自身抗體的應用和研究進展專家講座

本身抗體應用及研究進展

-04-13自身抗體的應用和研究進展第1頁2酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）

1間接免疫熒光法（IFAIndirectFluorescentAssay

）3免疫印跡法（IB）WesternblotLIA4其它：IDA、RIA等自身抗體的應用和研究進展第2頁全自動本身抗體分析儀自動化檢測檢測定量化單個項目隨時檢測多個項目同時檢測45-90分鐘匯報結(jié)果原廠質(zhì)控和校正血清準確溫度調(diào)控系統(tǒng)五點定標、三重檢測自身抗體的應用和研究進展第3頁自身抗體的應用和研究進展第4頁風濕病試驗室診療血清學檢驗

本身抗體——特異性非特異免疫相關指標滑液分析普通試驗室檢驗項目自身抗體的應用和研究進展第5頁項目檢驗方法SLE四項

ANA間接免疫熒光抗DS－DNA抗體間接免疫熒光抗組蛋白抗體ELISA抗核小體抗體ELISAENA系列

抗RNP免疫印跡、ELISA抗SM免疫印跡、ELISA抗SSA免疫印跡、ELISA抗SSB免疫印跡、ELISA抗JO-1免疫印跡、ELISA抗SCL-70免疫印跡、ELISA抗核糖體P蛋白免疫印跡、ELISARA三項

AKA（抗角質(zhì)蛋白抗體）間接免疫熒光抗RA33ELISA抗CCP（抗環(huán)瓜氨酸肽抗體）ELISAANCA四項

P-ANCA（熒光模型為核周模型）間接免疫熒光C-ANCA（熒光模型為細胞質(zhì)模型）間接免疫熒光MPO-ANCA（髓過氧化酶抗體）ELISAPR3-ANCA（抗蛋白酶3抗體）ELISA常見本身抗體及其檢測方法(1)自身抗體的應用和研究進展第6頁(2)本身免疫肝炎七項

ANA間接免疫熒光抗LMA抗（肝細胞膜抗體）間接免疫熒光ASMA（抗平滑肌抗體）間接免疫熒光抗LKM（抗肝腎微粒體抗體）間接免疫熒光抗SLA（抗可溶性肝抗原抗體）間接免疫熒光AMA（線粒體抗體）間接免疫熒光抗LSP（抗肝臟特異性蛋白抗體）間接免疫熒光RF三項

RF-IgGELISARF-IgAELISARF-IgMELISA抗磷脂綜合征三項（ASP）ELISAPT-IgG（凝血素抗體）ELISAPT-IgMELISA抗β2-糖蛋白1抗體ELISA常見本身抗體及其檢測方法自身抗體的應用和研究進展第7頁抗Ku抗體（Ku)抗Mi抗體（Mi-2）抗PM-Scl抗體抗JO-1抗體（JO-1）多發(fā)性肌炎、皮肌炎抗線粒體抗體M2型（AMA-M2）原發(fā)性膽汁性肝硬化抗nRNP抗體（U1-snRNP）混合性結(jié)締組織?。∕CTD）抗Scl-70抗體（Scl-70）抗著絲點B抗體（CENP-B）系統(tǒng)性硬化抗SSB/La抗體抗SSA/R052抗體抗SS-A/R060抗體干燥綜合征/系統(tǒng)性紅斑狼瘡抗核糖體P蛋白（PO）抗增殖細胞核抗原抗體（PCNA)抗Sm抗體抗組蛋白抗體抗核小體抗體抗雙鏈DNA抗體IgG抗體系統(tǒng)性紅斑狼瘡項目名稱疾病

ANA譜17項（免疫印跡法）(3)常見本身抗體及其檢測方法自身抗體的應用和研究進展第8頁(一)類風濕關節(jié)炎（RA）

類風濕因子（RF）早期診療系列指標抗RA33/36抗體 抗核周因子（APF）抗角蛋白抗體（AKA）抗Sa抗體抗環(huán)瓜氨酸抗體（抗CCP）

自身抗體的應用和研究進展第9頁類風濕因子（RF）抗人IgG分子Fc片段上抗原決定簇特異性抗體,分為IgM、G、A、E型RF在RA中陽性率為70%~８０％，是診療RA主要標準之一RF含量與病情活動性和嚴重性成正比，連續(xù)高滴度RF常提醒RA病情活動，骨侵蝕發(fā)生率高，常可伴有皮下結(jié)節(jié)或血管炎等關節(jié)外表現(xiàn)，提醒預后不良自身抗體的應用和研究進展第10頁類風濕因子（RF）RF并非RA獨有特異性抗體，對RA診療不具特異性SLE30%SS70%~90%SSc20%~30%MCTD50%~60%非風濕性疾病5%以下正常人RF陽性不等于一定就是RARF陰性也不等于一定就不是RA自身抗體的應用和研究進展第11頁自身抗體的應用和研究進展第12頁RF慣用檢測方法RF 1：40陽性乳膠凝集法（測IgM-RF）RF256Iu/ml雙抗夾心ElISA法(測總RF）RF-IgG 110IU/ml -IgA 18IU/ml ELISA法

