核酸的生物學(xué)功能

16A型題一、名詞解釋1．半保存半不連續(xù)復(fù)制2．岡崎片段3．引物酶4．拓?fù)洚悩?gòu)酶5．反轉(zhuǎn)錄6．PCR7．內(nèi)含子8．外顯子9．編碼鏈10．核心酶11．啟動(dòng)子12．Pribnowbox1315．帽子構(gòu)造16．poly〔A〕尾巴17．核不均一RNA18．RNA自我剪切19．Ribozyme20．剪接體21．密碼子22．同義密碼子23．增加子24．多核糖體25．S.D序列26．信號(hào)肽27．信號(hào)識(shí)別蛋白28．停靠蛋白29．基因表達(dá)30．操縱子31．衰減子32．反義RNA33．基因治療34．轉(zhuǎn)座子35．限制性內(nèi)切酶36．克隆37．轉(zhuǎn)化38．RFLP39．DNA指紋圖譜40．RAPD二、填空題將以岡崎片段合成的子鏈稱為 ，連續(xù)合成的子鏈稱為先導(dǎo)鏈。DNA復(fù)制中消滅的RNA片段由一種特異的RNA聚合酶催化合成，此酶稱為 。拓?fù)洚悩?gòu)酶能夠使DNA產(chǎn)生拓?fù)鋵W(xué)上的種種變化，最常見(jiàn)的是產(chǎn)生 和消退超螺旋。紫外線引起DNA分子中同一條鏈上相鄰的兩個(gè)嘧啶核苷酸以共價(jià)鍵連接生成環(huán)丁烷構(gòu)造，即 。暗修復(fù)通過(guò)3種不同的機(jī)理來(lái)完成修復(fù)即切除修復(fù)、重組修復(fù)和 。RNA指導(dǎo)的DNA聚合酶又稱為 。PCR反響的每一個(gè)循環(huán)都要經(jīng)過(guò)高溫變性﹑ 和中溫延長(zhǎng)3個(gè)階段。DNA挨次測(cè)定技術(shù)最適用的是Sanger提出的 末端終止法。修復(fù)允許子鏈DNA復(fù)制合成時(shí)越過(guò)親鏈上受損傷的片段而不形成缺口。10．DNA中有些基因是重復(fù)的，稱為 。11．把基因中不編碼的序列稱為 ，把被間隔的編碼蛋白質(zhì)的基因局部稱為 。．基因中僅一股鏈被轉(zhuǎn)錄，把被轉(zhuǎn)錄的一股鏈稱為 ，另一股鏈稱為 。大腸桿菌RNA聚合酶的亞基組成是 ，沒(méi)有σ亞基的RNA聚合酶稱為 。原核生物的啟動(dòng)子挨次存在兩個(gè)共同的挨次，即和 。細(xì)菌及病毒DNA的轉(zhuǎn)錄終止挨次有兩個(gè)明顯的特點(diǎn)：其一是富含GC，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物極易形成 ，其二是緊接GC之后有一串 。從大腸桿菌中獲得的RNA聚合酶在轉(zhuǎn)錄時(shí)要求有二價(jià)金屬離子，主要是 和。轉(zhuǎn)錄合成的RNA第一個(gè)核苷酸常常是 或 。以mRNA為模板合成蛋白質(zhì)的過(guò)程稱為 ，或稱為 。原核生物完整的核糖體為 s，由1個(gè) s和1個(gè) s亞基組成。真核生物的核糖體大約是 s，由1個(gè) s和1個(gè) s兩個(gè)亞基組成。蛋白質(zhì)合成的肽鏈延長(zhǎng)階段包括：進(jìn)位、肽鍵形成和 3步。將mRNA上的AGGAGGU區(qū)域稱為 序列。當(dāng)代基因工程中一種生物的基因能在另一種生物中表達(dá)的根底是 。每個(gè)tRNA的堿基挨次都能排列折疊成一個(gè) 狀的構(gòu)象。操縱子包括調(diào)整基因、啟動(dòng)基因、 和 。轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白通常有獨(dú)立結(jié)合DNA的構(gòu)造域，這種構(gòu)造域中與DNA接觸的構(gòu)造單元有 和 。轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白有與蛋白質(zhì)結(jié)合的構(gòu)造域，此構(gòu)造域含有的構(gòu)造單元有和 。真核生物mRNA5′端 序列可與30s核糖體小亞基中16srRNA3′端的序列互補(bǔ)。在某一基因指導(dǎo)下蛋白質(zhì)的合成過(guò)程稱 ?；虮磉_(dá)的調(diào)控有兩個(gè)層次： 的調(diào)控和 的調(diào)控。設(shè)計(jì) ，抑制靶基因的表達(dá)，到達(dá)治療疾病的目的，稱為基因治療。一類有特定構(gòu)造的DNA挨次，這些挨次不斷地轉(zhuǎn)變它們?cè)诩?xì)胞基因組內(nèi)的位置，或從一個(gè)基因組移動(dòng)到另一個(gè)基因組上，稱為 ?！?0ng的DNA即可?？梢杂媚z電泳分別RNA，將特別片段轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上，之后用雜交法來(lái)鑒定它，此法稱為 ?？梢杂?法產(chǎn)生一個(gè)氨基酸被替換的突變蛋白質(zhì)。目的基因的獲得目前普遍實(shí)行3種方法： 、、 。有些質(zhì)粒當(dāng)細(xì)菌停頓生殖時(shí)，自身還能復(fù)制擴(kuò)增，稱為 ；有的隨著細(xì)菌停頓生殖，復(fù)制也停頓，稱為 。只要選用與所需〔目的〕基因互補(bǔ)的DNA片段作探針，通過(guò) 、等即可從基因文庫(kù)中篩出所需要的目的基因。用來(lái)生產(chǎn)某些蛋白類藥物的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物又稱 。三、簡(jiǎn)答題說(shuō)明DNA復(fù)制時(shí)，隨后鏈復(fù)制的根本過(guò)程。說(shuō)明DNA切除修復(fù)的根本過(guò)程。