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關(guān)于食用菌液體菌種生產(chǎn)第1頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日傳統(tǒng)菌種生產(chǎn)工藝,一般是由試管母種擴(kuò)繁成二級種、三級種,生產(chǎn)周期長、污染率高、成本高、需大量人工、管理困難。液體菌種生產(chǎn)具有純度高、活力強(qiáng)、繁殖快的特點(diǎn),接種到培養(yǎng)料內(nèi)有流動性好、萌發(fā)點(diǎn)多,發(fā)菌迅速等特種點(diǎn)。第2頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日1、工藝更簡便固體菌種的生產(chǎn)工藝為一級試管種→二級原種→三級栽培種,而液體菌種則沒有級的分別,也就是說液體菌種既可以做為母種接原種,也可以做為原種或栽培種直接接栽培袋,簡化了生產(chǎn)工藝。一、液體菌種八大優(yōu)勢第3頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日
生產(chǎn)固體菌種頻繁擴(kuò)接轉(zhuǎn)代,生產(chǎn)中煙薰火燒,使菌絲活力大大降低,極易造成污染。而液體菌種生產(chǎn)需經(jīng)過篩選、提純,屬純菌種;在生產(chǎn)過程中設(shè)備封閉運(yùn)行,屬純培養(yǎng)。這樣高純度的菌種,固體菌種怎能與之相比呢?2、菌種更純第4頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日
采用固體菌種,從制種到出菇一個(gè)周期下來至少需要4-5個(gè)月,甚至半年多。而采用液體菌種從制種到菌絲長滿栽培袋只需15天左右的時(shí)間,從制種到出菇大部分品種只需1個(gè)月,整個(gè)生產(chǎn)周期一般也就是兩個(gè)月。3、周期更短第5頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日
以前采用固體菌種的栽培戶都知道,無論使用二級種還是三級栽培種生產(chǎn)栽培袋,菌種所占的成本都在1角錢以上,而用液體菌種無論是生產(chǎn)栽培種還是栽培袋,其菌種成本就2-3分錢,您說哪個(gè)更劃算?4、成本更低第6頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日
采用固體菌種進(jìn)行食用菌生產(chǎn),栽培袋的污染率大都在8-10%。而采用液體菌種接種后6小時(shí)萌發(fā),24小時(shí)菌絲布滿培養(yǎng)料面,菌種萌發(fā)速度超過雜菌生長速度,沒有雜菌污染。5、污染更少第7頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日
固體菌種生產(chǎn)需重復(fù)備料、拌料、裝瓶(袋)、滅菌、接種、養(yǎng)菌,而液體菌種整個(gè)生產(chǎn)過程都是在一個(gè)罐體內(nèi)完成,按鍵操作,既成倍降低了生產(chǎn)、管理費(fèi)用,又節(jié)省人工,輕松制種。6、操作更簡便第8頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日
采用液體菌種的產(chǎn)品可以比采用固體菌種的早上市2個(gè)月以上,早上市與晚上市在效益上差的可就大了。此外,采用液體菌種的栽培袋菌齡短,出菇整齊一致,適合出口要求,在價(jià)格上占優(yōu)勢。7、出菇整齊上市早第9頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日
采用固體菌種袋內(nèi)菌絲菌齡不一致,加之受自然條件的制約,需多潮出菇多茬管理,有的沒出完菇還要越夏或越冬管理。而采用液體菌種養(yǎng)菌時(shí)間短,出菇集中,適合工廠化、標(biāo)準(zhǔn)化全年候生產(chǎn),代表產(chǎn)業(yè)發(fā)展方向。8、適宜工廠化標(biāo)準(zhǔn)化全年候生產(chǎn)第10頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日任何一種食用菌自身的生長必須滿足其對溫度、濕度、需氧量、養(yǎng)分等的需要,同時(shí)必須避免雜菌感染。在深層發(fā)酵技術(shù)上稱之為選擇性發(fā)酵技術(shù),如啤酒生產(chǎn)技術(shù)當(dāng)屬此例,而白酒生產(chǎn)則是生物菌群發(fā)酵技術(shù)。
