022年，8月28日細胞因子的分子生物學檢測原位雜交技術(shù)Rt-PCR技術(shù)第三十一頁，共三十九頁，2022年，8月28日

第三節(jié)常用細胞因子的檢測方法一、IL-2的檢測二、IFN-γ的檢測三、TNF的檢測第三十二頁，共三十九頁，2022年，8月28日待檢樣品（細胞上清）指示細胞（CTLL-2）按不同稀釋度加入37oC，16-20小時加入3HTdR（1-5Ci）37oC，4-6小時收集細胞測定白細胞介素-2的測定示意圖第三十三頁，共三十九頁，2022年，8月28日待檢樣品（細胞上清）指示細胞（L929）按不同稀釋度加入37oC，4小時37oC，24-48小時棄取上清，加入VSV觀察細胞病變（鏡檢或比色）干擾素的測定示意圖第三十四頁，共三十九頁，2022年，8月28日腫瘤壞死因子的測定示意圖待檢樣品（細胞上清）指示細胞（L929）按不同稀釋度加入37oC，24小時棄取上清，洗滌加入結(jié)晶紫染液，洗滌加入細胞裂解液，比色第三十五頁，共三十九頁，2022年，8月28日

第四節(jié)細胞因子受體的檢測一、細胞因子受體的類型二、細胞因子受體的檢測第三十六頁，共三十九頁，2022年，8月28日

細胞因子受體的類型膜