說(shuō)明DNA重組修復(fù)的根本過(guò)程。說(shuō)明DNASOS修復(fù)的根本過(guò)程。說(shuō)明光修復(fù)的根本過(guò)程。真核生物RNA轉(zhuǎn)錄生成后，是如何進(jìn)展加工修飾的？蛋白質(zhì)生物合成后的加工修飾方式有哪些？寫(xiě)出中心法則路線圖。結(jié)合鋅指的構(gòu)造，說(shuō)明鋅指的作用。結(jié)合亮氨酸拉鏈的構(gòu)造，說(shuō)光明氨酸的作用。表達(dá)載體具有哪些特點(diǎn)？簡(jiǎn)要說(shuō)明搖擺學(xué)說(shuō)的主要內(nèi)容。13．簡(jiǎn)要說(shuō)明Southern雜交的根本過(guò)程。14．簡(jiǎn)要說(shuō)明Nouthern雜交的根本過(guò)程。15．簡(jiǎn)要說(shuō)明Western blot雜交的根本過(guò)程。16．說(shuō)明DNA聚合酶I的功能。簡(jiǎn)要說(shuō)明原位雜交的根本過(guò)程。簡(jiǎn)述遺傳密碼的特點(diǎn)。說(shuō)明氨基酸與tRNA分子的連接方式、密碼子與反密碼子的相互作用特點(diǎn)。四、論述題說(shuō)明DNA的復(fù)制過(guò)程。與原核生物相比，真核生物的轉(zhuǎn)錄有何特點(diǎn)？簡(jiǎn)要說(shuō)明PCR的原理、反響過(guò)程和應(yīng)用。說(shuō)明RNA的轉(zhuǎn)錄生成過(guò)程。簡(jiǎn)要說(shuō)明原核生物蛋白質(zhì)的生物合成過(guò)程。說(shuō)明乳糖操縱子的調(diào)控。說(shuō)明DNA重組技術(shù)的根本過(guò)程。真核生物的蛋白質(zhì)合成有何特點(diǎn)？DNA模板上的啟動(dòng)子構(gòu)造有何特點(diǎn)？DNA重組技術(shù)中，獲得目的基因的方法都有那些？B型題簡(jiǎn)要說(shuō)明四膜蟲(chóng)的核糖體前體的自我剪切過(guò)程。如何實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)工程。說(shuō)明蛋白質(zhì)信號(hào)肽轉(zhuǎn)運(yùn)的一般過(guò)程。說(shuō)明色氨酸衰減子的調(diào)控。寫(xiě)出SangerDNA測(cè)序的根本原理和過(guò)程。常見(jiàn)的DNA指紋技術(shù)有哪幾種，簡(jiǎn)要說(shuō)明其根本原理和主要用途？在DNA復(fù)制過(guò)程中，隨后鏈?zhǔn)侨绾伪３謴?fù)制方向和前導(dǎo)鏈全都的？說(shuō)明RNA延長(zhǎng)的轉(zhuǎn)錄鼓泡模型。真核細(xì)胞的基因表達(dá)調(diào)控與原核細(xì)胞有何異同？答 案A型題一、名詞解釋半保存半不連續(xù)復(fù)制：DNA制。以DNA母鏈雙鏈為模板合成子鏈時(shí)，其中一條子鏈的合成是不連續(xù)的，而另一條鏈的合成是連續(xù)的，故稱半不連續(xù)復(fù)制，合稱半保存半不連續(xù)復(fù)制。岡崎片段：1968年岡崎覺(jué)察DNA的5′→3′鏈合成是先合成一些約l000個(gè)核苷酸的片段稱為岡崎片段。隨著復(fù)制的進(jìn)展，這些片段再連成一條子代DNA鏈。DNA聚合酶都要求一個(gè)有自由3′–OH的引物來(lái)起始DNA現(xiàn)復(fù)制合成先導(dǎo)鏈或隨后鏈岡崎片段的引物是一段5～10個(gè)核苷酸的RNARNA由一種特異的RNA聚合酶催化合成，此酶稱為引物酶。拓?fù)洚悩?gòu)酶：能夠使DNA產(chǎn)生拓?fù)鋵W(xué)上的種種變化。最常見(jiàn)的是產(chǎn)生負(fù)超螺旋和消退超螺旋。在大腸桿菌中，是一種DNA促旋酶，它能切開(kāi)正超螺旋雙鏈DNA的一條鏈讓另一條鏈通過(guò)這一切口消退螺旋，然后再將DNA切口封好。從而消退復(fù)制過(guò)程中所產(chǎn)生的正超螺旋，轉(zhuǎn)變?yōu)樨?fù)超螺旋。此酶作用需水解ATP供能。反轉(zhuǎn)錄：以RNA為模板合成DNA的過(guò)程，稱為反轉(zhuǎn)錄。PCR：多聚酶鏈?zhǔn)椒错?，是一種快速的DNA特定片段體外合成擴(kuò)增的方法。它的反響過(guò)程包括高溫變性、低溫退火和中溫延長(zhǎng)3個(gè)階段。內(nèi)含子：真核生物的基因很多是不連續(xù)的，即一個(gè)完整的基因被一個(gè)或更多個(gè)插入成熟的RNA。把這些插入而不編碼的序列稱為內(nèi)含子。外顯子：把被間隔開(kāi)的編碼蛋白質(zhì)的基因局部稱為外顯子。編碼鏈：在雙鏈DNA中，把被轉(zhuǎn)錄的一股鏈稱為模板鏈，另一股鏈稱為編碼鏈。核心酶：大腸桿菌的RNA聚合酶是一個(gè)格外大的〔450Ku〕極其簡(jiǎn)單的酶分子。4種亞基組成。整個(gè)酶的亞基組成是α2ββ′σ，稱為全酶。沒(méi)有σRNA聚合酶稱為核心酶〔αββ′〕。2RNA聚合酶結(jié)合在被轉(zhuǎn)錄的DNA區(qū)段上，結(jié)合的特定部位稱20200個(gè)堿基的特定挨次。Pribnowbox：原核生物的啟動(dòng)子挨次中存在兩個(gè)共同的挨次，即-10挨次和-35挨次，-10挨次也稱為Pribnowbox。σ亞基離開(kāi)聚合酶，形成的核心酶更結(jié)實(shí)﹑DNA和生RNA的一個(gè)區(qū)域里進(jìn)展的，由于在這個(gè)區(qū)域里含有一段解鏈的DNA“泡”，所以稱為轉(zhuǎn)錄鼓泡。