液體菌種發(fā)酵設(shè)備包括四大系統(tǒng),溫控系統(tǒng)由控制器、電熱管等組成;供氣系統(tǒng)由空氣壓縮機(jī)、輸送管道、空氣過濾器等組成;冷卻系統(tǒng)由熱交換器、進(jìn)出水管道組成;攪拌系統(tǒng)由射流器、提升管等組成。
二、液體菌種設(shè)備基本原理第11頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日1、溶氧量液體菌種生產(chǎn)中最關(guān)鍵的是培養(yǎng)液中氧的溶解量,因?yàn)樵诰z生長過程中,必須不斷的吸收溶解其中的氧氣來維持自身的新陳代謝,氧氣在液體(水)中的溶解量與壓力、溫度有關(guān),同時(shí)與培養(yǎng)液的接觸面積、滲透壓有很大的關(guān)系。
因此我們設(shè)計(jì)發(fā)酵設(shè)備時(shí)有效地解決了這些問題,如安裝射流器使氣泡細(xì)碎度增加等。三、液體菌種生產(chǎn)的關(guān)鍵技術(shù)第12頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日技術(shù)的關(guān)鍵就是保證進(jìn)入的空氣無菌度高,因此必須選擇孔徑小、材料先進(jìn)的過濾膜。一般細(xì)菌直徑在0.5-5um,酵母菌在1-10um,病毒一般在20-400mu,所以選擇過濾膜時(shí)應(yīng)綜合考慮以上因素。當(dāng)然如果選的太小,成本將大幅度提高。另外環(huán)境對于空氣影響很大,在空氣壓縮機(jī)房、制種車間必須保持環(huán)境清潔。2、空氣過濾第13頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日培養(yǎng)液是菌絲生長發(fā)育的營養(yǎng)源,要求營養(yǎng)全面均衡。不同的菌種對營養(yǎng)要求偏重不同。配制原料有糖、麩皮、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、維生素、蛋白胨、土豆汁、酵母浸膏等。配置培養(yǎng)液時(shí),先將土豆片、麩皮一起煮熟,將汁液濾出,后加入其它輔料混勻即可。3、培養(yǎng)液第14頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日培養(yǎng)器上端有接種口,也是裝料口,將母種并瓶后加入抑菌劑,而后必須在火焰圈的保護(hù)下倒入罐體內(nèi),要求動作快、操作準(zhǔn)確。4、接種第15頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日如前所述,環(huán)境對菌種生產(chǎn)影響很大,過濾器本身不可能把雜菌百分之百地濾掉,減少環(huán)境中的雜菌基數(shù)是非常重要的,液體菌種母種接入到經(jīng)滅菌的培養(yǎng)液中只要能形成對雜菌的生長優(yōu)勢就可以抑制雜菌感染,也就是說,液體菌種培養(yǎng)不是建立在絕對無菌的前提下相反是建立在相對無菌的前提下。就此意義上說,保持環(huán)境清潔,減少空氣中雜菌基數(shù),對于提高菌種培養(yǎng)成功率意義較大。5、環(huán)境第16頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日工藝流程圖:空氣壓縮→過濾
↓
配料→裝罐→滅菌→冷卻→接種→培養(yǎng)→液體種
↑
試管斜面種→三角瓶顆粒種
四、液體菌種生產(chǎn)流程第17頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日液體菌種培養(yǎng)基的主要原料是土豆、麥麩、玉米粉、黃豆粉等
第18頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日液體菌種沒有“級”的分別,制種時(shí)間平均3天左右
第19頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日液體菌種的接種采用接種槍,兩人配合每小時(shí)可接800袋以上
第20頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日接種后6小時(shí)萌發(fā),24小時(shí)菌絲布滿培養(yǎng)料面,菌種萌發(fā)速度比雜菌快,因此沒有雜菌污染機(jī)會