-IgM200IU/ml自身抗體的應用和研究進展第13頁RA早期診療系列指標

敏感性特異性抗RA33/36抗體35.8%99.6%APF40%-80%70%-90%AKA40%-55%85%-95%抗Sa抗體40%-60%98.6%抗CCP46%-70%96%自身抗體的應用和研究進展第14頁抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（抗CCP）瓜氨酸是RA血清抗聚角蛋白微絲蛋白相關抗體主要抗原決定簇對RA診療含有高度特異性（98%）可在RA早期出現(xiàn)預測早期關節(jié)炎發(fā)展為RARA關節(jié)侵蝕破壞早期識別及預測自身抗體的應用和研究進展第15頁(二)系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）是一個臨床表現(xiàn)有多系統(tǒng)損害癥狀慢性系統(tǒng)性本身免疫性疾病，其血清有以抗核抗體為主大量不一樣本身抗體本身抗體（1）抗核抗體譜——ANA、抗ds-DNA、抗ENA抗體（2）抗磷脂抗體（3）抗組織細胞抗體——抗RBC抗體抗血小板相關抗體抗神經(jīng)元抗體（4）其它——RF、p-ANCA自身抗體的應用和研究進展第16頁抗核抗體（ANA）定義——以細胞核內(nèi)物質(zhì)為抗原抗體臨床意義①SLE篩查抗體:

95%陽性，但滴度與SLE活動性無相關陰性基本可排除SLE②陽性并非SLE特異陽性并非風濕病特異:——風濕?。⊿LE、SSc、SS、RA)非風濕性疾?。ǜ腥?、慢肝、肺纖維化、腫瘤）服用一些藥品（INH、苯妥英鈉、肼苯達嗪、普魯卡因酰胺）

自身抗體的應用和研究進展第17頁抗核抗體（ANA）方法——間接免疫熒光法結(jié)果判斷:①滴度〉1：100為陽性②常見核型——5種不一樣核型臨床意義不一樣

自身抗體的應用和研究進展第18頁

核膜型與抗ds-DNA相關，多見于SLE，尤其是有腎炎者

均質(zhì)型與AHA（抗組蛋白抗體）、抗DNA相關，引發(fā)LE形成主要見于SLE、藥品性狼瘡自身抗體的應用和研究進展第19頁

斑點型與抗ENA相關，應深入查特異性抗體核仁型多見于硬皮病自身抗體的應用和研究進展第20頁

著絲點型多見于CREST綜合征自身抗體的應用和研究進展第21頁ANA常見五種核型及臨床意義核膜型——與抗ds-DNA相關，多見于SLE，尤其是有腎炎者均質(zhì)型——與AHA、抗DNA相關，引發(fā)LE形成主要見于SLE、藥品性狼瘡斑點型——與抗ENA相關，應深入查特異性抗體核仁型——多見于硬皮病著絲點型——多見于CREST綜合征自身抗體的應用和研究進展第22頁ANA檢測方法間接免疫熒光法印跡法ELISA法自身抗體的應用和研究進展第23頁

抗核抗體譜（ANAs）定義：以細胞核內(nèi)物質(zhì)為抗原抗體

抗DNA抗體——抗ss-DNA抗ds-DNA抗組蛋白抗體——H1，H2A，H2B，H3，H4抗非組蛋白抗體——抗ENA抗體抗著絲點抗體抗核仁抗體其它——線粒體、溶酶體、高爾基體等

自身抗體的應用和研究進展第24頁抗ds-DNA抗體臨床意義①對SLE診療有較高特異性②滴度與SLE活動相關，可作為病情監(jiān)測及療效觀察指標③與SLE腎損害相關檢測方法①放免法（Farr)——敏感，有利于早期預測檢測高親協(xié)力抗ds-DNA②間接免疫熒光法(IF)——特異③ELISA——可檢測低親協(xié)力抗ds-DNA有利于中樞狼瘡病情監(jiān)測④金標免疫斑點法自身抗體的應用和研究進展第25頁抗ENA抗體抗RNPMCTD100%陽性，且滴度高 雙手腫脹，雷諾現(xiàn)象，肌炎，指（趾）端硬化 腎臟保護性抗體？抗SmSLE標識性抗體，陽性率30% 有利于早期、不經(jīng)典及治療緩解后SLE回顧性診療 抗Sm陽性一定伴抗RNP陽性，但抗RNP陽性可單獨存在抗SSA①原發(fā)性SS：60-75%SLE:40-50% ②與皮損、光過敏、白細胞降低、淋巴結(jié)腫大、血管炎、紫癜相關③可造成新生兒狼瘡、嬰兒心臟傳導阻滯抗SSB ①原發(fā)性SS：40%，較抗SSA更特異 ②其它CTD伴抗SSB者常伴繼發(fā)性SS自身抗體的應用和研究進展第26頁抗ENA抗體抗Scl-70硬皮病標識性抗體抗Jo-1多肌炎/皮肌炎標識性抗體抗Rib 胞漿抗原——核糖體位于胞漿內(nèi)抗Rib陽性+其它本身抗體陰性=ANA陰性