TATA盒：真核生物的啟動(dòng)子與原核生物的很相像，也位于轉(zhuǎn)錄起始部位的5′-25TATA〔Hogness盒〕。它與原核的-10挨次〔TATAAT〕極為相像。它是啟動(dòng)子活性所必需的。帽子構(gòu)造：真核生物的mRNA5′3′兩個(gè)末端都要受到修飾。5′末端要形成一種稱作帽子的簡(jiǎn)單構(gòu)造。它是在mRNA5′末端的核苷酸上通過(guò)焦磷酸鍵連接一個(gè)7–甲基鳥(niǎo)苷。此外，連接帽子的頭兩個(gè)核苷酸的核糖也被不同程度的甲基化。poly〔A〕尾巴：在mRNA3′末端則要加上一段多聚腺嘌呤核苷酸poly〔A〕：〔AAAAAAAAA–––––––〕20200個(gè)核苷酸。核不均一RNA：在細(xì)胞內(nèi)任何時(shí)候都存在著大量正在加工似乎無(wú)用的RNA分子，這些分子總稱為核不均一RNA。RNA自我剪切：只需核苷酸存在，RNA就能剪接自身或自我剪切，即RNA分子本身具有高度的專一性和催化活性。Ribozyme：具有酶催化活性的RNA，稱為Ribozyme〔核酸性酶〕。mRNA的成熟過(guò)程中也覺(jué)察RNA具有剪接作用。由細(xì)胞核的小分子RNA與特異的蛋白質(zhì)結(jié)合形成的小核糖核蛋白復(fù)合體顆?！睸nRNP〕發(fā)揮剪接作用，首先mRNA前體與SnRNP形成剪接體，其中的SnRNA發(fā)揮剪接作用，而不是蛋白質(zhì)局部。密碼子：3個(gè)堿基編碼1個(gè)氨基酸，此三聯(lián)堿基組稱為一個(gè)密碼子。同義密碼子：代表同一種氨基酸的不同密碼子，稱為同義密碼子或“同義詞”，均屬簡(jiǎn)并密碼。DNA上還有一些序列對(duì)轉(zhuǎn)錄有顯著影響，最突出的是增加子。它的特點(diǎn)是：與啟動(dòng)子的相對(duì)位置無(wú)關(guān)。無(wú)論在啟動(dòng)子的上游或下游，以至相隔上千個(gè)堿基對(duì)，只要存在于同一DNA分子上都能發(fā)揮作用。但刪除這段序列會(huì)顯著降低轉(zhuǎn)錄活性。增加子還具有組織特異性，它優(yōu)先或只在某種細(xì)胞中表現(xiàn)功能。多核糖體：蛋白質(zhì)合成過(guò)程中，一個(gè)mRNA的分子上不只結(jié)合一個(gè)核糖體而是多個(gè)核糖體，稱多核糖體。多個(gè)核糖體同時(shí)翻譯一個(gè)mRNA分子，這顯著提高了mRNA的利用率。一條mRNA80個(gè)核苷酸結(jié)合一個(gè)核糖體。25．S.DAUGmRNA5′20～30這段前導(dǎo)挨次中，具有一段特別挨次，位于起始AUG之前的固定位置上。這段挨次與核糖30s16srRNA3′mRNA上的起始識(shí)別信號(hào)，將mRNA上的此區(qū)域稱為Shine–Dalgarno挨次或S.D序列。N–末端含有一段信號(hào)序列或稱為信號(hào)肽，其長(zhǎng)度一般為15～35個(gè)氨基酸殘基。信號(hào)肽的中部多含有疏水氨基酸組成的片段〔約14～20個(gè)氨基酸殘基〕。信號(hào)識(shí)別蛋白：細(xì)胞內(nèi)還存在一種信號(hào)識(shí)別蛋白〔SRP〕，它是一種核糖核酸蛋白63007sRNA。SRP能識(shí)別正在合成并將要通過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的多肽的核糖體。SRP與這類核糖體合成的多肽的信號(hào)肽相結(jié)合，形成SRP–信號(hào)肽–核糖體復(fù)合物，并暫停多肽鏈的合成。隨即SRP將復(fù)合體從細(xì)胞質(zhì)引向內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜。?？康鞍祝簝?nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上有SRP的受體，也稱為?？康鞍住睤P〕。DP與復(fù)合體相結(jié)合，SRP釋放出來(lái)，SRP可再用于另一個(gè)核糖體的轉(zhuǎn)運(yùn)?；虮磉_(dá)：基因表達(dá)是指在某一基因指導(dǎo)下蛋白質(zhì)的合成過(guò)程。〔統(tǒng)稱為構(gòu)造基因及在構(gòu)造基因前面的調(diào)整基因〔R〕﹑操縱基因〔O〕和啟動(dòng)基因〔P〕。衰減子：色氨酸操縱子中存在一個(gè)關(guān)心調(diào)控構(gòu)造，可用以終止和減弱轉(zhuǎn)錄，這個(gè)調(diào)控構(gòu)造稱為衰減子。反義RNA：反義RNA是一種與mRNA互補(bǔ)的RNA分子，它是正義基因和/或基因的正義鏈轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物。它與mRNA結(jié)合后即阻斷mRNA的翻譯，從而調(diào)整基因的表達(dá)，是一種翻譯水平的調(diào)控?；蛑委煟涸O(shè)計(jì)人工反義RNA，抑制靶基因的表達(dá)，到達(dá)治療疾病的目的，稱為基因治療。轉(zhuǎn)座子：基因中還覺(jué)察另外一類有特定構(gòu)造的DNA挨次，這些挨次不斷地轉(zhuǎn)變它控作用，稱為可轉(zhuǎn)座的遺傳因子或簡(jiǎn)稱轉(zhuǎn)座子。限制性內(nèi)切酶：一類核酸內(nèi)切酶，可以將外源DNA在特定位點(diǎn)進(jìn)展切割。克?。篋NA重組的產(chǎn)物稱為重組體。因轉(zhuǎn)入活細(xì)胞后能復(fù)制增殖，所以是一種無(wú)性生殖體系，英文稱為克隆〔Clone〕，因而重組體也稱為克隆。有時(shí)把DNA重組的操作過(guò)程也稱為“克隆”。