生理學(xué)實(shí)驗(yàn)紅細(xì)胞滲透脆性的測定

關(guān)于生理學(xué)實(shí)驗(yàn)紅細(xì)胞滲透脆性的測定第1頁，共12頁，2023年，2月20日，星期五【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?、本實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)測定紅細(xì)胞滲透脆性的方法。2、加深對(duì)細(xì)胞外液滲透張力在維持紅細(xì)胞正常形態(tài)與功能重要性方面的理解。第2頁，共12頁，2023年，2月20日，星期五【實(shí)驗(yàn)原理】在臨床或生理實(shí)驗(yàn)使用的各種溶液中，與血漿滲透壓相等的稱為等滲溶液（如0.85%NaCI溶液），高于或低于血漿滲透壓的則相應(yīng)地稱為高滲或低滲溶液。將正常紅細(xì)胞懸浮于不同濃度的NaCI溶液中即可看到：在等滲溶液中的紅細(xì)胞保持正常大小和雙凹圓碟形；在滲透壓遞減的一系列溶液中，紅細(xì)胞逐步脹大并雙側(cè)凸起，當(dāng)體積增加30%時(shí)成為球形；體積增加45%～60%則細(xì)胞膜損傷而發(fā)生溶血，這時(shí)血紅蛋白逸出細(xì)胞外，稱為溶血。第3頁，共12頁，2023年，2月20日，星期五【實(shí)驗(yàn)原理】將紅細(xì)胞懸浮于等滲NaCl液中，其形態(tài)不變。若置于低滲NaCl溶液中則發(fā)生膨脹破裂，此現(xiàn)象稱為紅細(xì)胞滲透脆性。但紅細(xì)胞對(duì)低滲鹽溶液具有一定抵抗力，其大小可用NaCl溶液濃度的高低來表示。將血液滴入不同濃度的低滲NaCl溶液中，開始出現(xiàn)溶血現(xiàn)象的NaCl溶液濃度為該血液紅細(xì)胞的最小抵抗力。出現(xiàn)完全溶血現(xiàn)象時(shí)的NaCl溶液濃度為該紅細(xì)胞的最大抵抗力。前者代表紅細(xì)胞的最大脆性(最小抵抗力)，后者代表紅細(xì)胞最小脆性(最大抵抗力)。第4頁，共12頁，2023年，2月20日，星期五不同物質(zhì)的等滲溶液不一定都能使紅細(xì)胞的體積和形態(tài)保持正常，能使懸浮于其中的紅細(xì)胞保持正常體積和形狀的鹽溶液，稱為等張溶液。所謂“張力”實(shí)際是指溶液中不能透過細(xì)胞膜的顆粒所造成的滲透壓。例如NaCI不能自由透過細(xì)胞膜，所以0.85%NaCI既是等滲溶液，也是等張溶液；但如尿素，因?yàn)樗梢宰杂赏ㄟ^細(xì)胞膜，使胞外成為低滲溶液從而發(fā)生溶血。1.9%尿素溶液雖然與血漿等滲，但紅細(xì)胞置入其中后立即溶血，所以不是等張溶液。第5頁，共12頁，2023年，2月20日，星期五【實(shí)驗(yàn)材料】實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：

動(dòng)物種類不限

。實(shí)驗(yàn)器材：試管架、小試管、滴管，移液管。藥品與試劑：1%NaCl溶液、0.85%氯化鈉溶液、蒸餾水，1.9%尿素溶液，1%肝素。第6頁，共12頁，2023年，2月20日，星期五【實(shí)驗(yàn)方法】1．配制不同濃度的低滲NaCl溶液：取口徑相同的干燥潔凈小試管10支，分別編號(hào)排列在試管架上，配制出10種不同濃度的NaCl低滲溶液（0.25%，0.3%，0.35%，0.4%，0.45%，0.5%，0.55%，0.6%，0.65%，0.9%）。每個(gè)試管總量均為2.5ml或4ml，視試管大小而定。另取3支小試管，在三支試管上分別編號(hào)11-13，分別加入0.85%NaCl溶液、1.9%尿素和蒸溜水2.5ml或4ml，與前面10支試管量一致。第7頁，共12頁，2023年，2月20日，星期五2．制備抗凝血：不同動(dòng)物采血方法各異，但多采用末梢血。把血液放入含有肝素的燒杯內(nèi)，混勻。1%肝素1ml可抗10ml血。3.加抗凝血：用滴管吸取抗凝血，依次向13支試管內(nèi)各加1滴，輕輕顛倒混均，切忌用力振蕩。先觀察11、12、13管的變化，其他10支試管在室溫下放置1小時(shí)。第8頁，共12頁，2023年，2月20日，星期五4．觀察結(jié)果血液溶血情況，其現(xiàn)象可分為以下幾種：(1)試管內(nèi)液體完全變成透明紅色，說明紅細(xì)胞完全破裂，稱為完全溶血。(2)試管內(nèi)液體下層為混濁紅色，上層無色透明，表示部分紅細(xì)胞沒有破壞，稱為不完全深血。(3)試管內(nèi)液體下層為混濁紅色，上層無色透明，說明紅細(xì)胞完全沒有破壞。第9頁，共12頁，2023年，2月20日，星期五4．觀察項(xiàng)目(1)觀察不同濃度低滲NaCl

混合液的顏色和透明度。(2)比較第11、12、13管的溶血情況并分析其原因。第10頁，共12頁，20