臨床意義①是SLE又一特異性抗體，陽性率10-20%②多見于SLE活動期與抗ds-DNA抗體消長相平行但不會隨病情緩解馬上消失可連續(xù)1-2年后才轉(zhuǎn)陰自身抗體的應用和研究進展第27頁抗核小體抗體（AnuA）核小體是細胞染色質(zhì)中一個成份，它是由DNA和組蛋白以特殊方式相連而組成，在SLE誘導和致病中起主要作用對SLE早期診療有主要意義比抗ds-DNA、抗組蛋白抗體更早出現(xiàn)陽性率：50%~90%特異性﹥98%自身抗體的應用和研究進展第28頁(三)皮肌炎/多發(fā)性肌炎（PM/DM）免疫學檢驗ANAENA——抗Jo-1陽性其它檢驗——肌酶譜肌酸磷酸激酶（CPK）:MM-心肌和骨骼肌MB-心肌BB-平滑肌和腦內(nèi)乳酸脫氫酶（LDH）谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）堿性磷酸酶（ALP）自身抗體的應用和研究進展第29頁(四)干燥綜合征（SS）ANA——陽性率40%~70%ENA——抗SSA抗體陽性率70%~96%抗SSB抗體陽性率50%~87%抗α-Fordrin——對于pSS或sSS診療有一定意義，但特異性和敏感性并不理想。RF——陽性率75%~100%高球蛋白血癥WBC下降自身抗體的應用和研究進展第30頁(五)系統(tǒng)性硬化?。╬SS）ANA——陽性率50%~55%ENA——抗Scl-70陽性率15%~40%抗著絲點抗體(ACA)陽性自身抗體的應用和研究進展第31頁(六)混合性結(jié)締組織?。∕CTD）ANA陽性ENA——抗RNP高滴度陽性自身抗體的應用和研究進展第32頁（七）血管炎抗中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）熒光圖譜分型主要抗原成份胞漿型cANCA核周型pANCA蛋白酶3（PR3）髓過氧化物酶（MPO）非經(jīng)典型（cANCA）不清自身抗體的應用和研究進展第33頁ANCA臨床意義c-ANCA和PR3-ANCA

對韋格納肉芽腫有高度特異性（95%），敏感性80%

與病情活動性相關常作為判斷藥品療效和病情復發(fā)指標p-ANCA和MPO-ANCA

不如c-ANCA含有診療特異性陽性者血管炎程度較高，其滴度也與病情活動相關主要與顯微鏡下多血管炎

壞死性新月體腎小球腎炎

變應性肉芽腫性血管炎相關自身抗體的應用和研究進展第34頁（八）抗磷脂抗體綜合征（APS）是一個非炎癥性本身免疫病，臨床上以動/靜脈血栓形成、習慣性流產(chǎn)和血小板降低等癥狀為表現(xiàn)，血清中存在抗磷脂抗體血清學檢驗抗心磷脂抗體（ACA）——IgG、IgM、IgA（ELISA）抗β2糖蛋白1抗體（抗β2-GP1)狼瘡抗凝物（LA）——凝血酶原時間（PT）激活部分凝血活酶時間（APTT）白陶土凝集時間（KCT）蛇毒試驗（αRVVT）自身抗體的應用和研究進展第35頁抗磷脂抗體抗β2-GP1抗體比LA和ACA在APS患者中更含有特異性，是造成APS主要抗體抗β2GP1抗體只出現(xiàn)于本身免疫性疾病,而ACA也可出現(xiàn)于一些感染性疾病,如梅毒、AIDS、肝炎、結(jié)核等自身抗體的應用和研究進展第36頁（九）本身免疫性肝病我科開展本身免疫肝炎系列抗體包含：抗核抗體（ANA）抗肝細胞膜抗體(抗LMA)抗平滑肌抗體（ASMA）抗肝腎微粒體抗體（抗LKM抗體）抗肝-胰抗體(抗LP抗體)抗可溶性肝細胞抗體（抗SLA）抗線粒體抗體（AMA）自身抗體的應用和研究進展第37頁本身免疫性肝炎（AIH）