轉(zhuǎn)化：由質(zhì)粒做載體形成的克隆，轉(zhuǎn)入細(xì)菌的過(guò)程稱為轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)化前，細(xì)菌預(yù)先要在低溫條件下用氯化鈣處理，增加細(xì)胞膜的通透性，形成“感受態(tài)”細(xì)胞。RFLP：當(dāng)用一種限制性內(nèi)切酶去切DNA時(shí)，DNA分子會(huì)降解成很多長(zhǎng)短不等的片段，個(gè)體間這些片段是特異的，可以作為某一DNA〔或含這種DNA的生物〕所特有的標(biāo)記，這種方法就稱為限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性。DNA指紋圖譜：用某一小衛(wèi)星DNA做探針，可以同時(shí)與同一物種或不同物種的眾多酶切基因組DNA片段雜交，獲得具有高度個(gè)體特異性的雜交圖譜，其特異性像人的指紋一樣因人而異，故稱為DNA指紋圖譜。RAPD：l990年Williams以隨機(jī)序列〔9～10核苷酸〕作引物，用基因組DNA為模板進(jìn)展PCRDNA指紋圖譜一樣，這種方法稱為隨機(jī)引物PCR，后稱為隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA。二、填空題隨后鏈引物酶負(fù)超螺旋嘧啶二聚體SOS修復(fù)反轉(zhuǎn)錄酶低溫退火雙脫氧SOS重復(fù)基因內(nèi)含子、外顯子模板鏈、編碼鏈13．α2ββ′σ、核心酶14．-10挨次，也稱為Pribnow box、-35挨次二重對(duì)稱性構(gòu)造、A〔6個(gè)〕Mg2+、Mn2+pppA、pppG18．翻譯、蛋白質(zhì)的生物合成19．70、30、5020．80、40、6021．移位22．S.D密碼的通用性三葉草操縱基因、構(gòu)造基因鋅指基元、螺旋–轉(zhuǎn)角–螺旋基元。螺旋–環(huán)–螺旋、亮氨酸拉鏈28．S.D基因表達(dá)轉(zhuǎn)錄水平、翻譯水平RNA轉(zhuǎn)座子溴化乙錠34．Northern雜交35．寡聚核苷酸定點(diǎn)突變以mRNA為模板，用反轉(zhuǎn)錄酶合成DNA、構(gòu)建基因文庫(kù)、人工合成基因復(fù)制松弛型掌握、嚴(yán)緊型掌握38．原位雜交、Southern雜交39．“生物反響器”三、簡(jiǎn)答題答：隨后鏈?zhǔn)侵敢詫槠魏铣傻淖渔?。隨后鏈的模板是通過(guò)聚合酶Ⅲ全酶二聚體的一亞基，形成一個(gè)環(huán)，使隨后鏈的方向與另一個(gè)亞基中的先導(dǎo)鏈模板的方向一樣。DNA聚合酶Ⅲ全酶合成先導(dǎo)鏈的同時(shí)也合成隨后鏈。當(dāng)大約1000個(gè)核苷酸加在隨后鏈上之后，隨后鏈的模板就離開(kāi)，然后再形成一個(gè)的環(huán)，引物酶再合成一段RNA引物，另一岡崎片DNA聚合酶I發(fā)揮5′→3′5′端除去RNADNA連接酶將各片段連接起來(lái)，形成完整的隨后鏈。DNA，包括4個(gè)步驟，可以概括為切–補(bǔ)–切–封。以胸腺嘧啶二聚體為例：由特異的內(nèi)切核酸酶識(shí)別嘧啶二聚體，并在嘧啶二聚體前的糖–磷酸骨架上切開(kāi)一個(gè)裂口。裂口處有3′–OH和含有嘧啶二聚體的5′端。DNA聚合酶以3′–OH為引物，以另一條完好的互補(bǔ)鏈為模板進(jìn)展修復(fù)，合成一段片段。嘧啶二聚體區(qū)被DNA聚合酶的5′→3′ 外切酶活性作用切除。合成的DNA片段和原存在的DNA局部由連接酶催化相連。在大腸桿菌中，修復(fù)時(shí)合成與切除均由DNA聚合酶I來(lái)完成。在真核細(xì)胞中DNA聚合酶沒(méi)有外切酶活性，切除由另外的酶來(lái)完成。答：重組修復(fù)是指復(fù)制后通過(guò)分子內(nèi)重組或稱為姐妹鏈交換，從完整的親代鏈上把I和連接酶填補(bǔ)完整。答：SOS修復(fù)是指允許子鏈DNA復(fù)制合成時(shí)越過(guò)親鏈上受損傷的片段而不形成缺口，這種修復(fù)以犧牲復(fù)制的忠實(shí)性為代價(jià)。SOS修復(fù)的具體機(jī)理還不格外清楚。答：光修復(fù)也稱光復(fù)活，它是由可見(jiàn)光〔300～400nm〕激活光復(fù)活酶，該酶能分解胸腺嘧啶二聚體。已從細(xì)菌和動(dòng)物的細(xì)胞中分別出一種光復(fù)活酶。此酶與DNA形成的復(fù)合C–C鍵，以到達(dá)復(fù)活胸腺嘧啶。哺乳動(dòng)物和人體內(nèi)缺乏此酶。mRNA5′3′尾巴”的修飾；真核生物mRNA前體物的剪切加工，包括內(nèi)含子的剪除、留下的片段拼接成成熟mRNA等過(guò)程。真核生物全部的rRNA轉(zhuǎn)錄物都需要加工，過(guò)程與原核相像，即剪切5′、3′tRNA〔tRNA前體轉(zhuǎn)錄物，這些轉(zhuǎn)錄物可能含有一個(gè)或多個(gè)tRNA的挨次。成熟的tRNA剪切加工而成。答：蛋白質(zhì)加工包括修飾和折疊。蛋白質(zhì)修飾包括N–端修飾、多肽鏈的水解和切開(kāi)、氨基酸側(cè)鏈的修飾和糖基化修飾。答：DNA RNA 蛋白質(zhì)答：鋅指基元是指在保守的半胱氨酸和組氨酸殘基形成的四周體構(gòu)造中鑲著一個(gè)鋅原子，本身由約23個(gè)氨基酸組成，在含鋅指的蛋白中鋅指通常是成串的重復(fù)排列。鋅指間7～8DNA結(jié)合時(shí)，是鋅指的尖端進(jìn)入到DNA的大溝或小溝，以識(shí)別它特異結(jié)合的DNA序列并與之結(jié)合。