第21頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日采用液體菌種,栽培袋養(yǎng)菌時(shí)間僅為15天左右
第22頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日采用液體菌種菌齡短,出菇整齊,比采用固體菌種的上市早
第23頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日用液體菌種制做菌種,菌絲潔白粗壯,同樣獲得好效益
第24頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日液體菌種為工廠化標(biāo)準(zhǔn)化全年候生產(chǎn)食用菌打下了良好的基礎(chǔ)第25頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日
配料時(shí)先將土豆去皮切片,與麩皮混合后用不銹鋼鍋煮熟并取汁,在將輔料KH2PO4、MgSO4等溶入,混勻后裝入罐中加熱,至121.3℃并維持40分鐘左右進(jìn)行滅菌,滅菌結(jié)束后用冷水冷卻至培養(yǎng)溫度,而后將并瓶后的三角瓶種接上進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)時(shí)根據(jù)不同的菌種,設(shè)定適宜的溫度。第26頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日培養(yǎng)期間應(yīng)注意觀察,并做好記錄。包括溫度、壓力、氣流量、排出氣體的氣味等。如遇到停電,排氣閥自動關(guān)閉或人工關(guān)閉來保持罐中處于正壓狀態(tài)。來電后重新啟動,并打開排氣閥繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)過程中,可隨時(shí)無菌操作采樣分析,幾天后待菌球密度合適(從視鏡觀察)即可接種。
第27頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日液體菌種的搖瓶培養(yǎng),其主要設(shè)備是搖床(搖瓶機(jī)),有往復(fù)式和旋轉(zhuǎn)式兩種。將液體培養(yǎng)基裝入500毫升三角瓶內(nèi),每瓶裝量為100毫升,加入15粒左右的小玻璃珠或小塊的玻璃碎片,用棉塞封口后置1.5千克壓力下滅菌30分鐘,取出冷至30℃時(shí)接種。每瓶接入1.5~2平方厘米的斜面菌種一塊,讓其懸浮于液體培養(yǎng)基表面且使菌絲朝上,在適溫下靜置培養(yǎng)48小時(shí)。當(dāng)菌絲長至液體培養(yǎng)基中時(shí),置搖床上進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。往復(fù)式搖床振蕩頻率為80~100次/分,振幅6~10厘米;旋轉(zhuǎn)式搖床偏心距為4毫米,振蕩頻率為150~220轉(zhuǎn)/分。旋轉(zhuǎn)式搖床因旋轉(zhuǎn)速度過快,菌絲球一般較大,且菌絲球表面絨毛狀菌絲少,一般不能用作菌種。五、液體菌種的搖瓶培養(yǎng)第28頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日液體菌種接種的培養(yǎng)液的培養(yǎng)溫度一般控制在24~26℃,培養(yǎng)時(shí)間72~96小時(shí)。培養(yǎng)結(jié)束后,因菌種不同,培養(yǎng)液出現(xiàn)不同色澤。平菇、金針菇的培養(yǎng)液呈淺黃色;香菇、猴頭的培養(yǎng)液呈棕色;而蜜環(huán)菌則會有熒光現(xiàn)象;木耳的培養(yǎng)液呈青褐色、粘稠、有香甜味。若出現(xiàn)培養(yǎng)液混濁,并伴有腐敗及酸味,多為細(xì)菌性污染所致。液體菌種需鏡檢后方可應(yīng)用于生產(chǎn)。第29頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日搖床培養(yǎng)的液體菌種數(shù)量較少,一般只適用于固體菌種的接種。也可作為發(fā)酵罐種源,或接種于三角瓶內(nèi),每瓶接種菌液10毫升,繼續(xù)進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)。因菌絲球正處于旺盛生長狀態(tài),菌絲球分散性好,能縮短搖瓶培養(yǎng)時(shí)間,快者2天即可終止培養(yǎng)。液體菌種在4℃左右溫度下可保存1~2個(gè)月,在15~20℃室溫下可保存7~10天,使用時(shí)對接種成功率、產(chǎn)量均無不良影響。