α–螺旋一側(cè)集中了很多疏水氨基酸，一般約每7個(gè)氨基酸殘基消滅一個(gè)亮氨酸。即亮氨酸都消滅在α–螺旋的疏水一側(cè)，呈直線排列。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)–蛋白質(zhì)相互作用時(shí)亮氨酸殘基是肩并肩地排列起來(lái)有如拉鏈，因而稱為亮氨酸拉鏈。相互作用的兩個(gè)α–螺旋還彼此纏繞在一起，形成螺旋的再螺旋。亮氨酸拉鏈區(qū)的氨基端還有約30個(gè)殘基的堿性區(qū)〔富含賴氨酸和精氨酸〕，作用是與DNA結(jié)合。兩個(gè)亮氨酸拉鏈蛋白形成二聚體時(shí)構(gòu)成Y字型，螺旋的再螺旋是Y字的干，堿性區(qū)成為臂。每個(gè)堿性區(qū)形成α–螺旋，并發(fā)生彎曲以便纏繞在DNA的大溝中。胞的力量，又具有多處攜帶外源DNA的酶切位點(diǎn)，并含有特別的篩選標(biāo)記。可使外源基因復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯出基因的蛋白質(zhì)產(chǎn)物。動(dòng)〔即搖擺〕，并允許有某些特異堿基的參與。DNADNA，再轉(zhuǎn)移到一張硝酸纖維素膜上。在膜上的這些DNA片段可以用32P標(biāo)記的單鏈DNA探針雜交。再用放射自顯影方法顯示出與探針挨次互補(bǔ)的限制性酶切DNA片段的位置。用這個(gè)方法能很簡(jiǎn)潔地將上百萬(wàn)片段中的一個(gè)特別片段鑒定出來(lái)一顆針一樣，格外靈敏有效。答：用凝膠電泳分別RNA，將其轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上，之后用雜交法來(lái)鑒定它，此法稱為Northern雜交或稱Northern印跡法。纖維素膜上，之后用特別的抗體與對(duì)應(yīng)的蛋白質(zhì)〔抗原結(jié)合染色來(lái)鑒定它。這項(xiàng)技術(shù)是鑒定基因表達(dá)產(chǎn)物所不行缺少的?！睤NA聚合酶是一個(gè)模板指導(dǎo)酶，具有5′聚合的功能?！?〕3′→5′外切活性：DNA復(fù)制過(guò)程中假設(shè)摻入的是一個(gè)錯(cuò)誤的核苷酸時(shí)，將抑制DNAI3′→5′3′端切除最終面錯(cuò)配的核〔3〕5′→3′RNA引物，DNA5′→3′5′端切去引物RNA的功能。子雜交檢測(cè)。〕高度簡(jiǎn)并性；通用性；變異性；具有重疊基因和重疊密碼。答：結(jié)合氨基酸是tRNA的重要功能之一，這個(gè)過(guò)程也稱為氨基酸的活化。當(dāng)氨基酸結(jié)合于tRNA以后，就稱為氨?；膖RNA或氨基酰tRNA。反響式為：氨基酸+tRNA+ATP→氨基酰–tRNA+AMP+PPitRNA取決于密碼子與tRNA反密碼子的相互作用。當(dāng)tRNA攜帶著氨基酸去識(shí)別mRNA上的密碼子并結(jié)合時(shí)，實(shí)際上是兩條走向相反的RNA分子的結(jié)合。四、論述題〔〕復(fù)制起始：原點(diǎn)Oric上有4個(gè)dnaA蛋白結(jié)合的部位。當(dāng)大腸桿菌dna因表達(dá)的dnaA蛋白結(jié)合于Oric4個(gè)部位上后，dnaBdnaC也結(jié)合上來(lái)，DNA局部解鏈，復(fù)制開(kāi)頭，引物酶參加，合成一段RNA引物。復(fù)制的延長(zhǎng)：復(fù)制從原點(diǎn)起始，DNA聚合Ⅲ全酶進(jìn)入已形成的復(fù)制叉上，在此它利用已合成的引物RNArep蛋白，它像起始部位的dnaB蛋白一樣是一個(gè)解螺旋酶使復(fù)制叉得以推動(dòng)，SSB再次保持解鏈的DNA單鏈處于伸展?fàn)顟B(tài)而使之起模板作用，DNA學(xué)上的危機(jī)，利于聚合酶Ⅲ全酶在兩條模板不斷延長(zhǎng)，兩條鏈同時(shí)同方向合成。DNA，其復(fù)制終止位點(diǎn)大約在起始原點(diǎn)，但具體機(jī)理尚不清楚。答：真核生物的轉(zhuǎn)錄比原核生物簡(jiǎn)單，其主要差異如下：真核生物中轉(zhuǎn)錄與翻譯處在不同的區(qū)域在原核生物中mRNA的轉(zhuǎn)錄與翻譯幾乎是同步發(fā)生的。而真核生物，轉(zhuǎn)錄發(fā)生在細(xì)胞核內(nèi)，翻譯則在核外進(jìn)展。轉(zhuǎn)錄合成的RNA必需穿出核膜才發(fā)揮作用。這種轉(zhuǎn)錄和翻譯在空間上和時(shí)間上的分隔使得真核生物能夠以精巧的方式進(jìn)展RNA的加工、修飾、拼接，增加了真核生物對(duì)基因轉(zhuǎn)錄和翻譯的調(diào)控。RNA聚合酶不一樣原核生物中RNA14α2ββ’σσ亞基的RNA聚合酶稱為核心酶αββ′。在真核生物中則有3種類型的RNA聚合酶。啟動(dòng)子不同大腸桿菌的啟動(dòng)子中含有兩個(gè)特征性的序列：-10挨次和-35挨次。真核生物的啟動(dòng)子與原核生物的很相像，也位于轉(zhuǎn)錄起始部位的5′端，但存在著幾個(gè)重要的區(qū)域。距起始部位最近的一個(gè)是在-25處，稱為TATA盒，與原核的-10挨次〔TATAAT〕極為相像，它是啟動(dòng)子活性所必需的。此外，在-40和-110之間還有更多的影響啟動(dòng)的堿基，具體的生物學(xué)功能尚在爭(zhēng)論中。轉(zhuǎn)錄后RNA的加工修飾不同原核生物自然的mRNA在轉(zhuǎn)錄后已具有充分的功能不用加工修飾。真核生物的mRNA在5′和3′兩個(gè)末端都要受到修飾，分別加“帽子”和“尾巴mRNA前體物的mRNArRNA轉(zhuǎn)錄物都需要加工，過(guò)程與原核相像，即剪切5′3′末端和切除轉(zhuǎn)錄物中不需要的區(qū)域。真核生物tRNA〔tRNA前體轉(zhuǎn)錄物物可能含有一個(gè)或多個(gè)tRNA的挨次，成熟的tRNA也是在轉(zhuǎn)錄后經(jīng)剪切加工而成。答：PCR又稱多聚酶鏈?zhǔn)椒错?，其原理依?jù)DNA在高溫下〔如95℃〕變性，雙鏈解開(kāi)為兩條單鏈；降低反響溫度，使兩條引物在低溫下〔37℃〕分別與兩條模板互補(bǔ)退火，形成局部雙鏈；之后，在中溫條件下合成DNA子鏈。PCR的反響過(guò)程：包括高溫變性、低溫退火和中溫延長(zhǎng)3個(gè)階段。DNA，人工合成的兩個(gè)DNA引物，4種脫氧單核苷酸〔dNTP〕，一種耐熱的多聚酶和Mg2+。將上述溶液加熱，使模板DNA在高溫下〔如95℃〕變性，雙鏈解開(kāi)為兩條單鏈。低溫退火：反響溫度，使兩條引物在低溫下〔37℃〕分別與兩條模板互補(bǔ)退火，形成局部雙鏈。中溫延長(zhǎng)：再上升反響溫度至中溫〔72℃〕，此時(shí)多聚酶以dNTP為原料，以兩引物為復(fù)制的起點(diǎn)，在兩條模板上合成的DNA子鏈。33次轉(zhuǎn)變溫度為一個(gè)循環(huán)，每一次循環(huán)就使欲擴(kuò)增的DNA區(qū)段的拷貝數(shù)放大一倍，即第一次循環(huán)，每條模板雙鏈DNA2條；其次次循環(huán)，則變?yōu)?條；第三次循環(huán)，變成8條……以幾何級(jí)數(shù)擴(kuò)30次循環(huán)．最終使特定DNA片段放大了數(shù)百萬(wàn)倍。答：〔1〕轉(zhuǎn)錄起始RNADNA特定區(qū)段上。結(jié)合的特定部位稱為啟動(dòng)子，20200個(gè)堿基的特定挨次。-10挨次被看作是雙螺旋翻開(kāi)形成開(kāi)放啟動(dòng)復(fù)合物的區(qū)-35RNA聚合酶就起嘌呤核苷酸ATP或GTPRNA第一個(gè)核苷酸常常是pppA或pppG。起始時(shí)第一個(gè)核苷酸進(jìn)入起始部位，延長(zhǎng)部位再填進(jìn)另一個(gè)核苷酸，然后兩個(gè)核苷酸結(jié)合。在第一個(gè)磷酸二酯鍵生成后，σ因子從全酶解離下來(lái)，核心酶在DNA鏈上向下游滑動(dòng)，核心酶連同生成的二核苷酸，連續(xù)結(jié)合于DNA模板上并沿DNA鏈前移，進(jìn)入延長(zhǎng)階段。延長(zhǎng)過(guò)程當(dāng)轉(zhuǎn)錄起始步驟完成后，σ轉(zhuǎn)錄的延長(zhǎng)。延長(zhǎng)是在含有核心酶、DNA和生RNA的一個(gè)區(qū)域—轉(zhuǎn)錄鼓泡里進(jìn)展，在RNA與模板DNA12bp，相當(dāng)于A型DNA螺旋的一轉(zhuǎn)。雜交鏈中的RNA3′–羥基對(duì)進(jìn)來(lái)的核糖核苷三磷酸能進(jìn)展結(jié)合合成反應(yīng)，使鏈不斷延長(zhǎng)。在“泡”里核心酶始終與DNA的另一鏈〔編碼鏈〕結(jié)合，使DNA中約有17個(gè)bp50170nm的距離。在RNA聚合酶沿著DNA模板移動(dòng)的整個(gè)過(guò)程中形成的RNA–DNA雜交鏈的長(zhǎng)度及DNA未解開(kāi)的區(qū)域長(zhǎng)度均保持不變。每參加一個(gè)核苷酸時(shí)，RNA–DNA雜交雙鏈就旋轉(zhuǎn)一個(gè)角度，以便RNA的3′–OH12bp的長(zhǎng)度恰好短于雙螺旋完整的一轉(zhuǎn)，當(dāng)形成完整的一轉(zhuǎn)前，RNA因彎曲很厲害即離開(kāi)了DNA模板，防止了RNA5′–末端與DNA相互纏繞打結(jié)。轉(zhuǎn)錄終止轉(zhuǎn)錄有終止點(diǎn)，轉(zhuǎn)錄終止消滅在DNA分子內(nèi)特定的堿基挨次上。細(xì)菌及病毒DNA的終止挨次有兩個(gè)明顯的特點(diǎn)：其一是富含GC，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物極易形成二重對(duì)稱性構(gòu)造；其二是GC之后有一串A〔6個(gè)〕。按此模板轉(zhuǎn)錄出來(lái)的RNA極易自身互補(bǔ)，形成發(fā)夾狀構(gòu)造，生的RNA鏈卻以幾個(gè)U殘基而完畢。當(dāng)RNA聚合酶遇到這種構(gòu)造特點(diǎn)時(shí)就會(huì)停頓下來(lái)。生的RNA鏈在某些終止位點(diǎn)上，不需要其它蛋白因子的幫助就自動(dòng)從DNA上釋放下來(lái)。但有些終止位點(diǎn)，RNA鏈的終止釋放還需要rho蛋白〔ρ因子〕參與。答：胞內(nèi)蛋白質(zhì)的生物合成過(guò)程包括；翻譯起始，肽鏈延長(zhǎng)和肽鏈合成終止3個(gè)階段。翻譯起始。30s起始復(fù)合物的形成：首先在識(shí)別mRNAS.D30s亞基和甲酰甲硫氨酰–tRNAfMet〔fMet–tRNAfMet〕與mRNA結(jié)合，形成30s起始復(fù)合物。生成此復(fù)合物時(shí)需要GTP3種蛋白起始因子—IF–1、IF–2IF–3330s上，GTP穩(wěn)定這種結(jié)合。fMet–tRNAfMetmRNAAUG30s起始復(fù)合物。70s起始復(fù)合物的形成：當(dāng)30s起始復(fù)合物形成后，IF–3釋放。50s亞基參與進(jìn)來(lái)，引GTP水解釋放能量，IF–1IF–2也釋放，最終形成70s起始復(fù)合物。形成70s復(fù)合物后即可進(jìn)入蛋白質(zhì)的肽鏈延長(zhǎng)階段。