第30頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日1.用于原種或栽培種生產(chǎn)液體菌種可以作為母種和原種使用。就目前國內(nèi)現(xiàn)有水平來說,用深層發(fā)酵方法大規(guī)模生產(chǎn)液體菌種還有困難,大多用搖瓶培養(yǎng)或小型通氣發(fā)酵方法生產(chǎn),以液體菌種代替母種較為理想。用液體菌種制出的原種,生活力強(qiáng),上下菌齡一致,用于接種栽培種,定植快,污染率低。用搖瓶方法培養(yǎng)液體菌種,周期短,可連續(xù)多次擴(kuò)大培養(yǎng)(一般不超過5代),對生長速度、菌種質(zhì)量均無不良影響。六、液體菌種使用方法第31頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日2.用于磚狀菌種生產(chǎn)在棉籽[BFQ]殼等培養(yǎng)料內(nèi),按50%~100%的量加入液體菌種,拌勻后,裝入消毒的紙盒、木箱、塑料箱內(nèi),用塑料薄膜包好,3~7天菌絲充分發(fā)育連接成菌塊,作為栽培種使用。可用于平菇、鳳尾菇、金頂蘑生產(chǎn),不適用于香菇、黑木耳。第32頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日3.用于菌床播種床栽:適用于平菇、鳳尾菇、香菇栽培,每平方米用菌液300~1000毫升,常用量為500毫升,以穴播法最好,條播次之,撒播最差,將穴播與撒播結(jié)合效果最好。栽培平菇、鳳尾菇20天菌絲滿床,20~25天可以出菇,香菇壓塊栽培,在播種后40天出菇。袋栽:將液體菌種由袋口注入或用混播法拌料。液體菌種用量為30%~50%,播種后一般26~35天出菇。瓶栽:每千克干料用100毫升液體菌種,栽培平菇、鳳尾菇、草菇、猴頭、木耳等,15~25天菌絲滿瓶。第33頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日1.液體菌種的科研、生產(chǎn)、制種和工廠化的大規(guī)模生產(chǎn)單位;
2.用于多種微生物的培養(yǎng);
3.含食用菌活性成分的保健食品生產(chǎn);
4.各種奶制品的活性因子生產(chǎn);
5.生產(chǎn)菌絲體,提取生物活性成分來生產(chǎn)各種食品添加劑;
6.微生物發(fā)酵工程來制取農(nóng)藥、醫(yī)藥、激素等;
7.適用于科研單位、菌業(yè)公司、工業(yè)企業(yè)和從事食用菌栽培人員的菌類生產(chǎn)。
七、應(yīng)用領(lǐng)域第34頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日
用液體菌種培養(yǎng)器生產(chǎn)一批菌種僅需3天,是使用固體菌種周期的1/10。由于液體菌種具有流動性,因而接入的菌種可流散在不同的部位萌發(fā)生長。接種后6小時(shí)左右即可看到菌種萌發(fā)變白,24小時(shí)就可吃料生長,使雜菌沒有浸染機(jī)會。在25℃的條件下,養(yǎng)菌18天-20天即可長滿袋,生長期是使用固體菌種的50%。八、用液體菌種栽培杏鮑菇第35頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日杏鮑菇需要較豐富的碳源和氮源,特別是氮源越豐富菌絲生長越好,產(chǎn)量也越高。配方是:木屑65%、棉籽殼10%、麥麩23%、石膏1%、石灰1%。第36頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日水分:在栽培杏鮑菇菌絲生長階段,要求空氣相對濕度60%左右,子實(shí)體形成和發(fā)育階段要求相對濕度在85%-90%。子實(shí)體發(fā)育和生長階段,水分管理極為重要。初期菇房相對濕度要保持在90%左右,而當(dāng)子實(shí)體發(fā)育期間和接近采收時(shí),濕度可控制在85%左右,這樣有利于延長子實(shí)體的保質(zhì)期。不要把水噴到菇體上,特別在氣溫升高時(shí),容易使子實(shí)體發(fā)黃,嚴(yán)重時(shí)還會感染雜菌,造成腐爛,影響產(chǎn)量和質(zhì)量。第37頁,共39頁,2023年,2月20日,星期日溫度:杏鮑菇菌絲生長最適宜的溫度25℃左右,原基形成的最適溫度是10-15℃。子實(shí)體發(fā)育的溫度因不同
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