此時(shí)，fMet–tRNAfMet占據(jù)的是核糖體的P位點(diǎn)〔肽酰位，核糖體的A位點(diǎn)〔氨基酰位〕還空著，并正對(duì)著mRNA上的下一個(gè)密碼子，為下一個(gè)氨基–tRNA的進(jìn)入作好了預(yù)備。mRNA翻譯的方向：沿mRNA5′→3′方向進(jìn)展。肽鏈延長(zhǎng)。蛋白質(zhì)合成的肽鏈延長(zhǎng)階段包括：進(jìn)位、肽鍵的形成和移位3步。這33個(gè)延長(zhǎng)因子：EF–Tu，EF–TsEF–G。①進(jìn)位：是指一個(gè)氨基酰–tRNA70s復(fù)合體A位的過(guò)程。②肽鍵形成：氨基酸–tRNA進(jìn)入A位后，核糖體的P部位和A部位都被占滿。于是P位的fMet–tRNAfMet的甲酰甲硫氨酸活化的羧基被轉(zhuǎn)到A位的氨基酰–tRNA氨基酸的氨基上，生成一個(gè)二肽酰–tRNA，稱為轉(zhuǎn)肽作用。此過(guò)程由50s核糖體亞基上稱為肽酰轉(zhuǎn)移酶中心的肽酰轉(zhuǎn)移酶催化。③移位：當(dāng)肽鏈形成后，消滅無(wú)負(fù)載的tRNA占據(jù)著P位，二肽酰–tRNA占據(jù)A位。3tRNAtRNA從A位移到P位；mRNA3個(gè)核苷酸的位置，一個(gè)的密碼子正好落入A3個(gè)動(dòng)作總稱為移位。肽鏈合成的終止當(dāng)70s核糖體A位消滅mRNA的終止密碼子時(shí)，就沒(méi)有氨基酰–tRNA再進(jìn)入A位，肽鏈P部位的tRNA的，使P位上的肽鏈轉(zhuǎn)移至水中，形成游離肽鏈，同時(shí)70s釋放出50s核糖體亞基。此時(shí)，另一個(gè)被稱為核糖體釋放因子的成分參與使30s與mRNA分開(kāi)。脫去肽鏈的tRNA與終止因子也離開(kāi)。分別后的50s、30s又可為合成另一條肽鏈所用。答：乳糖操縱子包括調(diào)整基因、啟動(dòng)基因、操縱基因和構(gòu)造基因。大腸桿菌的lac操縱子受到兩方面的調(diào)控：一是對(duì)RNA聚合酶結(jié)合到啟動(dòng)子上去的調(diào)控〔陽(yáng)性〕；二是對(duì)操縱基因的調(diào)控〔陰性〕。當(dāng)生長(zhǎng)在沒(méi)有葡萄糖而只有乳糖的培育基中時(shí)，由于乳糖是lac操縱子的誘導(dǎo)物，它可以結(jié)合在阻遏蛋白的變構(gòu)位點(diǎn)上，使構(gòu)象發(fā)生轉(zhuǎn)變，破壞了阻遏蛋白與操縱基因的親和力，不能與操縱基因結(jié)合，于是RNA聚合酶結(jié)合于啟動(dòng)子，并順當(dāng)?shù)赝ㄟ^(guò)操縱基因，進(jìn)展構(gòu)造緣由。在含乳糖的培育基中參加葡萄糖時(shí)，不能利用乳糖的緣由：是在lac操縱子的調(diào)控中，有降解物基因活化蛋白〔CAP〕，當(dāng)它特異地結(jié)合在啟動(dòng)子上時(shí)，能促進(jìn)RNA聚合酶與啟動(dòng)子結(jié)合，促進(jìn)轉(zhuǎn)錄〔由于CAP的結(jié)合能促進(jìn)轉(zhuǎn)錄，稱為陽(yáng)性調(diào)控方式〕。但游離的CAP不能與啟動(dòng)子結(jié)合，必需在細(xì)胞內(nèi)有足夠的cAMP時(shí)，CAP首先與cAMP形成復(fù)合物，此復(fù)合物才能與啟動(dòng)子相結(jié)合。葡萄糖的降解產(chǎn)物能降低細(xì)胞內(nèi)cAMP的含量，當(dāng)向乳糖培育基cAMP濃度降低，CAPRNA聚合酶也不能與啟動(dòng)子結(jié)合，雖已解除了對(duì)操縱基因的阻遏，也不能進(jìn)展轉(zhuǎn)錄，所以仍不能利用乳糖。答：〔1〕選擇人們所期望的外源基因〔稱為目的基因〕；DN〔如質(zhì)?！睤N；將重組體轉(zhuǎn)入適宜的生物活細(xì)胞，使目的基因復(fù)制擴(kuò)增或轉(zhuǎn)錄、翻譯表達(dá)出目的基因編碼的蛋白質(zhì)；從細(xì)胞中分別出基因表達(dá)產(chǎn)物或獲得一個(gè)具有遺傳性狀的個(gè)體?！澈颂求w：真核生物核糖體較大，是由60s大亞基和40s小亞基組成80s的40s18srRNA，60s5s28srRNA，5.8srRNA是真核生物所特有的。起始氨基酸：起始的氨基酸也是甲硫氨酸，是由一種特別的tRNA攜帶成為起始的氨基酰–tRNA，命名為Met–tRNAf。起始密碼子：起始密碼子只有AUG40s亞基、Met–tRNAf和一些起始因子組成的起始復(fù)合物在mRNA5′mRNA滑動(dòng)，直至遇上第一個(gè)AUG密碼子。起始因子：真核生物含有的起始因子比原核生物多得多，相互關(guān)系也很簡(jiǎn)單。真核生物的起始因子現(xiàn)有elF–1elF–6，其中有些還含有多個(gè)亞基。真核生物肽鏈延長(zhǎng)的過(guò)程：真核生物肽鏈延長(zhǎng)的過(guò)程與原核相像。有多種因子參與，eEF表示真核生物的延長(zhǎng)因子，eRF表示真核生物的釋放因子，真核生物的延長(zhǎng)因子有eEFl、eEF2eEF3?！?〕大腸桿菌的啟動(dòng)子：是20至200個(gè)堿基的特定挨次。啟動(dòng)子中含有兩個(gè)特征性的序列：-10挨次和-35-10挨次的右末端離RNA510個(gè)-10挨次的根本序列是TATAAT-10挨次被看作是雙螺旋翻開(kāi)形成開(kāi)放啟動(dòng)復(fù)合物的區(qū)域。-359個(gè)堿基，被認(rèn)為是酶結(jié)合的起始部位。啟動(dòng)子常以單位時(shí)間內(nèi)合成RNA分子數(shù)的多少分為強(qiáng)啟動(dòng)子和弱啟動(dòng)子。據(jù)認(rèn)為強(qiáng)弱之間的區(qū)分就存在于-35的構(gòu)造中?！?〕5′端，但存在-25處，稱為TAT盒Hogness盒，與原-10挨次TATAA〕-40和-110之間還有更多的影響啟動(dòng)的堿基，具體的生物學(xué)功能尚在爭(zhēng)論中。答：目的基因的獲得目前普遍實(shí)行3種方法：mRNAcDNAcDNA為模板進(jìn)展PCR擴(kuò)增DNA。這里，關(guān)鍵是要預(yù)先獲得目的基因的mRNA，mRNA極易降解，所以提取過(guò)程中要防止內(nèi)源和外源RNase對(duì)其降解。DNA合成儀可以合成肯定長(zhǎng)度的DNA片段。只要某基因的序列，即可輸入編碼挨次由DNA合成儀合成此序列。構(gòu)建基因文庫(kù)：將編碼生物細(xì)胞染色體DNA分子的全部基因，盡量完整地提取出來(lái)，用某些限制性內(nèi)切酶處理，使DNA成為肯定長(zhǎng)度的片段并分別與載體〔一般為λ噬菌體〕連接，侵染大腸桿菌。這樣，這些被侵染的大腸桿菌細(xì)胞里分別含有總DNA中的各種基因片段，只要選用與所需基因互補(bǔ)的DNASouthern雜交等即可從大腸桿菌中篩選出所需要的目的基因。通常把這些含有總DNA中各種基因片段的全部大腸桿菌細(xì)胞稱為基因文庫(kù)。B型題答：反響是由參加的G與前體RNA結(jié)合，即攻擊外顯子與內(nèi)含子接合的5‘端，使上游的外顯子產(chǎn)生3′–OH末端。此3′–OH緊接著又去攻擊下游外顯子與內(nèi)含子的接合部位，使兩個(gè)外顯子連接起來(lái)形成成熟的RNA，完成加工過(guò)程。但同時(shí)釋放出一段414核苷酸的內(nèi)3′–OH又攻擊鄰近的5′端形成39915核苷酸的片段。此片段含有反響初期摻入的G。399核苷酸環(huán)自行翻開(kāi)成線狀分子，其3′–OH再攻擊自身5′端，釋放出4核苷酸的片段，成為395核苷酸的環(huán)。最終，這個(gè)環(huán)自行翻開(kāi)成為線狀RNA，名為L(zhǎng)–19RNA。它是穩(wěn)定的，但只要有適合的底物即可表現(xiàn)出活性。答：〔1〕基因的核苷酸挨次打算了蛋白質(zhì)中氨基酸的排列次序。DNA重組技術(shù)的基因突變，來(lái)組建具有所期望性質(zhì)的基因，從而產(chǎn)生的蛋白質(zhì)?！?〕也可以用寡聚核苷酸定點(diǎn)突變法產(chǎn)生一個(gè)氨基酸被替換的突變蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)的變翻開(kāi)了大門，可以去了解蛋白質(zhì)是如何折疊、如何識(shí)別其它分子、如何催化反響、如何加勢(shì)。答：除了少數(shù)外，幾乎全部的分泌蛋白都在N–末端含有一段信號(hào)序列或稱為信號(hào)肽，其長(zhǎng)度一般為15–35個(gè)氨基酸殘基。信號(hào)肽的中部多含有疏水氨基酸組成的片段〔約14～20個(gè)氨基酸殘基〕，且沒(méi)有嚴(yán)格的專一性?！睸RP〕，能識(shí)別正在合成并將要通過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的多肽的核糖體。SRP與這類核糖體合成的多肽的信號(hào)肽相結(jié)合，形成SRP–信號(hào)肽–核糖體復(fù)合物，并暫停頓多肽鏈的合成。隨即SRP將復(fù)合體從細(xì)胞質(zhì)引向內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜。膜上有SRP的受體–?？康鞍住睤P〕。DP與復(fù)合體相結(jié)合，SRP釋放出來(lái)，SRP可再用于另一個(gè)核糖體的轉(zhuǎn)運(yùn)。此時(shí)，通過(guò)一個(gè)依靠GTP的過(guò)程，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜被翻開(kāi)一個(gè)通道，信號(hào)肽穿過(guò)膜與膜內(nèi)另一受體SSR切除。答：衰減子〔a〕即色氨酸操縱子中的一個(gè)關(guān)心調(diào)控構(gòu)造，可用以終止和減弱轉(zhuǎn)錄。它位于構(gòu)造基因trpE起始密碼子前，稱為前導(dǎo)序列〔L〕。衰減子調(diào)控，是一種翻譯與轉(zhuǎn)錄相偶聯(lián)的調(diào)控機(jī)制。即核酸分子和蛋白質(zhì)分子一樣，能以構(gòu)象的轉(zhuǎn)變起到調(diào)整的作用。當(dāng)色氨酸充分時(shí)，完整的前導(dǎo)肽〔14肽〕可被合成，這時(shí)在核糖體參與下，前導(dǎo)序列形成終止信號(hào)，RNA聚合酶不能通過(guò)，阻擋轉(zhuǎn)錄進(jìn)展，削減構(gòu)造基因的表達(dá)。當(dāng)色氨酸缺乏時(shí)，由于色氨酸–tRNA不能形成，前導(dǎo)肽翻譯至色氨酸密碼子〔UGG〕處即終止，在核糖體參與下，前導(dǎo)序列不能形成終止信號(hào)，RNA聚合酶可以超越衰減子而連續(xù)轉(zhuǎn)錄，構(gòu)造基因得到表達(dá)，產(chǎn)生色氨酸。答：Sanger法DNA2′，3′–二脫氧核苷三磷酸〔ddNTP〕，3′–OH，所以不能進(jìn)展脫氧核苷酸鏈的延長(zhǎng)。整個(gè)測(cè)定的程序如下：將被測(cè)DNA4DNA聚合酶和4種dNTP〔其中一種為32P標(biāo)記〕。在4個(gè)管中分別加人ddTTP、ddCTP、dd